天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖机制研究

目的:探讨天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用,并对其增殖抑制作用机制进行初步探讨。方法:采用不同质量浓度的天马颗粒剂(10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1))处理人结肠癌细胞株SW480,同时设立空白对照组(RPMI 1640培养液处理)及阳性对照组(以5-氟尿嘧啶处理)。观察SW480细胞的形态学动态变化,以MTT法检测各组SW480细胞的增殖情况,另以速率法检测各组SW480细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)比活性的变化情况。建立人结肠癌细胞株SW480免疫抑制小鼠肾包膜下移植瘤模型,同时设立天马颗粒剂组(天马颗粒剂灌胃),空白对照组(生理盐水灌胃)及阳性对照组(5-氟尿嘧啶腹腔注射),8 d后采集肿瘤组织,以免疫组织化学法及图像分析技术定量检测各组移植瘤SW480细胞中Ki-67及PCNA基因的表达情况。结果:随着天马颗粒剂质量浓度的增加,SW480细胞逐渐稀疏,散在生长,细胞变大,透明度差,颗粒增多;当天马颗粒剂质量浓度为10~(-4)g·mL~(-1)时,SW480细胞颜色加深,且部分细胞从瓶壁脱落,甚至部分细胞可见坏死崩解的碎片;实验组10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均可显著抑制SW480细胞增殖,且随天马颗粒剂作用时间延长及质量浓度增大,SW480活细胞计数逐渐降低(P<0.05);随着质量浓度的增加OD值逐渐降低,增殖抑制率逐渐升高(P<0.05);10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均会使SW480细胞的AKP比活性升高,且以10~(-2)g·mL~(-1)时的AKP比活性最高,且显著高于其他各组(P<0.05或P<0.01)。阳性对照组AKP比活性与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Ki-67及PCNA基因主要表达于SW480细胞的细胞核,天马颗粒剂组及阳性对照组Ki-67及PCNA基因阳性着色较空白对照组明显减少,其表达的面积均值及积分光密度均显著降低(P<0.01)。结论:天马颗粒剂可显著抑制人结肠癌细胞株SW480增殖,原因可能与其诱导SW480细胞成熟分化或抑制SW480细胞Ki-67及PCNA基因表达相关。     

酶消化法分离培养原代肺动脉平滑肌细胞及免疫组化鉴定

目的建立体外胶原酶消化法分离培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)及免疫鉴定的方法。方法采用I型胶原酶对PASMCs进行体外培养。在无菌环境下,分离提取雄性Sprague Dawley(SD)大鼠肺动脉主干,剥离外膜、剔除内皮细胞,经酶消化法,体外培养PASMCs。倒置相差显微镜观察PASMCs生长状态及特点;台盼兰测定细胞活力;免疫细胞染色法进行平滑肌α-肌动蛋白(α-SM actin)鉴定。结果酶消化法分离培养的PASMCs 3 d后,可见细胞贴壁呈梭形生长,6 d后生长迅速呈典型的峰-谷状生长,9 d后达90%融合。通过形态学观察及免疫荧光染色法鉴定表明:培养的细胞为PASMCs;细胞存活率为98.5%;原代培养8~10 d后即可传代,3-10代细胞生长迅速、细胞形态不易发生改变,可用于进行细胞实验。结论采用I型胶原酶消化法简单易行、可靠、PASMCs生长迅速、传代周期短的特点;尤为重要的是,培养的原代PASMCs可用于肺动脉高压和肺血管重构的研究工作。     

羊的生活习性及春夏放牧技术管理

<正>羊属于游走动物,其生活习性在养羊生产中具有重要作用。只有充分认识和掌握,才能按照其生活规律采取放牧饲养或半舍饲饲养方式,通过加强放牧技术管理,增加羊的生长繁殖大有益处。1行为特性1.1绵羊绵羊属于沉静性,人们习惯称其为"疲绵羊"。就是说绵羊行动迟缓,反应不敏感。绵、山羊同群放牧时,山羊     

多菌种益生菌对黄曲霉毒素中毒日本鹌鹑的影响

试验研究了多菌种益生菌(PRO)对黄曲霉毒素B1(AFB1)中毒的鹌鹑生长性能、免疫状况的影响。选取鹌鹑320只分配到4个处理组,分别是对照组(基础日粮)、AFB1组(基础日粮+AFB1 2.5 mg·kg-1)、PRO组(基础日粮+PRO 150 mg·kg-1)、AFB1+PRO组(基础日粮+AFB1 2.5 mg·kg-1+PRO 150 mg·kg-1),每个处理4个重复,每个重复20只鹌鹑。试验期从7~35日龄,鹌鹑自由饮水和采食,每周测量采食量(FI)和体增重(BWG)。试验结果显示,AFB1组鹌鹑总采食量和体增重均减少(P<0.05),但饲喂益生菌则改善了这些相应的指标(P<0.05)。在7~35日龄,AFB1增加了饲料转化率,而PRO的补充则降低了饲喂AFB1鹌鹑的饲料转化率(P<0.05);且AFB1+PRO处理组的饲料转化率比PRO组高(P<0.05)。试验还观察到AFB1组鹌鹑的内脏器官(如肝脏和脾脏)肥大,睾丸、法氏囊生长被抑制,但PRO则改善了这些器官的状况(P<0.05)。饲喂AFB1的鹌鹑体液免疫(例如针对绵羊红细胞抗原的抗体反应)和细胞应答(例如皮肤厚度对2,4-二硝基-1-氯苯)受到抑制,但饲喂PRO能提高这些免疫系统功能(P<0.05)。日粮中添加AFB1总是能增加日本鹌鹑血清中天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、碱性磷酸酶的水平(P<0.05),而PRO的使用则起到相反的效果。研究表明,在黄曲霉毒素中毒情况下,日粮中使用多菌种益生菌可改善日本鹌鹑的生长性能和免疫活性。     

蛋鸡饲养技术

<正>1育雏期的饲养管理(0~8周龄)雏鸡的生理特点是体温调节机能不完善,对温度、湿度等外界环境十分敏感,雏鸡阶段生长迅速,代谢旺盛,羽毛生长的快;胃容量小,消化能力弱;抗病能力差,群居性强,胆小易惊群。因此养鸡的成败,育雏是关键,关系到成活率、鸡群发育的整齐度,抗病能力及成鸡时的产蛋量、产蛋高峰持续时间和整个饲养期的经济效益。(1)进雏前的准备:育雏舍要清洁卫生,经过熏蒸消毒处理,并     

高压静电场激励裙带菜配子体的生物效应研究

为获得高产的裙带菜Undaria pinnatifida品种,以优选的裙带菜DL18品系配子体为材料,采用高压静电场处理的方法,在不同电场强度(0、3.3、4.0、4.7、5.3、6.0 kV/cm)下处理一定时间(2¹0min)后进行配子体的培养、采苗、育苗、海区暂养、栽培和F1代配子体的rbcL、rbcL-rbcS间隔区及部分rbcS基因(rbcL-sp-S)序列分析的研究。结果表明:在3.310min)后进行配子体的培养、采苗、育苗、海区暂养、栽培和F1代配子体的rbcL、rbcL-rbcS间隔区及部分rbcS基因(rbcL-sp-S)序列分析的研究。结果表明:在3.3⁶.0 kV/cm电场强度、26.0 kV/cm电场强度、2¹0 min处理时间范围内,随着电场强度、处理时间的增加,配子体的存活率逐渐降低,但均在95%以上;处理组与对照组雌、雄配子体的成熟率、成熟卵的受精率和受精卵的萌发率均无显著性差异(P>0.05);配子体的特定生长率及幼孢子体的长度在处理组与对照组间均有显著性差异(P<0.05),在5.3 kV/cm电场强度下,配子体生长最快,幼孢子体长度最大;随着孢子体的生长,处理组藻体的生长优势越来越明显,在4月份其长度和质量达到最大值,分别为(2.410 min处理时间范围内,随着电场强度、处理时间的增加,配子体的存活率逐渐降低,但均在95%以上;处理组与对照组雌、雄配子体的成熟率、成熟卵的受精率和受精卵的萌发率均无显著性差异(P>0.05);配子体的特定生长率及幼孢子体的长度在处理组与对照组间均有显著性差异(P<0.05),在5.3 kV/cm电场强度下,配子体生长最快,幼孢子体长度最大;随着孢子体的生长,处理组藻体的生长优势越来越明显,在4月份其长度和质量达到最大值,分别为(2.4².8)m、(1.62.8)m、(1.6².0)kg,其中在5.3 kV/cm电场强度处理下藻体的平均长度和质量最大,分别为(2.8±0.5)m、(2.0±0.3)kg,对照组藻体的平均长度、质量分别为(2.2±0.3)m、(1.2±0.2)kg;rbcL-sp-S序列分析结果表明,该序列长度超过2100 bp,处理组与对照组的A+T平均含量为64.22%,均高于G+C含量;处理组碱基置换明显增多,同时也出现碱基缺失、插入情况;随着电场强度的增加,处理组F1代配子体与对照组F1代配子体的遗传距离逐渐增大,从0.002 4增至0.005 7,对照组F1代配子体与F2代配子体的遗传距离为0.003 3。本研究结果可为高压静电场技术应用于裙带菜种质改良和品种选育提供理论指导。     

酶联合消化法和贴块法分离小鼠肺动脉平滑肌细胞及其生物学特性的研究

目的:探讨适用于小鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)分离培养及鉴定的技术方法。方法:采用Ⅰ型胶原酶、木瓜蛋白酶联合消化法及组织贴块2种方法对PASMCs进行体外培养。在倒置显微镜下观察PASMCs的生长特点;台盼蓝法测定细胞传代成活率;分别对PASMCs行生长曲线、MTT法、DNA周期检测比较增殖情况;免疫荧光染色法鉴定细胞。结果:酶消化法分离培养的细胞1 d后,在倒置相差显微镜下可见细胞贴壁呈椭圆形生长,4d后生长迅速呈典型的谷-峰状生长,7d后达80%融合即可传代;贴块法培养的细胞3d后,可见细胞从组织块边缘长出,7d后细胞数量逐渐增多,10d后细胞生长迅速呈单层致密排列,细胞传代成活率均为96%。2种方法获得的第2代PASMCs经平滑肌ɑ-肌动蛋白(ɑ-SM actin)免疫荧光染色鉴定,其阳性率均为90%以上;生长曲线、MTT法显示细胞增殖及细胞DNA周期无明显差异。结论:2种方法均可高效获得PASMCs在体外稳定培养,为研究肺血管疾病提供较为理想的种子细胞。     

胍基乙酸对AA肉仔鸡生长性能和死淘率的影响

为研究日粮中添加不同剂量的胍基乙酸对AA肉仔鸡生长性能和死淘率的影响,试验选用1日龄AA肉仔鸡360只,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复20只鸡,基础日粮为玉米-豆粕型日粮。3个试验组分别在基础日粮中添加胍基乙酸0、300和600 mg·kg~(-1)。试验期为42 d,分为0~21和22~42 d两个阶段饲养。试验结果表明,各处理组间各阶段的平均采食量和死淘率无显著差异(P>0.05)。在试验0~21 d,与对照组和300 mg·kg~(-1)处理组相比,胍基乙酸600 mg·kg~(-1)处理组的肉仔鸡,其日增重显著增加(P<0.05),料肉比显著降低(P<0.05);在试验22~42 d时,日粮中添加胍基乙酸600 mg·kg~(-1)处理组的肉仔鸡,日增重有高于对照组的趋势(P=0.05);在试验0~42 d,日粮中添加胍基乙酸600 mg·kg~(-1)处理组可显著增加肉仔鸡全期日增重(P<0.05),显著降低料肉比(P<0.05)。与对照组比较,添加胍基乙酸300 mg·kg~(-1)的肉仔鸡,21 d体重增加了2.50%,42 d体重增加1.28%,但差异不显著(P>0.05)。试验研究表明,在AA肉仔鸡日粮中添加600 mg·kg~(-1)胍基乙酸时,能显著提高肉仔鸡生长性能。     

Akt1在环氧合酶-2抑制剂抑制宫颈癌Hela细胞增殖中的作用

目的研究Akt1在环氧合酶2抑制剂NS398抑制宫颈癌Hela细胞增殖过程中的作用。方法以不同浓度的NS398或Akt1选择性激动剂IGF-1与NS398共同处理Hela细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制率,Western blotting免疫印迹技术分别检测Akt1蛋白表达的变化。结果与对照组比较,不同浓度的NS398处理Hela细胞后,细胞生长抑制率(IR)增加(P<0.05);NS398呈浓度和时间依赖性下调Hela细胞Akt1蛋白质的表达(P<0.05);与单独用NS398组比较,Akt1激动剂与NS398共同处理细胞后,细胞IR值逐渐下降,并且其作用呈浓度依赖和时间依赖性(P<0.05)。结论 NS398呈剂量和时间依赖性抑制Hela细胞的增殖,其作用机制可能与下调Akt1蛋白的表达有关。     

槲皮素联合伊马替尼体外抑制人胃癌SNU-1细胞生长和诱导细胞凋亡的研究

目的观察槲皮素联合伊马替尼对人胃癌SNU-1细胞生长和细胞凋亡的影响。方法以12.5~200.0μmol/L槲皮素和0.125~2.000μmol/L伊马替尼单药以及二者联合用药处理细胞24 h,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色观察细胞核变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;用蛋白印迹法检测相关蛋白的表达情况。结果槲皮素和伊马替尼单药均能使细胞活力降低,0.250μmol/L伊马替尼和2 5.0μmol/L槲皮素联合用药对细胞活力具有显著抑制作用,差异有高度统计意义(P<0.01),且可诱导人胃癌SNU-1细胞凋亡;二者联合处理还可以显著诱导半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的上调,差异有高度统计意义(P<0.01)。结论槲皮素联合伊马替尼能抑制胃癌SNU-1细胞的生长并诱导细胞凋亡,其作用机制主要是通过上调Caspase-9和Caspase-3的表达从而启动细胞凋亡来实现的。     

建筑--具有生命的细胞

通过把建筑比作有生命的细胞,从而从生物学角度探讨建筑作为生命细胞体所具有的各项功能,结构及其与环境的相互关系。通过对建筑细胞体的循环,支撑结构及建筑界面的研究来探讨生态建筑设计。     

黄芪多糖诱导的DC联合CIK对人食管癌Eca-109细胞的影响

目的:观察黄芪多糖诱导的树突状细胞(dendritic cells,DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)对人食管癌Eca-109细胞作用的影响。方法:取健康人外周血单个核细胞在体外培养DC和CIK细胞,观察经APS(astragalus polysaccharide,APS)诱导DC细胞和常规培养的DC细胞形态和数量的区别,并分为APS诱导组:APS-DCCIK组,即经黄芪多糖诱导的DC与同源CIK共培养组;对照组:DC-CIK+APS组,即常规方法培养的DC与同源CIK共培养加用等量黄芪多糖组(100 mg·L~(-1));空白组:DC-CIK组,即常规方法培养的DC与同源CIK共培养组。(各组DC∶CIK=1∶5)。检测三组靶效比分别为2.5∶1、5∶1、10∶1时对Eca-109细胞的毒性。结果:APS诱导的DC细胞较空白组细胞集落多而且大;APS诱导DC细胞数量显著高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);当DC∶CIK=1∶5时,APS诱导DC-CIK细胞数量明显高于空白组(P<0.05);DC∶CIK=1∶5,效靶比分别为2.5∶1、5∶1、10∶1时,APSDC-CIK组的细胞毒活性明显高于DC-CIK组和DC-CIK+APS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:APS不仅可增加DC和DC-CIK细胞的增殖能力,还可增强DC-CIK细胞对食管癌Eca-109细胞的杀伤效应。     

前景灿烂的燃料电池

介绍燃料电池的发展简况和4种有发展前途的燃料电池(磷酸燃料电池、质子交换隔膜燃料电池、熔碳燃料电池、固态氧化物燃料电池)。     

经鼻内镜鼻泪管开放治疗慢性泪囊炎的临床研究

目的:探讨经鼻内镜鼻泪管开放治疗慢性泪囊炎的临床疗效。方法:纳入52例(眼)慢性泪囊炎患者,术前均完善泪囊造影CT检查,随机分为观察组和对照组两组,每组各26例(眼)患者,观察组经鼻内镜下鼻泪管开放术,对照组经鼻内镜泪囊鼻腔造口术。术前、术后采用VAS评分,比较两组患者的治疗效果。结果:治疗前后VAS评分比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者的临床总有效率明显高于对照组,术后鼻泪管阻塞及溢泪的复发率明显低于对照组,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:鼻内镜下鼻泪管开放术治疗鼻泪管阻塞型慢性泪囊炎具有良好的治疗效果,并且术后患者鼻泪管阻塞的复发率低及溢泪改善程度高,值得临床推广。     

七氟烷对血细胞流变学影响的研究现状

围术期易出现微动脉栓塞和深静脉血栓,而血栓形成与血液流变性的改变密切相关.血细胞流变性是血液流变学的基础和核心,已经成为今后血液流变学研究的重要方向.七氟烷是目前常用的吸入麻醉药物之一.最近报道,七氟烷对血细胞流变学有一定影响,可能是围术期出现血液高黏滞综合征,导致血栓的因素之一,应进一步探讨和研究.     

微生物燃料电池处理含硫废水

微生物燃料电池的研究与应用,对缓解当前的能源危机有重大意义,其发展潜力很大。文章简述了微生物燃料电池的工作原理。同时,该文也阐述了一些影响微生物燃料电池去除硫化物的因素。     

空心包体应变计测量精度问题

空心包体应变计已在国内外地应力测量中得到广泛的应用。然而目前国内在使用空心包体应变计的测量结果计算地应力场的过程中存在着一些不可忽视的问题，这些问题与使用者对空心包体应变计的理论基础和工作原理缺乏认识有关。而这些问题的存在将大大影响地应力测量计算结果的可靠性和准确性。本文提出了有关问题并给出了解决这些问题的有效技术和方法。     

无介体微生物燃料电池的研究进展

微生物燃料电池的出现使得降解有机污染物的同时收获电能成为可能，因而受到广泛关注。从产电微生物和电池结构两部分介绍了无介体微生物燃料电池的研究进展，对产电微生物的研究主要从产电微生物的种类、影响微生物产电的因素以及产电机理等方面进行阐述；对微生物燃料电池结构的研究，主要从电池阳极及阳极室、阴极及阴极室、分隔材料、整体结构和运行方式等方面进行了阐述；从提高微生物燃料电池产电能力的角度出发，对微生物和电池结构提出了研究方向，并展望了产电微生物燃料电池的研究前景。     

饮水消毒副产物二氯乙腈对HepG2细胞周期的影响

目的研究p53基因和chk1基因在饮水消毒副产物二氯乙腈(dichloroacetonitrile,DCAN)对HepG2细胞周期阻滞过程中的影响。方法以二甲基亚砜(DMSO)溶解DCAN,以DMSO处理人肝癌细胞(Hep G2细胞)为对照组,分别以低、高浓度(50、400μmol/L)DCAN染毒Hep G2细胞24 h。采用碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞周期分布情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测p53基因和chk1基因mRNA表达的改变。结果与对照组比较,400μmol/L处理组G1期细胞比例明显减少,G2期细胞比例明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);400μmol/L DCAN作用于Hep G2细胞后下调了p53的表达,差异有统计学意义(P<0.05),而对chk1的表达没有影响。结论高浓度的DCAN能明显延长HepG2细胞的G2期,并可抑制p53的mRNA表达水平,但对chk1的mRNA表达水平无影响。     

抑制剂耐受性酵母底盘细胞的设计与构建

纤维素乙醇是一种低碳清洁的绿色能源,可与传统石油基液体燃料混合使用,具备广阔的应用前景。纤维素乙醇的生产历经木质纤维素预处理、糖化和酿酒酵母发酵等工艺,而预处理过程会产生多种副产物,显著抑制酵母细胞的生长速率和发酵性能。因此,构建抑制剂耐受性酵母底盘细胞,有助于提高纤维素乙醇的生产效率,降低生产成本。针对抑制剂耐受性酵母底盘细胞的设计与构建开展综述,系统总结了抑制剂的作用机制、耐受性底盘细胞的强化手段、抑制剂耐受性基因挖掘方法,并探讨了人工基因组重排提升酵母耐受性的最新进展。