芸豆肽的抗氧化活性研究

采用Sephadex-G50 凝胶柱层析分离具有强抗氧化活性的小分子芸豆肽,以VC 为对照,研究3 种肽分离组分的还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的清除能力。结果表明：随着相对分子质量的减小和肽质量浓度的增加,其还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的清除能力逐渐增大;小分子芸豆肽(C 组分)的还原能力低于VC;对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH 自由基的半清除质量浓度分别为2.301、2.553、1.386mg/mL。该小分子肽组分的相对分子质量主要集中在100～1000,该组分疏水性氨基酸含量为36.78%,其疏水值达到364.73 kcal/mol。说明小分子肽组分的抗氧化活性与其氨基酸种类和组成、相对分子质量分布密切相关。     

乳清低聚肽的制备及其抗氧化活性

利用两步酶解法制备出乳清低聚肽,对其基础理化成分、氨基酸组成和分子量分布进行了分析,从羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力以及还原能力四个方面评价其抗氧化活性。组成分析结果表明:总蛋白质含量为86.83%,氨基酸组成丰富,富含抗氧化性氨基酸,其中亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸含量较高;分子量小于1000u的组分高达85.78%,132~576u范围内组分占59.55%。抗氧化实验结果显示:乳清低聚肽具有较强的抗氧化活性,并且呈量效关系,对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为:2.3、4.2mg/mL,浓度为2.5mg/mL时的还原能力与0.012mg/mL的抗坏血酸相当。     

驼乳与牛乳乳清蛋白酶解工艺优化及其产物抗氧化能力分析

为了研究不同蛋白水解酶对驼乳和牛乳抗氧化能力的影响,向驼乳和牛乳乳清蛋白中添加不同蛋白水解酶,探究乳清蛋白抗氧化活性肽的最佳制备条件,并对其抗氧化能力进行比较分析。首先从3种蛋白酶中筛选出最佳用酶,在此基础上以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-Trinitrophenylhydrazine,DPPH)自由基的清除率为响应值,进行单因素和响应面试验,同时研究了驼乳和牛乳乳清蛋白抗氧化肽对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子的清除效果。结果表明,木瓜蛋白酶水解物的能力最强,水解度可达15%。驼乳乳清蛋白最佳酶解工艺为酶解pH6.4,酶解温度55 ℃,底物浓度2.73%,DPPH自由基清除率可达71.9%。牛乳乳清蛋白最佳酶解工艺为酶解pH6,酶解温度54 ℃,底物浓度4%,DPPH自由基清除率达69.9%。在最佳酶解条件下,驼乳乳清蛋白酶解液的·OH清除率为58.2%,O₂-·清除率为67.2%;牛乳乳清蛋白酶解液·OH清除率为52.2%,·O₂-清除率为60.7%。驼乳乳清蛋白酶解液的抗氧化性在不同程度上均高于牛乳乳清蛋白酶解液,驼乳和牛乳乳清酶解液的DPPH自由基清除能力较强,其次是O₂-·清除能力,·OH清除能力最弱。     

不同分子量水牛乳酪蛋白酶解肽抗氧化活性的研究

通过超滤分离得到不同分子量范围的水牛乳酪蛋白酶解肽组分,对比不同组分的抗氧化活性,结果表明:分子量范围小于1 ku的组分,其DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子清除能力以及还原能力均高于分子量范围在大于1 ku(1~3 ku)的组分,且二者均显著高于(P0.05)酶解前的底物酪蛋白。     

黄粉虫抗氧化活性肽的分离纯化研究

为制备具有抗氧化活性的黄粉虫生物活性肽,采用双酶水解黄粉虫蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖SephadexG-25 凝胶柱层析和阳阴离子交换柱层析分离纯化,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,纯化得到的抗氧化多肽对羟自由基和超氧阴离子自由基具有很强的清除作用,清除率可分别达到74.20% 和87.32%。     

大豆低聚肽的成分分析及体外抗氧化作用

以大豆分离蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,再经过超滤膜超滤后制得大豆低聚肽粉,对其基础理化成分、分子量分布和氨基酸组成进行了分析,并从DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力以及还原能力4个方面考察了体外抗氧化活性。理化成分分析表明:大豆低聚肽中蛋白质含量为86.98%,分子量小于1 000 Da的组分高达83.54%,氨基酸组成丰富,富含谷氨酸、天门冬氨酸、亮氨酸和精氨酸;抗氧化评价结果显示:大豆低聚肽对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为3.4,5.8和16.3 mg/m L,并且具有一定的还原能力。因此,大豆低聚肽具有良好的抗氧化活性。     

乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究

采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

优选南极磷虾蛋白肽抗氧化活性组分

目的制备南极磷虾抗氧化肽,优选出抗氧化活性最好的南极磷虾肽成分。方法采用脱脂、酶解、超滤等手段制备南极磷虾抗氧化肽;以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、抗氧化能力指数3个抗氧化指标和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)活力2个酶活力指标为评价指标,优选出抗氧化活性最好的南极磷虾肽组分;基于G-25凝胶层析技术对抗氧化活性最好的南极磷虾肽组分进行分离纯化,进一步基于电子顺磁共振(electron paramagnetic resonance,EPR)方法测定洗脱后各峰的DPPH自由基清除率,得到抗氧化活性最好的南极磷虾抗氧化肽组分。结果通过抗氧化指标测定,截留分子量3～10 KDa的肽的DPPH自由基清除率最高,为(30.10±1.10)%,截留分子量3 KDa的南极磷虾肽的ABTS清除能力和抗氧化指数较好,则IC50值为(0.74±0.08) mg/mL、氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity, ORAC)值为6.39±0.21;通过酶活力指标测定,截留分子量3 KDa的肽的SOD活力和CAT活力最好,分别为(45.7±0.13)U/mg和(17.1±0.19)U/mg蛋白质。对截留分子量3KDa和3～10KDa的南极磷虾肽进行G-25分离纯化后,测定各组分的DPPH自由基清除率,可知截留分子量3～10KDa的F2-2峰清除率最好,为(51.55±1.54)%。结论基于EPR方法优选出分子量为3～10 KDa的南极磷虾肽的F2-2组分的DPPH自由基清除率最高。     

蛋清蛋白肽体外抗氧化作用模式的研究

目的 研究蛋清蛋白肽抗氧化作用模式。方法 利用超滤技术分离蛋清蛋白木瓜蛋白酶酶解产物; 采用Fenton体系、邻苯三酚自氧化体系和亚油酸自氧化体系分别测定超滤各组分清除羟自由基、超氧阴离子及抑制脂质过氧化的能力, 同时测定各组分对二苯代苦味肼基自由基清除能力(DPPH自由基)、还原能力及对猪胎儿成纤维细胞(porcine embryonic fibroblast, PEF)过氧化损伤的保护作用。结果 超滤各组分中分子量小于3 kDa组分(蛋清蛋白酶解产物-Ⅲ, egg white protein hydrolysate, EWPH-Ⅲ)占蛋清蛋白酶解产物(EWPHs)总量的50.06%。EWPH的抗氧化活性随分子量的降低而增强(P<0.05), 其中EWPH-Ⅲ在浓度为5 mg/mL时, 对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除率分别为52.86%、35.05%和78.74%, 对亚油酸氧化的抑制率为74.57%。在浓度为2.5 mg/mL时, PEF细胞存活率达到70.06%。结论 蛋清蛋白肽具有较强的抗氧化活性且分子量越小, 抗氧化活性越强, 可以作为氢供体、自由基稳定剂和金属离子螯合剂来抑制过氧化作用。     

几种南海贝类酶解产物的生物活性及其分子量分布研究

对菲律宾蛤仔、波纹巴非蛤、马氏珠母贝双酶水解产物的自由基清除活性和血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性及分子量分布进行研究。结果表明：3种贝类酶解产物均具有清除羟自由基、超氧阴离子、二苯基苦基苯肼（DPPH）等自由基的活性以及ACE抑制活性;3种贝类酶解产物对超氧阴离子的清除作用均较弱;羟自由基清除活性较强的是菲律宾蛤仔酶解产物,其高活性组分的分子量在1479～851 Da之间;DPPH自由基清除活性较强的是菲律宾蛤仔酶解产物,其高活性组分的分子量在1479～851 Da之间;ACE抑制活性较强的是波纹巴非蛤酶解产物,其高活性组分的分子量在633—303 Da之间。