鸡胸软骨硫酸软骨素的制备及结构分析

首先分析了鸡胸软骨中主要营养成分,再用酶法提取生物活性多糖硫酸软骨素,并用三氯乙酸除蛋白、乙醇沉淀和柱色谱进行分离纯化得到高纯度产品。反相高效液相色谱和原子吸收光谱分析表明鸡胸软骨富含呈味氨基酸和钙、镁和锌等矿物元素。高效凝胶过滤色谱和琼脂糖凝胶电泳证明该纯化后的硫酸软骨素产品均一,纯度达到99%,其分子量为21007D。其红外光谱呈现4-硫酸软骨素的典型特征,没有发现6-硫酸软骨素存在。气相色谱分析发现其中中性单糖主要为葡萄糖、木糖和半乳糖,与猪喉软骨存在明显差异。     

鸡软骨中硫酸软骨素的分离纯化

以鸡软骨为原料,对酶法提取硫酸软骨素进行纯化工艺的研究,采用阴离子交换树脂和凝胶层析法对提取的硫酸软骨素粗品进行纯化。结果表明:D218型阴离子交换树脂纯化硫酸软骨素最佳工艺条件为,吸附液用量与树脂体积比为1∶1;吸附流速为1.0m L/min;吸附时间为60 min;洗脱剂Na Cl溶液的浓度为3.0mol/L;洗脱剂用量与树脂体积比为5∶1,最佳解析时间为75 min,硫酸软骨素纯度为72.03%。通过葡聚糖凝胶G-75纯化后得到的硫酸软骨素的纯度为99.30%,较第一次纯化提高了27.27%。通过高效液相色谱法对纯化后的物质进行检测,进一步证明从鸡软骨中提取的物质为CS。     

猪鼻软骨硫酸软骨素双酶法提取初探

采用双酶法,通过不同种类的酶、不同添加量、不同料液比提取猪鼻软骨中的硫酸软骨素,综合对比,分析不同种类酶对硫酸软骨素提取的影响。结果表明,猪鼻软骨硫酸软骨素提取最佳工艺为:料液比1:1.5,第1类酶使用碱性蛋白酶,用量为2.5%,第2类酶(胰酶)用量为1.2%,成品收率达到16.740%。     

猪喉软骨硫酸软骨素的制备和自由基清除活性

直接用木瓜蛋白酶水解软骨,三氯醋酸除蛋白质,乙醇沉淀干燥得硫酸软骨素粗多糖,经DEAE-Sepharose fast flow离子交换层析分离纯化,高效凝胶渗透色谱和琼脂糖凝胶电泳测定其相对分子质量和纯度,比较硫酸软骨素粗品和纯品的体外自由基清除活性。结果显示硫酸软骨素粗品和纯品提取率分别为31.56±0.46%和19.79±0.78%,后者相对相对分子质量为75 174,粗品的DPPH.和.OH清除活性最强,随着产品纯度的提高,活性降低,而对于O2-.清除活性结果则相反。     

低分子量硫酸软骨素体外酵解特征及其对肠道菌群的调节作用

硫酸软骨素（Chondroitinsulfate,CS）具有调节肠道微生物的作用,但不同分子量对其益生活性的影响鲜有报道。该研究比较了硫酸软骨素（80 ku）及其光催化降解产物（Low Molecular Weight Chondroitin Sulfate,LWCS,4 ku）体外酵解特征及其对肠道代谢物的影响。通过化学法、气相色谱质谱联用、高通量测序等方法测定了不同时间发酵液中p H值、CS和LWCS含量、还原糖含量、短链脂肪酸浓度以及肠道微生物的变化。结果显示,在发酵48 h内,CS、LWCS以及还原糖含量均显著降低（P<0.05）,说明肠道微生物能够降解利用硫酸软骨素及其降解产物。且降解后的硫酸软骨素更显著地增加了拟杆菌门和副杆菌属等有益菌的丰度（P<0.05）,更明显的抑制了潜在致病菌型埃希氏-志贺氏菌属（P<0.05）。此外,LWCS发酵能维持24 h的酸性环境,并产生更多的乙酸、丙酸和总短链脂肪酸（分别增加1.15、1.03和1.09倍）。以上结果表明,光催化降解后的硫酸软骨素具有更强的肠道益生作用,该研究为硫酸软骨素的开发应用提供了科学依据。     

猪喉软骨硫酸软骨素的结构解析

用波谱分析结合酶法谱推测猪喉软骨硫酸软骨素包含GlcA(β1-3)GalNAc4SO3、GlcA(β1-3)GalNAc6SO3重复结构单元,不存在GlcA2SO3(β1-3)GalNAc4SO3、GlcA2SO3(β1-3)GalNAc6SO3(硫酸皮肤素特征)和NeuAc(α2-3)Gal(β1-4)GlcNAc4SO3(硫酸角质素特征)重复结构单元。     

猪硫酸软骨素提取工艺的研究

以猪软骨为原料,采用稀碱与酶解相结合的方法提取硫酸软骨素。以蛋白酶、脂肪酶分解去除杂蛋白及脂肪,经酒精沉淀并干燥后得到产品。实验得到的最佳提取工艺为:料液比1∶1.5,碱浓度5%,碱提温度40℃,酸性、中性和碱性蛋白酶的用量分别为1.4%、1.4%、0.7%,脂肪酶的用量1%,在酶各自最适条件下作用时间各为1.5h。     

软骨素裂解酶的研究进展

硫酸软骨素（chondroitin sulfate,CS）是由葡萄糖醛酸和乙酰半乳糖胺交替连接的带负电荷的线性大分子多糖,具有多种生理活性,包括修复关节软骨、抗氧化、降血脂、抗凝血、抗血栓及抗肿瘤等,但CS的高分子量限制了其很多功能的有效发挥。软骨素裂解酶（chondroitinase,Chase）作为一类降解CS的裂解酶,可裂解CS产生低分子量CS,从而有效克服CS生物利用率低的缺点。本文结合笔者工作,简要介绍了CS和低分子量CS的生物活性,阐述了Chase裂解CS的催化机制,系统梳理了Chase的种类和来源、发酵生产和表征以及重组表达和应用方面的研究进展,以期深入理解低分子量CS和Chase的研究现状和发展趋势,促进Chase的工业化生产。     

碱—酶法提取硫酸软骨素的工艺研究

研究以猪软骨组织为原料,采用碱液提取和酶解相结合的方式提取硫酸软骨素。通过对影响碱液提取效率和酶解效果因素的研究,确定了碱液提取的最佳条件为:碱液的体积分数7.5%、提取温度为50℃、提取时间2 h、提取2次。酶解的最佳条件为:采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的混合酶1∶1(w∶v)、添加质量分数1.0%,pH值8、提取36 h。     

鸡胸软骨硫酸软骨素的制备及其稳定性研究

采用木瓜蛋白酶水解法从鸡胸软骨中提取硫酸软骨素粗多糖,并用三氯乙酸除蛋白、乙醇沉淀和柱色谱分离纯化得到高纯度产品。以硫酸软骨素主要成分(总糖、还原糖、葡萄糖醛酸、游离硫酸根)及相对黏度为指标,研究热、酸碱、氧化剂处理对硫酸软骨素稳定性的影响及紫外光照射对其结构的影响。研究结果表明,经紫外光照射后,硫酸软骨素结构基本无变化;在温度低于80℃,pH=7时,硫酸软骨素稳定性较好。温度大于100℃、强酸、强碱或含有氧化剂时,硫酸软骨素极不稳定,各成分变化程度较大,游离硫酸根增加,分子量降低。但对于其降解机理,需做进一步研究。      

地尔硫(艹卓)联合低分子肝素治疗慢性肺源性心脏病的临床观察

目的观察地尔硫联合低分子肝素治疗慢性肺源性心脏病的疗效。方法随机将54例确诊为慢性肺源性心脏病患者分为治疗组和对照组,两组抗感染药物、氧疗等常规治疗不变,治疗组加地尔硫联合低分子肝素治疗,分别在治疗前,治疗后1,2,4周行心电图、心脏彩超、血气分析、6min步行试验,对心功能Borg呼吸困难与疲劳评分。结果治疗组的肺动脉压较对照组下降更显著,心功能分级6min步行试验显著改善(P<0.05),不良反应事件少。结论地尔硫联合低分子肝素治疗慢性肺源性心脏病效果显著可靠。     

地尔硫[艹卓]联合低分子肝素治疗慢性肺源性心脏病的临床观察

目的观察地尔硫[艹卓]联合低分子肝素治疗慢性肺源性心脏病的疗效。方法随机将54例确诊为慢性肺源性心脏病患者分为治疗组和对照组，两组抗感染药物、氧疗等常规治疗不变，治疗组加地尔硫[艹卓]联合低分子肝素治疗，分别在治疗前，治疗后1，2，4周行心电图、心脏彩超、血气分析、6min步行试验，对心功能Borg呼吸困难与疲劳评分。结果治疗组的肺动脉压较对照组下降更显著，心功能分级6min步行试验显著改善（P〈0．05），不良反应事件少。结论地尔硫[艹卓]联合低分子肝素治疗慢性肺源性心脏病效果显著可靠。     

关节炎与低分子肝素在治疗关节炎中的应用

本文综合国内外相关文献,介绍骨关节炎和类风湿性关节炎及低分子肝素在治疗关节炎中的应用。     

Interaction of Low Molecular Weight Phenolics with Proteins (BSA)

Mixtures of bovine serum albumin (BSA) and several low molecular weight phenolics were incubated and fractionated using G-50 Sephadex chromatography. Fractions corresponding to the protein and the possible phenolic-protein complexes and fractions corresponding to the free phenolics were collected, and their phenolic content was determined. Among the selected commercial phenolic standards tested ( p -coumaric acid, p -hydroxybenzoic acid, protocatechuic acid, caffeic acid and (+)-catechin), the strongest BSA-binding affinity was demonstrated by 3,4-dihydroxy benzoic and cinnamic acids (protocatechuic acid and caffeic acid), whereas p -hydroxybenzoic acid did not interact with BSA. The methodology was also applied to a phenolic extract obtained from lentils containing p -coumaric acid, a p -coumaric acid derivative, (+)-catechin and procyanidins B₃ [(+)-catechin-(4αÕ8)-(+)-catechin] and B₁ [(-)-epicatechin-(4αÕ8)-(+)-catechin]. Interactions observed among the lentil phenolics and BSA were comparable to those observed among the commercial phenolic standards and BSA.     

低分子肝素生物活性和功能的实验研究

目的研究低分子肝素增加皮肤血管通透性、改善局部血液循环的生物活性,为在化妆品中应用低分子肝素提供理论和数据支持。方法观察给药前后小鼠耳廓微循环的变化,进行比较研究。结果低分子肝素的效价越高,对微血管扩张和毛细血管开放程度影响越大,且持续时间长;低分子肝素对微循环的促进作用明显大于普通肝素;对熊果苷的皮肤渗透有促进作用。结论低分子肝素具有增加皮肤血管通透性、改善局部血液循环的生物活性,并能促进其它活性物质向皮肤渗透。     

低分子肝素生物活性和功能的实验研究

目的研究低分子肝素增加皮肤血管通透性、改善局部血液循环的生物活性,为在化妆品中应用低分子肝素提供理论和数据支持。方法观察给药前后小鼠耳廓微循环的变化,进行比较研究。结果低分子肝素的效价越高,对微血管扩张和毛细血管开放程度影响越大,且持续时间长;低分子肝素对微循环的促进作用明显大于普通肝素;对熊果苷的皮肤渗透有促进作用。结论低分子肝素具有增加皮肤血管通透性、改善局部血液循环的生物活性,并能促进其它活性物质向皮肤渗透。     

低分子量壳聚糖对镉染毒引起的氧自由基变化的影响

采用浸浴法研究了镉（Cd^2＋）胁迫下,添加不同浓度低分子量壳聚糖（LMWC）对长江华溪蟹（Sinopotamon yangtsekiense）超氧阴离子（O2^-&#183;）、羟自由基（&#183;OH）和过氧化氢（H2O2）三种氧自由基的影响,并初步探讨了LMWC的作用机制。实验设置5个LMWC与Cd^2＋联合作用组（5、10、20、40和80mg/L）、1个Cd^2＋对照组（58mg/L）和1个空白对照组,分别在96h后测定鳃、肝胰腺和心脏的抗O2^-&#183;能力、抑制&#183;OH能力和H2O2含量。结果显示,Cd^2＋可以诱导蟹体产生大量的氧自由基,并导致机体的抗氧化能力降低,LMWC的加入可以有效抑制Cd^2＋引起的氧化损伤,其抑制作用随LMWC浓度的增大逐渐增强。LMWC浓度达到40mg/L和80mg/L时抑制作用显著。LMWC对镉染毒引起蟹体内过量氧自由基有一定的清除作用。     

低分子量蛹虫草多糖降血糖活性的研究

采用高血糖小鼠模型验证低分子量蛹虫草多糖在体内的降血糖活性。以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建小鼠糖尿病模型,小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组、低分子量蛹虫草多糖高、中、低剂量组,研究低分子量蛹虫草多糖对小鼠空腹血糖值、糖耐量、脏器指数、体重、血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)等指标的影响。连续灌胃给药4周,与模型组相比,剂量组小鼠的体重呈升高趋势,具有显著性差异(p0.01),高剂量组(200 mg/kg)降糖效果最好,给药4周后空腹血糖降至13.7±2.4 mmol/L,结果表明,低分子量蛹虫草多糖显示出较好的降血糖效果,能明显降低糖尿病小鼠血糖值,且在一定范围内能改善小鼠糖耐量异常,同时能有效减轻高血糖对肾脏和肝脏的损伤和缓解由糖代谢紊乱所引发的体重下降问题。     

低分子质量壳聚糖对鲤鱼生长和消化酶活性的影响

旨在探讨低分子质量壳聚糖(low molecular weight chitosan,LMWC)对鲤鱼(Cyprinus carpio)生长和消化酶活性的影响。采用单因子浓度梯度法,设基础饲料组和质量分数分别为0.25%、0.50%、0.75%、1.0%LMWC组;分别在30、45、60d对不同组鲤鱼质量增加率、投饵系数以及肝胰脏和肠道淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶的活性进行动态分析。结果表明:随着LMWC添加量增加和时间延长,与对照组相比,鲤鱼质量增加率、淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性都呈现逐渐升高的趋势,投饵系数呈现逐渐下降的趋势。在45、60d时0.75%LMWC组鲤鱼的质量增加率,淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶活性相对于对照、0.25%、0.50%、1.0%LMWC组,升高趋势最为明显。1.0%LMWC组鲤鱼随着时间延长,质量增加率和消化酶(淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶)活性的升高趋势逐渐变缓;饲料中添加不同质量分数的LMWC对鲤鱼消化酶活性的影响不同,0.75%为LMWC的最适添加量。