破壁灵芝孢子抑制肿瘤实验研究

目的 :通过对移植性动物瘤株作为病理模型的体内抑瘤试验来验证灵芝孢子在未破壁及经破壁后对移植性动物肿瘤小鼠肝癌、小鼠肉瘤 - 1 80及小鼠网细胞肉瘤 (L- II)的抑瘤作用。方法 :小鼠抑瘤实验设 6个处理。结果 :破壁灵芝孢子实验组在 2 g/kg· d～ 8g/kg· d剂量范围内对小鼠 S- 1 80的抑瘤率为 42 .3%～ 82 .0 %之间。对小鼠肝癌的抑瘤率为 52 .2 %～ 86.1 %。对 L-II的抑瘤率为 54.0 %～ 79.6%之间。实验显示 ,此抑制作用有明显的量效关系。     

灵芝孢子内脂质对小鼠肝癌及肝癌组织端粒酶活性影响的研究

目的 :研究灵芝孢子内脂质对移植性小鼠肝癌的体内抑瘤作用及对荷瘤小鼠肝癌组织端粒酶活性的影响。方法 :小鼠肝癌抑瘤实验及荷瘤小鼠肝癌端粒酶活性实验各设 6个处理。结论 :3g/kg· d剂量的灵芝孢子内脂质组及 8g/kg· d剂量的破壁灵芝孢子组对小鼠肝癌及对肝癌组织的端粒酶活性有显著的抑制作用。     

不破壁松花粉对小鼠免疫功能的调节作用

目的 研究不破壁松花粉对小鼠的免疫调节作用。方法 以不破壁松花粉为受试物, 每天以0.33、0.67、2.00 g/(kg·bw) 3个剂量经口给予小鼠30 d。对小鼠淋巴细胞增殖能力、吞噬细胞的吞噬功能、单核-巨噬细胞功能等方面进行测定。结果 0.67 g/(kg·bw)/d组小鼠淋巴细胞增殖能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率以及自然杀伤(natural killer, NK)细胞活性显著高于对照组(P<0.05), 2.00 g/(kg·bw)/d组小鼠血清半数溶血值(half hemolytic unit of complement, HC50)以及NK细胞活性显著高于对照组(P<0.05)。结论 本实验条件下, 不破壁松花粉在0.67 g/(kg·bw)/d和2.00 g/(kg·bw)/d剂量下有一定程度的增强小鼠免疫力功能的作用, 其机制有待进一步研究。     

萌动期破壁灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 :观察萌动期灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 :体内、外试验及碳廓清试验观察小鼠巨噬细胞的吞噬作用。结果 :0 .1 2～ 1 .2 0 mg/ml的灵芝孢子明显促进了巨嗜细胞的体外吞噬作用 ;0 .1 2～ 1 .80 g/kg剂量范围内 ,灵芝孢子对受试小鼠巨嗜细胞的体内吞噬功能有明显促进作用 ;每日口服 0 .2 4～ 1 .80 g/kg的灵芝孢子可使受试小鼠的碳廓清指数明显增加 ,并存在量效依赖关系。结论 :萌动期破壁灵芝孢子对小鼠巨噬细胞吞噬功能具显著促进作用。     

荔枝果肉乙酸乙酯粗提物对Th1/Th2细胞平衡的影响

本研究分析荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物对小鼠细胞因子分泌的作用,进而探讨其对Th1/Th2细胞平衡的影响。将30只BALB/C小鼠随机分成对照组(生理盐水)、乙酸乙酯部粗提物低剂量和高剂量组(4.6、9.2 mg/kg.bw.d),连续灌胃7 d,观察各组小鼠的胸腺和脾脏指数变化以及脾细胞增殖情况,用ELISA检测小鼠脾细胞以及血清分泌IFN-γ和IL-4的含量以及IFN-γ/IL-4比值。实验结果表明:乙酸乙酯部粗提物高剂量组小鼠的胸腺指数、脾脏指数显著提高。乙酸乙酯部粗提物低、高剂量都能显著提高小鼠脾细胞和血清IFN-γ分泌水平,同时,高剂量组小鼠脾细胞和血清IL-4的分泌水平也显著提高。低、高剂量的乙酸乙酯部粗提物都能显著提高小鼠脾细胞和血清IFN-γ/IL-4的比值。荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物诱导Thl/Th2平衡向Th1方向漂移,可能进而诱导机体的炎症性反应。     

黑灵芝多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响

目的：研究黑灵芝多糖(PSG-1)对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响。方法：采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PSG-1 在不同质量浓度、不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,检测不同质量浓度PSG-1 单独作用及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B 淋巴细胞增殖作用的影响;用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果：PSG-1 在20～160μg/mL 质量浓度范围能显著促进脾细胞的增殖,且48h 效果最佳;PSG-1 能显著增强刀豆蛋白A (Con A)诱导的T 淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B 淋巴细胞的增殖作用;并且能显著诱导脾淋巴细胞分泌IL-2 和TNF- α。结论：PSG-1 能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A、LPS 对T、B 淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,还可以通过IL-2 和TNF-α发挥免疫增强作用。     

小分子阿胶肽的免疫调节作用

目的:研究小分子阿胶肽(LMWPC)对小鼠免疫功能的调节作用。方法:采用凯氏定氮及高效凝胶色谱法分析LMWPC的蛋白质含量及分子量分布情况,利用小鼠血清溶血素滴度测定和小鼠脾细胞抗体生成实验,观察0.18、0.35和1.05 g/kg·bw剂量的LMWPC对小鼠体液免疫的影响,采用小鼠迟发型变态反应实验和ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验,考察LMWPC对小鼠细胞免疫的影响。结果:LMWPC的分子量主要集中在1000 Da以下,蛋白质含量丰富,高达(88.84±1.77) g/100 g。与对照组相比,高剂量组小鼠的半数溶血值(HC₅₀)为(76.8±4.2)(P<0.05),足趾肿胀为(0.35±0.03) mm (P<0.05),小鼠脾淋巴细胞转化实验OD值为(0.344±0.052)(P<0.05)。与低、中剂量相比,高剂量组具有最佳的增加小鼠血清溶血素水平、增强小鼠迟发型变态反应和促进小鼠脾淋巴细胞转化增殖的能力;而中剂量组LMWPC能明显增加小鼠脾细胞抗体生成的效果。结论:本研究条件下,LMWPC能够提高小鼠的体液免疫及细胞免疫功能,对小鼠的免疫功能有正向调节作用。     

灵芝醋抗衰老及增强免疫力作用的研究

研究了灵芝醋的抗衰老及增强免疫力的作用,用0.5%、1.5%、5%3种不同浓度灵芝醋饲喂果蝇,3个剂量组的平均寿命分别延长了17.3%、29.6%和44.6%,半数死亡时间、最高寿命也都有所延长,且表现为抗衰老效果随灵芝醋剂量的增加而增强;用5g/kg·d、10g/kg·d、20g/kg·d的剂量灌胃小鼠,与对照组相比,巨噬细胞的吞噬率提高了2.22%、4.22%、16.67%,吞噬指数分别提高了3.56%、4.56%、30.78%。增强免疫力效果随着灵芝醋剂量的增加而增强。     

金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响

目的:观察金线莲多糖(ARP)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖,细胞周期及分泌IL-2、IFN-γ的影响。方法:MTT法检测ARP单独及协同Con A、LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;ELISA法检测细胞因子IL-2和IFN-γ的含量。结果:在试验浓度范围,ARP对小鼠脾淋巴细胞没有毒性作用,与空白对照组相比,OD值明显升高(P0.05),在一定范围内呈量-效关系;ARP与Con A或LPS共同作用小鼠脾淋巴细胞时,其OD值明显高于Con A、LPS单独刺激组(P0.05);与空白对照组相比,ARP组G_0/G_1期淋巴细胞百分率降低(P0.01),S期、G2/M期淋巴细胞百分率升高(P0.01);ARP组IL-2、IFN-γ分泌量明显高于空白对照组(P0.05)。结论:ARP可促进小鼠脾淋巴细胞增殖并与Con A、LPS具有协同作用。其作用机制可能与促使小鼠脾淋巴细胞通过G_1期限制点,加速G_0/G_1期向S期,S期向G2/M期转化进入细胞增殖周期,并且可能与其促进IL-2、IFN-γ的分泌有关。     

灵芝孢子内脂质护肝作用的实验研究

目的 :探讨灵芝孢子内脂质对小鼠肝癌的抑制作用及其对肝脏的保护作用。方法 :动物试验观察灵芝孢子内脂质对移植性小鼠肝癌的抑制作用及其对 D-氨基半乳糖所致肝脏损害的保护作用。抑瘤试验设二处理 :A-对照组 (肝癌移植 生理盐水 ) ,B-灵芝孢子内脂质给药组 (肝癌移植 灵芝孢子内脂质 2 .5g· kg-1· d-1 ) ,受试小鼠每日分别给予受试物共 1 0天 ,比较 AB组瘤重 ,计算抑瘤率。护肝试验设三处理 :C-生理盐水对照组 ,D- D-氨基半乳糖 生理盐水 ,E- D-氨基半乳糖 灵芝孢子内脂质 (2 .5g· kg-1· d-1 ) ,1 0 d后测小鼠肝功能 (ALT)并取肝组织行病理组织学检查。结果 :AB两组小鼠间瘤重存在着极显著性差异 (P<0 .0 1 ) ,灵芝孢子内脂质组抑瘤率为 89.8% ;D、E组小鼠 ALT及病理组织学指标均有极显著性差异 (P<0 .0 1 ) ,灵芝孢子内脂质对 D-氨基半乳糖所致肝损害具拮抗作用。结论 :灵芝孢子内脂质对小鼠肝癌有抑制作用 ,对肝脏具保护作用。     

灵芝孢子粉破壁工艺优化及其抗肿瘤作用

以灵芝孢子粉为原料,采用高压均质法破壁灵芝孢子,研究灵芝孢子粉破壁优化工艺及破壁孢子粉抗肿瘤作用。选取水为破壁溶剂,以均质压力、均质次数、料液比为试验因素,以灵芝孢子破壁率为试验指标,通过单因素试验及正交试验对灵芝孢子破壁工艺进行优化。通过建立S180荷瘤小鼠模型,对破壁灵芝孢子粉的抗肿瘤作用进行研究。结果表明,最佳破壁工艺条件为均质压力150 MPa、均质次数3、料液比1∶100（g/mL）,破壁率为94.35%。抗肿瘤实验表明,破壁灵芝孢子对小鼠S180肉瘤的抑制率为43.37%～57.59%,且肝体比和肺体比变化稳定,并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。因此,破壁灵芝孢子粉具有良好的抗肿瘤作用。     

白藜芦醇对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响

研究了白藜芦醇(Res)对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)、脂多糖(LPS)以及5、10、20、40μg/m L不同浓度的Res,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:Res能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,能与Con A协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。综上,Res能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。     

萌动激活灵芝孢子抗癌活性研究

进行了休眠期灵芝孢子、破壁灵芝孢子、萌动激活灵芝孢子及萌动激活全破壁灵芝孢子对小鼠肝癌和网状细胞肉瘤L—Ⅱ细胞生长的抑制作用研究,结果表明,休眠期灵芝孢子经萌动激活可显著提升灵芝孢子的药理活性,萌动激活全破壁灵芝孢子具有显著的抗癌活性,并呈明显的量效关系。     

鸡肉酶解物对HepG2细胞抗氧化活性及小鼠血清抗氧化酶活性的影响

为了研究鸡肉酶解物SSPH(Salt Soluble Protein Hydrolysate,SSPH)及MFH(Muscle Fibrin Hydrolysate,MFH)的抗氧化作用,实验测定了鸡肉酶解物的HepG2细胞内活性氧的清除能力,以及小鼠胃饲28 d实验后的体内抗氧化酶活性。SSPH和MFH是特定工艺条件下提取鸡胸肉的盐溶蛋白及肌纤蛋白,经酶解制备的、95%以上分子量小于1000 u的酶解物。研究结果显示,在HepG2细胞培养中,鸡肉酶解物SSPH和MFH的添加浓度为500 μg/mL时,HepG2细胞的成活率为84.50%和89.87%,鸡肉酶解物对HepG2细胞均不存在毒性。细胞抗氧化实验中,实验组的HepG2细胞内荧光强度均显著降低于(P<0.05)空白对照组,并随鸡肉酶解物浓度增加而荧光强度降低;当SSPH及MFH的浓度为150 μg/mL时,细胞活性氧清除率,即抗氧化活性(Cellular Antioxidant Activity,CAA)值分别达到43.17%和46.64%,表明二者均具有良好的HepG2细胞活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)清除能力,且呈良好的剂量-效应关系。小鼠实验以生理盐水及鸡肉匀浆为对照组,经28 d胃饲,30 min游泳后取血清分析血清SOD、CAT及GSH-Px抗氧化酶活性,结果显示,除胃饲鸡肉酶解物SSPH剂量为40 mg/kg·bw·d组的CAT酶活性与实验对照组间差异不显著外,胃饲SSPH及MFH剂量为40 mg/kg·bw·d 和200 mg/kg·bw·d的实验组小鼠,血清SOD、CAT及GSH-Px等抗氧化酶活性均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于实验对照组,表明鸡肉酶解物SSPH及MFH能够有效提高实验小鼠体内抗氧化酶活性。     

玛咖多糖的抗疲劳作用研究

为了观察玛咖多糖对小鼠的抗疲劳作用,本研究采用水提醇沉法提取玛咖粗多糖,通过Sevag法去蛋白,纯化多糖。将60只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组,高、中、低剂量给药组。高、中、低剂量给药组分别按2.25g/kg·d、1.5g/kg·d、0.75g/kg·d灌胃玛咖多糖,正常对照组以等体积生理盐水灌胃,连续灌胃10d后对小鼠进行负重游泳实验及血清指标测定。结果表明:三个剂量组玛咖多糖均能延长小鼠游泳时间,增强小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力,减少小鼠血清中丙二醛(MDA)的生成,提高小鼠抗疲劳能力,并呈剂量-功效依赖关系。因此,玛咖多糖的抗疲劳、提高运动能力与其抗氧化作用相关。     

蟾酥水提取物对小鼠免疫功能的影响

研究新提取的蟾酥水提取中试产品体内外对小鼠免疫功能的调节作用。体内实验设蟾酥水提取物的高(2mg/kg)、中(1mg/kg)、低(0.5mg/kg)剂量组、左旋咪唑组和生理盐水组,连续腹腔注射给药3d后分别测定小鼠脾脏和胸腺指数、血液白细胞分类计数、血清中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ浓度和脾淋巴细胞体外增殖能力;无菌分离健康小鼠的脾淋巴细胞进行体外培养,加入不同质量浓度的蟾酥水提取物(20、10、5μg/ml),协同LPS或Con A共同孵育48h后,采用MTT法测定脾淋巴细胞增殖能力和ELISA法测定脾淋巴细胞上清液中的IL-2、IL-12、IL-4和IFN-γ含量。该蟾酥水提取物能协同Con A和LPS促进脾T、B淋巴细胞的体外增殖能力(P0.01),促进免疫器官生长。明显提高小鼠血清和脾淋巴细胞上清液中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ水平(P0.01)。该蟾酥水提取物中试产品通过促进小鼠免疫细胞的增殖活性和细胞因子的分泌水平而发挥其免疫调节作用。     

梅花鹿茸血冻干粉的安全性评价

通过小鼠急性毒性试验,大鼠30 d喂养试验,三项遗传毒性试验,小鼠尾部铅皮负重游泳,小鼠血清中尿素水平检测,小鼠肝脏中糖原储备量测定以及小鼠运动前后血清中乳酸水平的测定对梅花鹿茸血冻干粉的食品安全性及对小鼠的缓解体力疲劳作用进行探讨。结果表明：小鼠急性经口毒性>15 g/kg·BW,属无毒级;鹿茸血冻干粉0.6,1.3,2.0 g/(kg·BW·d)剂量在30 d喂养试验中未对大鼠的体重、摄食量、血液常规和血液生化指标产生影响,且三项遗传毒性试验结果均为阴性。0.6 g/(kg·BW·d) 组小鼠负重游泳时间长于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;0.1,0.2,0.6 g/(kg·BW·d) 组肝糖原储备量高于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;0.6 g/(kg·BW·d)组小鼠游泳前后血乳酸变化的曲线下面积值低于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。梅花鹿茸血冻干粉食用安全,且具有缓解小鼠体力疲劳功能。     

鸡胚蛋提取物对体外培养的脾淋巴细胞和巨噬细胞的影响

目的:以体外细胞实验研究鸡胚蛋提取物对免疫力低下小鼠脾淋巴细胞和巨噬细胞的影响。方法:以水和石油醚为提取介质,检测鸡胚水溶物(CEAE)和脂溶物(CEPEE)在10～500μg/mL浓度范围内对脾淋巴细胞增殖、脾淋巴细胞分泌IL-2、巨噬细胞吞噬作用以及巨噬细胞产NO的影响。结果:鸡胚蛋提取物能恢复免疫低下小鼠的免疫功能,CEPEE显著地促进脾淋巴细胞增殖并分泌IL-2,而CEAE则对巨噬细胞的吞噬能力和分泌NO能力显示出更强的刺激作用,两种提取物均呈现出量效关系。结论:鸡胚蛋脂溶物和水溶物分别作用于淋巴细胞和巨噬细胞,发挥正向免疫调节作用。     

屏风固金颗粒对小鼠免疫功能的影响

目的探讨屏风固金颗粒对小鼠免疫功能的影响。方法测定屏风固金颗粒对小鼠脾淋巴细胞增殖、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-1(IL-1)及NK细胞活性的影响。结果屏风固金颗粒组对上述免疫指标的作用与对照组比较均有显著性差异,与玉屏风颗粒组比较也显著增强。结论屏风固金颗粒能够诱导小鼠脾细胞淋巴细胞增殖,刺激IL-2、IL-1的分泌及NK细胞的活性,具有免疫增强作用。     

低聚果糖对小鼠肠道菌群、血甘油三酯及血尿素氮的影响

目的观察低聚果糖(FOS)对小鼠肠道菌群、血甘油三酯(Tg)及血尿素氮(BUN)的影响。方法FOS0.1g/kg和1g/kg·bw·d.分组ig(灌服)小鼠连续14d后,取粪便,滴种选择性培养基,孵育,平板菌落计数法测菌群,酶法(GPO-PAP)测Tg,37℃-OPA法测BUN。结果和正常对照组相比,ig1g/kg的小鼠肠道双歧杆菌和肠杆菌数量增加(p<0.05);BUN含量上升(p<0.01)、Tg含量下降;ig0.1g/kg的小鼠BUN和Tg含量均上升(p<0.05),肠道类杆菌数量减少。结论FOS1g/kg·bw·d×14d的用量,可增殖肠道双歧杆菌和肠杆菌,降低血Tg含量,而0.1g/kg·bw·d×14d用量即可使BUN含量上升。