量子点标记荧光免疫法检测花生中黄曲霉毒素B_1

建立了基于量子点标记二抗的间接竞争荧光免疫吸附测定方法（indirect competitive fluorescence-linked immunosorbent assay,cFLISA）,并研究检测花生中黄曲霉毒素B1的可行性。采用谷胱甘肽为稳定剂,在水相中直接合成碲化镉（CdTe）量子点,并利用1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）与兔抗鼠二抗进行共价偶联,以黄曲霉毒素B1的单克隆抗体建立cFLISA方法。结果表明,该方法的灵敏度和最低检测限值分别为0.023ng/mL和0.001ng/mL,与传统的有机染料FITC-二抗法比较,灵敏度提高了30倍,花生样品加标0.1、0.05和0.025ng/g,回收率范围在88%～116%之间,变异系数均小于10%。建立的cFLISA方法可以较好的检测花生中黄曲霉毒素B1,并为其它真菌毒素的检测提供参考。     

量子点荧光微球免疫法定量检测小麦中黄曲霉毒素B1

摘 要: 目的 建立量子点荧光微球免疫法快速检测小麦中黄曲霉毒素B1的方法。方法 采用量子点荧光微球作为荧光标记物,与黄曲霉毒素B1的单克隆抗体偶联,构建量子点荧光微球探针。优化缓冲液pH、抗体最小标记量、荧光探针用量和包被抗原浓度等实验条件,建立检测卡上T线和C线信号峰值面积的比值与样本中黄曲霉毒素B1浓度的关系,构建定量标准曲线。针对小麦样品,将该检测方法与时间分辨荧光定量检测方法进行比较。结果 本研究建立的荧光定量免疫层析检测方法最佳反应条件为：pH 7.5磷酸钠缓冲液,抗体标记量为20 μg,荧光探针用量为4.0 μL,抗原质量浓度使用0.40 mg/mL。小麦中黄曲霉毒素B1的定量检测线性范围为0.05 μg/kg-25 μg/kg,其线性拟合方程为Y= -0.6058X + 12.523（r2=0.9994）,检出限为0.02 μg/kg,定量限为0.05 μg/kg。加标回收率在91.50%~115.00%之间,变异系数在1.88%~4.35%之间。结论 本研究建立的荧光定量免疫层析方法快速、准确、稳定性好、可靠性高,适用于小麦中黄曲霉毒素B1的现场快速检测。     

粮油中黄曲霉毒素B1的监测

利用简单的仪器设备监测粮油中的黄曲霉毒素B1，此法直接、快速，利于推广普及。     

黄曲霉毒素B1检测方法的分析

黄曲霉毒素B1是一种致癌物质 ,许多国家已将其限量标准提高 ,黄曲霉毒素B1检测方法的检出限已因其毒性而提高 ,并已成为国际贸易中新的技术壁垒。文中介绍了黄曲霉毒素B1的几种常见检测方法 ,并对其特点及检出限进行了概括性的分析。     

量子点标记结合电化学免疫检测黄曲霉毒素B1

将量子点标记技术与电化学检测技术相结合,基于竞争免疫分析,成功构建黄曲霉毒素B1(AFB1)检测新方法。以水相合成Pb S量子点,通过TEM成像、XRD对其进行表征。随后以量子点标记AFB1单克隆抗体作为信号探针,基于酶标板表面AFB1人工抗原和样品中AFB1与量子点标记的AFB1单克隆抗体之间的竞争免疫结合,建立AFB1新型检测方法。在优化的条件下,方法线性范围0.1~30 ng/m L,检测限0.03 ng/m L。花生样品中加标回收试验结果表明,方法准确性良好,可用于实际样品的检测,为其它真菌毒素的检测提供参考。     

间接竞争酶联免疫分析方法检测花生中黄曲霉毒素B1

目的:针对花生中强毒性污染物黄曲霉毒素B_1(AFB_1)建立了一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。方法:制备了AFB_1包被抗原,包被量为0.1μg/孔;抗体稀释64 000倍;选用0.1%脱脂乳粉为方法封闭液,0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)为样品稀释液;结果:在最优的试验条件下,建立的ic-ELISA对目标物AFB1的检测线性范围为0.0097～0.088μg/L(R2=0.999);灵敏度(IC50)和检出限(IC15)分别达到0.027μg/L和0.0066μg/L。板内变异系数(n=6)为0.29%～16.9%,板间变异系数(n=6)为0.22%～21.19%。在花生样品中AFB_1的检测灵敏度(IC50)为1.04μg/kg,回收率为96.67%～106.51%。结论 :本研究建立的ic-ELISA方法操作相对简便,检测灵敏度高、准确性好,可稳定地用于花生样品中AFB_1污染物的定量分析检测。     

纳米金标记黄曲霉毒素B1新型检测方法

本文建立了两种基于银增强纳米金标记探针的高灵敏度免疫分析方法.方法一是用黄曲霉毒素B1(AFB1)抗体与金标抗原、待测抗原进行竞争免疫反应,然后加入银增强溶液,以金为核沉积生长银,通过检测光密度来确定待测物中AFB1的含量,该方法的检出限可达到0.01 ng/mL.方法二是在前一种方法的基础上,将银化学溶出,通过化学发光法检测沉积的银量来确定待测物中AFB1的含量,该方法的检出限可达到0.002 ng/mL.     

比对实验中黄曲霉毒素B1的检验与分析

本文综合国标法,色谱法及试剂盒法三种方法进行修正,把1：1的甲醇水改为7：3的甲醇水直接加进样品中,删除国标法及试剂盒自带方法中采用石油醚转移步骤,把手动振摇、蒸发等步骤改为漩涡振荡及离心方法,改良了样品的提取方法,操作方便,减少交叉污染,使结果更稳定。     

等离子体降解黄曲霉毒素B1的试验研究

为探索高效快速降解黄曲霉毒素B1的新方法,利用等离子体处理黄曲霉毒素B1溶液,以黄曲霉毒素降解率为指标,研究了等离子体处理对黄曲霉毒素B1降解效果的影响,采用响应面法对其影响因素进行了优化设计.试验结果表明:等离子体处理对黄曲霉毒素B1降解有明显的效果,各参数影响顺序为:作用功率＞作用时间＞极距,最佳工艺为:作用功率200 W、作用时间80 s、极距3 cm,降解率可达51.67％.     

Automatic Flow-Batch Approach Using CdTe Quantum Dots for Fluorescent Determination of Ascorbic Acid in Fruit Juices

This paper introduces, for the first time, the combination of the advantageous features of the automatic flow-batch system for implementing quantitative chemical analysis involving the use of quantum dots (QDs). For illustration, the combined QD-flow-batch system was applied for the fluorescent determination of ascorbic acid in fruit juices. Cadmium telluride (CdTe) QDs were selected in this work because they are the most commonly synthesized and used ones for the analytical applications. Water-soluble CdTe QDs were successfully produced using mercaptopropionic acid. The analytical method is based on the quenching effect produced by ascorbic acid on the fluorescence of CdTe. All calibration solutions were prepared in-line, and all analytical processes were completed by simply changing the operational parameters in the control software. The limit of detection and relative standard deviation were estimated at 3 μg L^?1 and ≤1.4 % (n = 5), respectively. The accuracy was assessed through recovery test (97.9 to 103.1 %). The ruggedness of the method was assessed by comparison of the intra- and interday using the official AOAC method at a confidence level of 95 %. The proposed system presented satisfactory robustness, high sampling rate (69 h^?1), and reduced chemicals consumption. Thus, the combination of flow-batch system and QDs is potentially useful as an alternative for other fluorimetric determinations.     

CdTe量子点免疫层析试纸条检测克伦特罗

以巯基乙酸作为稳定剂,利用水热反应制备了水溶性的高荧光CdTe量子点,量子产率为54.961%。研究了该量子点在1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的作用下与抗克伦特罗抗体的共价连接。结果表明：该量子点与克伦特罗抗体连接后体系的荧光强度和吸光度均增强,且峰位均未发生明显移动,F/P值为4.20。将该偶联反应物CdTe-Anti CLE pAb作为荧光标记物,组装出一种用于检测克伦特罗的荧光免疫试纸条,最低检测限达0.5 μg/L,与酶联免疫吸附法进行对比,该试纸条能够实现对克伦特罗的快速检测。     

黄曲霉毒素B1检测方法的研究分析

黄曲霉毒素B1是黄曲霉毒素中毒性最强、危害最大的一种。由于国内外限量标准的不统一,在出口食品中由于黄曲霉毒素不合格而被通报的食品占了相当大的比例。这也对我国检测黄曲霉毒素B1的技术提出了更高的要求,在众多检测方法中酶联免疫法也因其快速、方便等特点,逐渐被认可,成为了黄曲霉毒素B1检测工作初筛的工具。     

A Sensitive and Selective Fluorimetric Method of Quick Determination of Sialic Acids in Egg Products by Lectin‐CdTe Quantum Dots as Nanoprobe

Sialic acids (SA) are widely found as components of oligosaccharide units in mucins, glycoproteins and other microbial polymers in nature food. The aim of this study is to create a new fluorimetric detection method applied for determinating SA in egg products by using a sensitive lectin‐CdTe quantum dots (QDs) nanoprobe. Water‐soluble and high luminescent CdTe QDs were conjugated with sambucus nigra bark lectin (SNA) as probe for SA detection. As a result of specific interaction between SA and SNA‐CdTe QDs, the conjugations finally lead to the change of a fluorescent signal. Under optimal conditions, fluorescence intensity increase linearly with the increase of the concentration of SA ranging from 12 to 680 ng/mL. The low detection limit is 0.67 ng/mL. This quick and selective analysis method for SA detection has been used in synthetic samples and egg products with recovery between 97.92% and 110.42%, which demonstrates the application of this assay is feasible and practical.     

基于非标记核酸适配体的可视化检测黄曲霉毒素B1方法研究

目的 利用纳米金在盐诱导下凝聚后引起的颜色变化,建立基于非标记的AFB1特异性结合适配体,针对AFB1的灵敏快速可视化检测方法。方法 通过对适配体DNA浓度、NaCl盐溶液、pH值等条件的优化,确定最佳反应体系并进行特异性实验。结果 本方法具有良好的灵敏度和特异性,线性范围和检测限分别是0.025—10 ng/mL和0.025 ng/mL,可以满足中国和欧盟的最大残留限量(MRL)的检测要求。结论 该方法实现了对黄曲霉毒素B1的可视化检测,简单、高效、可行,具有较高的分析灵敏度和较好的特异性。     

饲料中黄曲霉毒素B1快速检测方法的研究

取２０ｇ被检样品,在３６０ｎｍ紫外线下观察,如无亮黄绿色荧光粒,可基本判定饲料未受黄曲霉毒素Ｂ１污染;如有１￣４个亮黄绿色荧光粒,可疑为饲料黄曲霉毒素Ｂ１污染;如有４个以上黄绿色荧光粒,可判定饲料受到了黄曲霉毒素Ｂ１污染。     

EDC法制备黄曲霉毒素B1人工抗原的研究

本研究采用EDC法制备了黄曲霉毒素B1人工抗原，通过TLC与ELISA对制备过程监控，确定了最佳的肟化反应时间与偶联反应时间。同时，就黄曲霉毒B1与牛血清白蛋白的起始摩尔比对偶联产物中这两物质摩尔比的影响进行了研究。结果显示，在25℃肟化反应24h、偶联反应24h，当黄曲霉毒素B1与牛血清白蛋白的起始摩尔比为30：1时，得到了黄曲霉毒素B1与牛血清白蛋白的摩尔比为5：1的黄曲霉毒素B1人工抗原。