培养的肺动脉内皮细胞的免疫和细胞化学鉴定

本实验用间接免疫荧光法和电镜免疫胶金法显示培养细胞的胞内凝血Ⅷ因子相关抗原(ⅧR:Ag)反应阳性以及电镜下Weible-Palade(WP)小体存在,证明所分离并经多次传代的细胞为内皮细胞。材料和方法:1.从新生小牛肺动脉中以胶原酶消化法分离出内皮细胞,于199培养液中培养并传代,取第3-5代细胞。实验前细胞培养于涂有鼠尾胶原的载玻片上。2.WP小体检测:细胞以PBS(0.1M,pH=7.4)原位漂洗并分别以3％戊二醛45分钟、1％锇酸30分钟固定;将预聚好的Epon812块扣于经脱水和Epon812浸透的细胞单层上,聚合后用热烤法将细胞层剥离于载玻片,常规超薄切片和铅铀染色,透射电镜下观察。3.ⅧR:Ag检测:(1)间接免疫荧光法:以95％4℃乙醇原位固定细胞10分钟,     

姜黄素对活化血小板诱导血管内皮细胞炎症因子表达的影响

目的:研究姜黄素对活化血小板诱导的血管内皮细胞、(endothelial cell ofvessels,ECVs)炎症因子的干预效应.方法体外激活的血小板与ECVs共同培养12h,建立炎症应答模型,采用实时荧光定量PCR来检测ECVs中细胞间黏附分子-1(intercelluar adhesionmolecule,ICAM-1)、单核细胞趋化因子蛋白-1(monocytechemoattrac-talatproteinl,MCP-1)、IL-1β、IL-6利IL-8的mRNA水平.同时采用25μg/mL姜黄素预处理ECVs 24h,再检测以上炎症介质的表达水平改变.结果姜黄素预处理能够不同程度减少活化血.小板诱导的ECVs炎症模型中ICAM-1、MCP-1、1L-1β、1L-6利IL-8的mRNA水平,与干预前相比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论姜黄素可抑制活化血.小板所诱导的珈.管内皮细胞炎症因子的变化.     

家兔挤压综合症肾小球超微结构改变及其在发病学上的意义

本文报道40只家兔挤压性急性肾衰综合症(CS)肾小球超微结构改变及其在发病学上意义的研究。用本组研制的CS动物模型,将兔分为4组进行实验:1.正常对照组(N=5);2,3天病理组(N=23);3,5天病理组(N=6);4,7天病理组(N=6)。研究主要发现是肾小球毛细血管内皮细胞肿胀,胞质增多,有些内皮细胞胞质呈多指状突起突入毛细血管腔,严重者抵达对侧壁呈拱桥状使管腔狭窄。有些内皮细胞肥大,严重者一个核充满了毛细血管腔,使管腔严重狭窄。有些内皮细胞增生,严重者一个毛细血管腔有3—4个,使管腔闭塞。有些毛细血管腔充满了脱落的内皮细胞碎屑和内皮细胞,甚至融合成微血栓,致管腔狭窄。有少数毛细血管腔有红细胞积聚融合的微血栓。系膜细胞亦有不同程度肿胀,胞质增     

乳腺癌细胞exosomes对人脐静脉内皮作用的实验研究

目的:观察人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞源exosomes对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)增殖、迁移能力及血管样结构形成的影响.方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosomes;MTT法检测MDA-MB-231细胞源exosomes对HUVECs增殖的影响;Transwell小室法检测HUVECs与exo...     

海洋低温溶菌酶对人脐静脉内皮细胞超微结构的影响

目的:观察海洋低温溶菌酶对体外培养的人脐静脉内皮细胞超微结构的影响,探讨海洋低温溶菌酶抗肿瘤血管形成的机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度的海洋低温溶菌酶处理24 h后,利用透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:海洋低温溶菌酶处理后人脐静脉内皮细胞出现超微结构变化,包括核内染色质浓缩及边集,胞质内细胞器肿胀和空泡化,呈现典型的细胞凋亡改变.这种改变呈剂量依赖性.结论:海洋低温溶菌酶可引起人脐静脉内皮细胞损伤,导致细胞凋亡,从而可能诱发其抗肿瘤血管生成的作用.     

长期培养的人血管内皮细胞超微结构研究

内皮细胞培养是研究内皮细胞生物学的重要方法。近年国外开展内皮细胞长期培养,并用于细胞生物学,动脉粥样硬化病理学、血栓形成等机制的研究中。本文在国内首次对长期培养的人血管内皮细胞进行超微结构的研究。本实验按[1]的方法进行脐蒂静脉内皮细胞的长期培养达25代(积累倍增数60-75,倍增时间20-25小时)。按[1、2]方法对流产胎儿主动脉内皮细胞长期培养达10-15代、(积累倍增数25-30,倍增时间20-25小时)。     

激光扫描共聚焦显微镜在骨髓基质细胞移植中的应用

目的：探讨激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope,LSCM）技术在骨髓基质细胞（Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs）移植中的应用。方法：使用活细胞示踪剂CM-DiI、细胞核探针DAPI和DNA合成前体物BrdU体外标记BMSCs,移植到动物模型体内,利用LSCM技术,观察BMSCs在受体组织内的分布和分化。结果：体外标记BMSCs后再移植到受体,使用LSCM技术可以观察到BMSCs定位于受体心肌组织和脑组织,并有部分BMSCs表达相应的组织特异性蛋白Cx43和GFAP。结论：利用LSCM技术观察BMSCs在受体组织内分布和分化是一种简单可行的方法。     

人肝细胞自噬性凋亡的形态学观察

为了进一步完善形态学的分型标准以及研究调控自噬对细胞凋亡的影响 ,采用去血清诱导自噬和3ＭＡ抑制自噬 ,同时施与凋亡诱导剂 ,观察细胞超微结构的改变。正常人肝ＬＯ2细胞株去血清培养12ｈ诱导自噬之后 ,ｃｉｓｐｌａｔｉｎ(3μｌ ｍｌ)加入 16 40培养基诱导ＬＯ2细胞凋亡 16ｈ和 3-ＭＡ自噬抑制剂(6 0 0 μｇ ｍｌ) ,30ｍｉｎ后加入ｃｉｓｐｌａｔｉｎ(3μｌ ｍｌ)混合培养ＬＯ2细胞 16ｈ。ＪＥＭ 12 0 0ＥＸ透射电镜观察、摄片。正常ＬＯ2细胞胞质丰富 ,核仁明显 ,自噬现象少见。单施加凋亡诱导剂的细胞 ,可见凋亡细胞的形态多样 ,细胞…     

边缘学科分支最新动向

TN一051 99011281磁场抑制肿瘤和影响细胞跨膜电位的探讨/张沪生,杜碧,张新晨,李佑民,曾繁清,虞国寅,姚博文(武汉大学)11武汉大学学报(自然科学版)一1 998,44(4).一506一508峰佰磁场住6一2.DT.磁场梯度10一100T·m一上,脉冲宽度20一200ms,重复频率0.16-1 34Hz的磁场作用于鼠S一180肉瘤,在电镜下观察到肉瘤细胞程序性死亡的特征和线粒体肿胀,这一磁场能引起2.smV的跨膜电位变化导致CaZ十内流,促使细胞凋亡.图1参10(木)T琳0昌1 99011282角腹内皮细胞图象自动检查系统的研究/陈瑶,曾衍钧,范黎,李秀云,齐莉,吴希军(北京工业大学)刃计算机工…     

人胎脑毛细血管的形态发育——超微结构观察(5～9月胎儿)

从胚胎5～9月共收集各月龄胎脑11例,早产及流产原因均与母婴疾患无关。用透射电镜对大脑皮质顶叶的毛细血管发育进行了动态观察,结果表明:(1)毛细血管管腔从大(llμ)至小(8μ)、管壁从薄变厚;(2)血管内皮细胞胞浆逐渐增多,细胞间紧密连接由短变长,迂曲,但中间始终有裂隙存在;(3)内皮细胞中的细胞器从胎基过渡到成熟,质膜小泡从大变小;此外周细胞胞突逐渐增多;基底膜改变在5～7月时变化较大,7月后趋向稳定。作者认为胎儿脑毛细血管的形态特征为进一步探讨血脑屏障的机能提供参考资料。     

地塞米松与血管内皮生长因子共同促进骨髓间充质干细胞形成毛细血管样结构的研究

目的：观察骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）在地塞米松（dexamethasone,DEX）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）组成的培养液中是否能形成毛细血管样结构。方法：将BMSCs在加入DEX（10^-8mol／L）和VEGF（10m）形成的微环境中培养12天,采用光镜和透射电镜观察血管样结构的形成情况;将BMSCs培养12天后与海藻酸钠凝胶混合后移植入Wistar大鼠体内让其继续生长,10天后取材,采用组织切片HE染色观察血管的生成情况。结果：透射电镜可观察到数个细胞通过紧密连接围成一个环状、类似于血管样结构;组织切片HE染色显示生成了原始血管腔。结论：DEX和VEGF形成的微环境可以使BMSCs分化后形成毛细血管样结构,并在活体动物体内进一步形成原始血管腔。为骨组织工程化血管形成提供了一条新的途径。     

系统性淀粉样变性的超微病理诊断

目的:应用光镜(LM)及透射电镜(TEM)观察不同部位淀粉样物质的沉积及超微结构特点,为系统性淀粉样变性提供可靠的病理诊断依据.方法:对21例临床拟诊为系统性淀粉样变性病例的肾脏,腹壁脂肪和直肠粘膜活检组织按常规进行LM及TEM标本制备及病理检查.结果:LM观察显示淀粉样物质在肾脏,腹壁脂肪和直肠粘膜沉积阳性率分别为7...     

超声微泡对pEGFP质粒转染小鼠损伤面神经的促进作用

目的：探讨超声微泡介导基因转染面神经的可行性及有效性。方法：建立小鼠面神经损伤模型,以增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP）为标记基因。将48只小鼠随机分为6组：空白组（A组）、脂质体＋质粒组（B组）、微泡＋质粒＋超声组（C组）、微泡＋质粒组（D组）、超声＋质粒组（E组）、单纯质粒组（F组）。将小鼠面神经损伤后,局部注射...     

共焦荧光显微定量研究血卟啉单甲醚亚细胞定位

目的 :研究血卟啉单甲醚 (HMME)在鼠肺毛细血管内皮细胞内的亚细胞定位 ;方法 :孵育时间分别为 2小时、2 4小时 ,四种荧光探针标记四种细胞器。激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)探测HMME和探针荧光图像。定性比较两种荧光分布模式 ,并定量计算高探针荧光区域与细胞内HMME荧光均量比I2 /I1 ;结果 :两种孵育时间下 ,HMME荧光均呈胞浆弥散分布 ,且在核周附近的高尔基体灰度较高 ,细胞核几乎无荧光分布。I2 /I1 高低顺序 2小时组 :高尔基体 >内质网 >溶酶体 线粒体 ;2 4小时组 :高尔基体 >线粒体 内质网 >溶酶体 ,且高尔基体组显著下降伴随线粒体组大幅上升 ;结论 :此定量分析方法能有效用于光敏剂亚细胞定位研究 ,对弥散分布光敏剂尤其适合 ;两种孵育时间下 ,高尔基体为HMME主要定位点 ,内质网有一定分布 ,溶酶体分布很少 ,细胞核几乎无分布 ;短孵育时间线粒体分布很少 ,长孵育时间由高尔基体到线粒体有一定再分布     

3D激光扫描共聚焦显微镜计量特性分析及测试

为了合理评定激光扫描共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM）的测量性能,提出了一种用于检验LSCM计量特性的测试方法。首先,依据LSCM成像原理,对其技术特点,特别是轴向分辨率和横向分辨率等进行了理论分析;然后对其计量特性的参数指标进行了归纳,并提出相应的性能测试方法。具体包括采用线间隔为微纳米级的网格板等作为标准器,测试LSCM的放大倍数和光学横向分辨率;采用纳米级高度台阶样板测试LSCM的光学轴向分辨率和轴向定位特性;采用激光干涉仪测试样品台工作性能等。实验证明:该方法能够满足当前普遍应用的LSCM的性能测试需求。     

拓宽激光扫描共聚焦显微技术运用的新探索

利用一些醛类固定液在固定作用中可产生荧光物质的特性，在荧光显微术中选择合适的激发波长和发射波长，使得一些未经荧光标记的生物组织结构也能在激光扫描共聚焦显微镜下成像，并可进行三维图像的构建，这不仅使激光扫描共聚焦显微技术的运用范围大为扩展，而且大大节约了研究费用和时间，提高了效益。此外，该技术还为组织学和细胞学的回顾性研究提供了一个有效手段，并将激光扫描共聚焦显微技术与普通光镜及电镜技术有机地结合起来，使组织和细胞的形态学研究得以全方位进行。     

MedliteC3激光祛除不良纹眉的临床应用

目的：观察MedliteC3激光不同Q开关激光模式祛除纹眉的临床效果。方法：采用MedliteC3激光的两种不同Q开关激光模式分别治疗不同颜色纹刺。结果：针对不同纹刺颜色,选用不同Q开关激光模式可明显祛除或淡化纹刺的颜色,但因个别纹刺液如颗粒较大或纹刺较深,需多次治疗,才能达到效果。结论：MedliteC3激光对祛除纹眉的颜色治疗效果好,该方法明显优于传统的治疗方法,值得推广。     

Flexible and Transparent Electrochromic Displays with Simultaneously Implementable Subpixelated Ion Gel‐Based Viologens by Multiple Patterning

Electrochromic materials reversibly change colors by redox reactions depending on the oxidation states. To utilize electrochromic materials for active‐matrix display applications, an electrochromic display (ECD) requires simultaneous implementation of various colors and a fine‐pixelation process. Herein, flexible and transparent ECDs with simultaneously implementable subpixelated EC gels by sequential multiple patterning are successfully demonstrated. Ionic liquid‐based EC gels of monoheptyl‐viologen, diheptyl‐viologen (DHV), and diphenyl‐viologen (DPV) are used to create the colors of ECDs: magenta, blue, and green, respectively. Especially, to realize an improved green color, DHV–DPV composite gels are synthesized. Three EC gels exhibit stable properties without degradation during repetitive operation. Moreover, a transmittance greater than 90% is maintained in a bleached state, which is sufficient for application as a transparent display. The subpixelation process for multicolored‐flexible ECDs is designed to facilitate both easy fabrication and rapid operation with various patterns at low cost. The subpixelated EC gels using a film mask can be implemented to a minimum size of 200 µm. Furthermore, the subpixelated flexible ECDs exhibit high durability even after 1000 cycles of mechanical bending tests at a bending radius of 10 mm. Therefore, these EC materials can be used directly for flexible and transparent active‐matrix displays.     

荧光染色法观察LED活化竹红菌素介导的光动力作用诱导卵巢癌细胞凋亡

目的:探讨LED活化竹红菌素介导的光动力作用诱导人卵巢癌细胞凋亡的光化学生物学效应.方法:应用Hoechst33258细胞核荧光染色法观察LED活化竹红菌素介导的光动力作用对人卵巢癌细胞凋亡的影响,结果:LED活化竹红菌素介导的光动力作用组出现核凝聚、凋亡小体的人卵巢癌细胞株H08910细胞明显多于单纯LED辐照组、单...