HPLC法同时测定冬虫夏草中5种核苷类成分

用高效液相色谱法同时测定冬虫夏草中鸟嘌呤、胸腺嘧啶、腺嘌呤、腺苷、虫草素5种核苷类成分的含量。采用色谱柱为Aichrom Bond-AQ C18柱(250 mm×4.6 mm×5μm),以乙腈-水(7∶93)为流动相,流量为0.8 m L/min,检测波长254 nm,柱温30℃。鸟嘌呤、胸腺嘧啶、腺嘌呤、腺苷、虫草素的质量浓度分别在1.01~5.50μg/m L(r=0.9995)、0.05~1.01μg/m L(r=0.999 8)、0.20~1.98μg/m L(r=0.999 5)、1.01~5.07μg/m L(r=0.999 5)、0.10~1.03μg/m L(r=0.999 6)的范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为99.1%,97.8%,98.6%,100.4%,99.2%,RSD(n=5)分别为1.15%,2.34%,2.01%,1.75%,1.50%。该方法简便快速、准确度高、重现性好,可用于同时测定冬虫夏草中鸟嘌呤、胸腺嘧啶、腺嘌呤、腺苷、虫草素5种核苷类成分。     

RP-HPLC法同时测定12种植物油中的3种甾醇含量

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)建立同时测定植物油中菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇含量的方法。采用C8柱(250 mm×4.6 mm×5μm)为色谱柱,流动相A相为乙腈,B相为水,通过梯度洗脱方式,以流量为1 m L/min,紫外检测波长210 nm对植物油中菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇进行分离检测。结果表明,菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇的质量浓度范围分别为5.12~101.4,5.08~101.6,5.09~101.8μg/m L时,3个甾醇的线性关系良好(线性方程分别为y=3 699x-5 454,y=4 951x+8 889,y=3 994x-3 800;相关系数r2分别为0.998 9,0.999 9,0.999 4),检测限为2.5μg/m L,平均回收率分别为99.79%~100.6%,98.17%~99.80%以及97.76%~102.24%,进样精密度(n=6)分别为2.29%,1.66%,2.12%,重复性RSD分别为2.49%,1.78%,2.72%,稳定性RSD分别为1.95%,2.56%,2.40%。通过对12种植物油中3种甾醇含量进行同时测定,表明相对于气相色谱法(GC),采用HPLC法具有更稳定、更准确、更简便等特点,是同时检测植物油中菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇的较好方法。     

二羟二丁基醚及其手性杂质的毛细管GC法分离

采用毛细管气相色谱法(CGC)分别对二羟二丁基醚(DHDB)及手性杂质的分离条件进行考察,建立二羟二丁基醚(DHDB)含量的测定方法。PEG-20M(30 m×0.53 mm×1.0μm)毛细管柱为色谱柱,FID为检测器,正辛醇作为内标,DHDB手性杂质程序升温条件为初温120℃,以0.5℃/min升温至180℃,保持40 min;DHDB含量测定程序升温条件为140℃保持1 min,以20℃/min升至200℃。DHDB及其手性异构体得到完全分离;DHDB在66.70~800.1μg/m L的范围具有良好的线性关系(y=0.007 0x+0.055 4;r2=0.999 6);平均回收率为99.54%,重复性RSD为0.68%,中间精密度RSD为0.95%,样品的平均含量为77.92%(RSD=0.25%)。该方法快速、简便,适于DHDB手性杂质分析和含量测定。     

高效液相色谱法同时测定忍冬藤中7个活性成分的含量

采用HPLC测定不同市售地、不同直径的忍冬藤药材中各活性成分的质量分数(新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、獐牙菜苷、马钱苷、3,5-二咖啡酰喹尼酸、4,5-二咖啡酰喹尼酸)。色谱柱为Shiseido C18(4.6 mm×250 mm×5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,并进行梯度洗脱,体积流量为1 m L/min,柱温为35℃,检测波长为238,326,350 nm。结果显示,上述成分的进样质量与峰面积之间线性关系良好(r0.999 5),精密度RSD4.3%,重复性RSD4.1%,平均加样回收率在96.8%~104.1%。本方法简单、准确,适用于忍冬藤的质量控制。     

强力枇杷露中齐墩果酸和熊果酸含量测定研究

建立强力枇杷露中齐墩果酸和熊果酸含量测定方法。采用HPLC法,色谱柱为Sepax Aurethyst C18-H(4.6mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-甲醇-0.5%乙酸铵溶液(体积比67∶12∶21);流量为1.0 m L/min;柱温为30℃;检测波长为210nm。齐墩果酸的进样量在0.05~1.59μg呈良好的线性关系(r=1.0000),精密度RSD=1.23%,平均加样回收率为93.7%,RSD=1.40%;熊果酸的进样量在0.19~6.20μg呈良好的线性关系(r=1.000 0),精密度RSD=0.20%,平均加样回收率为98.6%,RSD=1.96%。该方法简便、准确、重复性好,可用于强力枇杷露中齐墩果酸和熊果酸的含量测定。     

HPLC测定马甲子药材中马甲子1~#的含量

建立HPLC测定马甲子1#含量的方法,采用BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6 mm×100 mm×2.4μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长为320 nm。结果表明马甲子1#在0.021 4~0.854 4μg(r=0.999 9)范围进样量与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为99.4%(RSD=1.18%)。该方法快速,准确,重现性好,可用于测定马甲子中马甲子1#的含量。     

HPLC法同时测定季铵盐中氯化苄和苯甲醇

本文提出同时测定季铵盐苄基氯化铵中氯化苄、苯甲醇的新方法。采用高效液相色谱法,以C18(4.6mm×250mm,5μm)为分离柱;磷酸二氢盐—甲醇进行梯度洗脱;检测波长为210nm;柱温为25℃;流速为1.0m L/min。结果表明氯化苄在6.5~130μg/m L(r=0.9998),苯甲醇在6.25~125μg/m L(r=0.9999)浓度范围内呈良好的线性关系,氯化苄和苯甲醇的回收率分别为95.00~102.00%和102.86~105.71%,检出限分别为3.0μg/g、1.5μg/g。该方法操作简单,未用到有毒的试剂,准确性高,是季铵盐原料质量控制的理想方法。     

GC-MS/MS同位素内标法测定肉制品中N-二甲基亚硝胺

采用同位素内标定量,建立一种快速、准确测定各种肉制品N-二甲基亚硝胺的GC-MS/MS法。样品中加入D6-N-二甲基亚硝胺内标,经水蒸气蒸馏、二氯甲烷提取、分离、浓缩,用多反应监测模式(MRM)进样分析。色谱柱为HP-Innowax毛细管柱(30 m×0.32 mm,0.25μm),氦气为载气,氮气为碰撞气,流量为1.4 m L/min。结果表明:该方法检测范围在10~300 ng/m L内,线性关系良好y=77.16x-500.16(r2=0.999 6),精密度RSD为2.36%;回收率为82.9%~99.5%,检出限0.2μg/kg。对4种不同来源的肉制品共40批次进行检测,检出13批次,但均未超过限量(3μg/kg)。该方法灵敏、简便、准确、重复性好,可作为肉制品中N-二甲基亚硝胺检测的好方法。     

HPLC法同时测定青钱柳叶中绿原酸等4种多酚酸的含量

目的:建立青钱柳叶代用茶中绿原酸等4种多酚酸含量HPLC分析方法。方法:样品经过70%甲醇水溶液80℃水浴提取2小时,采用反相高效液相色谱外标法,色谱柱C18(250×4.6mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速1.0ml/min,柱温30℃,进样量20ul,4种多酚酸检测波长326 nm。结果:新绿原酸(0～84ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数1,加标回收率98.86%,精密度RSD为0.79%);绿原酸(0～102ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数1,加标回收率104.5%,精密度RSD为0.76%);隐绿原酸(0～110ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数0.999,加标回收率98.73%,精密度RSD为0.72%);咖啡酸(0～64ug/ml范围呈良好的线性关系,相关系数1,加标回收率99.97%,精密度RSD为0.73%)。用此法检测青钱柳叶代用茶,其中绿原酸含量较高约2.0～19mg/kg;隐绿原酸和新绿原酸含量较低约0.2～1.5mg/kg;不含咖啡酸。结论:该方法可以同时完成4种多酚酸的有效分离、定性和定量,标准曲线线性关系良好、检测结果可靠、样品前处理简单、检测操作过程便捷,可以作为青钱柳叶代用茶质量控制的检测方法。     

HPLC-ELSD法同时测定桔梗中5种皂苷含量

建立高效液相色谱法同时测定桔梗药材中去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D_3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D的方法。色谱柱为ODS 250 mm×4.6 mm×5μm,流动相A为乙腈-0.2%甲酸,流动相B为水,采用梯度洗脱(0~15 min,20%~22%A;15~60 min,22%A;60~65 min,22%~30%A;65~70 min,30%~20%A)。供试品经50%甲醇(ν/ν)超声提取30min,过滤蒸干后以50%甲醇(ν/ν)定容至5m L容量瓶中;漂移管温度为75℃,氮气流量为2.5L/min。去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D_3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D分别在0.64~6.4μg、1.22~12.2μg、1.08~10.8μg、0.74~7.4μg,1.7~17μg范围内组分浓度与峰面积线性关系良好;药材中5种成分的平均加标回收率分别为101.1%、99.9%、100.4%、100.7%和101.6%;RSD均5%。该方法简便、准确,分离效果好,可用于桔梗药材的质量控制。