利用无毒产细菌素菌株防治烟草细菌性青枯病

本文研究了烟草细菌性青枯病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ ｓｍｉｔｈ）的无毒产细菌素菌株对烟草青枯病菌４－１１的防治作用。结果指出：用浸根法处理Ａ３－５，Ａ４－３，Ａ１－４三个无毒菌株对致病菌４－１１均有防治效果。其中Ａ３－５防效最好，病毒情指数比治作用，病情指数比对照降低达８０％，推迟发病２５天，说明在烟草根际保持较高数量的Ａ３－５，是提高其防治效果的必要条件。对发病动态学     

两株防治烟草青枯病的烟草根际拮抗菌

  目的  进一步丰富烟草青枯病的生防资源。  方法  采用抑菌圈法和盆栽试验测定分离自烟草根际的细菌菌株GZYCT-4和GZYCT-9对青枯病菌的拮抗活性;运用PCR技术检测拮抗细菌的生防标记基因,利用趋化性试验研究烟草根系分泌物及其所含的各种有机酸对拮抗菌根部定殖的影响。  结果  （1）GZYCT-4和GZYCT-9对烟草青枯病菌均具有较好的抑菌效果,培养48 h的抑菌圈直径分别为16.64 mm和18.90 mm,盆栽试验表明灌根接种施用GZYCT-4和GZYCT-9可有效防治烟草青枯病。（2）GZYCT-4和GZYCT-9菌株均检测到8个枯草芽孢杆菌生防标记基因,其脂肽类粗提物对烟草青枯病菌的抑菌圈直径分别达到16.24 mm和20.71 mm。（3）GZYCT-4对红花大金元根系分泌物有较强的趋化反应,且红花大金元根系分泌物含有的草酸对GZYCT-4吸引作用较大,而GZYCT-9则对K326根系分泌物有较好的趋化反应,K326根系分泌物所含的柠檬酸对GZYCT-9有较好的吸引作用。  结论  GZYCT-4和GZYCT-9菌株均可有效地防控烟草青枯病,且对不同品种的烟草根系分泌物及其所含的各种有机酸有趋化差异。      

烟草内生细菌及其对烟草青枯病的生物防治研究

对烟草内生细菌的来源、数量动态变化、与青枯病抗性的关系,以及内生细菌防病和促进种子萌发等方面进行了研究。结果表明烟草内生细菌可来源于种子内部,在烟草不同生育期,抗病品种中内生细菌的总数量以及对青枯病菌具有拮抗作用的内生细菌数量均高于感病品种,部分内生细菌具有促进烟草种子萌发和防治烟草青枯病的作用。      

烟草细菌性青枯病防治方法研究

研究了烟草细菌性青枯病的生物防治和化学防治相结合的方法。通过盆栽试验结果表明：产细菌素的烟草青枯细菌无致病力菌株抗链霉素突变体ｒＡ３－５和农用链霉素联合作用，对烟草青枯病防效最佳。先加致病菌再加拮抗菌和先加拮抗菌再加致病菌的防病效果分别为９３．８％和１００％，推迟发病期８天和３０天，而ｒＡ３－５和农用链霉素单一作用的防病效果分别为５６．３％、６５．３％和４１．７％、５８．４％。     

烟草青枯病菌(Pseudomonas solanacearum)细菌素的生物学特性研究

本文研究了烟草青枯病菌(Pseudomonas solanacearum)无毒产细菌素菌株 A_(3-5)产生的细菌素的生物学特性,结果表明,用不同制备方法提取的 A_(3-5)的细菌素,Au 值均为8。失活温度为60℃,在30℃以下温度放置25天抑菌活性不变,35℃下放置20天,活性开始减弱,40℃放置10天,活性即减弱,25天对几乎完全失活。这说明 A_(3-5)的细菌素虽具有较强耐热能力,但高温不利于其存活。此外,0.5%的胰蛋白酶即刻使其完全失活,说明对胰蛋白酶敏感。经1万转/分钟和5万转/分钟连续离心后,细菌素仍存在于上清液中,说明为非沉淀性的。以上特性表明 A_(3-5)的细菌素可能是一种小分子物质。     

乳酸菌31-1菌株产细菌素的初步研究

从发酵肉制品宣威火腿中分离筛选出一株产细菌素的乳酸茵31-1,对多株植物乳杆菌具有抑菌作用.经排除有机酸等干扰因素,进行初步蛋白质分离提纯后,抑茵活性增强,因此确定该菌株为细菌素产生菌.进而研究了31-1生长过程中细菌素产生的变化情况,结果发现细菌素在对数末期(8h)开始产生,且在稳定期中期(33h)有最大产量,最终31-1产细菌素的效价达到320AU/mL.     

烟草赤星病拮抗细菌Ata28菌株的控病及促生效应

从烟草叶片中分离获得的对烟草赤星病菌[Alternaria alternata(Fries) Keissler]有明显抑制作用的枯草芽孢杆菌Ata28菌株,经温室控病试验,能显著降低赤星病的发病率;将其用于烟草种子的细菌化处理,以无菌土盆栽的方式测试其对烟草幼苗的促生效果,分别测定其地上部鲜重,最大叶长、宽,真叶数。结果表明,拮抗细菌Ata28对烟草幼苗有明显促生效应。控病、促生试验的Ata28菌液处理与对照间差异均达到显著水平,表明拮抗细菌Ata28兼具防病作用和促生效应。     

产细菌素乳酸菌菌株的来源及所产细菌素的分类研究进展

乳酸菌产生的细菌素对很多导致食源性疾病的致病菌和腐败菌均具有抑制作用,近年来引起了诸多研究者的关注,在食品 储存和保鲜中也有应用。为了便于科研工作者更好的开发抑菌谱广、抑菌效果好的细菌素,该文对产细菌素乳酸菌菌株的来源食品、 菌株的所属种属、细菌素的分类以及分离纯化方法等做一评价,为相关的研究提供基础材料和参考,促进天然防腐剂的开发工作更 好更快地开展。     

产细菌素植物乳杆菌菌株的筛选及其细菌素生物学特征研究

从甘蓝泡菜中分离到６９株乳酸杆菌,通过琼脂点扩散交叉拮抗试验,筛选出３株有明显抑菌活性代谢产物的植物乳杆菌。排除酸、过氧化氢等干扰因素后,离心发酵液对指示菌Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍ９６Ｄ仍有抑菌作用,用胰蛋白酶对其透析液处理后活性丧失,说明它们产生的抑菌物质是细菌素。以Ｇ８菌株为试材,对其细菌素类物质的产生及细菌素粗提物进一步研究,发现在对数末期其抑菌活性最高,对热相对稳定（１００℃,２０ｍｉｎ）,易被胰蛋白酶、蛋白酶Ｋ和胃蛋白酶失活,显示活性的ｐＨ值范围为４．０～５．５,粗提液表现为不仅抗明串株菌属、片球菌属、乳杆菌属的一些菌株,而且抗一些非乳酸菌的革兰氏阳性菌,但对大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）等革兰氏阴性菌没有任何抑制作用。说明Ｇ８菌株产生的是一类抗广谱革兰氏阳性菌的细菌素     

重庆地区烟草青枯病菌的生物型测定

从重庆市黔江区、酉阳县、武隆县烟田采集的烟草青枯病典型病株中,分离获得了44个菌株,进行了鞭毛染色和致病性测定,并进一步研究了菌株对双糖和己醇的利用能力以及对硝酸盐的还原作用、产气情况。结果显示:44个菌株的菌体形态均与青枯病菌菌体形态一致,且均具有致病性;这些菌株均属于生物型Ⅲ,无亚型及其它生物型。     

覆盖模式对连作烟田青枯病防治的影响

为了探索防治烟草青枯病的农艺栽培措施,于2008和2009年通过田间小区试验考察了地膜覆盖、水稻秸秆覆盖及黑麦草等覆盖对连作烟草青枯病的防治效果,并分析了不同覆盖模式对土壤青枯菌,土壤可培养细菌、真菌和放线菌种类及数量的影响.结果表明:膜草覆盖和前膜后秸覆盖均能有效防治烟草青枯病,在移栽后4周和采收末期的防效均达到65％以上,单一黑麦草覆盖或单一秸秆覆盖的防效仅为32％～62％;不同覆盖模式对土壤微生态的影响效果不同,盖膜和种植黑麦草处理,其移栽后1周、4周的相对抑菌率均达75％以上,前膜后秸在栽后1周、4周的相对抑菌率均达到74％以上;膜草覆盖和前膜后秸均能增加土壤可培养细菌的种类,但对真菌和放线菌的种类影响不大,因此,膜草覆盖和前膜后秸两种覆盖模式在防治青枯病方面具有较高的实用价值.     

湖北恩施烟区烟草青枯菌致病力分析

为有效进行恩施烟区烟草青枯病的防控,本研究采用人工接种的方法鉴定了恩施烟区烟草青枯菌的致病性。根据红花大金元、K326和岩烟97三个烟草品种病害流行下曲线面积(AUDPC)数值进行聚类分析,将恩施地区烟草青枯菌划分为强、中、弱3种致病型,表明恩施烟草青枯菌是一个由弱到强连续变化的群体。3种致病型菌株在恩施南部和北部区域均有分布,其中恩施北部区域菌株致病力稍高于南部。     

湖北地区烟草青枯菌系统发育分析

本研究采用青枯菌演化型分类框架,对来源于湖北烟区的48个烟草青枯菌进行系统发育学分析并进行序列变种鉴定,以明确该地区烟草青枯菌的菌系分化。基于青枯菌内切葡聚糖酶基因(egl)和DNA蛋白修复基因(mutS)的系统发育学分析结果表明,48个供试菌株属于青枯菌亚洲分支(演化型Ⅰ)的3个序列变种,分别为序列变种15、17和44,未发现我国已报道的烟草青枯菌序列变种34。其中序列变种17和44为优势菌系,且均来源于恩施地区;序列变种15只包含来源于十堰地区的3个菌株。本研究表明湖北地区烟草上的青枯菌存在一定程度的遗传分化。     

湖北恩施地区烟草青枯菌的生理分化研究

本研究对湖北恩施烟区青枯病菌（Ralstonia solanacearum）的生理小种、生化型和演化型进行了鉴定,为湖北省烟草青枯病抗性品种的选育和利用提供了理论依据。从湖北恩施地区的8个县（市）采集青枯病感病烟株,通过平板稀释分离和特性性引物检测从中分离鉴定到54个具有致病性的烟草青枯菌菌株。采用注茎接种法将供试菌株分别接种青枯菌6个鉴别寄主,确定所有的菌株均属于生理小种1;基于青枯菌对3种双糖和3种己醇利用能力的检测结果,将54个菌株鉴定为生化型Ⅲ;经青枯菌演化型PCR检测,54个菌株均能扩增得到片段大小分别为280 bp和144 bp的两条特异性条带,这说明全部分离菌株均属于青枯菌演化型Ⅰ型。     

生物有机肥对烟草青枯病的防效及对土壤细菌群落的影响

烟草青枯病是一种危害严重的土传性病害,为了防治烟草青枯病,筛选了3株拮抗青枯雷尔氏菌的芽孢杆菌（甲基营养型芽孢杆菌JK3、枯草芽孢杆菌JK4和解淀粉芽孢杆菌JK10）,将其发酵液添加到有机肥中,经二次发酵后获得生物有机肥（SF2、SF4）,施入烟田。结果表明,生物有机肥能较好地防治烟草青枯病,同时促进烟株的生长,SF2、SF4处理的防效分别为82.18%、68.82%。同时,采用高通量测序技术分析了土壤细菌的群落结构,发现生物有机肥显著影响了土壤细菌的群落结构,促进了土壤中有益菌（如鞘氨醇单胞菌属、类芽孢杆菌属、耐热芽孢杆菌、梭菌属等）的增殖。芽孢杆菌和链霉菌的数量也明显增加,推测链霉菌和芽孢杆菌可抑制青枯雷尔氏菌的繁殖,进而控制烟草青枯病的发生。施用添加拮抗芽孢杆菌的生物有机肥是防治烟草青枯病的一项有效措施。     

烟草青枯病的综合防治

详细介绍了烟草青枯病的分布、为害、症状、发病条件及综合防治措施 :①农业栽培措施防病 ;②种植抗病品种 ;③化学药剂防病等。     

烟草野火病菌生物学特性研究

研究了烟草野火病茵的部分生物学特性，涉及致病性、菌株的保存与复壮、生长曲线及O.D.600值与CFU／mL之间关系、病菌毒素的产生等诸方面。研究发现用甘油溶液保存病菌4年后仍具有较强的致病力，并且通过复壮可使致病力进一步增强：不同菌株的产毒能力存在明显的差异，以致病力强的菌株产毒能力为更强；改用对病菌更敏感的鼠伤寒沙门氏菌为指针成功地测定了烟毒素的活性。     

无致病力青枯菌株对烟草青枯病的控制作用

为进一步揭示无致病力菌株对烟草青枯病的控病机理,以无致病力青枯菌株为材料,针对烟草青枯病进行了温室控病及田间小区试验,并通过抗药性标记测定其抗药性突变菌株在烟株体内的定殖状况,同时分析处理后烟株体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性变化。结果显示:无致病力菌株Tbw1-7-3在温室盆栽条件下对青枯病的相对防效达89.4%,其田间防效在发病初期10~20 d与药剂农用链霉素处理间无明显差异,且其抗药性突变株在烟株根表和体内可短暂定殖。同时菌株Tbw1-7-3能提高寄主中PAL、POD和PPO 3种酶活性及促进病程相关蛋白(PRP)的积累。无致病力菌株对烟草青枯病具有较好的控制作用,以菌株Tbw1-7-3的防效最优。田间试验也显示Tbw1-7-3菌株在发病初期具有良好的控病效果。无致病力青枯菌株的控病机理可能兼有占位效应及诱导抗病性。