产气气杆菌产普鲁兰酶发酵培养基的优化

对一株产气气杆菌产普鲁兰酶的发酵培养基进行了优化,确定了该菌株的最适发酵培养基配方为（g／L）：玉米淀粉15,豆饼粉10,CH3COONH48,K2HPO4·3H2O0．5,MgSO4·7H2O0．5,KCl0．5,FeSO4·7H2O0．05．采用该培养基在5L发酵罐水平发酵55h,普鲁兰酶活力达到54．64U／mL．研究了不同铵盐形式对该菌株产普鲁兰酶的影响,结果发现：以CH3COONH4为无机氮源,该菌株产普鲁兰酶活力高,且该酶绝大部分能分泌至胞外而以NH4CI,NH4NO3及（NH4）2SO4为无机氮源,该菌产普鲁兰酶活力较低,且为胞内酶．     

纳豆芽孢杆菌的诱变育种研究

通过实验研究了纳豆芽孢杆菌的育种方法,对初始纳豆芽孢杆菌进行了紫外及微波诱变,采用牛奶-琼脂板筛选菌种,得到了目的菌株QBNW467.研究表明,采用牛奶-琼脂板法筛选诱变后的纳豆芽孢杆菌方法可行,用该法筛选出的菌株QBNW467的固体发酵产酶活性可达2200 IU.g-1.     

枯草芽孢杆菌产果胶裂解酶培养基优化研究

通过Plackett-Burman试验设计,从葡萄糖、果糖、豆粕粉、氯化铵、乙酸铵、硫酸铵、蛋白胨、酵母提取物、K2PHO4、KH2PO4、CaCl2等11个相关因子中筛选出对枯草芽孢杆菌产果胶裂解具有显著影响的因子——果糖、豆粕和酵母提取物,选取因子豆粕和酵母提取物进行响应面设计分析,研究结果表明当豆粕和酵母提取物含量分别为100 g/L,25 g/L时,果胶裂解酶活性最大为22.69 U/mL。     

枯草芽孢杆菌产木聚糖酶发酵条件的研究

通过单因素和正交试验,对芽胞杆菌产木聚糖酶的发酵条件进行了研究.结果显示最佳产酶条件是:2%麸皮、0.5%(NH4)2HPO40、.1%K2HPO4、0.02%MgSO4.2H2O、0.2%吐温80、1mmol/L微量元素(Fe2 ,Zn2 )、pH9.0、35℃和振荡培养48 h.其木聚糖酶活力可达到2.67 IU/mL.     

枯草芽孢杆菌FM208849产果胶酶发酵条件的优化

枯草芽孢杆菌FM208849是从罗布麻表皮中筛选到的一株高效产果胶酶的菌株,对罗布麻的生物脱胶效果明显。本文从菌种生长与诱导物两个方面对枯草芽孢杆菌FM208849产酶发酵条件进行优化,并对所产果胶酶催化反应条件进行了初步分析。结果表明:最佳产酶培养基为果胶与葡萄糖共4 g/L(质量比为1∶3),牛肉膏15 g/L,NaCl 2 g/L;最佳发酵时间为24 h。初步测定果胶酶的最适反应温度为40℃,最适pH为9.5,其分子质量在39.3 ku左右。     

枯草芽孢杆菌FM208849产果胶酶发酵条件的优化

枯草芽孢杆菌FM208849是从罗布麻表皮中筛选到的一株高效产果胶酶的菌株,对罗布麻的生物脱胶效果明显。本文从菌种生长与诱导物两个方面对枯草芽孢杆菌FM208849产酶发酵条件进行优化,并对所产果胶酶催化反应条件进行了初步分析。结果表明:最佳产酶培养基为果胶与葡萄糖共4 g/L(质量比为1∶3),牛肉膏15 g/L,NaCl 2 g/L;最佳发酵时间为24 h。初步测定果胶酶的最适反应温度为40℃,最适pH为9.5,其分子质量在39.3 ku左右。     

产壳聚糖酶菌株的诱变育种及其产酶条件研究

通过在培养基中加入不同种类的抗生素,对壳聚糖酶产生菌株Penicillium sp.ZD-Z1进行筛选,再经紫外诱变得到一株产酶活力较强的菌株,活力为0.58 U/mL.采用三因素(温度、pH、转速)四水平正交分析,所得到菌种最适产酶培养条件为:28℃、培养基初始pH4.5、摇瓶培养转速190 r/min.用发酵粗酶液对4%壳聚糖(相对分子质量290 000)水溶液进行降解实验,水解24 h后测得黏均相对分子质量为1 920,降解效果显著.     

贝莱斯芽孢杆菌Vel-HNGD-F2产抗菌物质发酵条件优化及抗菌特性研究

从猪肠道微生物中筛选到的贝莱斯芽孢杆菌Vel-HNGD-F2对禾谷镰刀菌有良好的抑菌效果,有望用于禾谷镰刀菌引起的作物病害防治。为进一步提高菌株Vel-HNGD-F2的抗菌物质产量,采用响应面法对其发酵条件进行优化;通过酸沉淀法对菌株Vel-HNGD-F2的脂肽类物质进行粗提并检测抑菌活性,研究粗提物的稳定性;用已知的5种编码脂肽类抗生素的基因的特异性引物进行PCR扩增并测序分析;通过UPLC-Q-TOF-MS检测技术对脂肽粗提物的成分进行分析。结果表明：菌株Vel-HNGD-F2的最佳发酵条件为发酵温度36.49℃、发酵液初始pH 7.14、接种量3.13%,预测发酵上清液抑菌率为58.71%,实际抑菌率为58.49%;粗提物对禾谷镰刀菌有抑菌作用且具有良好的耐热性并对紫外照射不敏感;对PCR扩增产物测序结果经NCBI的在线BLAST比对,表明该菌含有与bmyB、fenD、ituC、srfAA和bacA同源的基因,推测菌株Vel-HNGD-F2可能分泌这5种脂肽;UPLC-Q-TOF-MS结果显示抗菌物质为包含surfactin、iturin和bacillomycin的混合物。菌株V...     

等离子诱变Trametes sanguinea WTFA5产漆酶培养基优化及酶学性质研究

以愈创木酚-YP D培养基筛选产漆酶菌株,用等离子诱变、单因素和正交实验法提高其产漆酶效率,以活性电泳法纯化漆酶.筛选到一株产漆酶的血红栓菌Trametes sanguinea WTFA5;等离子诱变后获得遗传稳定的突变株T.sanguinea WTFS4,使发酵时间由10 d缩短至9 d,并且漆酶酶活由123.2 U...     

产胶原蛋白酶枯草芽孢杆菌的筛选

为了得到产胶原蛋白酶的微生物,以海产品市场附近采集的污泥为样品,经过富集培养后通过明胶培养基进行筛选,获得1株产胶原蛋白酶的菌株。通过形态观察和生理生化特征分析,以透明圈和菌落直径之比(HC)为检测指标,初步鉴定该菌株为芽孢杆菌属。对它产生的胶原蛋白酶进行分离和活力测定,得到的酶活力为44.982 U/mL。经SDS-PAGE凝胶电泳检测,该酶将分子质量为100 ku左右的胶原蛋白水解成为8 ku左右的短肽,说明该酶能有效水解胶原蛋白。     

枯草芽孢杆菌发酵产耐酸耐高温α-淀粉酶培养基优化

耐酸耐高温α-淀粉酶具有耐酸和耐高温的双重特性,可以进一步提高淀粉糖和相关行业生产效率、降低成本,近来其研究和应用受到广泛重视。采用单因素和正交试验对枯草芽孢杆菌液体发酵产酶的培养基组分进行优化,包含碳源、氮源、金属离子和产酶促进剂等。经过优化后的主要培养基组成为:麦芽糖10%、玉米淀粉2%;胰蛋白胨1%、尿素2%;0.4%的硫酸锰;0.1%的吐温80。经优化后的耐酸耐高温酶α-淀粉酶酶活由43.13 U/m L提高到了89.15 U/m L,发酵酶活提高了一倍左右。     

响应面法优化芽孢杆菌LJ-7发酵产酯酶条件

为了获得海洋芽孢杆菌LJ-7发酵产酯酶的最佳条件,采用响应面法对其发酵条件进行了优化。首先,通过单因素试验选出对酯酶产量影响较显著的3个因素,即发酵温度、初始pH和发酵时间。在单因素试验的基础上,采用Box-Benhnken中心组合方法进行三因素三水平的试验设计,以酶活为响应值,利用响应面分析法进行进一步优化,确定最佳发酵条件为:发酵时间42.81h,发酵温度29.40℃,pH为6.21,此时预测的酯酶酶活为24.91 U/mL。在此最佳条件下,平行试验测得实际酶活为24.63U/mL,达到理论预测值的95%以上。该模型较好地预测了实际发酵情况,得到的优化条件具有实际应用价值。     

枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的发酵条件优化分析

为获得枯草芽孢杆菌产旷β-甘露聚糖酶的最佳发酵条件,分别对碳源、氮源、碳氮质量比、发酵时间和培养温度进行了单因素实验,在此基础上对发酵温度、接种量、培养基初始pH值和发酵时间四因素进行了L9（3^4）正交优化试验．结果表明枯草芽孢杆菌分泌β-甘露聚糖酶的最佳碳源为40g／L魔芋精粉,最佳氮源为5g／L酵母抽提物,两者最佳质量比为5：1,最佳发酵条件为30℃的条件下摇瓶培养28h;最佳发酵参数组合为发酵温度30℃、接种量5％、培养基初始pH6．5、发酵时间28h;各因素对枯草芽孢杆菌产β－甘露聚糖酶的影响程度大小依次为发酵时间〉发酵温度〉接种量〉培养基初始pH,其中发酵时间对产酶的影响最为显著。     

两性霉素B产生菌的诱变育种及发酵条件优化

以结节链霉菌Streptomyces nodosus 150802为出发菌株,采用紫外诱变方法进行诱变选育出高产菌株S.nodosus UV-13,运用单因素实验设计方法优化了S.nodosus UV-13发酵生产两性霉素B(AmB)的条件.实验结果表明:紫外诱变最佳照射时间为60s,在此条件下,通过摇瓶初筛和复筛后选育出了一株稳定高产突变株S.nodosus UV-13,其AmB发酵单位为2.46g/L,较原始菌株提高了20.0%,经过传代5代后仍表现出良好的遗传稳定性.单因素实验建立的最优S.nodosus UV-13发酵条件:发酵温度28℃,摇瓶装液量每250mL添加50mL,接种量为6%,发酵周期7d.在此最优发酵条件下,AmB发酵单位达到3.80g/L.     

南极假丝酵母诱变育种及产脂肪酶条件优化

通过紫外诱变、硫酸二乙酯诱变及复合诱变,对南极假丝酵母菌种进行了选育,筛选出一株高产菌株UDAan-1,其酶活达到42.7 U.mL-1,为原始菌株的1.8倍。在摇瓶条件下对发酵培养温度、初始pH值等南极假丝酵母诱变菌株产酶工艺参数进行了优化。最终确定了各发酵工艺参数:培养温度26℃,初始pH值6.5,发酵用菌种培养20h,接种量6%(体积分数),摇床转速200 r.min-1,250 mL摇瓶装液量50 mL,表面活性剂选用0.1%吐温-80(体积分数)。     

酪酸梭状芽孢杆菌发酵培养基的优化

验证了高层半固体琼脂试管法比固体琼脂平板法更具有良好的厌氧性能,能准确地对酪酸梭状芽孢杆菌进行活菌计数．通过对发酵培养基中不同碳源、氮源、生长因子进行单因素研究,L9（3^3）正交实验进一步优化得到最佳培养基组成为（g／L）：胰蛋白胨10,葡萄糖8,酵母膏4．用此培养基在37℃培养24h,活菌数可达4．1×10^8mL^-1．培养基中添加K2HPO45g／L、MgSO4-7H2O0．2g／L、MnSO4·H2O0．2g／L、CaCO31g／L培养32h时,酪酸梭状芽孢杆菌芽孢转化率可达95％．     

产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌发酵条件的响应面优化

采用实验室前期构建的能够高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌株,对其液体发酵条件进行优化。通过单因素实验和响应面Box-Behnken模型优化液体发酵培养参数,五因素三水平的响应面分析表明最佳发酵培养条件为:蛋白胨26.05 g/L,葡萄糖29.29 g/L,MgSO4 1.5 g/L,CaCl2 0.74 g/L,NaCl 10 g/L,pH 9.0,接种量3 %。在最优发酵培养条件下,纳豆激酶最高酶活达到2 186.17 IU/mL,比优化前提高了269 % ,这表明响应面法优化枯草芽孢杆菌工程菌能够明显的提高纳豆激酶活性,为该菌株规模化生产纳豆激酶提供了基础应用参考。     

微杆菌Z4产几丁质酶的发酵条件研究

为提高微杆菌Z4发酵的几丁质酶得率,利用摇瓶研究了发酵温度、初始pH、装液量等对于发酵产酶的影响.在这些实验的基础上,运用正交试验对Z4产几丁质酶的摇瓶发酵条件进行了进一步优化.结果的极差分析和方差分析表明温度对产酶的影响最大,具有显著性.最佳摇瓶发酵工艺条件为:培养温度28℃,培养基初始pH7,接种量6%,三角瓶装液量60mL培养基/250 mL三角瓶.在该条件下发酵液酶产量达到4.13 U/mL,比优化前提高了79.6%.     

响应面法优化重组枯草芽孢杆菌发酵生产青霉素G酰化酶

利用响应面法优化重组枯草芽孢杆菌pAUB-BmPGA／BS168发酵生产青霉素G酰化酶的条件。通过Plackett-Burman设计法对碳源、氮源、无机盐、温度等19个因素对发酵产青霉素G酰化酶的影响进行评价。筛选出发酵温度和酵母膏为影响产酶的显著因素。采用了中心组合设计实验对两种显著影响因素进行了优化,应用响应面分析确定了显著因素的最佳水平。结果表明,当温度为34℃,酵母膏为8．8g／L时,最终的酶活达到28．2U／mL,比初始发酵条件提高了1．19倍。在最佳条件利用15L的发酵罐对重组枯草芽孢杆菌进行扩大培养,最终酶活可达51．0U／mL,相对于摇瓶发酵又有大幅度的提高。