粪便微生物粗提液修复溃疡性结肠炎的研究

研究了粪便微生物粗提液对溃疡性结肠炎修复作用的影响。将64只健康小鼠随机分为4组,即完全空白组（n=20）、肠炎空白组（n=20）、SASP（柳氮硫胺吡啶）组（n=12）和FMT（粪便微生物移植）组（n=12）,处理组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠盐（DSS）溶液8 d,建立溃疡性结肠炎（UC）模型,并于建模第8 d,解剖完全空白组、肠炎空白组小鼠各8只,以验证UC模型是否建立成功。造模后,SASP组、FMT组同时分别给予柳氮硫胺吡啶片及鼠源粪便微生物提取液干预治疗4周,灌胃频率2 d/次,然后进行为期两周的后续观察,期间观察各组小鼠表观状态、体重变化,结肠组织长度变化,结肠组织病理学改变,并测定各组血清IL-1β、IL-6、TNF-α的浓度变化。结果表明:与肠炎空白组小鼠相比,粪便微生物移植疗法使小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低（p<0.05）,并使结肠长度及体重显著增加,结肠组织更加完整。因此证实,粪便微生物提取液对溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用,具有应用于临床医学的潜力。      

益生菌混合物通过抑制NF-κB信号通路发挥抗溃疡性结肠炎功效的研究

本文从NF-κB信号通路出发,探讨益生菌混合物对人工诱发溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用,为治疗人类肠炎提供一种安全可靠的方法。给予溃疡性结肠炎小鼠一定剂量的益生菌混合物,通过Western-blotting、ELISA实验法,分别测定小鼠组织及血清中关键标志物中的表达水平。结果表明:与肠炎空白组小鼠相比,益生菌联合疗法使UC小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低（p<0.05）,并降低NF-κB的蛋白表达,增加IκB的蛋白表达。益生菌混合物通过抑制NF-κB信号通路的活化从而发挥抗溃疡性结肠炎功效,益生菌混合物抑制了NF-κB与IκB的分离,阻塞游离的NF-κB进入细胞核,从而无法调控IL-1β、IL-6、TNF-α等炎性细胞因子的表达,最终抑制机体过度的活化。益生菌混合物对溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用,具有应用于临床医学的潜力。      

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨黔产刺梨根干预溃疡性结肠炎的作用机制

目的:基于TLR4/NF-κB信号通路探讨黔产刺梨根治疗溃疡性结肠炎大鼠的作用机制。方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇溶液灌肠建立溃疡性结肠炎模型,灌胃刺梨根水煎液高、中、低剂量组（8、4、2 g/kg）,柳氮磺嘧啶组（0.3 g/kg）。观察大鼠外观、动作行为以及血便;采集大鼠血清与大鼠结肠,利用苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠结肠病理学改变;酶联免疫吸附测定（ELISA）检测大鼠血清白细胞介素（IL）-1β,IL-6,TNF-α水平;逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测大鼠结肠Myd88、NF-κB p50、NF-κB p65、TLR4 mRNA表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠结肠Myd88、NF-κB p50、NF-κB p65、TLR4蛋白表达。结果:刺梨根水煎液可明显改善溃疡性结肠炎大鼠结肠炎症损伤,特别是刺梨根水煎液高剂量组。与模型组比较,刺梨根水煎液高剂量组结肠病理损伤得到显著改善,刺梨根水煎液高剂量组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均极显著下降（P<0.01）;结肠Myd88、NF-κB p50、TLR4 mRNA表达量显著下降（P<0.05）;结肠Myd88、NF-κB p50、NF-κB p65、TLR4蛋白表达量极显著下降（P<0.01）。结论:刺梨根水煎液可有效缓解TNBS诱导的溃疡性结肠炎并改善炎症损伤,刺梨根水煎液干预溃疡性结肠炎的作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路相关。     

英红九号红茶水提物通过调控TNF-α/NF-κB信号通路缓解小鼠的急性酒精中毒

该研究探讨了英红九号红茶水提物（Yinghong NO.9 Black Tea Water Extract,YBTE）缓解小鼠急性酒精中毒作用（Acute Alcoholic Intoxication,AAI）及其机制。采用56°白酒稀释液一次性灌胃方法建立小鼠AAI模型,记录翻正反射消失和恢复时间,检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性以及血清和肝脏中乙醇脱氢酶（ADH）的活性,采用Western blot法测定肝脏中核因子-κΒ（NF-κB）、炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白表达水平。结果表明,不同剂量YBTE均能延长小鼠入睡时间,也能缩短睡眠时间,其中高剂量组小鼠入睡时间延长到40.89 min（p<0.01）,睡眠时间缩短为166.18 min（p<0.01）。与模型组相比,YBTE可降低血清中ALT和AST的活性,提高血清和肝脏中ADH的活性,其中高剂量组ALT活性下降到22.89 U/L（p<0.01）,AST活性下降到29.58 U/L（p<0.01）,血清ADH提高到43.43 IU/mL（p<0.01）,肝脏ADH提高到7.37 IU/mL（p<0.01）,并能下调肝脏中p-NF-κB p65、TNF-α和IL-1β蛋白表达量。YBTE具有良好的缓解AAI的作用,其作用机制可能是促进酒精代谢和下调TNF-α/NF-κB信号通路。     

水苏糖对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用

目的:探究水苏糖对溃疡性结肠炎(UC)的干预作用。方法:采用葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液灌胃诱导建立小鼠溃疡性结肠炎模型。将小鼠随机分为5组:生理盐水组、DSS模型组、水苏糖低剂量组、水苏糖中剂量组、水苏糖高剂量组。通过检测小鼠体质量、便血等疾病活动指数及结肠长度、大体形态损伤等指标,分析水苏糖对小鼠结肠炎的干预作用。通过测定小鼠结肠组织髓过氧化物酶(MPO)含量、血清中IL-1β等细胞因子的分泌水平及NF-κB信号关键蛋白表达,探讨其可能机制。结果:与生理盐水组相比,模型组小鼠体质量显著下降,出现腹泻、便血等症状,MPO含量及炎症因子表达均显著上升。与模型组相比,水苏糖各剂量组均能显著改善DSS诱导的UC模型小鼠的疾病症状及组织病理学病变,降低MPO含量,减少炎症因子释放,以中、高剂量组的作用较为明显,同时,水苏糖显著抑制了NF-κB信号途径关键分子p65的表达。结论:水苏糖对UC具有良好的改善作用,该作用可能与其降低IL-1β等炎症细胞因子含量及抑制NF-κB信号途径有关。     

刺梨多糖、刺梨黄酮对溃疡性结肠炎小鼠的缓解作用

采用3%(质量分数)葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)诱导溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)小鼠模型,探究刺梨总多糖(Rosa roxburghii Tratt total polysaccharide, RP)和总黄酮(Rosa roxburghii Tratt total flavonoids, RF)对UC小鼠的干预效果及机制。将40只雄性小鼠(C57BL/6J)随机分成空白组、模型组、RP组和RF组,每组10只。除空白组,其余各组小鼠均自由饮用3%DSS溶液,从造模第4天开始灌胃,连续干预10 d。计算疾病活动指数(disease activity index, DAI),测量小鼠结肠长度,血清中内毒素(lipopolysaccharide, LPS)和D-乳酸(D-lactic acid,D-lac)水平,结肠组织中肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白...     

茯苓多糖通过NF-κB和NLRP3信号通路调节脂多糖引起的焦虑和抑郁样行为

目的：探讨茯苓多糖（Poria cocos polysaccharide,PPS）对脂多糖（LPS）引起的焦虑和抑郁样行为的影响,并分析其机制。方法：BV-2细胞分成对照组、LPS组、LPS+氟西汀组、LPS+PPS(PPS分别为4、8、16μmol/L),处理24 h,二氯二氢荧光素二氢乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平,Griess法检测培养上清液NO水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清液中TNF-α、IL-1β水平,Western blot实验检测CD206、CD16/32、NF-κB p65水平。动物实验将小鼠分为对照组、模型组、LPS+氟西汀组、LPS+PPS低剂量组（20 mg/kg）、LPS+PPS高剂量组（80 mg/kg）,每组10只,测试抑郁样行为,检测海马组织TNF-α、IL-1β、IL-18的浓度,分析海马组织CD206、CD16/32、NF-κB p65、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1蛋白水平。结果：与LPS组比较,4、8、16μmol/L PPS能极显著降低ROS荧光相对强度（P<0.01...     

粪便微生物粗提液修复溃疡性结肠炎的研究

研究了粪便微生物粗提液对溃疡性结肠炎修复作用的影响。将64只健康小鼠随机分为4组,即完全空白组(n=20)、肠炎空白组(n=20)、SASP(柳氮硫胺吡啶)组(n=12)和FMT(粪便微生物移植)组(n=12),处理组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)溶液8 d,建立溃疡性结肠炎(UC)模型,并于建模第8 d,解剖完全空白组、肠炎空白组小鼠各8只,以验证UC模型是否建立成功。造模后,SASP组、FMT组同时分别给予柳氮硫胺吡啶片及鼠源粪便微生物提取液干预治疗4周,灌胃频率2 d/次,然后进行为期两周的后续观察,期间观察各组小鼠表观状态、体重变化,结肠组织长度变化,结肠组织病理学改变,并测定各组血清IL-1β、IL-6、TNF-α的浓度变化。结果表明:与肠炎空白组小鼠相比,粪便微生物移植疗法使小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低(p0.05),并使结肠长度及体重显著增加,结肠组织更加完整。因此证实,粪便微生物提取液对溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用,具有应用于临床医学的潜力。     

莲藕渣多糖通过MAPK/NF-κB途径调节小鼠腹腔巨噬细胞的免疫应答

揭示莲藕渣多糖（Lotus Root Residue Polysaccharide,LRP）对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞的体外免疫调节作用,探讨LRP刺激腹腔巨噬细胞产生免疫应答的信号通路。利用MTT法测定不同浓度LRP对细胞活力影响;选用不同浓度梯度及同一浓度不同时间点的LRP刺激细胞,Griess法检测细胞NO释放量;半定量PCR检测细胞TLR4、TLR2受体及免疫关联因子（TNF-α、IL-6、iNOS、1L-1β、COX-2、Nfkbia）mRNA的表达,蛋白印迹法检测其MAPK通路（ERK1/2、JNK、p38）及Akt的磷酸化,同时研究了LRP对和蛋白AP-1及NF-κB的影响,对LRP对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节活性及其信号机制进行评估。研究表明,LRP对小鼠腹腔巨噬细胞无毒作用,25~50 μg/mL LRP促进细胞生长,细胞存活率为104.82%和102.53%（p<0.05）;NO浓度随LRP浓度提高而显著提高（p<0.05）,200 μg/mL LRP刺激细胞产生一氧化氮（NO）为36.47 μmol/L,200 μg/mL的LRP处理细胞,NO产量随培养时间延长而增多（p<0.05）,24 h时NO浓度为44.18 μmol/L;mRNA基因表达研究显示,LRP调控TLR4、TLR2受体,并调节免疫基因的表达;此外,LRP促进核蛋白c-Jun、p65由核外转向核内,增强ERK1/2、JNK、p38蛋白的磷酸化水平,但对于Akt的磷酸化没有显著影响。因此,莲藕渣多糖（LRP）可通过MAPK/NF-κB途径增强BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞免疫应答。     

枸杞多糖对LPS诱导BV2小胶质细胞的抗炎活性及NF-κB信号通路的调控作用

为探究枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharide,LBP）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的BV2小胶质细胞的保护作用。本研究利用MTT法检测细胞活性,ELISA检测炎症因子的分泌,Western Blot检测蛋白表达情况。结果显示,单独LPS处理BV2小胶质细胞后,细胞的活性无显著变化而细胞上清液中的炎症因子PGE2、IL-1β、IL-6及TNF-α释放显著增多;将枸杞多糖梯度与LPS诱导的BV2小胶质细胞共孵育24 h后,有效地提升了LPS诱导的BV2小胶质细胞的活性,同时显著抑制了LPS激活的BV2小胶质细胞炎症因子的释放（P<0.05）;流式结果表明,LPS组小胶质细胞可产生大量ROS,小胶质细胞经不同浓度LBP处理12 h后,ROS含量显著降低（P<0.05）;Western Blot检测结果显示,与对照组相比,LPS组和LBP组中NF-κB信号通路相关蛋白表达及细胞核内p65蛋白表达水平均显著上调（P<0.05）,且与LBP浓度成反比,而细胞质内p65蛋白表达显著降低（P<0.05）,且随着LBP浓度增加而降低。本研究表明,枸杞多糖对LPS激活的BV2小胶质细胞有显著的保护作用,对于LPS激活的BV2小胶质细胞引起的炎症反应具有抑制作用,同时能抑制小胶质细胞中ROS的含量以发挥抗氧化应激作用,同时有效地抑制LPS刺激后细胞内p-TAK1、iκB、p-iκB及p-p65的表达。     

芹菜素通过NF-κB和MAPK抑制脂多糖诱导的骨髓来源巨噬细胞的炎性

目的研究芹菜素在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的骨髓来源巨噬细胞(bone-marrow-derived macrophages,BMDMs)炎性的作用。方法用MTT方法筛选出芹菜素起作用的浓度范围。选择适当的芹菜素浓度处理BMDMs,用实时定量PCR方法检测炎性基因的表达,用Western-blot方法检测炎性信号通路蛋白的表达,以及荧光免疫检验法考察NF-κB P65蛋白的核转位。结果芹菜素的有效作用浓度范围为0~30μmol/L,选用10、30μmol/L浓度的芹菜素培养BMDMs后,炎性因子的m RNA水平明显降低,巨噬细胞从促炎性M1型向抗炎性M2型转化,并且呈现剂量依赖的趋势。NF-κB和MAPK信号通路的激活也受到了明显的抑制。结论芹菜素能通过抑制NF-κB和MAPK信号通路降低LPS诱导的BMDMs的炎性。     

基于NF-κB/NLRP3信号通路探讨栀子豉汤对酒精性肝损伤的保护作用

目的探讨栀子豉汤对酒精性肝损伤(alcoholicliverdisease,ALD)小鼠的保护作用及对NF-κB/NLRP3信号通路的影响。方法 将60只雄性小鼠随机均分为6组:空白组、模型组、甘草酸二铵阳性对照组(60 mg/kg)和栀子豉汤高、中、低(910.0、455.0、227.5 mg/kg) 3个剂量组。除空白组外,其余5组均采用50%乙醇(10 mL/kg)灌胃诱导小鼠ALD模型。持续14 d。检测小鼠血清中肝功能指标水平、血清中炎症因子含量;同时检测血清中抗氧化因子含量。HE染色观察肝脏的组织病理学改变。用Western blot检测小鼠肝组织中核苷酸寡聚化结构域样受体家族3 (nucleotide oligomeric domain-like receptor family 3, NLRP3)、半胱天冬酶-1 (caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a card, ASC)、核转录因子-κB(P65)[nuclear factor kappa-B p65, NF-...     

陈皮酚类化合物调控AHR和NF-κB通路抗苯并芘诱导的肺上皮细胞损伤

本文研究了苯并芘(Bap)诱发肺上皮细胞炎性损伤的作用机制及陈皮中的酚类化合物的抗炎活性及作用机制。通过从陈皮中分离出来酚类化合物并用于抗Bap诱导的人肺上皮II型细胞(A549)损伤的活性研究,检测Bap对细胞炎症因子、NF-κB、芳基烃受体(AHR)通路相关蛋白表达的影响及陈皮酚类化合物对Bap造成损伤的保护作用。本文从陈皮中分离得到6个酚类化合物,研究表明,其中aspidin BB可降低3.74%由Bap诱导的A549细胞凋亡。aspidin BB可抑制Bap诱导的NO及炎症因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)分泌,分别降低了49.22%、26.79%、37.86%和42.94%。Westernblotting结果显示,aspidinBB可抑制Bap诱导的AHR和NF-κB相关蛋白的激活,增强A549细胞的抗炎作用。因此得出陈皮酚类化合物aspidin BB可通过减少Bap诱导的炎性因子分泌,调控AHR、NF-κB通路发挥抗炎及抗氧化损伤的功能。     

甘薯多酚粗提液的抗氧化活性研究

采用抗坏血酸和没食子酸作为对照,全面测定了甘薯多酚粗提液对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基的清除率、还原能力、抗脂质过氧化活性以及对食用油脂的抗氧化性的影响,结果表明甘薯多酚粗提液具有较强的综合抗氧化能力,是一种有开发价值的天然抗氧化剂。     

3种不同组分香菇多糖对溃疡性结肠炎小鼠的缓解作用

探究3种不同组分香菇多糖（Lentinula edodes polysaccharides,LEP）对溃疡性结肠炎小鼠的疗效及其可能的作用机制。通过灌胃方式给予小鼠低（L-LEP1,100 mg/kg bw）、中（M-LEP1,200 mg/kg bw）、高（H-LEP1,400 mg/kg bw）剂量香菇多糖组分LEP1、高剂量（400 mg/kg bw）香菇多糖组分LEP2、LEP3 以及香菇粗提液（lentinus edodes crude extract,LECE）,提前两周进行干预,之后给予小鼠自由饮用3.5%葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium salt,DSS）7 d 以诱导急性结肠炎,记录疾病活动指数（disease activity index,DAI）,测量结肠长度和脾脏指数,苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE）法观察结肠病理切片和评分,阿尔辛蓝（alcian blue,AB）和过碘酸雪夫（periodic acid-schiff reaction,PAS）染色检测结肠组织杯状细胞和黏蛋白,酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测结肠组织中髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）含量,血清中白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）的含量以及结肠中IL-1β、TNF-α、IL-6、干扰素-γ（interferon-gamma,IFN-γ）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）、IL-10 和白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）的含量。结果表明,LEP1、LEP3 及粗提液LECE 能够有效延缓小鼠结肠炎症的发展,其作用效果与修复肠道损伤、影响炎症反应以及肠道细胞免疫有关。     

牛MMP9启动子与转录因子NF-κB作用的研究

为确认转录因子NF-κB对牛MMP9启动子的影响,利用P65过表达载体转染牛乳腺上皮细胞,检测其在蛋白水平对MMP9表达的影响;然后构建牛MMP9启动子双荧光素酶报告载体,转染Hela细胞后用双荧光素酶实验检测启动子活性,确定MMP9基因核心启动子区域,同时添加NF-κB抑制剂(Celastrol)确认P65对启动子活...     

植物多糖通过NF-κB信号通路对巨噬细胞的免疫调节作用研究进展

植物多糖具有一定的免疫调节功能,作为免疫调节剂已广泛应用于医疗和保健食品行业。核转录因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)是一种可以调控基因转录的核因子,对巨噬细胞内部的多种基因都有调控作用,许多研究表明植物多糖主要通过NF-κB信号传导通路诱导巨噬细胞发生免疫应答。本文介绍了NF-κB信号通路的组成和调节以及巨噬细胞表面介导植物多糖的受体活化NF-κB的机理,为深入研究植物多糖免疫调节功能提供参考。     

光皮木瓜多酚粗提液的抗氧化活性研究

以光皮小瓜多酚醇提物、水提物为研究究对象,在测定提取液中多酚含量的基础上,研究了多酚粗提液的还原能力以及清除超氧阴离子自由基（O2）、羟基自由基（&#183;OH）和亚硝酸根（NO2-）的能力。结果表明：在试验浓度范围内,木瓜多酚粗提液有强的还原能力,且醇提物对（O2）、&#183;OH和NO2的最大清除率分别达78．29％、83．97％和55．64％;水提物为96．64％、89．64％和81．23％。这说明木瓜多酚粗提液具有较强的综合抗氧化能力,是一种有开发价值的天然抗氧化剂。     

除去燕麦β-葡聚糖粗提液中蛋白质方法的比较研究

为了提高β-葡聚糖的纯度采功能特性，分别用Sevag法、胰蛋白酶法、等电点法、胰蛋白酶结合Sevag法和胰蛋白酶结合等电点法除去燕麦β-葡聚糖粗提液中蛋白质。其结果表明：用Sevag法时，需要重复5～6次，胰蛋白酶结合Sevag法可以减少重复次数，胰蛋白酶除去蛋白质的效果最差，等电点法除去蛋白质时，操作简单，成本低。而胰蛋白酶结合等电点法除去蛋白质的效果最好，其蛋白质去除率95．8％，多糖保留率90．6％。