应用抑制性消减杂交法筛选与红曲菌产桔霉素相关的基因

为了筛选与红曲菌产桔霉素相关的基因，应用抑制性消减杂交(SSH)构建了两个红曲菌的cDNA消减文库。利用分子生物学软件从这两个文库中找出八条同源序列，通过Blast软件对这八条序列进行分析，结果显示，它们可能是新的基因片段，递交后被Genbank接收。     

蓖麻成熟期胚抑制消减cDNA文库构建及其差异表达基因分析

利用抑制性消减杂交（suppression subtractive hybridization,SSH）技术,以高含油量蓖麻品种油蓖5号开花后第15d胚和36d胚为实验材料构建36d成熟期胚消减cDNA文库。文库的插入片段平均长度约400bp,随机挑取700个克隆进行PCR筛选,获得596个阳性克隆,经过点杂交筛选后选择了521个阳性克隆进行测序。经过同源性比对归并后得到96个差异表达基因,其中包括31个未知基因。已知基因涉及油脂合成、糖的分解、蛋白质贮藏与降解等多个方面。本研究还通过RT—PCR检测了部分可能与蓖麻油脂合成相关基因的差异表达水平,对其可能的功能进行了简要的分析。     

RFID技术及其在烟草物流中的应用与研究

RFID技术类似于一种条码扫描技术,该项技术已被各大行业广泛应用,并且取得了一定的实际效果。对于我国烟草行业而言,为了探寻独立的物流系统,也采用了诸多管理技术,给行业发展注入了新的活力。其中,RFID技术在烟草物流环节中的应用尤其值得业界关注,不仅有效提升了行业的管理效率,而且促进了烟草行业的规模发展。本文就 RFID技术的研究内容及其在烟草物流中的应用展开论述,剖析实践过程中所遇到的问题及调整措施,以期为业界提供有益的实证研究。     

现代萃取技术及其在烟草化学分析中的应用

综述了超临界流体萃取、微波辅助萃取、加速溶剂萃取、浊点萃取、液相微萃取和固相微萃取和分子印迹固相萃取的发展现状、优点、工作原理及其在烟草化学分析中的应用.并简要介绍了其应用前景.     

蟹类主要过敏原及其消减技术研究进展

蟹是引起食源性过敏的主要食品之一,蟹类过敏原是引起蟹过敏的根源。近年来,过敏原性质的研究及分离纯化技术备受关注,已发现蟹的主要过敏原包括原肌球蛋白、精氨酸激酶、血蓝蛋白等。利用食品加工技术降低蟹致敏性的研究也日益增多,以热加工法、辐射技术、酶处理法和超高压法等为代表的蟹致敏活性消减技术取得了新进展。本文就蟹类主要过敏原的种类、致敏蛋白的制备、蟹与其他甲壳类的交叉过敏性以及蟹类过敏原消减方法等进行综述,以期为蟹过敏的诊断预防和低致敏产品开发提供参考。     

统计技术在烟草农业研究中的应用综i述

介绍了统计技术在烟草品种分类与综合评价、生态因素与烟叶品质关系、烟草病虫害预测预报、烟叶品质指标关系分析、烟叶分级等农业领域中的应用,并讨论了常用统计技术的特点及其局限性。     

水果过敏原及其致敏性消减技术研究进展

水果含有丰富的维生素、多酚等抗氧化物质,可延缓衰老,促进人体健康,然而水果过敏造成的食品安全问题日益突出。概述了常见的水果过敏原与交叉过敏反应,水果致敏性消减技术的原理与研究进展。常见的7大类水果过敏原主要包括类甜蛋白、Bet v 1同源蛋白、脂质转移蛋白、抑制蛋白、几丁质酶、半胱氨酸蛋白酶和β-1,3-葡聚糖酶。交叉过敏反应是引发水果过敏的主要原因之一,当多种过敏原含有相似的结构序列或决定簇时可引发明显的交叉过敏反应。其中,花粉中的Bet v 1最容易与常见的水果引起交叉过敏反应。高温、高压、脉冲电场、超声波、辐照等物理加工技术可通过二硫键的断裂与重排、氢键的增强或削弱、肽链的断裂或交联等作用直接破坏水果过敏蛋白质的结构;碱液或酶处理等化学消减技术可通过破坏过敏原的蛋白结构,降解过敏原致敏性表位。目前水果致敏性消减技术的研究较少,其效果也不够理想。未来可通过分子动力学模拟、新型食品加工方法等多技术联合,精准靶向控制水果致敏性;生物育种和基因编辑等新技术培育脱敏水果新品种,从根本上解决水果致敏性难题,为低敏或脱敏水果产品的开发与产业化应用提供科学依据。     

动物性水产品过敏原及其消减技术研究进展

动物性水产品加工除了需要解决贮藏保鲜及风味等问题外,如何消除水产品的致敏性也是水产品加工的一大难题。本文综述动物性水产品中多种过敏原及其特性,介绍近年来酶解技术、超高压技术、辐照技术、美拉德反应和微生物作用等食品加工技术在水产品过敏原消减方面的研究进展,分析其存在的局限性,并探讨技术间联用用于过敏原消减,以期为生产加工低敏或脱敏产品提供参考。     

大气压电离技术在烟草辅料分析中的应用

有机质谱是现代测定有机化合物分子结构最重要的工具之一,它与高效分离技术．气相色谱的在线联用(GC／MS)已成为复杂有机混和物分析最为有效的手段,这2种技术对于难挥发和热不稳定化合物以及大分子化合物却受到很大限制。随着近年来技术上的一系列改进,质谱技术已经突破了传统的物理和化学领域,进入到药物、生物大分子的研究中,随着热喷雾、电喷雾、离子束等新接口技术的出现和发展,LC／MS技术已日臻完善。     

离子色谱技术及其在烟草中的应用进展

简要地介绍了离子色谱(IC)技术的发展现状、优点、工作原理、仪器构成及其在烟草研究中的应用,并对其应用前景进行了展望。     

青霉菌灭活菌丝体诱导烟草抑制消减杂交cDNA文库的构建

为了探究青霉菌灭活菌丝体（DMP）在烟草抗性中的作用机制,以DMP水溶液处理的烟草红花大金元叶片为材料,利用抑制消减杂交（SSH）技术构建了cDNA文库,并对文库进行了分析。SSH获得356个克隆,挑选102个克隆,测序成功77个。Blastn比对出47个不同功能的基因。Blastx比对出26个不同功能的蛋白;7种未知功能的预测蛋白;2个克隆没有比对出相关蛋白。所有克隆抗病防御、能量代谢和细胞保护相关基因较多,分别占总数的40.3%、23.4%和14.9%。其余有关细胞结构、蛋白合成、转录及信号传导的基因相对较少,分别占到8.5%、4.3%、4.3%和4.3%。     

美拉德反应在烟草加工中的应用研究进展

美拉德反应作为一种普遍的非酶褐变现象,广泛存在于烟叶调制、醇化、加工过程之中,其反应产物是烟草香气物质的重要来源。在烟草调制、发酵与醇化的过程中,烟叶中淀粉、蛋白质等转化为小分子糖类与氨基酸,并发生美拉德反应,生成的产物对烟草的香气、吃味有极其重要的影响;在烟草的工业加工之中,人们利用美拉德反应制备再造烟叶与香精香料,为烟草产品提质增香。本文阐述了美拉德反应的反应机理,并从烟叶调制、醇化、再造烟叶改良、烟用香精香料开发等方面总结归纳出目前美拉德反应在烟草生产、加工中的应用,并对优化反应条件、加强反应机理研究、提质增香应用等方面做出展望。     

JPA与SSH架构整合方案及应用研究

在Java EE应用系统中,持久化层采用对象关系映射（ORM）解决了与数据库之间的耦合问题,但因不同的ORM框架之间存在差异,难以摆脱对具体ORM框架的依赖。JPA（Java Persistence API,Java持久化API）是Sun官方提供的持久化的解决方案,它为Plain Old Java Objects（POJO）提供持久化标准规范。在研究JPA技术及其原理的基础上,给出了JPA与SSH架构的整合方案及数据访问对象（DAO）设计模式。采用该架构方案开发的系统,减少了对具体ORM的依赖性,各层次间耦合度低,模块复用性高,大大提高了开发的效率,降低了开发和维护的成本。     

代谢组学技术在烟草研究中的应用进展

简述了作为研究植物生理生化和基因功能新方法的代谢组学在烟草研究中的主要技术流程及其应用现状,归纳了不同生态环境和不同组织中烟草代谢物差异及产生原因,总结了生物和非生物胁迫及化学诱导处理等条件下的烟草生理生化变化及相关基因功能。最后提出了目前烟草代谢组学研究所面临的问题,并指出与其他组学整合应用是代谢组学在烟草研究领域的发展趋势。     

普通烟草碳酸酐酶家族基因的生物信息学分析

为挖掘普通烟草碳酸酐酶基因的信息并探讨其功能,本研究利用生物信息学方法,在烟草基因组数据库中对普通烟草碳酸酐酶家族成员进行了检索,并对其理化性质、遗传进化、基因结构、蛋白保守基序、顺式作用元件和组织表达模式进行了分析。结果显示,在普通烟草中至少含有9个α和6个β亚家族成员。在进化关系上,不同亚家族成员之间,序列同源性较低;与水稻相比,拟南芥和普通烟草两个亚家族间的亲缘关系较近。亚细胞定位分析结果显示,烟草α亚家族成员在细胞壁、细胞膜、线粒体、叶绿体、细胞质等细胞器中均有分布,而β亚家族成员均存在于叶绿体中。基因结构和保守基序分析说明,各亚家族成员的基因结构和蛋白保守基序呈现较高的一致性。启动子顺式作用元件分析显示,烟草碳酸酐酶基因的启动子中,均含有多个参与光反应、激素响应、非生物胁迫和机械损伤等相关的顺式作用元件。基因组织表达模式分析表明,烟草的碳酸酐酶基因不同成员在不同组织表达水平存在差异,并呈现出时空特异性。本研究结果为烟草碳酸酐酶基因的功能研究奠定了基础。     

采后烟叶碳代谢的动态变化分析

为探究采后离体烟叶内碳代谢的变化规律,以烤烟品种豫烟12号和秦烟96为供试材料,测定采后不同时段烟叶淀粉、总糖和还原糖含量变化,并对淀粉和糖代谢相关基因进行实时荧光定量PCR分析。结果表明,秦烟96采后烟叶淀粉含量显著高于豫烟12号,烟叶采后0~30 h,淀粉含量逐渐下降,总糖和还原糖含量逐渐升高,且糖含量在采后12 h后增加速率变快。秦烟96鲜烟叶中淀粉和糖代谢相关基因的表达量高于豫烟12号,而淀粉分解相关基因Ntα-amylase和Ntβ-amylase表达量低于豫烟12号。烟叶采后30 h内,淀粉合成相关基因NtAGPS1、NtAGPS3和直链淀粉合成关键基因NtGBSS1表达量逐渐下调;支链淀粉合成的相关酶基因表达量变化呈无序增降模式;淀粉分解代谢和糖代谢相关酶基因的表达量或呈先升后降趋势,或呈逐渐上升趋势。NtAGPS1和NtGBSS1表达量变化与采后烟叶中淀粉和糖含量变化相关性显著。同一生态条件下,豫烟12号和秦烟96采后烟叶淀粉和糖代谢规律存在差异,其中NtAGPS1和NtGBSS1可能是采后离体烟叶碳代谢的关键调控基因。     

烟草薄片的开发与应用

以造纸法为重点,对辊压法、稠浆法和造纸法这三个烟草薄片发展的历程作了综述;对比辊压法、稠浆法,从应用效果、影响因素等方面对造纸法烟草薄片的特点进行了综述。     

填料在再造烟叶生产中的应用研究进展

综述填料在造纸法再造烟叶生产过程中的应用研究情况,包括填料种类、添加工艺以及对再造烟叶产品的影响等。通过分析认为,填料种类的选择及添加工艺等方面的研究还需要取得进一步突破。     

绒毛状烟草BAC文库的构建

绒毛状烟草是重要的野生种烟草之一。本研究以CopyControl^TM pCC1BAC^TM(Hind Ⅲ Cloning-Ready)Vector为载体,构建了绒毛状烟草的BAC文库。分析结果表明,BAC文库DNA插入片段为50~200 kb,平均110 kb,空载率<2%。随机挑选15个克隆进行稳定性继代试验,100代后插入片段仍然稳定存在。该绒毛状烟草BAC文库的建成,为进一步克隆重要功能基因提供了必备的物质平台。     

低钾胁迫对烟草幼苗碳氮代谢基因表达谱的影响

为探索烟草响应低钾胁迫的分子机制,对K326烟草幼苗进行了0、6、12和24 h的低钾胁迫处理,并利用定制的烟草全基因组芯片,分析了烟草幼苗基因表达谱的变化。结果表明,与0 h相比,6、12和24 h的3个时间点差异表达在2倍以上(p<0.05)的基因总数为3790个。从功能方面看,这些差异表达基因广泛参与了烟草的各种生物学过程,包括抗氧化活性、应激反应、运输活性、发育过程、催化活性、生物调节、代谢过程等。其中包括了硝酸还原酶基因NIA2等10个参与烟草氮代谢的基因,以及UGP等44个参与烟草碳水化合物与糖代谢的基因。本研究结果说明,低钾胁迫对烟草的基因表达产生了广泛的影响,进而可能影响到烟草的碳氮等基础代谢。