2015~2016年河北省贝类水产品中诺如病毒污染状况研究

目的 对2015~2016年河北省6个设区市的市售牡蛎、海虹、血蚶样品中的诺如病毒进行连续一年的检测, 了解河北省贝类水产品中诺如病毒污染状况。方法 分离贝类水产品消化腺, 用蛋白酶K消化后进行前处理, 提取RNA, 用一步法实时荧光逆转录聚合酶链式反应法检测GⅠ型和GⅡ型诺如病毒。对河北省贝类水产品的诺如病毒污染状况进行分析。结果 共采集691份贝类样品进行检测, 其中仅检出GⅠ型阳性样品16份, 阳性率2.32%; 仅检出GⅡ型阳性样品22份, 阳性率3.18%; 同时检出GⅠ和GⅡ型的阳性样品4份, 阳性率0.58%; 总阳性率6.08%。2016年6~7月阳性率最高。沿海地区样品阳性率为内陆地区的2.35倍, 有统计学差异(χ2=8.58, P<0.01)。结论 河北省市售贝类水产品中部分存在诺如病毒污染, 需要加强对贝类水产品的诺如病毒污染检测和控制, 特别是沿海地区, 降低诺如病毒引起的食源性腹泻的疾病负担。     

北京市市售牡蛎中诺如病毒核酸检测及定量分析

目的针对北京市市售牡蛎样品中诺如病毒污染水平及污染浓度进行定量分析研究。方法分离牡蛎消化腺,将消化腺匀浆处理,加入含有蛋白酶K的磷酸盐缓冲液,进行样品前处理,用试剂盒提取病毒RNA,用一步法实时荧光逆转录聚合酶链式反应(real time RT-PCR)检测诺如病毒RNA,并对阳性样品进行定量分析。结果共检测牡蛎样品356份,其中GGI阳性样品12份,GGII阳性样品39份,GGI和GGII同时为阳性的样品6份。对阳性样品中的诺如病毒核酸定量分析,核酸浓度在3.7×10~3~2.8×10~5基因拷贝/g(消化腺)之间。结论北京市市售牡蛎中存在诺如病毒污染的情况,需要加强对牡蛎中诺如病毒的污染监测,并开展污染水平风险评估,保障消费者食用安全,降低由诺如病毒引起的腹泻病的疾病负担。     

实时荧光RT-PCR检测冷冻草莓中诺如病毒

目的：建立冷冻草莓中的GI、GII型诺如病毒实时荧光RT-PCR检测方法,并应用于实际样品的检测。方法：对草莓样品进行前处理、病毒富集、病毒RNA的提取和纯化,然后采用实时荧光RT-PCR进行检测。结果：核酸提取方法能够有效地去除抑制因子,同时对104份送检样品进行检测,结果均为阴性。结论：所建立的核酸提取与实时荧光RT-PCR结合的检测体系适合于草莓样品中诺如病毒GI、GII型的检测。     

贻贝中诺如病毒荧光定量反转录PCR检测及北京市污染情况调查

目的监测北京市市售贻贝中诺如病毒(NoV)的污染率及污染浓度,为贝类样品中诺如病毒的风险评估提供基础数据。方法解剖并分离贻贝的内脏团,将内脏团研磨至均质,加入磷酸盐缓冲液振荡60 min,提取病毒颗粒。提取病毒RNA,荧光定量反转录PCR检测诺如病毒,并进行定量分析。结果共检测293份贻贝样品,总阳性率为9.22%(27/293),其中诺如病毒基因组Ⅰ(GGⅠ)占阳性样品数的37.04%(10/27),基因组Ⅱ(GGⅡ)占阳性样品数的62.96%(17/27),未检测到同时携带GGⅠ和GGⅡ的样品。阳性样品中诺如病毒浓度范围在6.20×10~3~3.15×10~5基因拷贝/g(内脏)之间。结论北京市市售贻贝中存在诺如病毒污染。     

贝类中诺如病毒的研究进展

从贝类中诺如病毒的污染现状、检测组织靶点、病毒浓缩方法及效率、检测方法有效性等多个方面评述贝类中诺如病毒的研究现状、进展、急需解决的问题和未来的发展方向,以期为制定诺如病毒检测技术标准及我国贝类进出口贸易提供参考。     

贝类中诺如病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法研究

将诺如病毒(Norovim8es,NV8)RT-PCR特异产物纯化后与pGEM-T裁体连接并转化至感受态细胞DH5α,经测序鏊定.提取阳性克隆质粒DNA,梯度稀释后作为实时荧光定量PCR的标准质粒.使用SYBRGreen I染料建立检测贝类中NV8的实时荧光定量RT-PCR方法.结果表明,本方法标准曲线线性范围可达6个数量级(108～103拷贝),R2为O.9983,比常规RT-PCR方法敏感100倍,且特异性良好,与贝类中的轮状病毒、甲肝病毒均不反应;批内和批间重复性良好,变异系数(CV)分剐在0.28%～4.03%和1.47%～5.53%范围.该方法具有简便、敏感、高效、稳定等优点,可用于水产品中NV8的定量检测.     

果蔬食品中诺如病毒污染状况及检测研究进展

食源性疾病不但严重危害人们的健康, 而且造成大量的经济损失。在全球范围内与果蔬等农产品相关的诺如病毒(Norovirus, NoV)污染事件持续暴发并呈增长态势。由于果蔬类食品中诺如病毒污染含量较低, 再加上食品基质成分的干扰, 使得果蔬制品中的NoV检测成为一项非常艰巨的任务。传统的检测技术面临许多缺点, 例如鉴定的特异性有待增强; 提取效率不够高, 检测敏感性尚需改进。这意味着需要转换视角, 开展食源性诺如病毒检测技术的创新研究。本文综述了果蔬食品中NoV污染流行状况及易受污染的、需加以关注的果蔬食品种类, 总结了果蔬食品中NoV洗脱及富集方法、介绍了基于组学的检测技术及发展趋势, 希望为不断提高果蔬食品中NoV检测防控能力提供参考。     

冷链食品中诺如病毒的检测方法研究以及污染状况分析

文章以冷链食品中的诺如病毒为研究对象,建立冷链食品中诺如病毒的高效提取方法。该方法设计特异性引物探针,应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检验冷链食品中诺如病毒,文章应用所构建的方法开展了冷链食品中诺如病毒污染状况的抽样调查。结果表明,应用RT-PCR成功扩增了诺如病毒特征性核酸,在后续使用该方法进行的冷链食品中病毒的抽样检测调查中发现诺如病毒总体检出率为7.0%(27/383),病毒分型发现检出的27株诺如病毒中有25份为诺如病毒GII型,2份为诺如病毒GI型。     

数字聚合酶链式反应法检测贝类和浆果中甲肝病毒

目的建立一种数字聚合酶链式反应(PCR)检测贝类和浆果中甲肝病毒的方法。方法样品经蛋白酶K消化-聚乙二醇法进行甲肝病毒富集后,使用高纯度病毒核酸试剂盒进行RNA提取,之后对甲肝病毒进行数字PCR检测。结果本方法对甲肝病毒有典型扩增,重复性和稳定性良好,对于草莓样品中甲肝病毒的检测灵敏度为25.30 CCID_(50)/20 g,树莓样品中甲肝病毒的检测灵敏度为6.32 CCID_(50)/20 g,贝类样品中甲肝病毒的检测灵敏度为12.54 CCID_(50)/2 g,表明其灵敏度高。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定贝类和浆果食品中甲肝病毒。     

2019年连云港市农贸市场双壳贝类中诺如病毒污染状况调查

目的 了解连云港市农贸市场双壳贝类中诺如病毒污染状况.方法 于2019年6、8和11月在连云港三县三区各采集10份双壳贝类食物,共180份,及时分离消化腺于?75℃保存,采用实时荧光定量PCR检测诺如病毒基因型.结果 5种双壳贝类中诺如病毒基因总检出率为26.67％(48/180),基因型分型中GI型检出率为5.00％...     

北京市市售扇贝中诺如病毒监测分析

目的监测北京市市售扇贝中诺如病毒和A组轮状病毒污染状况,分析其基因特征。方法 2014年11月至2015年10月,采集北京市3个水产品出售市场新鲜扇贝72份。取扇贝消化组织,用聚乙二醇(PEG)8000沉淀法进行病毒富集后提取核酸,用实时荧光逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测诺如病毒和A组轮状病毒核酸。用半巢式RT-PCR方法扩增诺如病毒GⅠ/GⅡ组衣壳蛋白区基因,对PCR产物进行测序,用BioEdit 7.0.9.0软件进行序列比对,用MEGA 6.06软件构建进化树。结果 72份扇贝样品均未检出A组轮状病毒;诺如病毒检出率为27.8%(20/72),其中GⅡ组16份,GⅠ组2份,GⅠ和GⅡ组混合2份。冬季检出率最高,为61.1%(11/18);夏季未检出。8份诺如病毒核酸阳性样品测序结果为GⅡ.17型,属于GⅡ.17型ClusterⅢb分枝。有6株GⅡ.17型毒株与2015年中国人源诺如病毒、2016和2017年日本人源诺如病毒、2017和2018年韩国水中诺如病毒以及2015年日本牡蛎中诺如病毒序列相似性为100.0%。结论北京市市售扇贝中存在诺如病毒污染,食用扇贝有引起病毒性急性胃肠炎的风险。     

Contamination of shellfish from Shanghai seafood markets with paralytic shellfish poisoning and diarrhetic shellfish poisoning toxins determined by mouse bioassay and HPLC

This paper reports the results of investigations of shellfish toxin contamination of products obtained from Shanghai seafood markets. From May to October 2003, 66 samples were collected from several major seafood markets. Paralytic shellfish poisoning (PSP) and diarrhetic shellfish poisoning (DSP) toxins in shellfish samples were monitored primarily by a mouse bioassay, then analysed by HPLC for the chemical contents of the toxins. According to the mouse bioassay, eight samples were detected to be contaminated by PSP toxins and seven samples were contaminated by DSP toxins. Subsequent HPLC analysis indicated that the concentrations of the PSP toxins ranged from 0.2 to 1.9 µg/100 g tissues and the main components were gonyautoxins 2/3 (GTX2/3). As for DSP, okadaic acid was detected in three samples, and its concentration ranged from 3.2 to 17.5 µg/100 g tissues. Beside okadaic acid, its analogues, dinophysistoxins (DTX1), were found in one sample. According to the results, gastropod (Neverita didyma) and scallop (Argopecten irradians) were more likely contaminated with PSP and DSP toxins, and most of the contaminated samples were collected from Tongchuan and Fuxi markets. In addition, the contaminated samples were always found in May, June and July. Therefore, consumers should be cautious about eating the potential toxic shellfish during this specific period.     

2011—2012年广东省市售牡蛎中诺如病毒污染调查分析

目的 调查2011-2012年广东省市售牡蛎中诺如病毒的污染状况,为采取有效措施减轻牡蛎中诺如病毒污染程度提供建议,达到预防和控制食用牡蛎引起诺如病毒胃肠炎疾病的目的.方法 2011年3月-2012年10月,在广东省部分沿海城市进行市售牡蛎的采样检测,对其诺如病毒污染状况进行连续两年监测,采用荧光RT-PCR检测诺如病毒阳性标本基因分型,并对不同城市、季节及场所牡蛎中诺如病毒的污染情况及基因分型情况进行比较.结果 牡蛎中诺如病毒总检出率为14.9％ (41/275);四个季节牡蛎中诺如病毒检出率依次为4.4％、15.7％、18.2％和36.7％;从基因分型分析,GⅠ型病毒株检出率为4.0％,GⅡ型病毒株检出率为6.2％,GⅠ和GⅡ型病毒株同时检出率为4.7％.结论 2011-2012年广东省市售牡蛎的诺如病毒污染情况在市场、餐饮场所以及不同地区间比较差异无统计学意义,其基因分型间比较差异无统计学意义,但呈现明显季节性特点,以冬季污染最严重.     

2020年贵阳市城区部分集贸市场即食食品微生物污染情况调查

目的 了解集贸市场即食食品微生物污染情况,分析食源性沙门菌菌株生物学特征,评价食品卫生状况及致病风险。方法 随机选取人群消费较集中的5家大型集贸市场,按照国家食品安全标准对其售卖的即食食品进行食品微生物检测,同时对沙门菌血清型、抗生素耐药性及PFGE聚类进行分析。结果 131份即食食品中大肠菌群检出率62.59%（82/131）,并检出了沙门菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等致病微生物。沙门菌血清型多样,其PFGE图谱较分散,菌株出现多重耐药。结论 即食食品卫生状况普遍较差,生肉食品中检测出沙门菌,容易与即食食品发生交叉污染而引发食源性疾病,应加强即食食品及生肉制品的管理。     

生食动物性水产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌污染状况分析

目的 了解生食动物性水产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌污染状况。方法 采用随机抽样方法,在我国13个地区的餐饮店、零售店和批发市场采集生食动物性水产品,共计2 980份,对样品进行副溶血性弧菌和创伤弧菌检测。结果 生食动物性水产品中副溶血性弧菌检出率为14.7%(437/2 980),污染水平＞100 MPN/g的样品比例为2.9%(83/2 909);创伤弧菌检出率为3.5%(104/2 980)。采样于批发市场的样品中副溶血性弧菌检出率、污染水平＞100 MPN/g的样品比例和创伤弧菌检出率均高于餐饮店和零售店。第三季度副溶血性弧菌检出率、污染水平＞100 MPN/g的样品比例和创伤弧菌检出率最高。造成污染的主要原因包括原产地污染,储存不当及加工过程交叉污染。结论 生食动物性水产品中存在副溶血性弧菌和创伤弧菌的污染,其健康风险应引起关注,本次污染状况分析可为标准制修订提供理论依据。     

Horticultural postharvest loss in municipal fruit and vegetable markets in Samoa

Reducing horticultural postharvest loss is a priority in Samoa, due to declining agricultural productivity and wider dietary-based health concerns within the human population. Efforts to remediate loss is currently impeded by little information about the current levels of horticultural loss in Samoa or the factors contributing to this loss. In this study we quantified commercial postharvest loss of 23 horticultural crops at the Fugalei central municipal market on the Island of Upolu, Samoa, using direct weighing. Mean postharvest loss was further determined in all six municipal, community and private fruit and vegetable markets on the Samoan Islands of Upolu and Savai’i using vendor and farmer-trader surveys. Postharvest horticultural loss in the Fugalei municipal market was 6.2% (determined by weight) and 13.3% (based on vendor recall). There was no significant difference between mean postharvest loss in fruits compared to vegetables. The highest level of daily postharvest loss (5% to 22%) was observed for soursop, papaya, Tahitian lime, mustard cabbage and choko. Negligible loss (<1%) was observed in limes, vi (Spondias dulcis), eggplant, long bean, soa’a (plantains), lemon, cherry tomato, cucumber, pumpkin and ginger. The level of postharvest loss varied across the municipal, village and road-side markets surveyed, with higher losses in non-urban markets. There was no difference in the level of postharvest loss between any of the three urban markets in the Apia region. With most horticultural production located less than 20 km from the municipal market and little evidence of in-transit damage, transport logistics were unlikely to be an important contributor to loss. We believe low or sporadic consumer purchasing behaviour resulting in protracted market storage at high tropical ambient temperatures was the central contributor to observed losses. The potential importance of low consumer purchasing activity and the proportion of commercial vendor to transient farmer-trader in each of the markets is discussed in terms of being possible contributing factors to the resulting levels of postharvest loss and market variability.     

北京市餐饮业食用冰块微生物污染水平调查

评估北京市餐饮业食用冰块微生物污染的风险。方法 在北京市场抽检了63份餐饮业食用冰块样品,冰块独立分装在无菌采样袋中,2 h内完成采样到检测的过程。按照国家标准方法检测其中的菌落总数、大肠菌群、沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。结果 63份餐饮业食用冰块样品均未检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌等致病菌。连锁快餐店和咖啡店食用冰块的菌落总数和大肠菌群等指示菌计数较低,部分饮品甜品店食用冰块菌落总数和大肠菌群较高。结论 检测的食用冰块样品均是安全的。部分饮品甜品店用食用冰块指示菌较高,提示生产过程中可能存在微生物污染,需要严格执行卫生操作规范的程序。     

2016年北京市海产品中创伤弧菌的污染调查及两种检测方法比较

目的 对北京市市售海产品的创伤弧菌污染情况进行调查,并比较实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)法与VITEK鉴定方法检测结果的一致性。方法 采用传统检验方法结合分子生物学方法对在北京市市场随机采集的105份海产品进行创伤弧菌检验,并比较了RT-PCR法和VITEK鉴定方法的准确性。结果 105份海产品中,有40份样品检出创伤弧菌,检出率为38.10%;其中,虾类产品检出率高达52.38%(11/21),其次为贝类产品(37.88%,25/66)和鱼类产品(22.22%,4/18)。经rpoB基因测序验证,RT-PCR和VITEK方法的准确率分别为100.00%(40/40)和67.50%(27/40)。结论 北京市海产品中存在创伤弧菌的污染,应对海产品中创伤弧菌引起食源性污染的潜在风险进行评估,预防食物中毒的发生。