激素对甜菜愈伤组织不定芽再生的调节作用

2，4－D能促进胚珠愈伤组织形成，但对不定芽再生有抑制作用，而IAA无此抑制作用。6BA和KT单独或组合使用在胚珠分化芽的愈伤组织诱导上，是不可缺少的。胚珠意伤组织不定芽可在附加IAA与KT（或再附加6BA）的诱导培养基上一步形成。0．5mg／L的6BA与NAA或IAA在一定浓度下的组合能诱导叶柄产生愈伤组织，分化培养后获得了再生芽。无论胚珠或叶柄，愈伤组织不定芽的再生，主要与前期诱导培营基的激素组合与浓度有关。     

碳素营养对剑麻蛋白酶组培诱导的研究

以LS培养基,分别添加蔗糖、葡萄糖、麦芽糖和可溶性淀粉四种碳源,各1％、2％、3％和4％四种浓度,附加2,4—D 3mg/L,6—BA2.5mg/L,NAA 0.4mg/L,比较了不同种类及浓度的碳素营养对剑麻愈伤组织细胞生长和蛋白酶诱导的影响。结果表明:(1)蔗糖和葡萄糖有利于剑麻愈伤组织细胞生长和蛋白酶活力提高;(2)低浓度的碳源培养有利于愈伤组织细胞快速生长,而高浓度的碳源培养有利于剑麻蛋白酶活力提高。在4％的蔗糖培养条件下筛选出一株蛋白酶活力比外植体高34.38％的细胞株。     

银杏愈伤组织培养及其黄酮生物合成的初步探讨

本文采用银杏果实和植株诱发的茎尖和叶尖为原料，筛选银杏愈伤组织生长和继代培养的最佳条件和激素组合；利用继代培养愈伤组织进行细胞悬浮培养并检测黄酮的生物合成量。结果表明：（1）银杏愈伤组织的诱导及继代培养以附加NAA3.0mg/L和BA1.0mg/L的MS培养基效果最好；（2）采用0.1%浓度的植酸可以抑制褐变，并对愈伤组织的生长有促进作用；（3）在培养基中添加5％的蔗糖时愈伤组织增长倍数最高；愈伤组织继代培养40－45d时增长倍数达到最大值；（4）银杏愈伤组织细胞悬浮培养时，细胞生长速度可达6.8倍，黄酮生物合成量为68.76mg/L。     

甜菜原生质体培养及大块愈伤组织的产生

将发芽盒内培养2－3周的甜菜子叶,在CPW12M高渗溶液中预质壁分离4h 后用2％CellulaseOnozukK-10 0.5%Macerozyme 0.5%Driselase CPW9M酶液酶解12h。原生质体在K8P＋2．4－D2．0mg／L＋6－BA0．5mg／L培养基中液体浅层培养。6周内形成大量的多细胞团和微愈伤组织,进一步培养,形成直径为0．5cm左右松散的大块愈伤组织。     

紫薯愈伤组织诱导和培养条件优化及绿原酸类化合物的积累

以紫薯叶片为外植体,通过筛选培养基和培养条件建立了紫薯愈伤组织培养体系。研究6-苄基氨基嘌呤(6-BA)及萘乙酸(NAA)不同浓度组合对紫薯愈伤组织诱导的影响,之后分别考察基础培养基MS、1/2MS、B5、WPM、White及NAA、6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三种激素对紫薯愈伤组织继代生长的影响。确定最适基础培养基后,对激素进行单因素实验后再做正交实验。结果表明1/2MS基本培养基中添加1.5 mg/L 6-BA和0.4 mg/L NAA适合紫薯愈伤组织诱导,诱导率为81.82%。MS为优选基础培养基,通过正交实验优化的激素配比组合为1.0 mg/L NAA,0.4 mg/L 6-BA,1.0 mg/L 2,4-D。最佳继代培养基为MS+1.0 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+6 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,此优化激素条件下愈伤组织的生物量增长倍数为23.46倍,3-咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰宁酸、4,5-二咖啡酰宁酸三种绿原酸类化合物含量分别为0.30%、1.91%、1.10%,三者总含量3.31%,因此,通过紫薯愈伤组织培养生产绿原酸类化合物是可行的。     

泰国葛愈伤组织诱导及次生代谢产物的研究

目的分析泰国葛愈伤组织诱导率和次生代谢产物的影响,为优化其愈伤组织培养条件提供数据支撑。方法采用正交实验研究6-苄氨基腺嘌呤(6-BA,A)、a-萘乙酸(NAA,B)、吲哚丁酸(IBA,C)浓度及培养部位(根、茎、叶,D)对愈伤组织诱导率及次生代谢产物(葛根素、大豆苷、染料木素)累积量的影响。结果不同条件处理的愈伤组织均有所生长,当对愈伤组织诱导率的影响顺序为DACB,其极差分别为24.107,22.153,18.624及13.080,最优组合为A2B2C3D2;当对总次生代谢产物质量分数的影响顺序为ACDB,其极差分别为2.083,1.837,1.205及0.347,最优组合为A2B3C1D1。结论泰国葛愈伤组织诱导的最佳条件:6-BA 1.0 mg/L,IBA 0.5 mg/L,NAA 0.5 mg/L,茎部培养;黄酮类次生代谢产物积累的最佳条件:根部培养,6-BA 1.0 mg/L,IBA 0 mg/L,NAA 1.0 mg/L。实际生产中可根据此条件分步培养以获得最高收益。     

拳参愈伤组织的诱导及增殖效应的研究

目的研究适宜拳参愈伤细胞的诱导、组织分化及快速生长的培养基成分。方法以拳参的幼嫩叶柄为外植体,接种于附加2,4-D、N A A、6-B A、K T及其组合的M S培养基上,观察拳参愈伤组织的诱导、分化及愈伤细胞的生长状态。结果MS 0.4 mg/L 6-BA 2.0 mg/L NAA对拳参愈伤组织的诱导效果最好。MS 0.2 mg/L 6-BA 2.0 mg/L 2,4-D增殖培养的愈伤组织较适合于器官的分化,MS 0.2 mg/L 6-BA 4.0 mg/L NAA增殖培养的愈伤组织较适合于做细胞悬浮培养的材料。结论建立拳参愈伤组织诱导,愈伤组织分化和愈伤细胞快速增殖体系,为进一步研究药用植物拳参细胞的分子机制及次生代谢等提供资料。     

杜仲疏松愈伤组织诱导条件的优化筛选

杜仲愈伤组织生长过于致密从而导致难以实现悬浮培养,因此获得疏松、生长快速愈伤组织是实现杜仲细胞悬浮培养的前提.本文研究了不同外植体、激素和培养基对杜仲愈伤组织诱导率、疏松程度以及褐化率的影响,结果表明：上胚轴和子叶更容易被诱导为疏松愈伤组织,MS培养基是最适诱导培养基;适当增加6-BA浓度有助于褐化的减轻且提高愈伤组织疏松程度,杜仲疏松愈伤组织诱导最适激素配比为1.0mg/L 2,4-D＋1.0mg/L NAA＋1.0mg/L 6-BA.     

EMS诱变甘蔗愈伤组织的初步研究

为了探索EMS对甘蔗愈伤组织进行化学诱变的合适浓度和时间组合,以ROC22和粤糖93-159甘蔗愈伤组织为材料,研究了不同浓度(8、24、40μmol/L)、不同时间(2、4、6 h)诱变处理对愈伤组织的每克鲜重相对增重量和相对分化率的影响。并通过分化试验选择适合诱变后愈伤组织分化的培养基。结果表明,适合诱变处理后愈伤组织分化的培养基为:MS基本培养基+2 mg/L KT+2 mg/L NAA+3.0%蔗糖(W/V)+0.8%琼脂(W/V)。适合EMS诱变甘蔗的处理为:24μmol/L诱变处理2 h或8μmol/L诱变处理6 h。     

黄芪愈伤组织中黄芪多糖含量影响因素的研究

目的:研究培养基及成分和光照对黄芪愈伤组织中多糖类化合物形成的影响.方法:使用不同培养基并改变其中碳源、氮源、磷酸盐和钙盐的浓度,在黑暗和光照条件下进行黄芪愈伤组织培养,分光光度法检测愈伤组织中多糖类化合物的含量.结果:黄芪多糖积累的最佳条件是(24±1 ℃光照培养,培养基为MS基本培养基(附加0.5 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L 6-BA),其中含有80 g/L蔗糖、60 mmol/L KNO3、1.50 mmol/L KH2PO4和1.496 mmol/L CaCl2.结论:蔗糖作为碳源最有利于黄芪愈伤组织生物量积累和多糖类化合物的生物合成.硝态氮和光照有利于黄芪多糖类化合物的合成.     

祈州漏芦的组织培养与快繁技术研究

目的：对祁州漏芦愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究,构建祁州漏芦快速繁殖体系。方法：通过筛选外植体,添加不同种类及浓度的生长调节剂对祁州漏芦进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。结果：诱导愈伤组织适宜培养基：MS＋0.3mg/L NAA＋3.0mg/L 6-BA;芽增殖培养以MS＋0.3mg/L NAA＋5.0mg/L 6-BA为宜;生根培养以1/2MS＋0.1mg/L NAA为佳。结论：利用组织培养技术能够实现祁州漏芦快速繁殖。     

烟草愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以鄂烟1号无菌苗的叶为材料进行愈伤组织的诱导,筛选出生长培养基的最佳激素配比,初步建立了烟草细胞悬浮培养体系。结果表明,愈伤组织诱导的最优基本培养基为MS培养基,以MS NAA1.0mg/L 6-BA0.5mg/L为最佳配方;愈伤组织最佳生长培养基为MS 2,4-D0.1mg/L NAA1.5mg/L 6-BA0.3mg/L,愈伤组织培养第6天进入对数生长期,第14天干重增至最初干重的12.536倍,并以此配方建立了烟草细胞悬浮培养体系。     

培养基和外源激素对银杏愈伤组织诱导、生长及叶绿素含量的影响

以银杏胚为外植体,通过应用MS、WS、White培养基和不同组合的外源激素研究对愈伤组织的诱导及其叶绿素的含量.结果表明:MS培养基诱导效果最好;外源激素对银杏愈伤组织叶绿素含量的影响程度为KT＞6-BA＞NAA＞2,4-D;1/4MS NAA2 mg/L KT 3 mg/L组合由于有很高的诱导率、较高的生长量、最高的叶绿素含量成为最适宜的培养基.     

甘蔗新品种桂糖48号的组织培养技术研究

甘蔗组织培养技术是加速繁殖新品种和加快新品种大面积推广的主要手段,不同品种的离体培养中其培养基中激素配比存在差异,因此筛选合适培养基是提高品种快繁效率的关键。本文以桂糖48号为材料,以MS基本培养基加外源激素浓度梯度进行试验处理设计,对品种的愈伤组织诱导、愈伤分化、试管苗增殖和生根阶段进行培养基筛选试验,以其筛选出最合适桂糖48号的培养基配方。试验结果表明:诱导愈伤组织培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L;愈伤组织分化培养基为MS+BA 1.0 mg/L;初代增殖培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.5 g/L;继代培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L;生根培养基为1/2 MS+NAA 12 mg/L。在该培养基下,生根最好,苗绿,比较高,长势好,对加快甘蔗新品种桂糖48号在广西大面积推广起到积极的作用。     

剑麻愈伤组织细胞Co~(60)-γ射线辐射诱变的研究

采用 Co6 0 - γ 射线 0 .2 5KR、 0 .5KR、 1 .0 KR、2 .0 KR和 4.0 KR共 5种照射剂量辐射诱变剑麻愈伤组织 ,通过细胞生长速率、蛋白酶活力及细胞显微和超显微结构观察分析发现 ,辐射后的细胞无论在细胞水平还是亚细胞水平均发生了明显的变异甚至损伤 ,由此导致细胞生长速率随辐射剂量的增加而降低 ,由于辐射诱变的结果 ,在辐射第二代的0 .5KR和 2 .0 KR照射剂量处理中各筛选出一株蛋白酶活力高于外植体的细胞株。     

紫苏细胞悬浮培养生产迷迭香酸条件研究

通过诱导紫苏下胚轴和子叶外植体产生愈伤组织,建立细胞悬浮培养体系,以提高细胞产量及细胞中迷迭香酸含量。结果表明,在MS液体培养上添加3.0mg/L 6-芐氨基嘌呤(6-BA)＋0.3mg/L萘乙酸(NAA)培养基上,下胚轴愈伤组织呈嫩黄色松散状态,出愈时间短,出愈率可达100%。紫苏细胞悬浮培养产生迷迭香酸的最佳条件为培养时间7d、接种量鲜质量浓度20g/L、摇床转速110r/min、蔗糖30g/L、L-苯丙氨酸0.15g/L,此条件下可获得高达2.283mg/g的迷迭香酸。     

生理活性物质和自然生物调节对烟草种子、烟苗和烟株的影响

为了获得健壮、生长整齐一致的烟苗 ,本试验对烟草种子和栽培品种 Baragan 132 ,使用下列不同浓度的生理活性物质进行研究 :1) 0 .0 5 % ;0 .1%和 0 .2 %浓度的水氯酸盐普鲁卡因碱 ;2 ) 0 .0 5 % ;0 .1%和 0 .3%浓度的烟酸 ;3) 0 .0 1%和 0 .0 5 %浓度的吲哚乙酸 (IAA) ;4 ) 0 .0 1%和 0 .0 5 %浓度的萘基醋酸 (NAA) ;5 ) 0 .1% ;0 .2 %和 0 .3%浓度的硫尿 ;6 )对照 (水 )。对烟苗使用不同浓度生理活性物质的研究 :1) 1%浓度的吲哚乙酸 ;2 ) 1%浓度的维生素PP;3) 1%浓度的 PEI- 412 ;4 ) 1%浓度的萘基醋酸(NAA) ;5 ) 1%浓度的硫尿…     

葡萄幼嫩茎叶切块组织快繁脱毒技术

以葡萄幼嫩茎尖、茎叶切块组织为外植体，以改良ＭＳ为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素和生长素。诱导茎尖，茎叶切块组织，经愈伤组织形成丛生芽，获得大量愈伤组织再生植株，经指示植物鉴定，脱除了病毒。     

剑麻细胞悬浮培养诱导蛋白酶的研究

本研究将经过高浓度生长素预培养的剑麻愈伤组织细胞,接种入LS、MS、N6、B5四种液体培养基中,在30d培养过程中动态每2-5d测定培养细胞的生长速率、剑麻蛋白酶活力和培养液的pH值变化.结果表明悬浮培养细胞的生长量成倍地高于固体培养细胞;LS、MS培养基是剑麻细胞悬浮培养及诱导产蛋白酶最适的培养基;悬浮培养液中的蛋白酶活力占细胞蛋白酶活力的20.0%-46.9%;悬浮培养细胞生长速率与培养液的pH值存在一定的相关性.     

蒲公英愈伤组织诱导条件的研究

以蒲公英幼嫩叶片为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同配比的6-BA、NAA、2,4-D植物激素,探讨外植体愈伤组织的诱导。研究结果表明:叶片在含0.2mg/LNAA和2mg/L6-BA的MS培养基中培养20天后形成明显的愈伤组织,诱导率达到86.6%,且绝大多数愈伤组织状态、长势良好,呈比较湿润的嫩黄色颗粒状。