细胞固定化载体材料的研究进展及应用

文章简述了细胞固定化技术,介绍了近年来国内外细胞固定化载体材料研究的新进展,常用的载体材料的比较分类,选择及它们在固定化技术中的应用,并展望了细胞固定化材料的发展前景。     

固定化细胞载体材料的研究进展

固定化细胞技术是在固定化酶的基础上发展起来的高新技术,所用载体材料的性能是此项技术的关键。详细介绍了固定化细胞技术中常用载体材料的种类及其性能,概述了新近出现的载体材料及其应用,最后对载体材料的未来发展进行了预测。     

固定化细胞技术的研究进展

介绍了固定化细胞技术和近年来固定化细胞的制备方法、影响因素、载体特性等内容,探讨了固定化细胞技术在废水处理中的应用现状与今后的研究和发展方向。     

酶固定化载体及固定化方法最新研究进展

游离酶在工业生产等实际应用中存在着性质较不稳定、耐酸碱性弱、耐热性不强等诸多的局限性,对游离酶进行固定化是克服上述的不足的有效手段.本文将对常见的固定化载体(有机载体材料、无机载体材料和复合载体材料)和固定化方法(吸附法、包埋法、离子结合法、交联法和热处理法)以及一些新型固定化方法和新载体研究进展进行系统的深入介绍,并...     

固定化重组大肠杆菌细胞催化合成(R)-环氧氯丙烷

采用包埋法对重组大肠杆菌E.coli BL21进行了固定化研究,确定海藻酸钙是较好的固定化载体。考察了海藻酸钠质量分数、CaCl2质量分数、钙化时间、细胞包埋量以及固定化颗粒直径对固定化细胞活性和机械强度的影响,确定优化的制备条件为:海藻酸钠的质量分数为2.0%,CaCl2的质量分数为2%,钙化10 h,包埋菌体的质量浓度为0.05 g/mL,颗粒直径为2.7 mm。与游离细胞相比,固定化细胞的热稳定性和pH稳定性有明显提高。利用固定化重组大肠杆菌细胞催化拆分体积分数为1.5%的外消旋环氧氯丙烷,得到(R)-环氧氯丙烷的产率和光学纯度(对映体过量)分别为36.3%和100%。固定化细胞重复4批仍保持80%以上的活力,显示了良好的操作稳定性。     

用于固定化酶和细胞的陶瓷载体

本文简述了酶和细胞的固定化方法及作为载体材料之一的陶瓷的一些特性。结合固定化酶和细胞的性质和应用情况,认为采用陶瓷载体具有一系列的优点。文中列举了采用陶瓷做载体的实例。认为陶瓷作为固定化酶和细胞的载体可促进固定化酶和细胞技术及生物反应器的发展。此外还指出这一领域尚有很多问题还需要深入地进行研究。     

固定化E.Coli JM109(pBR322-MAT)细胞催化合成S-腺苷蛋氨酸

通过PCR从大肠杆菌(E.Coli-K12)基因组DNA中扩增出甲硫氨酸腺苷转移酶(MAT)基因,构建了能高效表达MAT的重组大肠杆菌E.Coli JM109(pBR322-MAT).选择海藻酸钙(CA)凝胶包埋固定化重组大肠杆菌,研究发现最佳ρ(CA)为20g/L的水溶液,最适细胞包埋量为0.15 g(湿细胞)/mL(凝胶),连续反应5批次后固定化细胞酶活力为初始最高酶活力的91%.对于固定化细胞催化合成SAM,在最佳条件下底物ATP的转化率超过95%.     

细胞固定化技术及其在废水处理中的应用研究

对细胞固定化技术进行了较为全面的介绍,指出理想的细胞固定化载体应该具备对微生物无毒、性质稳定、传质性能良好、强度高、寿命长、价格低廉等条件。详细阐述了细胞固定化技术在处理氨氮废水、含酚废水、重金属废水中的研究与应用现状,认为寻找高效、抗毒性强的生物及性质优良的固定化载体,开发高效的固定化反应器,进行生物再生是实现细胞固定化技术在废水处理中广泛应用的主要研究方向。特别指出的是这项技术在重金属废水处理中有着广阔的应用前景。     

固定化细胞技术应用研究进展

固定化细胞技术是酶工程的核心技术之一,它将酶工程提高到一个新水平.该技术简化了工业分离纯化的步骤,并使酶反应的连续生产成为现实.分析了固定化细胞的优缺点,介绍了固定化细胞的方法及其近年来在食品、发酵和三废处理行业的应用,并对其应用进行了展望.     

固定化微生物技术处理废水研究进展

对固定化微生物技术及其所用载体进行了介绍。综述了固定化微生物技术在国内外处理氨氮废水、含酚废水、降解芳香族类化合物以及其他有机废水处理中的研究与应用现状。指出了固定化微生物技术存在的问题，并提出了今后的研究方向。     

微电解灭活大肠杆菌的实验研究

以大肠杆菌为对象进行了微电解杀菌效果的实验研究。采用钛和石墨电极材料进行了微电解杀菌性能的比较。结果表明,微电解对于大肠杆菌有明显的灭活效应。杀菌效果根据条件的变化而不同,杀菌率随着处理时间、外部电压、氯离子浓度的增加而升高。证明微电解方法应用于中水消毒的可能性及其发展潜力。     

大肠杆菌氨基酰化酶工程菌的固定化研究

分别以聚乙烯醇(PVA)、海藻酸钠(SA)及PVA-SA为固定化载体对大肠杆菌氨基酰化酶工程菌进行固定。结果表明,PVA-SA固定化凝胶颗粒具有较好的机械强度和稳定性。确定PVA-SA的最佳包埋条件如下:PVA质量分数为8%、SA质量分数为1%、固定剂为pH值6.7的3%硼酸-1%氯化钙,此条件下制备的固定化细胞的酶回收率为91.46%。固定化细胞于4℃保存7 d、再室温保存14 d后,其酶活力为初始对照的90.76%,而游离细胞只有初始对照的29.69%。     

重组大肠杆菌表达的枯草芽孢杆菌腺苷磷酸化酶的应用研究

利用枯草芽孢杆茵嘌呤核苷磷酸化酶基因deoD在大肠杆茵BL21(DE3)中表达所得到的蛋白为酶液,催化核苷、2'-脱氧核苷与嘌呤及其类似物之间的反应.结果表明,嘌呤类核苷与嘧啶类核苷相比,前者达到反应平衡的时间较短、产物的得率(或底物的转化率)较高;腺苷磷酸化酶对核苷类的催化活性要比对脱氧核苷类的催化活性强;就碱基而言,对嘌呤和嘌呤类似物的催化活性基本相同.     

用KOH提取重组大肠杆菌中的PHA

用碱消化法从重组大肠杆菌中提取了PHA. 研究了碱液浓度、温度、消化时间及消化过程液固比等参数对产品PHA质量的影响. 提出了二段消化工艺,提高了PHA的产品纯度,所得PHA产品纯度为98.3%,同时较大幅度地降低了PHA的提取成本.     

百日咳毒素S1亚基片段在大肠杆菌中的表达

目的构建百日咳毒素(PT)S1亚基片段原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法根据GenBank中登录的百日咳毒素S1亚基基因序列,人工合成密码子优化的S1基因,利用重叠PCR技术将S1基因上的两段DNA序列拼接在一起,形成一个新的基因序列S1′。将该序列与7ZTS表达载体连接,构建重组原核表达质粒7ZTS-S1′,转化大肠杆菌JM109(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果S1′基因经PCR鉴定及测序证明与预期相符;重组表达质粒经双酶切鉴定证明构建正确;表达蛋白的相对分子质量约17400,表达量约占菌体总蛋白的8%,且具有良好的反应原性。结论已成功构建百日咳毒素S1亚基片段重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了重组蛋白,为PT单抗及其检测试剂盒的研制奠定了基础。     

HIV-1 Vif与ElonginC蛋白在大肠杆菌中的共表达

目的在大肠杆菌中共表达HIV-1Vif与ElonginC蛋白。方法PCR扩增ElonginC基因全长DNA片段,克隆入pMDT-easy载体,经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切后,与质粒pRSETB连接,构建质粒pRSETB-ElonginC。将质粒pMRI-Vif转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株,再将此菌株制备成感受态细胞,用pRSETB-ElonginC质粒转化该细胞,经1mmol/L IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果质粒pRSETB-ElonginC经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切,可切出约3000和400bp的2条片段,测序证明质粒构建正确。在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白,该蛋白具有良好的抗原特异性。结论在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白。     

高压匀浆破碎释放重组大肠杆菌提取包含体过程的研究

用高压匀浆机对重组大肠杆菌细胞进行破碎以释放重组人白细胞介素－6(rhIL-6)包含体,系统研究了高压匀浆过程中物理和化学因素的影响,包括匀浆次数,操作压力,料液的pH及悬浮体系的影响。从而选择操作压力为800MPa。悬浮体系为去离子水,经3次破碎,表达量为20％的 菌体可获得粗包含体的纯度约40%。此外,本文还对该高压匀浆破碎过程进行了动力学分析。     

固定化细胞在生物能源中的应用

<正> 生物能源取之不尽、用之不竭,为根本解决能源最好办法之一。它可分为沼气、氢气、微生物电池等。自从酶工程(固定化酶和固定化细胞等)研究进展以来,这些生物能源受到世界科学家的重视。兹分别简介如下:1.沼气沼气发酵有关的微生物分为甲烷杆菌属、甲烷八叠球菌属和甲烷球菌属。此外尚有所谓“奥氏甲烷杆菌”,是指甲烷杆菌M.O.H.与S 菌共生的菌。S 菌可由乙醇生成乙酸和氢,自身生成的氢对自身生长有碍,因此S 菌只有当甲烷产生菌存在时,才能生长,如下式:     

多种中草药提取物抑菌活性研究

以大肠杆菌为指示菌,采用牛津杯法对单一和复方中草药提取物的抑菌效果进行研究,结果表明:芙蓉醇提物、橄榄水提液、黄芩水提物、飞杨草醇提物、飞扬草水提物抑菌效果明显,在实验提取条件下,MIC分别为:0.39 mg/m L,0.98 mg/m L,2.59 mg/m L,170 mg/m L,340 mg/m L。