荔枝离体培养物DNA提取方法的研究

采用十二烷基硫酸钠（SDS）并补加非水溶性聚乙烯吡咯烷酮法，提取荔枝胚性培养物基因组DNA，有效地去除了植物组织中所含的多酚、单宁、色素及多糖类物质，得到高质量的荔枝胚性培养物基因组DNA。此DNA适合作为PCR模板应用，能较好地用于RAPD分析，这是一种简便、快捷、经济的荔枝胚性培养物基因组DNA提取的方法。     

白木香基因组DNA提取方法研究

在传统CTAB法的基础上加以改良,建立了一种适于白木香基因组DNA提取的方法.通过比较改良的CTAB法和试剂盒法,表明改良的CTAB法提取的白木香基因组DNA质量优于试剂盒法;使用改良的CTAB法提取的白木香基因组DNAOD260/OD280比值在1.8~2.0之间,DNA的得率约为172μg/100 mg干叶.酶切试验表明,改良的CTAB法提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切,可以用于下游研究.改良的CTAB法更适于白木香基因组DNA的提取.     

牦牛乳中DNA提取方法的建立与优化

为加速牦牛重要基因的挖掘和功能鉴定,以牦牛乳作为试验材料,建立简便的牦牛基因组DNA提取方法.采用常规离心法,从牦牛乳中获得体细胞,进而提取基因组DNA.研究不同去除蛋白方法、不同DNA沉淀剂、不同贮藏条件对牦牛乳中DNA提取质量的影响.DNA质量通过PCR评价.结果表明:高盐法与酚/氯仿法去除蛋白效果相当.高盐法简便...     

酸面团中微生物基因组DNA提取方法的优化

为有效提高酸面团中微生物基因组DNA的提取纯度与浓度,采用改良的CTAB法、STES法以及两种不同的基因组DNA提取试剂盒对酸面团中微生物基因组DNA进行了提取,并且重点优化了酸面团样品的前处理方法,经分光光度法和电泳法检测,确定了采用不同方法所获得DNA产物的浓度与纯度.结果表明:离心沉淀法、洗去面筋法和烘干法3种前...     

DNA条形码技术在动物角制品鉴别中的应用

利用动物线粒体12 S rRNA和16 S rRNA基因序列片段对动物角制品进行种属鉴别,为DNA条形码技术在角制品分子鉴定提供有效方法.收集犀牛角、水牛角、黄牛角和山羊角作为研究材料,采用优化提取步骤的商业化提取试剂盒进行基因组DNA的提取,以提高基因组DNA的浓度及质量.采用PCR扩增及测序技术获得所有样本12 S...     

奶粉基因组DNA不同提取方法的比较

为选择适合奶粉材料进行分子标记检测的DNA提取方法,以市售奶粉为材料,采用6种不同的方法提取基因组DNA,并比较这6种方法的提取效果．结果表明,除异丙醇沉淀法和十二烷基硫酸钠法(SDS法)外,其他4种方法提取的基因组DNA均适用于聚合酶链式反应(PCR)检测．同时,结合基因组DNA的纯度和质量浓度,明确奶粉基因组DNA提取方法的优劣依次为:热解法、异硫氰酸胍法、高盐低pH法和十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB法)．     

三种提取卤虫基因组DNA方法的比较

以盐生动物卤虫为材料,分别用氯化钠高盐沉淀法和两种酚/氯仿抽提法对卤虫基因组DNA进行了提取;并用紫外光分光光度计法、琼脂糖电泳法和PCR对所提取的DNA进行检测,将它们在DNA的产量、质量等方面的优缺点进行比较,通过三种方法的比较,认为改进的酚-氯仿法是卤虫基因组DNA的最佳提取方法.     

酒精和冷冻处理对肌肉组织基因组DNA提取的影响

提取基因组DNA的质量对于后续的基因扩增、酶切以及测序等分子生物学研究具有关键的影响,对肌肉组织进行不同的酒精和冷冻处理会显著影响提取DNA的质量。经过-80℃超低温冷冻数日的黄鳝样品解冻,取肌肉组织放入75%酒精处理后提取的基因组DNA完整性差、降解厉害;经过-80℃超低温冷冻数日的黄鳝样品直接取肌肉组织提取的基因组DNA比较完整、降解程度低;活体采取的黄鳝新鲜肌肉组织样品经过75%酒精处理,在-80℃超低温冷冻数日然后提取的基因组DNA质量也较好,电泳条带明晰而锐利,弥散降解带较少。后两种处理方法对黄鳝肌肉组织中DNA酶活性降低显著,因此提取的肌肉组织基因组DNA质量较高,可以有力支持后续的酶切、PCR扩增等分子生物学实验。     

从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA

采用试剂盒法、饱和酚抽提法、高盐沉淀法和氯化苄法从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA。经比色法和琼脂糖凝胶电泳分析检测。结果用氯化苄法提取的基因组DNA在质量上和得率上优于其他方法。A260/A280为1.7,DNA产量为0.11mg/g湿菌体。达到下部实验要求。     

一种植物基因组DNA快速提取方法的建立与评估

植物基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)的提取是植物分子实验的基础,但随着样本数量的增加,基因组DNA的提取成为植株基因型鉴定以及单核苷酸多态性检测等分子实验的限速环节.为解决现有技术中提取植物基因组DNA过程繁琐、耗时耗力的问题,从提取液配方和提取条件等方面改良常规快速植物基因组DNA提取法,缩短了样本制备时间并简化了提取步骤,改良后每个样本DNA制备需时不到90 s,同时采用96孔板和配套设施显著提高了实验通量.该方法对植物样本的状态要求低、扩增效率高、成本低,适用于拟南芥、水稻和玉米等多种植物基因组DNA的提取与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增实验,尤其适用于大样本量的规模化基因型鉴定.     

纤维素酶E_5基因在E.coli中的克隆与表达

将含纤维素酶 E5基因的质粒 p D5 4 1用 Nco I和 Eco R I双酶切后 ,经电泳分离获取含 E5基因的小片段 ,将该片段定向插入表达质粒 p SE4 2 0的多克隆位点上 ,进一步将重组 DNA转入大肠杆菌宿主 .采用刚果红染色法检测出选择性平板上的转化子具有羧甲基纤维素酶 (CMCase)活性 .摇瓶产酶试验进一步表明 ,基因重组后的大肠杆菌能高效表达 E5基因并将产物分泌出胞外 ,培养液中可检测到的CMCase活力达 31.6 U/ m L .该研究结果为进一步构建高效纤维素分解菌株打下了良好的基础 ,具有重要的学术意义和实际应用价值 .     

一株芽孢杆菌破乳特性试验

为准确、高效地调控生物破乳菌对破乳活性物质的生产,采用自筛破乳菌Bacillus mojavensis sp.,以O/W型模型乳状液作为破乳对象,分别测定在不同培养时间,全培养液不同组分,以及不同碳、氮源的条件下对该菌破乳效能的影响情况.结果表明:培养时间在14～24h全培养液的破乳活性最高.全培养液和中层液破乳效能高,菌体不具备破乳能力.烃类碳源可诱发该破乳菌产生具有破乳活性的代谢产物,而碳水化合物可以促进破乳菌的生长,其中果糖+液体石蜡组成的混合碳源对破乳菌的生长和破乳效能最有利.混合氮源NH4NO3+酵母膏更适于该破乳菌的生长及破乳活性物质的产生.控制培养时间和碳源、氮源的种类,可有效调控该破乳菌代谢产物破乳活性的高低.     

Biocompatibility evaluation in vitro. Part II: Functional expression of human and animal osteoblasts on the biomaterials

ＣｅｌｌｕｌａｒＤＮＡｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｎｔｈｅｏｒｔｈｏｐａｅｄｉｃｍａｔｅｒｉａｌｓｉｓｅｓｓｅｎｔｉａｌ,ｓｔａｎｄｉｎｇｆｏｒｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａ ｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙａｎｄｔｈｅａｆｆｉｎｉｔｙｂｅｔｗｅｅｎｉｍｐｌａｎｔａｎｄｓｕｒｒｏｕｎｄｉｎｇｔｉｓｓｕｅ .Ｃｏｌｌａｇｅｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｓｔｈｅｍｏｓｔｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ ｌｉｋｅｃｅｌｌｓ .Ｔｈｅｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｃｏｌｌａｇｅｎｐｒｏｔｅｉｎｏ…     

一种高效安全提取质粒DNA方法的建立

在碱裂解法提取质粒DNA的基础上做了改进,将NaOH浓度从0.20mol/L降低为0.10mol/L,使得超螺旋DNA的得率进一步提高.采用silica法纯化质粒DNA,避免了使用有毒性和挥发性气味的饱和酚和氯仿,使得操作更安全简单.电泳结果表明,提取的质粒DNA质量好,得率高,并且可以直接进行下一步的酶切、连接及转化等实验.同时,该方法中使用的硅胶可以回收再生进行重复利用,节省了实验费用.     

一种快速提取小麦DNA的方法

以优质小麦豫麦 47# 为原料 ,对小麦DNA的提取方法进行了探讨 .研究了在不用液态氮的情况下 ,防止DNA降解的关键技术 .对提取的小麦DNA进行紫外检测和琼脂糖凝胶电泳分析 ,结果表明提取的DNA相对分子质量大 ,浓度和纯度高 .该法也适合提取其它植物分子DNA .     

影响农杆菌介导植物遗传转化的因素

农杆菌介导的基因转化是一种使外源DNA转移到目的植株的天然系统，通过植物表达载体上DNA的加工与转移将外源DNA转运到植物细胞中的转基因方法．介绍了该方法在转化过程中的影响因素，包括转基因受体、外源基因供体、共培养条件、植物培养基的成分和外植体培养条件等．     

影响农杆菌介导植物遗传转化的因素

农杆菌介导的基因转化是一种使外源DNA转移到目的植株的天然系统,通过植物表达载体上DNA的加工与转移将外源DNA转运到植物细胞中的转基因方法.介绍了该方法在转化过程中的影响因素,包括转基因受体、外源基因供体、共培养条件、植物培养基的成分和外植体培养条件等.     

混合酵母菌处理高浓度味精废水的研究

为解决味精生产废水的处理问题,通过富集培养并利用选择性培养基分离到3种能适应味精生产过程中离交尾液(COD为29 860 mg/L,NH4+-N质量浓度为14 620 mg/L)的酵母菌,经初步鉴定分别属于胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、易变假丝酵母(Candida versa tilis)和异常汉逊酵母(Hansenula anom ala).对3种酵母菌混合处理味精生产废水的条件进行了研究,结果表明,最佳处理条件为:pH值4.0、温度28℃、时间20 h、接种量10%.同时,二倍稀释废水中COD去除率可达到82.9%,结果优于目前的处理方法.     

双歧杆菌分离,鉴定及其营养的研究

对从母乳和婴儿粪便中分离出的厌氧性杆菌进行双岐杆菌属、种鉴定，得到四株双歧杆菌，它们是：长双歧杆菌，表春双歧杆菌、短双歧杆菌和两歧双歧杆菌。用十一种不同培养基培养青春双歧杆菌，从中选一种适宜做发酵用的种子培养基－ＢＳ培养基。