大米镉结合蛋白的分离纯化及纯度鉴定

采用石墨炉原子吸收光谱法（graphite furnace atomic absorption spectrometry,GFAAS）测定不同品种、不同加工精度大米及大米4 种蛋白质中的镉含量。选用镉含量较高的大米为实验原料,采用Osborne分级法提取大米中的4 种蛋白质（清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白）,以及超滤、离子交换色谱从镉含量较高的大米蛋白中分离纯化出均一纯度的大米镉结合蛋白（rice Cd-binding protein,RCBP）,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）鉴定RCBP的纯度及测定分子质量。结果表明：籼米中镉含量高于糯米及粳米;随着加工精度的增加,同种大米中的镉含量依次降低。4 种大米蛋白中的镉含量分别为0.66、0.31、0.63、0.23 μg/g,清蛋白中镉含量最高。超滤分离大米清蛋白（rice albumin,RA）得到大米超滤清蛋白（rice ultrafiltration albumin,RUA）,离子交换色谱纯化RUA得到目标镉结合蛋白（组分c）,SDS-PAGE鉴定组分c为单一条带,分子质量为14 kD。     

大米镉结合蛋白的分离及理化特性

本实验选用一种镉含量较高的大米为原料,采用碱法提取大米蛋白（alkali-extractable protein,AP）,依次用热变性和乙醇沉淀分离AP,制备大米镉结合蛋白（rice Cd-binding protein,RCBP）,并分析了RCBP的紫外吸收特征、氨基酸组成、分子质量及二级结构。结果显示：AP、热变性蛋白（thermally denaturated protein,TP）和乙醇沉淀蛋白（ethanol-precipitated protein,EP）均在210 nm波长处有最大吸收峰,氨基酸组成类似;热变性去除了分子质量为94 kD的蛋白质,分子质量为5 094 kD的蛋白质含量减少,乙醇沉淀进一步减少了分子质量分别为50 kD和14 kD的蛋白质。AP的二级结构主要为α-螺旋和β-转角,有少量β-折叠;TP的二级结构只含有β-折叠和β-转角,且以β-折叠为主;EP的二级结构主要为β-折叠和β-转角,还含有少量α-螺旋和无规卷曲。表明热变性和乙醇沉淀使得AP中的镉结合蛋白得到分离,可以作为一种分离RCBP的方法。     

凝胶层析和离子交换层析结合法纯化重组降血压肽VLPVPR

为了提高VLPVPR的纯度,采用凝胶层析结合离子交换层析的方法对VLPVPR进行纯化。先用Sephadex G-10凝胶对VLPVPR溶液脱盐,再考察离子交换剂（SP Sepharose Fast Flow和Q Sepharose Fast Flow）对重组降血压肽VLPVPR的纯化效果,确立纯化VLPVPR的优化工艺。实验结果表明SP Sepharose Fast Flow不适于VLPVPR的纯化。采用Q Sepharose Fast Flow的纯化工艺为:上样量为柱床体积的10%,用10mmol/L pH9.0的CHES缓冲液洗脱,流速为1mL/min。VLPVPR回收率为93.8%,纯度达到47.2%。采用Q Sepharose Fast Flow纯化提高了VLPVPR的纯度。      

核桃蛋白对大米淀粉凝胶化及凝胶特性的影响

研究不同核桃蛋白添加量下大米淀粉的糊化特性、流变特性、热特性及凝胶质构和水分子状态.结果表明,核桃蛋白以浓度依赖的方式降低了大米淀粉糊的黏度和相变焓值,而使糊化温度升高,当核桃蛋白添加质量分数达12％时,峰值黏度、谷值黏度、最终黏度分别降低了 30.77％、12.35％和14.65％,糊化温度升高了 8.89％;所有样...     

大米淀粉的纯化及性质研究

通过碱洗法和酶法纯化大米蛋白和大米淀粉分离过程中产生的纯度不高的淀粉，结果表明酶法去大米淀粉中的蛋白优于碱法，采用碱性蛋白酶纯化大米淀粉的最优工艺参数为：时间2h，温度60℃，料液比1：6，加酶量0．4％。对大米淀粉脱脂的研究表明溶剂法脱脂比胰脂肪酶脱脂效果好。酶法去蛋白的大米淀粉与未纯化淀粉比较糊化初始温度上升，峰值粘度下降，超微结构显示其淀粉粒结构部分被破坏。脱脂则使糊化初始温度和峰值粘度均下降。     

米渣蛋白和大米蛋白的结构及性质比较

对大米蛋白和米渣蛋白的结构和性质进行了比较研究.分析了两种蛋白的凝胶色谱,溶解性能,氨基酸组成和二级结构的变化.SepharoseCL-4B凝胶色谱分析表明,两种蛋白的碱溶液溶出物具有不同的洗脱曲线和紫外吸收特征;米渣蛋白中的羰基含量和胱氨酸含量都显著高于大米蛋白;米渣蛋白的溶解性明显比大米蛋白的溶解性差.经过高温处理后大米蛋白的二级结构发生了改变.     

大米淀粉粒结合蛋白研究进展

淀粉结合蛋白(starch granule-associated proteins,SGAPs)是指紧密结合于淀粉表面及内部具有显著特征的一类蛋白质,在大米中的质量分数为0.2%~0.5%,不同于普通蛋白,其更多以酶的形式存在于淀粉颗粒中决定淀粉颗粒的结构及形态,对淀粉颗粒的生理生化特性有着重要作用。本文综述了目前国内外关于大米淀粉结合粒蛋白(SGAPs)的研究进展,介绍了几种较为典型的淀粉结合蛋白的分布、分离与纯化方法及其对淀粉的理化特性产生的影响,旨在对大米淀粉深入研究及大米淀粉工业提供一定理论研究基础。     

面筋蛋白和大米蛋白对鲢鱼鱼糜凝胶特性的影响

面筋蛋白和大米蛋白均可以明显提高鲢鱼鱼糜的凝胶强度和持水性,降低其蒸煮损失率和横向弛豫时间(T_2)。但是与大米蛋白相比,面筋蛋白在改善鲢鱼鱼糜凝胶特性方面效果更加显著。当面筋蛋白添加量为3%时,鱼糜凝胶的破断力、破断距离、凝胶强度和持水性分别为669.0 g、12.2 mm、8 162.0 g·m和89.8%,与对照组(未添加蛋白)相比分别增加了79.8%、37.2%、147.0%、11.6%;而蒸煮损失率为8.51%,与对照组相比降低了19.7%。且此时的凝胶横向弛豫时间T_(23)和T_(24)分别为42.4 ms和156.0 ms。3%的面筋蛋白促使鲢鱼鱼糜凝胶形成十分致密的空间三维网络结构,使其具有较高的凝胶强度和持水性,但是由于面筋蛋白带有浅黄色,所以鱼糜凝胶的白度有轻微下降。     

发状念珠藻藻蓝蛋白分离纯化及性质研究

采用冻融法破碎发状念珠藻细胞,经过磷酸缓冲液提取、硫酸铵分步沉淀、离子交换层析和凝胶层析分离纯化发状念珠藻藻蓝蛋白,其纯度(A615/A280)达到5.321,纯化因子为7.623。纯化的藻蓝蛋白最大吸收峰为615 nm,其室温荧光发射峰为646 nm,SDS-PAGE电泳显示其α和β亚基的分子质量在14.4～18.4 ku。稳定性实验表明,低温、避光、pH 6～8以及低浓度的蔗糖等条件下发状念珠藻藻蓝蛋白是稳定的。实验结果将为开发利用发状念珠藻藻蓝蛋白提供参考。     

大米蛋白与米渣蛋白对镉结合能力的对比研究

目的:比较大米蛋白和米渣蛋白对镉的结合能力,探究蛋白对镉的结合机理。方法:通过蛋白对镉的结合试验、镉的脱除试验,比较两种蛋白对镉的结合能力,并用粒径仪、圆二色光谱仪(CD)、红外光谱仪(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)、X射线光电子能谱分析仪(XPS)等仪器分析蛋白与镉的结合机理。通过掩蔽蛋白羧基、氧化巯基后再对镉结合的试验,验证蛋白的羧基及巯基对镉结合的重要性。结果:米渣蛋白对镉的最大结合量为12.08 mg/g,被结合的镉120 min后脱除率达到最大,大米蛋白对镉的最大结合量为8.85 mg/g,被结合的镉60 min后脱除率达到最大。掩蔽蛋白羧基后,两种蛋白对镉的结合量较羧基掩蔽前均下降18%;氧化巯基后,大米蛋白和米渣蛋白较巯基被氧化前对镉的结合量分别下降40%和50%。SEM观察出,蛋白结合镉后发生聚集现象。结论:与大米蛋白相比,米渣蛋白对镉的结合能力更强。此外,两种蛋白对镉的结合不仅是简单的物理吸附作用,蛋白中的巯基和羧基对镉的结合也具有重要作用。     

米糠抗氧化肽的提取和纯化工艺研究

研究了米糠抗氧化肽的提取、分离纯化工艺及氨基酸组成。研究结果显示,米糠抗氧化肽的最佳提取工艺条件为:在pH7.0、温度为55℃、[E]/[S]=12%、底物浓度为8%时,米糠蛋白经AS1.398中性蛋白酶酶解6 h,可获得对超氧阴离子氧化作用的抑制率最高的混合肽;经分子筛层析和离子交换层析,获得含3个肽段的米糠抗氧化混合肽;通过氨基酸组成和含量分析可知该米糠抗氧化混合肽由16种氨基酸组成,人体必需氨基酸含量丰富。     

大米蛋白在乳化体系不同相中的分子特征研究

以大米蛋白酶解物为实验材料,研究了不同pH值条件下乳化体系各相中的蛋白质分子特征。结果表明,在乳化相和水相之间、不同pH值时的乳化相之间蛋白质分子大小接近,但它们的氨基酸组成差异显著,说明它们不是相同的蛋白组分。计算表明,不同pH值条件下乳化相中蛋白质的疏水性值大于水相蛋白质,在高pH时两相的蛋白疏水性值差别变小。     

大米蛋白研究概述

该文主要介绍大米蛋白组成成分和大米蛋白分离提取方法,概述大米蛋白国内外研究现状及开发大米蛋白重要性,并对其前景进行展望。     

白鲢鱼酸/碱等电点沉淀法分离蛋白及其凝胶特性

为制备营养特性和功能特性优良的分离蛋白,采用酸/碱等电点沉淀法制备白鲢鱼分离蛋白,并比较不同工艺（pH3.0-5.5、pH4.0-5.5、pH11.0-5.5、pH12.0-5.5 和pH13.0-5.5）制备分离蛋白的差异,结果表明：与酸法提取相比,碱法提取制备的分离蛋白的蛋白质含量高、粗脂肪含量低,溶解性强,且碱法制备（pH12.0-5.5）的分离蛋白的蛋白质含量最高,高达81.96 g/100 g,且水分含量仅为9.76 g/100 g,同时碱法（pH12.0-5.5 和pH13.0-5.5）提取的分离蛋白得率高。此外,酸/碱等电点沉淀法制备分离蛋白的氨基酸种类齐全,必需氨基酸含量占氨基酸总量比值42.27%以上,符合联合国粮农组织/世界卫生组织（Food and Agriculture Organization/World Health Organization,FAO/WHO）的蛋白质理想模式。此外,与酸法提取相比,碱法提取制备分离蛋白,其凝胶三维网络结构致密有序均匀,并具有强的凝胶特性和高的持水性,且碱法（pH12.0-5.5）提取制得的分离蛋白凝胶的凝胶特性最强,持水性最高。因此与酸法提取相比,碱法提取分离蛋白的得率高,且碱法（pH12.0-5.5）制备的分离蛋白的质量最优,且营养特性好。     

小麦麸皮抗冻蛋白的纯化及理化性质的研究

本文纯化了一种小麦麸皮抗冻蛋白,并对其氨基酸组成、二级结构进行了分析。采用粗分离、饱和硫酸铵沉淀、离子交换色谱（DEAE-cellulose-26）、凝胶过滤色谱（Sephadex G75）四步对其进行纯化,纯化倍数为449.99倍,产率为4.17%,分子量为11.2 ku,热滞活性为0.169℃（5 mg/m L）。氨基酸组成结果表明:其甘氨酸含量较高（52.08 mol%）,亲水性好。将其与几种常见抗冻糖蛋白进行相关性分析,推断其是一种与冷诱导相关的蛋白。采用傅里叶红外光谱检测,获得其二级结构为:α-螺旋:25.96%²6.52%,β-折叠:21.69%²3.78%,β-转角:35.31%³7.61%,无规卷曲:13.69%¹5.08%。      

发芽对糙米蛋白质及氨基酸组成特性的影响

研究了发芽过程中糙米蛋白质和氨基酸含量和组成特性的变化,并与精米和糙米比较,评价了发芽糙米蛋白质的营养价值。结果表明,发芽可以增加糙米蛋白质、总氨基酸和必需氨基酸的含量,必需氨基酸指数提高。发芽过程中清蛋白和谷蛋白含量均呈上升趋势,球蛋白含量呈下降的趋势。除发芽24h外,醇溶蛋白的含量在整个发芽期间也呈现增加趋势,增加的蛋白质主要是谷蛋白。各发芽阶段糙米的必需氨基酸和总氨基酸的比值均大于55%。18种氨基酸中有12种氨基酸的含量在发芽24h最高。发芽后赖氨酸和苏氨酸的含量增加较明显,但仍是限制性氨基酸;丝氨酸、谷氨酸、精氨酸和组氨酸含量均有所增加。发芽24h时EAAI最大,与FAO/WHO模式相比,EAA组成模式更加合理。发芽可以提高糙米蛋白质的营养价值,改善籼稻米的品质,其中以发芽24h为宜。     

Cow and environmental factors associated with protein fractions and free amino acids predicted using mid-infrared spectroscopy in bovine milk

The objective of the present study was to identify the factors associated with both the protein composition and free amino acid (FAA) composition of bovine milk predicted using mid-infrared spectroscopy. Milk samples were available from 7 research herds and 69 commercial herds. The spectral data from the research herds comprised 94,286 separate morning and evening milk samples; the spectral data from the commercial herds comprised 40,260 milk samples representing a composite sample of both the morning and evening milkings. Mid-infrared spectroscopy prediction models developed in a previous study were applied to all spectra. Factors associated with the predicted protein and FAA composition were quantified using linear mixed models. Factors considered in the model included the fixed effects of calendar month of the test, milking time (i.e., morning, evening, or both combined), parity (1, 2, 3, 4, 5, and ≥6), stage of lactation, the interaction between parity and stage of lactation, breed proportion of the cow (Friesian, Jersey, Norwegian Red, Montbéliarde, and other), and both the general heterosis and recombination coefficients of the cow. Contemporary group as well as both within- and across-lactation permanent environmental effects were included in all models as random effects. Total proteins (i.e., total casein, CN; total whey; and total β-lactoglobulin) and protein fractions (with the exception of α-lactalbumin) decreased postcalving until 36 to 65 days in milk and increased thereafter. After adjusting the statistical model for differences in crude protein content and milk yield separately, irrespective of stage of lactation, younger animals produced more total proteins (i.e., total CN, total whey, and total β-lactoglobulin) as well as more total FAA, Glu, and Asp than their older contemporaries. The concentration of all protein fractions (except β-CN) in milk was greatest in the evening milk, even after adjusting for differences in the crude protein content of the milk. Relative to a purebred Holstein cow, Jersey cows, on average, produced a greater concentration of all CN fractions but less total FAA, Glu, Gly, Asp, and Val in milk. Relative to their respective purebred parental average, first-cross cows produced more total CN and more β-CN. Results from the present study indicate that many cow-level factors, as well as other factors, are associated with protein composition and FAA composition of bovine milk.     

Preparation and properties of a white protein fraction in high yield from sugar beet (Beta vulgaris L) leaves

Chlorophyll-free protein has been recovered at a yield in excess of 50 % from sugar beet (Beta vulgaris L) leaf juice after two successive pH treatments. This corresponds to about 60 kg of white protein per hectare. The main component of the final preparation is ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase (EC 4.1.1.39). Compared with the unfractionated protein from leaf extracts, the white protein preparation has higher contents of tyrosine, threonine, glutamic acid and proline and lower ones of isoleucine, lysine (although still high: 76mg g^?1) and glycine. The content of methionine is high (24mg g^?1) probably as a result of the addition of sulphite during protein extraction. The white protein preparation has a low level of ether extractives (17mg g^?1) and a moderate ash (52mg g^?1) content. The white protein is rapidly degraded by pepsin, trypsin and pancreatic juice.     

Amino acid composition of storage proteins of a promising chickpea (Cicer arietinum L) cultivar

The amino acid compositions of flours made from the cotyledons and from the whole seeds of a disease-resistant, stable and high-yielding cultivar of chickpea (Cicer arietinum L) cv H75–35, known locally as Gaurav, have been analysed. These, together with similar analyses of the albumin, globulin, legumin and vicilin protein fractions, have been compared with those of other legumes. Seed protein content was 19·8 % with globulin constituting 62·4 % of the total seed protein. The ratios of albumin to globulin and legumin to vicilin were 1:4 and 6:1, respectively. The proportion of basic amino acids in the albumin was low whereas the reverse was true in the globulin. The legumin fraction seems to be superior in terms of total essential amino acids to those from other sources. Sulphur amino acids were the most limiting, followed by tryptophan or threonine depending on the fraction. However, the ratio of methionine to cystine was high (2·76:1). The extent of the sulphur amino acid deficiency was assessed, and possible approaches for its improvement are outlined.     

不同米蛋白组分与镉的结合规律

对制备的4种不同米蛋白样品与镉进行结合动力学、热力学分析,结果表明:4种蛋白与镉结合的速度均非常快,30min就达到了反应平衡;其中,醇溶蛋白与镉的结合量最高(23.78mg/g),球蛋白的q值最低(3.64mg/g);结合过程符合准二级动力学模型;与Freundlich模型相比,Langmuir模型能更好地用来描述4种蛋白的等温吸附;结合反应的ΔG°值均为负值,而ΔH°均为正值,表明都是自发的吸热反应;酶提蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白的ΔH°分别为41.44,40.32,58.75kJ/mol,推测它们与镉的结合是配位结合,其中醇溶蛋白可能是多齿配位;氨基酸组成的不同,可能是影响4种米蛋白与镉结合的主要因素,谷氨酸和天冬氨酸含量之和与q值的相关性达到了0.967。