Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味酶酶解大豆分离蛋白及脱苦工艺优化

以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解及脱苦工艺研究。以水解度和苦味分值为考察值,对酶解工艺进行优化,确定最佳条件。结果表明:Alcalase2.4L碱性内切酶最佳酶解条件为加酶量14 000 U/g、酶解温度60℃、酶解pH8.5、底物质量分数5%,酶解时间2h,最终水解度为45.34%,此时水解液苦味值为4。Flavourzyme风味蛋白酶对水解液进行二次水解的最优酶解条件为加酶量300 U/g、酶解温度55℃、酶解pH 7.0、酶解时间3 h,此条件下大豆分离蛋白水解液苦味值最低为1.2。Alcalase2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶水解大豆分离蛋白使水解度得到较大提高的同时也解决了水解液的苦味问题。     

酶法生产大豆蛋白ACE抑制肽的研究

研究了Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protames复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果和ACE(血管紧张素转化酶)的抑制活性。水解能力用pH-start法检测,水解度大小依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶;ACE抑制活性用高效液相法检测,ACE抑制率强弱依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶。综合考虑,选定Alcalase碱性蛋白酶为生产大豆ACE抑制肽的最适酶,并对其酶解条件进行了优化,确定生产大豆ACE抑制肽的最佳条件为:温度60℃、pH8.0、[S]=4%、[E]/[S]=4%,这时的水解度为14.4%。     

鲢鱼蛋白水解物的双酶法制备工艺优化

利用双酶法(Alcalase碱性蛋白酶与Flavourzyme复合风味蛋白酶)制备鲢鱼蛋白水解物,应用响应面分析法对酶水解工艺优化,最佳酶解条件为底物浓度为料水比1∶2,Alcalase碱性蛋白酶用量为0.4%,Flavourzyme复合风味蛋白酶用量为0.8%,水解温度60℃,水解pH值6.5,水解时间4h,此条件下水解度为65.2%。     

双酶水解淡水鱼下脚料粉的研究

用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶同步水解淡水鱼下脚料粉,最佳酶解条件为:底物浓度为10.1%、Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶的添加量均为1.1%、水解温度57℃,起始pH值6.0,酶水解时间6.5 h,此条件下水解度为22.3%。     

双酶水解虾粉的研究

为了提高虾加工下脚料的利用价值,用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶同步水解虾粉,分析了水解温度、水解时间、起始pH值、酶用量（E/S）和底物浓度等对水解度的影响,确定的最佳酶解条件为：底物浓度为9.0%、Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶的添加量均为1.0%、水解温度为55℃、起始pH值为6.5和酶水解时间为8h,水解度为22.1%。     

高底物浓度玉米蛋白的双酶复合水解效果研究

利用碱性蛋白酶(Alcalase)、风味蛋白酶(Flavourzyme)和复合蛋白酶(Protamex)对高底物浓度(135g/L)玉米蛋白进行双酶复合水解,研究复合水解对水解物的水解度、可溶性蛋白质含量和抗氧化活性的影响,并对双酶酶解效果较好的酶解液进行了分子量分布测定。结果表明,Flavourzyme和Alcalase、Flavourzyme和Protamex、Protamex和Alcalase顺次水解玉米黄粉,总水解度分别为27.11%、26.95%和19.76%,可溶性蛋白质含量分别为50.33、40.32、48.85mg/ml,抗氧化活性分别为634.35、576.79和593.21 U/ml。多肽分子量主要分布在5 801.170～238.962u,与单酶水解相比均有显著提高。     

脱脂油菜饼中蛋白质的分步酶水解研究注—（Ⅱ）蛋白酶的筛选

本文对不同蛋白酶对脱脂油菜饼粕中蛋白质的水解作用及水解产物的风味作了初步研究。结果表明：在6种蛋白酶中,Alcalase的氮收率最高,其次是HAP碱性蛋白酶,1398中性蛋白酶,Flavourzyme,537酸性蛋白酶和木瓜白酶的较低;Flavourzyme的水解产物的水解度最高,而HAP碱性蛋白酶和1398中性蛋白酶水解产物的水解度较低。HAP碱性蛋白酶,Alcalase,1398中性蛋白酶的水解产物有较强的苦味,木瓜蛋白酶和537酸性蛋白酶水解产物口感平淡,Flavourzyme水解产物无苦味。     

不同蛋白酶酶解大豆蛋白的过程变化规律研究

选择6种蛋白酶(Alcalase、胰蛋白酶、Protex.7L、Protamex、Flavourzyme和木瓜蛋白酶),对酶解大豆蛋白制备大豆蛋白水解液的过程变化规律进行了研究.以水解度、可溶性蛋白得率、多肽得率、寡肽得率及游离氨基酸得率为指标对酶解过程进行分析.结果表明,Alcalase水解大豆蛋白的能力最强,生成的多肽、寡肽以及游离氨基酸的量最多;胰蛋白酶酶解产物的分子量偏大;Flavourzyme水解出的游离氨基酸含量占可溶性蛋白的比例较高.     

复合酶水解菜籽清蛋白的研究

以菜籽清蛋白为原料，选择碱性蛋白(Alcalase)和复合风味酶(Flavourzyme)分步水解制备菜籽清蛋白水解物。通过单因素实验和响应面法分析，确定了碱性蛋白酶(Alcalase)酶解菜籽清蛋白的最佳水解条件为：pH8．0、反应温度50．1℃、酶用量0．38AU／g、底物浓度4．87％。在此条件下水解1h，水解度为14．72％。分步酶解的工艺条件为：Alcalase酶反应1h后，加入50LAPU／g Flavourzyme酶，50℃下酶解2h，酶解液水解度可达28％。氨基酸分析结果表明，菜籽清蛋白水解物可作为优质食品添加剂用于食品工业。     

双酶法制备花生抗氧化肽

研究碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavourzyme)分步水解花生粕制备花生抗氧化活性肽的工艺条件。结果表明:Alcalase的添加量为0.048AU/g pro,其最佳的底物质量分数为4%,pH值为8.0、酶解时间180min、酶解温度60℃。然后向Alcalase水解液中添加Flavourzyme,添加量为15LAPU/g pro,pH值为7.0、酶解温度50℃、酶解时间180min。在此条件下,花生抗氧化肽得率为90.28%,体系水解度达33.73%,所得花生肽分子质量在5000D以下的为96.92%,具有显著的抗氧化活性。     

Physicochemical and bitterness properties of enzymatic pea protein hydrolysates

ABSTRACT:  The effects of different proteolytic treatments on the physiochemical and bitterness properties of pea protein hydrolysates were investigated. A commercial pea protein isolate was digested using each of 5 different proteases to produce protein hydrolysates with varying properties. After 4 h of enzyme digestion, samples were clarified by centrifugation followed by desalting of the supernatant with a 1000 Da membrane; the retentates were then freeze-dried. Alcalase and Flavourzyme™ produced protein hydrolysates with significantly higher ( P < 0.05) degree of hydrolysis when compared to the other proteases. Flavourzyme, papain, and alcalase produced hydrolysates that contained the highest levels of aromatic amino acids, while trypsin hydrolysate had the highest levels of lysine and arginine. Papain hydrolysate contained high molecular weight peptides (10 to 178 kDa) while hydrolysates from the other 4 proteases contained predominantly low molecular weight peptides (≤ 23 kDa). DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) free radical scavenging activity of the Flavourzyme hydrolysate was significantly ( P < 0.05) the highest while alcalase and trypsin hydrolysates were the lowest. Inhibition of angiotensin converting enzyme (ACE) activity was significantly higher ( P < 0.05) for papain hydrolysate while Flavourzyme hydrolysate had the least inhibitory activity. Sensory analysis showed that the alcalase hydrolysate was the most bitter while papain and α-chymotrypsin hydrolysates were the least. Among the 5 enzymes used in this study, papain and α-chymotrypsin appear to be the most desirable for producing high quality pea protein hydrolysates because of the low bitterness scores combined with a high level of angiotensin converting enzyme inhibition and moderate free radical scavenging activity.     

罗非鱼肉双酶分步酶解制备Maillard反应基液的研究

以罗非鱼下脚料为原料,对其进行双酶分步酶解来制备Maillard反应基液。以氨基酸态氮含量(Cn)、TCA可溶性蛋白(短肽)含量(Cp)的变化为指标对酶解过程进行分析,结合酶解液的感官评定,认为Flavourzyme和Protame、Flavourzyme和Alcalase2.4L两个组合的复合酶解效果较好。对其进行工艺改进以后,两者酶解液的Cn值分别达到0.4%和0.35%。     

桑叶蛋白抗氧化肽的酶法制备

为了提高桑叶蛋白MLP的抗氧化活性,用碱性蛋白酶Alcalase、复合蛋白酶Protamex、木瓜蛋白酶Papain、风味蛋白酶Flavourzyme、中性蛋白酶Neutrase及胰蛋白酶Trypsin等6种蛋白酶对MLP进行单酶酶解及双酶、三酶复合酶解,并对酶解前后的化学组成、分子量分布、多肽得率、氨基酸组成、自由基清除能力、还原能力等进行对比分析。结果表明,MLP主要由分子量大于6.5 ku的大分子肽及蛋白质组成,酶解物则主要由分子量为0.3~0.6 ku的小肽及0.6~6.5 ku的多肽组成;相较于过度酶解,适度酶解能更好的改善MLP的抗氧化活性;多肽得率与自由基清除能力显著正相关(r=0.916~0.985);6种蛋白酶中,碱性蛋白酶、中性蛋白酶及复合蛋白酶的酶解物抗氧化活性显著优于MLP及其他三种蛋白酶解物;中性蛋白酶单独酶解物的抗氧化活性显著优于双酶、三酶复合酶解物。对中性蛋白酶的单酶酶解条件进行优化,结果表明底物浓度为20 mg/mL,E/S为1%(W/W),用中性蛋白酶酶解2 h所得的酶解物(NH)的抗氧化活性最高,后期研究中可选用中性蛋白酶制备桑叶蛋白抗氧化肽。NH或许可以作为食品中较有潜力的抗氧化剂。     

酶解鲍鱼制备增味剂的研究

采用Alcalase和Flavourzyme两种蛋白酶对鲍鱼蛋白进行酶解,利用鲍鱼酶解物制备得到的增味剂,经感官评定,具有显著的口感增强作用。     

高谷氨酰胺低聚小麦肽制备用酶的筛选

本文研究了胰酶(Pancreatin)、碱性蛋白酶(Alcalase)、中性蛋白酶(Neutrase)、胃蛋白酶(Pepsin)、酸性蛋白酶(Acidic protease)、复合蛋白酶(Protamex)和风味蛋白酶(Flavourzyme)等8种蛋白酶对小麦蛋白的水解作用。以获得高谷氨酰胺低聚小麦肽为目标,通过分析水解过程中谷氨酰胺肽释放规律变化,筛选出Alcalase和Protamex为最佳水解酶。与其余蛋白酶制剂相比,Alcalase和Protamex可实现对小麦蛋白的有效降解、并最大限度减少蛋白酶对酰胺基团的破坏作用,产物有效谷氨酰胺含量可达20%以上,其中分子量低于3000 Da的水解产物高达95%,尤其是Alcalase酶解产物中分子量小于1000 Da的水解产物含量达到75%。与以往研究相比,本试验以分子量分布替代DH作为蛋白酶筛选的重要依据,从而更加准确反映蛋白酶解特性和难易程度,避免了游离氨基酸的干扰。     

双酶分步水解法制备棉籽多肽的蛋白酶筛选

本研究利用6种蛋白酶对棉籽蛋白进行单酶和双酶组合水解,测定水解过程中棉籽蛋白的水解度,同时对酶解产物的多肽得率进行了分析比较。结果表明,为了高效制备棉籽多肽,可先用Alacalase水解蛋白酶对棉籽蛋白进行水解,再利用Flavourzyme风味蛋白酶继续酶解,最终产物的水解度可达到36.58%,多肽得率达到71.32%,相比单独应用Alcalase水解蛋白酶,水解度提高了91.32%,多肽得率提高5.88%。     

大鲵多肽制备工艺的研究

以人工养殖大鲵为原料,酶解大鲵肌肉粉制备大鲵肽。结果表明,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、Flavourzyme、Protamex、Alcalase 5种酶,在各酶最适pH和温度下,按照加酶量2000U/g、料液比1:25对大鲵肌肉粉酶解5 h,以肽得率为指标,Protamex酶解产物的肽得率最高;采用L9(33)正交试验进行Protamex水解大鲵肌肉粉的水解工艺研究,获得最佳工艺参数为:温度50℃、酶解时间7 h、料液比1:35。     

Functional properties of hydrolysates from Phaseolus lunatus seeds

Use of low degree of hydrolysis (DH < 10%) with enzymatic treatment can produce protein hydrolysates with functional properties superior to the raw material. Suspensions of Phaseolus lunatus protein isolate (PPI) were treated with one of two commercial enzymes (Alcalase or Flavourzyme) at 50 °C and pH 8.0. DH with Alcalase was greater than Flavourzyme at 5 or 15 min of reaction. Alcalase-prepared hydrolysates had more peptides than those prepared with Flavourzyme. All the hydrolysates had higher solubility than the PPI, the highest being for the Alcalase-prepared hydrolysate at 15 min reaction time. Overall, the Alcalase-prepared hydrolysates had better solubility characteristics, whereas the Flavourzyme-prepared hydrolysates had better film properties (maximum emulsifying capacity and the highest foam formation values). This is probably because of the greater ease of movement toward the interface as shown by their high surface hydrophobicity values. The Alcalase-prepared hydrolysates had generally low or nonexistent film properties.