烟草根系分泌物对烟草疫霉菌的抑制作用

为明确烟草根系分泌物对烟草疫霉菌的影响,采用液相色谱-质谱联用仪(Liquid chromatograph-mass spectrometry,LC-MS)检测小黄金1025和革新3号根系中共有分泌物含量的变化。通过菌落生长、孢子囊形成、菌丝生长量明确含量差异较大的5种共有根系分泌物对烟草疫霉菌的抑制效果,并利用盆栽试验检测其对烟草黑胫病的防治效果。结果表明,共有根系分泌物中,含量差异较大的化合物为酒石酸、二硝托胺、茉莉酮、棕榈酸和油酸。在低浓度(100μg/mL)条件下,5种化合物对烟草疫霉菌均具有显著的抑制效果,且随浓度的增加其抑制效果增强。酒石酸对菌丝生长、孢子囊形成的抑制率分别为36.72%和50.16%,棕榈酸对菌丝生长量的抑制率为59.86%。酒石酸和棕榈酸对烟草黑胫病的防治效果分别为53.11%和52.70%。因此,烟草根系分泌物中存在抑制烟草疫霉菌生长的物质,且能够在一定程度上防治黑胫病的发生。     

肉桂醛对烟草疫霉菌的体外抑制作用

[目的]为探讨肉桂醛对烟草疫霉菌的体外抑制作用。[方法]以烟草疫霉菌为研究对象,研究肉桂醛作用下烟草疫霉菌菌丝的径向生长和细胞膜透性,通过菌丝ROS和PI荧光染色,进一步测定菌丝丙二醛和甘油含量。[结果]（1）肉桂醛能够有效地抑制烟草疫霉菌菌丝的径向生长和破坏菌丝形态,抑制菌丝径向生长的EC₅₀值约为0.93 mmol/L;（2）烟草疫霉菌菌丝ROS和PI荧光染色结果显示,经肉桂醛处理的菌丝,其活性氧含量增加并出现细胞死亡现象,并表现出浓度效应;（3）随着肉桂醛处理浓度的升高,烟草疫霉菌菌丝MDA和甘油含量以及细胞膜透性均呈现逐渐升高的趋势。[结论]肉桂醛可能通过增加烟草疫霉菌胞内ROS含量,引发脂质过氧化反应,刺激丙二醛产生,从而使细胞膜受损,进一步导致细胞死亡,达到抑菌效果。      

紫茎泽兰提取物对烟草疫霉菌的抑制作用研究

  目的  为探讨紫茎泽兰提取物对烟草疫霉菌的抑制作用,为其进一步的开发和利用奠定理论基础,  方法  采用室内抑菌试验研究了紫茎泽兰叶、茎、根3个器官的乙醇提取物对烟草疫霉菌丝生长、孢子囊产生及游动孢子释放的影响。  结果  结果表明:紫茎泽兰叶、茎、根3个器官的乙醇提取物均可显著地抑制烟草疫霉菌丝的生长、孢子囊的产生以及游动孢子的释放,抑制效果随处理浓度的增大而增强;叶、茎、根乙醇提取物对烟草疫霉菌的抑菌中浓度(EC₅₀)分别为7.74 mg/mL、13.63 mg/mL和16.38mg/mL;在处理浓度为10mg/mL时,叶、茎、根3个器官乙醇提取物对孢子囊产生及游动孢子释放的抑制率均在50%以上。  结论  紫茎泽兰不同器官乙醇提取物均对烟草疫霉菌均表现出显著的抑制效果,其中以叶片的乙醇提取物的抑菌效果最佳,茎和根次之。      

异硫氰酸酯类香料对两种革兰氏阳性致病菌的抑制作用

选取9种异硫氰酸酯类香料,以金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌作为供试菌,通过测量抑菌圈直径考察此类含硫香料的抑菌活性,并探讨其构效关系。筛选抑菌效果最好的含硫香料,利用反转录荧光定量聚合酶链式反应技术考察其对金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因表达的影响。结果显示:4种异硫氰酸酯类香料——异硫氰酸苄酯(benzyl isothiocyanate,BZITC)、异硫氰酸苯乙酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)、异硫氰酸3-甲硫基丙酯(3-methylthiopropyl isothiocyanate,MTPITC)和异硫氰酸异戊酯(isoamyl isothiocyanate,IAITC)对2种革兰氏阳性菌的抑菌效果较好,且抑菌能力为BZITC≈PEITCMTPITCIAITC。对比9种异硫氰酸酯类香料的抑菌活性,BZITC对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,最低抑菌浓度为0.61 mmol/L,对单增李斯特菌的最低抑菌浓度为4.88 mmol/L。在亚抑菌浓度条件下,BZITC极显著地降低了金黄色葡萄球菌毒力基因nuc的表达(P0.01)。以上结果说明,苯基的存在可能增强异硫氰酸酯类香料的抑菌活性,该结构对BZITC抑制金黄色葡萄球菌毒力基因nuc的表达具有重要作用。     

异硫氰酸酯类香料对两种革兰氏阴性致病菌的抑制作用

选取9种异硫氰酸酯类香料,研究其对常见的两种革兰氏阴性致病菌——副溶血性弧菌和沙门氏菌的抑菌活性。通过倍比肉汤稀释法测定最低抑菌浓度,根据OD600nm值绘制生长曲线。使用荧光定量PCR方法研究异硫氰酸酯类香料对副溶血性弧菌主要的毒力基因——tdh基因表达的影响。结果表明,调整香料浓度为0.04mol/L时,异硫氰酸苄酯、异硫氰酸3-甲硫基丙酯、异硫氰酸苯乙酯、异硫氰酸丁酯和异硫氰酸4-戊烯酯对两种供试菌均有明显的抑制作用(P0.05)。其中异硫氰酸苄酯的抑菌效果最佳,对副溶血性弧菌和沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为9.54μmol/L和2.44 mmol/L。异硫氰酸苄酯对tdh的基因表达具有抑制作用,并且有浓度依赖性。综上,异硫氰酸苄酯对两种革兰氏阴性致病菌有很好的作用效果,苄基对异硫氰酸酯类香料抑制革兰氏阴性致病菌有一定的影响,说明异硫氰酸苄酯香料可作为抑制致病菌的添加剂应用。     

不同植物提取液对泡菜生花酵母的抑制作用探究

从泡菜中分离纯化生花菌株,通过分子生物学技术鉴定其为毕赤酵母菌。选用竹笋、竹叶、竹笋壳、宣木瓜、大蒜5种植物,利用水提取法和酒精提取法对各植物进行提取。采用牛津杯抑菌试验法找出对泡菜产花酵母抑制作用最强的植物及其提取方式,结果显示抑菌效果最好的是大蒜水提取液。对大蒜水提取液的提取时间、pH、浓度比分别进行单因素试验,结果表明,较好的提取时间为4～6 d、提取液为pH 2.5～3.5、提取浓度比为1︰9～1︰11。根据各单因素试验数据进行正交试验,得出最优条件并进行验证,得出大蒜水提取液在提取6 d、提取液p H 3.5、提取浓度比1︰11的提取条件下对毕赤酵母的抑制效果较强,研究为工业化生产中防止泡菜腐败提供有利参考。     

烟草疫霉菌LAMP检测方法的建立及验证

为了建立烟草疫霉菌（Phytophthora parasitica）可视化快速检测方法,试验以羟基萘酚蓝（HNB）为指示剂,以烟草疫霉菌特异的核糖体转录间隔区（Internal transcribed spacer,ITS）为目的DNA片段,应用LAMP设计软件设计4条引物,通过优化LAMP反应体系和反应条件,建立一种准确快速的LAMP检测方法,并对该检测方法的特异性、灵敏度及实际应用效果进行验证。结果表明,本试验建立的烟草疫霉菌LAMP反应体系具有较好特异性且灵敏度较高。特异性检测只有烟草疫霉菌株LAMP产物为阳性（蓝色）,且电泳结果能够产生梯形条带;灵敏度验证在DNA水平上可达到100 fg,是普通PCR检测方法的1000倍。对田间疑似黑胫病病株及其根际土样提取的DNA进行LAMP检测,各有3份样本为阳性,且病株检测结果与组织分离法对烟草疫霉的检测结果相一致;接种2 d后,病害症状还不明显的烟株中即可检测到烟草疫霉菌。本研究建立的烟草疫霉LAMP检测体系,可快速、简捷地检测到病株及其携带土壤中的烟草疫霉菌。     

荔枝核提取液对亚硝胺的抑制作用

研究了荔枝核提取液对亚硝胺（NDMA）合成的阻断作用及对亚硝酸根离子的清除作用。通过正交实验法得到了最佳提取条件为:以蒸馏水为溶剂,于100℃水浴,冷凝回流提取1h,此提取物对亚硝胺的阻断率可达84.53%,对亚硝酸根清除率可达84.71%。另外,还研究了Ca2+、Fe2+、Zn2+等人体微量元素对清除亚硝酸根的增强作用。      

分离芸薹属植物基因组DNA的一种方法

介绍一种比目前较普遍使用的ＣＴＡＢ法能更好地分离植物基因组ＤＮＡ的方法。通过芸薹属不同植物和不同重量实验材料的多次试验，证明用该方法分离的基因组ＤＮＡ产率、纯度和分子量都较高，分离的ＤＮＡ可用于限制性酶切。这种方法也完全适用于其它植物基因组ＤＮＡ的分离。     

杜仲皮蛋白对霉菌的抑制作用

用纸片琼脂扩散法,研究了杜仲皮蛋白和多菌灵对木霉、青霉、根霉的抑制作用.结果表明,杜仲皮蛋白对这三种霉菌均有明显抑制作用,最小抑菌浓度分别为912.5、912.5和456.3μg/ml.多菌灵对木霉、青霉、根霉的最小抑菌浓度均为456.3 μg/ml.     

拮抗烟草疫霉菌的木霉菌株筛选鉴定及防病促生作用研究

为了获得对烟草黑胫病菌具有较好拮抗效果的木霉菌株,从河南省各烟区烟草根茎类病害发生较重烟田健康烟株的根际土壤中共分离获得疑似木霉菌28株,通过平板对峙培养,筛选出菌株XYPQ-1、ZMD-1和XYLS-5对烟草疫霉菌具有较强抑制作用,5 d后抑菌率达90%以上。利用分子生物学方法分别将其鉴定为绿木霉菌（Trichoderma virens）、拟康宁木霉菌（Trichoderma koningiopsis）和近渐绿木霉菌（Trichoderma paraviridescens）。对其代谢物抑菌活性及防病促生效果进行了初步研究,结果表明,3种木霉菌产生的挥发性和非挥发性代谢物均对疫霉菌具有明显的抑制作用,其中XYLS-5的抑制效果最好,处理后5 d,其挥发性和非挥发性代谢产物的抑菌率分别达61.71%和100.00%。3种木霉菌对烟草黑胫病均具有较好的室内防效,其中XYLS-5的防效最高,达80%以上,且具有促进烟草种子萌发和根系生长的作用,可作为烟草黑胫病生物防治的拮抗菌加以开发应用。     

八种异硫氰酸酯类食用香料的合成与香气特征

异硫氰酸酯是一类含硫含氮香料,目前GB2760-2014中批准允许使用的食用香料中有15种。以异丁胺、仲丁胺、戊胺、异戊胺、己胺、3-甲硫基丙胺、苯甲胺、苯乙胺、三乙铵、二硫化碳和对甲苯磺酰氯为原料合成了八种异硫氰酸酯,分别为异硫氰酸异丁酯、异硫氰酸仲丁酯、异硫氰酸戊酯、异硫氰酸异戊酯、异硫氰酸己酯、异硫氰酸3-(甲硫基)丙酯、异硫氰酸苄酯和异硫氰酸苯乙酯。它们的产率分别为85.0%、81.8%、90.1%、89.1%、92.3%、84.9%、91.5%、90.9%。采用红外光谱、气质联用和核磁共振对合成的八种异硫氰酸酯的结构进行了表征;采用气相色谱-嗅闻联用仪对它们的香气进行了评价,香气评价结果表明,它们都具有芥末样辛辣、刺激的气息;为了便于鉴定食品中的异硫氰酸酯类化合物,对它们在HP-5和DB-Wax色谱柱上的保留指数进行了测定。     

芸薹属植物未成熟小孢子培养技术的研究和应用

从供体植株状态，取样，分离和培养方法，胚状体发生和小植株形成，再生植株性状表现等方面芸薹属植物未成熟小孢子培养技术。这一技术与诱变，基因转化，原生质体融合，性状遗传研究，育种方法结合，广泛应用于遗传和育种实践中。     

烟草疫霉菌拮抗细菌的筛选鉴定及发酵条件优化

为了筛选对烟草疫霉菌具有拮抗作用的生防细菌菌株,本研究从烟草黑胫病病圃地采集健康烟株的根际土样,采用对峙培养法筛选得到8株对烟草黑胫病具有拮抗作用的细菌菌株,其中编号为LB-9的菌株对烟草疫霉菌的抑制作用最强且效果稳定,抑菌率为60.6%,且抑菌谱广,对其进行16S rRNA基因序列分析后将该菌株鉴定为多粘芽孢杆菌。采用单因素优化试验初步探究了多粘芽孢杆菌LB-9的最适发酵条件,明确了LB-9的最适发酵培养基、最适发酵温度、最适发酵时间和最适发酵初始pH值,对其生防制剂的开发应用具有重要意义。     

植物乳杆菌ST3.5的分离鉴定及其对霉菌的抑制作用

乳酸菌因具有拮抗霉菌等有害微生物的潜力,有望成为下一代安全、稳定的生物抗菌剂。本研究筛选获得了一株抑制霉菌活性较好的菌株ST3.5,基于16S rRNA测序鉴定为植物乳杆菌,并对其耐酸耐胆盐、抑制病原菌、耐药等特性进行分析。进一步对植物乳杆菌ST3.5的无细胞上清液进行酸处理、热处理及酶处理,分析其中主要的抑霉菌物质,通过高效液相色谱(HPLC)测定上清液中有机酸含量,扫描电镜(SEM)观察其对霉菌菌丝的破坏情况,并以玉米粒为实际样本进行生物防治试验。结果表明,植物乳杆菌ST3.5具有良好的耐酸特性,耐胆盐能力较弱,对庆大霉素、卡那霉素等抗生素具有耐药性,对氨苄西林、氯霉素等抗生素敏感,可以抑制致病菌的生长。有机酸分析发现植物乳杆菌ST3.5无细胞上清液中乳酸含量最高(22.02±0.23)g/L,其次是柠檬酸(4.99±0.04)g/L和乙酸(3.67±0.06)g/L。SEM结果显示上清液对霉菌菌丝有破坏作用。此外,生物防治实验证实了植物乳杆菌ST3.5无细胞上清液能够抑制玉米表面霉菌的生长。综上所述,植物乳杆菌ST3.5能够抑制霉菌生长,可用于开发生物防治制剂,以最大限度地减少霉...     

鉴别烟草属植物的特异PCR引物研究

[目的]为科学、高效鉴别检测涉案制烟原料中是否含有烟草材料.[方法]利用公共数据库中烟碱代谢途径相关基因序列和茄科基因组数据(含烟草未公开数据)开发分子标记,通过对3个烟草亚属11个组的91份烟草材料和17份非烟草材料进行实验验证,获得烟草属特异性扩增分子标记.[结果]从209对新开发的引物中筛选出2对稳定、可靠且具有...     

烟田秸秆腐解特性及其腐解液对烟草疫霉菌的影响

针对南方常见的烤烟轮作体系,研究3种作物(烟草、油菜和水稻)秸秆的腐解特性及其腐解液对烟草疫霉菌的影响,以期为烟田秸秆的综合利用提供理论依据。采用尼龙网袋法研究了3种秸秆在2种土壤水分条件下的腐解率及养分释放规律,并通过人工制备3种秸秆腐解液,研究了其不同浓度对烟草疫霉菌菌丝生长和孢子囊产生的影响。结果表明,前期烟草秸秆和油菜秸秆腐解较快,但腐解率总体表现为水稻秸秆油菜秸秆烟草秸秆,各处理秸秆180 d累积腐解率均在55%以上。3种秸秆的养分释放速率均表现为钾磷氮,经过180d的腐解,氮、磷、钾的释放率分别为60.65%～70.18%、75.33%～84.81%及93.96%～97.34%。干湿交替处理的秸秆腐解率及养分释放率整体高于淹水处理,但差异均未达到显著水平。3种秸秆腐解液对烟草疫霉菌菌丝生长和孢子囊产生均有抑制作用,抑制强度表现为水稻秸秆烟草秸秆油菜秸秆,且抑菌率随着腐解液浓度的升高而增大,其EC_(50)分别为0.82、1.40和2.08 g/L。因此,烤烟轮作体系中水稻秸秆较易腐解,且3种秸秆腐解液对烟草疫霉菌均存在化感作用,但不同水分条件对秸秆腐解及养分释放效率的影响有待进一步研究。     

丙酸钙对食品中霉菌生长的抑制作用

<正> 各种农产品(包括谷物、豆类等种子、蔬菜,水果),食品及饲料在贮存期间由于发霉变质而造成的经济损失是目前世界各国,尤其是发展中国家的严重问题之一。因而解决世界范围的食品、农产品在贮存期间的发霉变质具有很重要的现实意义。使用高效低毒的防腐剂抑制霉菌的生长,延长贮存期很有必要。丙酸及其盐类为低毒性的微生物生长抑制剂。对细菌、酵母及霉菌均有一定的抑制作用,它可以应用于很多种食品及饲料中作为防腐剂。在pH偏低条件下使用丙酸钙效果更好。丙酸钙的主要作用可使微生物蛋白质变性,丙酸进入微生物细胞后抑制酶类活动,使酶变性而显示其防腐作用。