血管缺氧再灌注损伤时过氧化氢的分布

血管缺氧再灌注损伤时过氧化氢的分布周武雄钟慈声顾玉东（上海医科大学生物物理学教研室，上海２０００３２）（上海医科大学华山医院手外科）缺氧再灌注损伤时有大量自由基产生，本实验采用电镜细胞化学方法，以ＣｅＣｌ３为捕捉剂对血管缺氧再灌注损伤时产生的Ｈ２Ｏ２...     

介绍一种显示过氧化氢的细胞化学方法

介绍一种显示过氧化氢的细胞化学方法沙继宏，叶煦亭，郑尊（第二军医大学中心实验室，上海２００４３３）烧伤或缺血再灌流损伤与活性氧的产生有关，这一结论已基本被认可。本实验通过细胞化学方法首次在活体烧伤及缺血再灌流肾脏模型上观察到过氧化氢（活性氧之一）的存...     

川芎嗪预处理对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后视网膜电流图的影响

目的:观察川芎嗪预处理对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后视网膜电流图的影响.方法:采用前房灌注法建立大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,设置正常组、缺血再灌注组、5min缺血预适应组、川芎嗪预处理组,分别于缺血前,缺血30min时,再灌注1h,12h,24h,72h,168h检测双眼各时期FERGb波及OPs(O2)波波幅,分别计...     

透射电镜观察实验性心肌缺血再灌注时超微结构改变以及硝苯吡…

本文建立家兔心肌缺血再灌注模型，用透射电镜观察心肌细胞超微结构的变化以及应用硝苯吡啶的影响，结果对照组显示超微结构明显破坏，尤其是线粒体和细胞膜系统破坏严重。而用药组心肌细胞改变轻微，表明钙拮抗药能减轻心肌缺血再灌注时细胞超微结构的损伤。     

姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的：探讨姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法：采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分成假手术组、对照组、100mg/kg姜黄素组及300mg/kg姜黄素组及300mg/kg姜黄素组,分别在脑缺血再灌注后24h处死,观察大鼠神经功能缺失的评分,应用TTC染色观察梗死体积,尼氏染色观察神经元形态结构特征,TUNEL染色计数凋亡神经元,荧光免疫组化及Western-blot检测caspase-3蛋白的表达变化。结果：姜黄素能明显改善大鼠缺血再灌注后的神经功能缺损,缩小梗死体积,明显减少TUNEL染色阳性细胞数,下调caspase-3蛋白的表达。结论：姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有良好的神经保护作用,这可能与其减少caspase-3的表达,抑制缺钱神经元的凋亡密切相关。     

激光心肌血管再建的机理研究

激光在离体猪心肌和活体兔心脏上打孔。观察术后激光孔道的病理改变,认为激光血管再建的主要机理可能为激光孔道中血流缓慢,血栓形成,肉芽组织长入机化血栓,肉芽组织中丰富的毛细血管在血流冲击下改建与心肌组织中的毛细血管网沟通使血道重建。     

激光血管成形术血管壁损伤研究

本文从光学及热学角度，对激光血管成形手术管壁损伤与激光参数间关系进行了研究，并通过动物实验对紫外激光血管成形术血管壁损伤进行了探讨。     

大鼠脑缺血／再灌注后突触超微结构的改变

突触是神经元进行信息传递的特化结构，且对缺血敏感。本实验应用透射电镜对脑缺血再灌注后不同时段突触的超微结构进行了观察，结果显示：假手术组，神经毡内可见大量突触，突触前后成分境界清楚，轮廓完整，突触前终末内突触小泡多，分布密集均匀，多为圆形清亮小泡(图1)；缺血2h，变化尚     

实验性内毒素所致内耳血管纹超微结构损伤

传统看法以为中耳炎只会引起传音性聋,却不能解释为什么慢性中耳炎患者几乎都伴有不同程度的感音神经性聋。实际上中耳炎引起的感音神经性聋比预料的多。作者将细菌内毒素脂多糖(Endotoxin,lipopolysac-charides,LPS)注入豚鼠内耳的外淋巴腔,并以无热原生理盐水注射作为对照,观察注射后的耳蜗血管纹超微结构变化。材料与方法大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS/O_ⅢB_4)系上海生物制品厂的产品,批号881102。健康白毛豚鼠18只,检查无耳炎,耳廓反射灵敏。动物随机分组为1、3、5天三个观察时间。实验组常规样品各5耳,酶细胞     

缺血再灌注脑损伤中PMNLs产生O2-及其信号转导初探

多形核白细胞(polymorphonuclear leukocytes,PMNLs)在缺血再灌注脑损伤及其进程中的作用受到越来越多的关注.PMNLs主要通过释放不同的化学性介质(如蛋白酶类、活性氧等)对脑组织产生破坏性作用,而其中所释放的超氧化物(Superoxide,O-2)占有重要地位.本实验对此进行了初步探讨.实验中,以我们新发现于大白鼠PMNLs内的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALPase)阳性颗粒能够产生O-2细胞毒性为突破口,用在我们以往实验中已证实的、可激活或抑止该颗粒信号转导机能的细胞化学因子处理动物,观察不同实验条件对脑缺血再灌注损伤及其程度的影响.     

大鼠肢体缺血再灌注后肺组织超微结构的改变

对正常组和肢体缺血再灌注（LIR）组大鼠的肺组织进行了通透性的测定和超微结构的形态学观察，研究结果显示实验组肺血管通透性增加，磷脂酰胆碱（PC）含量减少，电镜下可见肺泡毛细血管内皮细胞，I型肺泡上皮细胞水肿变性，肺泡壁增厚，Ⅱ型肺泡上皮细胞内板层板排空，线粒体肿胀，空变；肺间质水肿；肺泡表面活性物质脱落。本文结合上述超微结构变化，讨论了肢体缺血再灌注后急性肺损伤（ALI）的机制。     

透射电镜观察实验性心肌缺血再灌注时超微结构改变以及硝苯吡啶（心痛定）的保护作用

本文建立家兔心肌缺血再灌注模型，用透射电镜观察心肌细胞超微结构的变化以及应用硝苯吡啶（心痛定）的影响，结果对照组显示超微结构明显破坏，尤其是线粒体和细胞膜系统破坏严重。而用药组心肌细胞改变轻微，表明钙拮抗药能减轻心肌缺血再灌注时细胞超微结构的损伤。     

实验性慢性缺氧与肺血管结构的重建

目的：主要研究慢性缺氧与肺血管结构重建的关系,利用常压缺氧舱建立大鼠缺氧性肺动脉高压模型。实验动物分为3组：缺氧3天组、7天组、14天组。通过免疫组化的方法检测一氧化氮合成酶(NOS)的表达和含量,部分标本通过电镜观察。结果：在缺氧过程中,肺血管的胶原纤维明显增生,超微结构观察显示血管在早期可见内皮细胞损伤并伴有血小板性血栓形成;到后期出现肌纤维母细胞和胶原纤维增生。实验显示随缺氧时间的延长内皮细胞NOS的含量逐渐升高,而肺血管内源性的舒张反应反而降低,管腔狭窄,血流阻力加大。文中讨论了慢性缺氧与肺血管结构重建的关系,肺缺氧性肺动脉高压的机理,内皮细胞形态及功能的改变在肺动脉高压形成中的意义。     

老龄大鼠脑缺血再灌注海马神经元iNOS的表达及超微结构改变

目的：观察老年大鼠脑缺血再灌注后海马神经元诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase iNOS）的表达及超微结构变化。方法：建立老年大鼠不完全性全脑缺血动物模型，应用免疫组织化学染色和透射电镜，观察海马神经元iNOS的表达及超微结构变化。结果：缺血30min后再灌注24h组海马神经元iNOS活性显著升高；缺血30min再灌注21h和48h组中量表达；假手术组、缺血30min即刻取材、再灌注1h、6h、96h组iNOS几乎无表达；再灌注超过48h组海马神经元损伤较重。结论：NO是脑缺血后神经元迟发性死亡的重要因素之一。     

牛磺酸在体外对缺血/再灌注新生大鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的:观察低氧、复氧对心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,以及牛磺酸模拟心肌缺血/再灌注(I/R)过程中减轻钙超载的作用。方法:采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立模拟I/R模型。实验分4组:①正常对照组;②模拟缺血/缺氧组:细胞低氧180min;③模拟I/R组:细胞低氧180min,复氧180min;③牛磺酸+I/R组:先加入终浓度为20mmol.L-1的牛磺酸,再行低氧180min,复氧180min。以Fluo-4/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术检测心肌细胞[Ca2+]i变化。结果:对照组心肌细胞[Ca2+]i荧光强度(23.71±2.37)U和荧光光密度较低;低氧180min后复氧即刻,[Ca2+]i荧光强度开始增加(57.52±8.31),复氧180min后[Ca2+]i荧光强度(71.13±4.74)U和光密度显著增高(P<0.01vs对照组)。而牛磺酸组细胞内荧光强度和光密度较模拟I/R组显著降低[(42.42±4.17)U vs(71.13±4.74)U,P<0.01]。结论:心肌细胞缺血/缺氧导致Ca2+超载;模拟I/R Ca2+超载加剧,而牛磺酸有明显减轻心肌细胞模拟I/R时Ca2+超载的作用。     

利用激光散斑成像监测光动力治疗的血管损伤效应

激光散斑衬比成像(LSCI)技术作为一种高时空分辨的血流流速分布监测技术，无需扫描即可实时地全场记录微循环血流的时空变化特性。鸡胚尿囊膜(CAM)是用于在体研究光动力治疗(PDT)血管损伤效应的理想动物模型。以发育10天鸡胚尿囊膜为模型，使用光敏剂——焦脱镁叶绿酸(pyropheophorbide acid，pyro-acid)，激光照射波长为656．5nm，光照射功率为40mW／cm^2，研究了肿瘤周围血管在激光照射下的血管管径变化和血流速度分布变化。研究表明，通过对血管管径和血流速度的监测，激光散斑衬比成像技术可以用于评估光动力治疗过程中的肿瘤周围血管损伤效应。     

脑缺血/再灌注对大鼠脑内花生四烯酸乙醇胺浓度的影响及其机理初步研究

目的：脑缺血再灌注对脑组织中大麻内源性配体花生四烯酸乙醇胺（AEA）含量变化的影响。方法：用高效液相色谱法分别测定脑缺血、再灌注与对照组脑组织中AEA的浓度含量。结果：脑缺血及再灌注大鼠脑内AEA明显改变,浓度高于对照组,脑内AEA浓度在3小时缺血后显著增加,差异具有统计学意义。结论：脑缺血/再灌注导致脑组织中AEA浓度明显升高,AEA可能在脑缺血早期发挥了保护作用。     

轮器中神经血管分布的超微结构观察

文昌鱼是脊索动物门的典型代表,在系统进化中介于无脊椎与脊椎动物之间,由于它具有脊索、神经索和鳃裂这些脊椎动物主要特征,故被公认为脊椎动物远祖类型。但是轮器是否也像脊椎动物的内分泌腺一样,具有内分泌功能?分泌功能是否受控于神经组织?为此,本文特对轮器的神经血管分布进行了观察。     

电针对局灶脑缺血／再灌注大鼠海马内NF-κB旁路途经的调节作用

目的：观察局灶脑缺血/再灌注后不同阶段大鼠海马内IKKα及NF-κBp52的表达及电针对NF -κB旁路途径的调节作用。方法：SD健康雄性大鼠（280-300g）108只随机分为假手术组（n＝12）,电针组（n＝48）及模型组（n＝48）,按照再灌注后24h与7d将电针组及模型组分为2个亚组。采用右侧大脑中动脉闭塞/再通线栓法建立局灶脑缺血/再灌注模型。电针组取“合谷”穴、“太冲”穴,选用G6805-1型针灸治疗仪进行电针治疗。用FJB染色观察脑缺血/再灌注后海马区内神经细胞的损伤情况;利用免疫组化、Western blot 检测不同时间点海马区内IKKα的蛋白表达及NF-κB p52胞核内的蛋白表达变化。结果：FJB染色显示局灶脑缺血/再灌注后,海马区内神经细胞变性损伤明显（P＜0．05）;与模型组比较,电针干预后海马区内神经细胞变性损伤减少（P＜0．05）。免疫组化及Western blot 显示模型组大鼠海马内IKKα表达于再灌注后24h及7d均显著升高（P＜0．05）;胞核内NF-κB p52的蛋白表达随IKKα表达增加而增加（P＜0．05）。电针组与模型组比较,海马内IKKα蛋白表达及胞核内p52的蛋白表达明显减少（P＜0．05）。结论：脑缺血/再灌注刺激能诱发海马区内IKKα表达升高,活化p52入核激活信号通路造成海马区内神经细胞的损害;电针干预后能明显抑制IKKα的表达,阻止其活化p52进而有效缓解缺血/再灌注后海马内神经细胞的损伤。