富锶茶多糖提取物的抗氧化活性及其对H2O2诱导LO2细胞氧化损伤保护研究

目的 探明富锶茶多糖最佳提取工艺,并分析其体外抗氧化活性及对H2O2诱导LO2细胞氧化损伤的保护作用。方法 本研究采用热水超声辅助法从茶叶中提取富锶茶多糖,通过Box-Behnken响应面实验法对富锶茶多糖的提取工艺条件进行了优化;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基、羟基自由基(·OH)、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) ammonium salt, ABTS]阳离子自由基的清除能力和Fe3+的还原能力来为指标,分析富锶茶多糖的体外抗氧化活性;并以过氧化氢(H2O2)建立LO2细胞损伤模型,研究富锶茶多糖对LO2细胞氧化应激损伤的改善机制。结果 富锶茶多糖的最佳的提取工艺条件为：浸提时间57 min、料液比1:25 g/mL、提取温度67℃,富锶茶多糖得率为3.50%±0.12%。在体外抗氧化方面,富锶茶多糖对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH和对Fe3+的还原能力具有较好的清除能力;在改善LO2细胞氧化应激损伤方面,随着多糖质量浓度升高,细胞存活率也显著提高,当多糖质量浓度为50 μg/mL时,细胞存活率达到99.5%;在清除机体过氧化机制上,相对于模型组,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)在低、中、高实验组中均有所增强,氧化氢酶(catalase, CAT)活力在中、高实验组中有显著提高,从细胞水平表明富锶茶多糖对LO2细胞氧化损伤具有明显的改善作用。结论 富锶茶多糖具有良好的抗氧化性以及对H2O2诱导LO2细胞氧化损伤有很好的保护作用,为富锶茶多糖功能性产品开发提供了理论基础。     

玉米谷蛋白水解物对乙醇诱导损伤LO2细胞的保护作用

采用复合蛋白酶(protamex)和碱性蛋白酶(alcalase)协同水解玉米谷蛋白,制备玉米谷蛋白水解物(corn gluten hydrolysate,CGH),研究了玉米谷蛋白水解物的体外抗氧化活性,利用乙醇诱导LO2细胞氧化损伤模型对玉米谷蛋白水解物的抗氧化应激作用进行研究.结果表明,玉米谷蛋白水解物具有良好的...     

姜黄素超分子包合物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用

本文考察了姜黄素超分子包合物（Curcumin/Cyclodextrin polymer inclusion complex, CUR/CDP）对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用。采用MTT法建立乙醇诱导LO2细胞损伤的模型,通过谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）等试剂盒考察了CUR/CDP对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护效果。结果表明,经CUR/CDP（80 μg/mL）处理后,LO2细胞的存活率从54.75%±8.97%（模型对照组）提高到85.27%±2.64%,且细胞培养液中ALT、AST和LDH活力分别从（26.47±0.90）、（41.02±4.41）、（63.77±4.95）U/L（模型对照组）降低到（16.17±0.42）、（22.62±0.79）、（32.25±1.69）U/L（P<0.01）,LO2细胞内GSH-PX、SOD活力分别从（21.82±1.34）、（8.45±1.11）U/mg prot（模型对照组）升高到（36.70±0.56）、（16.47±1.27）U/mg prot,LO2细胞内MDA和ROS含量分别从（1.19±0.15）nmol/mg prot、（198.02%±11.76%）（模型对照组）降低到（0.72±0.05）nmol/mg prot、（110.87%±10.22%）（P<0.01）。综上所述,CUR/CDP通过提高LO2细胞相关抗氧化酶的活力和降低细胞内ROS含量来改善乙醇诱导LO2细胞的损伤。     

西凤酒全酒干预对LO2细胞和健康小鼠肠道菌群的影响

西凤酒中微量成分种类丰富,但关于其微量成分的作用及量效关系研究较少。因此,该研究基于细胞和动物实验探讨了西凤酒(以红西凤为代表)中微量成分对LO2细胞和健康小鼠肠道菌群的影响情况。细胞实验结果表明,乙醇浓度越高,细胞增殖抑制率、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)泄漏量越大,相同乙醇浓度下,红西凤和食用酒精(对照组)干预组之间具有显著性差异(P<0.05)。动物实验结果表明,不同剂量红西凤和食用酒精干预均导致小鼠体重、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)含量降低,肝重体重比、AST、ALT、TC、总胆固醇(total cholesterol, TC)、总甘油三酯(total triglycerides, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol, LDL-C)含量升高,肝脏组织出现不同程度脂肪变性,肠道菌群发生明显变化(门水平上,厚壁菌门与...     

反相高效液相色谱法测定解毒降脂片中大黄素的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定解毒降脂片中大黄素含量的方法,为解毒降脂片的质量控制提供依据。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(80∶20),流速为1ml?min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果:大黄素含量测定的线性范围11~66μg?ml-1,r2=0.9991,平均加样回收率为96.09%,RSD为1.49%。结论:建立测定解毒降脂片中大黄素含量的高效液相色谱法,该方法准确、可靠,可用于解毒降脂片的质量评价。     

油酰乙醇酰胺改善LO2细胞中脂肪酸诱导的氧化应激

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是最常见的慢性疾病之一,氧化应激在其发病和发展过程中起着关键作用。油酰乙醇酰胺(OEA)作为一种天然存在的脂质信号分子,具有多种药理学特性。研究探讨了油酰乙醇酰胺对脂肪酸诱导的LO2细胞氧化应激的影响及作用机制。通过0.4 mmol/L油酸和棕榈酸混合物(摩尔比2∶1)诱导LO2细胞产生氧化应激,添加不同浓度的OEA共同处理24 h。结果表明,OEA能够显著降低LO2细胞内ROS和MDA含量,提高抗氧化酶(SOD、CAT和GPx)活性。进一步的研究表明,OEA主要通过上调Nrf2和HO-1蛋白及mRNA的表达水平来改善氧化应激。     

基于HepG2细胞模型研究普洱茶茶色素的抗氧化作用

采用正常培养和油酸诱导培养的HepG2细胞为模型,通过测定普洱茶茶色素对HepG2细胞外谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响,以研究普洱茶茶色素的抗氧化作用。结果显示,普洱茶茶色素对正常培养的HepG2细胞的抗氧化作用影响不显著,而对油酸诱导的HepG2细胞模型抗氧化作用有显著的提高。抗氧化作用提高的程度依赖于普洱茶茶色素的质量浓度。当400μg/m L普洱茶茶色素作用HepG2油酸诱导模型24 h,细胞外GSH含量由0.004 4 g/L增加到0.010 3g/L,CAT活力由0.136 U/m L提高至1.174 U/m L,细胞内MDA含量由15.146 nmol/mg减少到7.635 nmol/mg,从而使这些指标接近正常培养HepG2细胞模型水平。因此,普洱茶茶色素的抗氧化作用是通过提高清除活性氧的酶活力和促进合成还原性物质来干预细胞的氧化应激。     

茶氨酸的HPLC快速检测

建立了未衍生化高效液相色谱法(HPLC)快速检测茶叶及绿茶提取物中茶氨酸含量的方法。采用Zorbax SB-AQ色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈:0.1%磷酸溶液=5:95(体积比)为流动相,流速1mL/m in,进样量10μL,柱温25℃,检测波长196nm。结果表明茶氨酸在0.02mg/mL 0.20 mg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9998,加样回收率为98.59%(n=5)。本方法检测快速,定量准确,可用于茶叶及绿茶提取物中茶氨酸含量的测定。     

六味黄酮茶水溶性成分HPLC指纹图谱研究

目的建立六味黄酮茶产品高效液相色谱（HPLC）指纹图谱。方法Waters SunFire C18色谱柱（4．6mm&#215;250mm,5μm）：乙腈-超纯水梯度洗脱,流速1．0mL／min,检测波长210nm,柱温30℃。结果在选定的色谱条件下,通过相似度分析确定了22个色谱峰构成六味黄酮茶指纹图谱的特征峰。结论用高效液相色谱-二极管列阵检测器联用（HPLC-DAD）法建立六位黄酮茶产品HPLC指纹图谱,有稳定、重复性好等特点,为企业提供了质量控制依据。     

液相色谱法测定茶氨酸提取物中咖啡因的含量

目的建立一种快速、简便测定茶氨酸提取物中咖啡因的液相色谱方法。方法样品经过前处理,以1-癸烷磺酸钠溶液(1.22 g→850 m L)+乙腈+磷酸=850+150+1(V:V:V)为流动相,流速1.0 m L/min,柱温40℃,进样量10μL,等度洗脱,经Agilent C18柱分离,于280 nm波长处检测,以外标法定量。结果用本方法进行检测,能很好的分离咖啡因,在浓度0.001 mg/m L至0.05 mg/m L之间呈现良好的线性关系,方法的相关系数可达1.000,平均回收率为100.2,在95%~105%之间,相对标准偏差(RSD)为1.0%,定量限为92.78μg/g,检出限为29.03μg/g。结论该方法耗时短、操作简便、准确、重现性好、分离效果明显。可以应用于茶氨酸提取物中咖啡因含量的测定。     

茶多酚对apoE-/-小鼠脂类代谢和肠道双歧杆菌的影响

研究茶多酚对小鼠脂类代谢和结肠双歧杆菌的影响,探讨茶多酚采食与脂类代谢和肠道双歧杆菌之间的关系。ApoE-/-小鼠以高脂饲料饲养并在饮水中添加1.6g/L茶多酚,8周后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析肠道双歧杆菌多样性。结果表明,高脂饮食对照组(HF)和茶多酚组(T)肠道双歧杆菌多样性有显著差异;16周后,T组血清中TC、LDL-C含量分别为19.8,16.1mmol/L,显著低于HF组的36.4,28.4mmol/L(P<0.05)。说明茶多酚采食对apoE-/-小鼠肠道双歧杆菌菌群多样性和脂类代谢均有显著的影响。     

茯砖茶水提物对高脂血症小鼠脂质代谢的影响 及其抗氧化作用的研究

目的考察茯砖茶的降血脂及肝保护作用。方法用高脂饲料饲喂小鼠建立高脂血症动物模型,以不同剂量(50 mg/kg·BW、150 mg/kg·BW、300 mg/kg·BW)茯砖茶水提物给小鼠每天灌胃,连续4周后检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。同时观察其对肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、体重、肝体比及肝组织病理变化的影响。结果结果显示,与模型组相比,茯砖茶水提物可呈剂量依赖性地降低血清中TC、TG、LDL-C的水平,提高HDL-C的含量。茯砖茶水提物还可以显著降低小鼠体重、肝体比及肝组织中MDA含量,极显著提高肝组织中GSH-Px和SOD活性,并减轻了肝脏的脂肪变性程度。结论茯砖茶水提物有较明显地改善脂质代谢和抗氧化的作用。     

山楂、荷叶、普洱茶膳食干预对肥胖大鼠脂质代谢的影响

摘 要: 目的 研究山楂、荷叶、普洱茶对高脂饮食诱导的肥胖大鼠脂质代谢的影响。方法 利用斯普拉-道来氏(sprague-dawley, SD)雄性大鼠制作高脂饮食诱导的肥胖模型, 通过检测体重、血脂水平、肝脏系数、体脂比等生理生化指标, 观察肝脏、肾周脂肪组织病理变化, 分析山楂、荷叶、普洱茶膳食干预对脂质代谢的影响。结果 山楂、荷叶、普洱茶及复合组均能抑制大鼠体重的增长, 调节血脂水平, 同时降低肝脏指数和体脂比, 其中复合组的效果最佳; 山楂、荷叶、普洱茶单用对肥胖大鼠受损的肝脏组织、脂肪细胞改善效果欠佳, 三者联用可明显减少肝脏炎性浸润和脂肪堆积的病变情况, 有效抑制脂肪细胞数量的增多和面积的增大。结论 山楂、荷叶、普洱茶联用可有效调节肥胖大鼠脂质代谢。     

茶多酚对肉鸡血脂水平、体脂分布及组织脂肪酸组成的影响

本文以28日龄雄性白羽肉鸡为研究对象,在正常饲喂基础上分别每天逐只灌喂80 mg·kg^-1和160 mg·kg^-1体重的茶多酚,以考察实验处理对肉鸡脂肪代谢和组织脂肪酸组成的影响,实验周期为28 d。结果表明,茶多酚处理能够显著降低肉鸡腹脂率、皮下脂肪厚度和肌间脂肪宽度,并改善动物的血脂水平。实验处理组动物肝脏、腿肌和胸肌含脂率与对照组动物相比显著下降,肝脏和腿肌单不饱和脂肪酸比例显著下降,而多不饱和脂肪酸比例显著升高。与对照组动物相比,160 mg·kg^-1茶多酚组肉鸡肝脏花生四烯酸（C20∶4）、二十二碳五烯酸（C22∶5）和二十二碳六烯酸（C22∶6）分别显著提高50.5%（p<0.001）、32.8%（p<0.05）和48.4%（p<0.05）,而腿肌中该三种多不饱和脂肪酸分别升高83.7%（p<0.01）、86.0%（p<0.01）和78.3%（p<0.05）。因此,茶多酚处理可显著改善肉鸡的血脂水平和体脂分布,并在一定程度上提高腿肌的营养价值。      

Hepatoprotective peptides purified from Corbicula fluminea and its effect against ethanol-induced LO2 cells injury

This study was focused on the purification, identification and mechanism of hepatoprotective peptides from Corbicula fluminea by using Sephadex G-15 chromatography, UPLC–MS/MS, oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay, cell experiment and molecular docking. Six identified peptides were synthesised chemically and subjected to evaluate hepatoprotective effect. ORAC value and hepaprotective effect against ethanol-induced LO2 cell injury in vitro were determined. The results showed that Tyr-Phe-Leu-Pro (YP-4) and Leu-Val-Tyr-Pro (LP-4) exhibited the strongest antioxidant activity and significantly increased the viability of ethanol-injured LO2 cells. These two peptides significantly reduced ROS levels and efficiently inhibited the decrease of mitochondrial membrane potential in ethanol-injured LO2 cells. Molecular docking revealed that YP-4 and LP-4 possess potential inhibitory activity on CYP2E1 and thus reduce ethanol-induced oxidative stress. It is suggested that YP-4 and LP-4 have good hepatoprotective effect against alcoholic liver injury.     

基于代谢组学研究金钗石斛调节脂质代谢的作用

目的 基于代谢组学研究金钗石斛对脂质代谢的调节作用。方法 将24只大鼠随机分为空白对照组、金钗石斛给药组（0.25 g/kg）,每6 h灌胃1次,连续5 d,收集大鼠血浆和肝脏。采用UPLC-MS对血浆样本进行代谢组学研究。利用主成分分析、聚类分析、KEGG通路富集分析等方法,对金钗石斛给药组与空白对照组的代谢组学数据进行分析,比较差异代谢物。根据代谢组学结果,采用RT-qPCR检测金钗石斛对Cyp7a1、Cyp7b1、Cyp8b1、Cyp27a1、Cyp3a1和Lpin1等脂质代谢相关基因表达的影响。结果 与空白对照组相比,金钗石斛给药组血浆样本内源性代谢物整体轮廓变化明显,其中1 448个代谢物的变化显著（P<0.05）,641个代谢物的差异倍数≥2。KEGG通路富集结果显示,前5条通路分别为Metabolic pathways、Biosynthesis of antibiotics、ABC transporters、Biosynthesis of amino acids、Protein digestion and absorption。RT-qPCR结果表明,金钗石斛可以上调Cyp27a1和Cyp3a1基因的表达（P<0.05）,下调Lpin1基因的表达（P<0.05）。结论 金钗石斛能对脂质代谢进行调节,为其进一步的开发与利用提供了科学依据。