米曲霉氨基酰化酶的纯化及粗酶性质研究

利用硫酸铵分级盐析法从米曲霉L-09中提取氨基酰化酶,比活力为56.01 U/mg,纯化倍数为2.06,酶活力回收率为80%。详细研究该粗酶的酶学性质。结果表明,经盐析法提纯的粗酶最适pH为7,最适反应温度为55℃,在55℃下热稳定性良好。溶液中的金属离子对酶活力有很大影响。其中,高浓度的Fe~(2+)、Mn~(2+)和Ca~(2+)对酶活力有抑制作用,低浓度的Co~(2+)离子对酶活力有激活作用。     

米曲霉产氨基酰化酶最佳活力条件的研究

通过在不同的反应时间,反应温度,缓冲液种类及pH条件下测定氨基酰化酶的活力,得出氨基酰化酶的最佳活力条件。试验结果表明,氨基酰化酶在反应温度为37℃、磷酸缓冲液pH为7．5、与底物反应30min时,活力最高。     

米曲霉3042的液体培养特性及其产氨基酰化酶的特性研究

对液体培养的米曲霉所产生的氨基酰化酶胞内外分布及其酶的最适ＰＨ、温度和热稳定性进行了探讨。结果表明,米曲霉３０４２属于凝聚型菌株,当搅拌速度为９０－１２０ｒ／ｍｉｎ时可获得较好的菌球,氨基酰化酶属于人酶,存在于细胞内部或分布于细胞壁上;菌体酶最适Ｐ眯７．０,最适温度为５５℃。好的菌球;氨基铧酶属于胞内酶,存在于细胞内部或分布于细胞壁上,菌体酶活最适ＰＨ为７．０,最适温度为５５℃。     

米曲氨基酰化酶分离纯化及其保存稳定性

通过对米曲氨基酰化酶硫酸铵分级沉淀、疏水层析分离、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验获得较高纯化倍数和较高活力的酶,并对酶保存稳定性进行研究.经分离纯化实验后,米曲氨基酰化酶的比活力由3.818 U/mg提高到106.738 U/mg,纯化倍数达28倍,活力回收率为22%.保存该酶的最适pH值为6.5～7.0,Co2 对酶有轻微的激活作用,Fe2 和CH3COO-对酶有明显地抑制作用,蛋白水解酶抑制剂1,4-二硫苏糖醇对酶的保存稳定性有较高提升.自制丙酮冻干粉保存稳定性良好,保存半年其酶活力仍能维持原酶活力的80%以上.     

米曲氨基酰化酶的提取及其酶学性质的表征

通过硫酸铵分级沉淀、SephadexG5 0凝胶层析和DEAE Sepharose阴离子交换层析 ,从米曲霉 3 0 42中提取得到了米曲氨基酰化酶 ,该酶的纯化倍数为 5 4.2 9,比活为 647.66U/mg ,总收率为49 5 3 %。详细考察了温度、pH、缓冲体系的离子强度和金属离子对米曲氨基酰化酶酶活的影响。结果表明 ,该酶促反应的最适pH为 7 5～ 8 0 ,最适反应温度随催化反应时间的延长而降低 ,缓冲体系中的离子对酶活有抑制作用 ,而低浓度的Co2 +对酶活有激活作用。     

微水相中氨基酰化酶催化拆分反应的研究

研究了氨基酰化酶在微水相中催化拆分N-乙酰-DL-苯丙氨酸的反应.结果表明,氨基酰化酶在有机介质中能保持较高的活性,其活性和反应体系中溶剂的疏水性(IgP)、水含量、pH、温度等密切相关.在适当控制以上条件的情况下,酶活力随IgP的增高而增大;在异戊醇为介质的反应体系中,水舍量为3.2%、pH为7.0、温度为64℃左右的条件下,酶有最大的催化活力.     

米曲氨基酰化酶的固态发酵条件研究

对米曲霉3042产氨基酰化酶的固态发酵条件进行研究,固态发酵培养基中,培养基组分麸皮与豆粕的最佳质量配比为8:2,产酶到达高峰的时间为38～48h。添加底物或底物类似物作为诱导物时,对提高米曲氨基酰化酶的酶活力作用不明显。添加吐温-80和植酸复合促进剂为培养基总质量的0.05%后,米曲霉产酰化酶达到高峰的时间为28～38h,其酶活力与不添加促进剂时的酶活力相比,提高到原来的271.94%。      

米曲氨基酰化酶的固态发酵条件研究

对米曲霉3042产氨基酰化酶的固态发酵奈件进行研究,固态发酵培养基中,培养基组分麸皮与豆粕的最佳质量配比为8:2,产酶到达高峰的时间为38～48h.添加底物或底物类似物作为诱导物时,对提高米曲氨基酰化酶的酶活力作用不明显.添加吐温-80和植酸复合促进刑为培养基总质量的0.05%后,米曲霉产酰化酶达到高峰的时间为28～38h,其酶活力与不添加促进剂时的酶活力相比,提高到原来的271.94%.     

微水相中氨基酰化酶催化拆分反应的研究

研究了氨基酰化酶在微水相中催化拆分N-乙酰-DL-苯丙氨酸的反应。结果表明,氨基酰化酶在有机介质中能保持较高的活性,其活性和反应体系中溶剂的疏水性（lgP）、水含量、pH、温度等密切相关。在适当控制以上条件的情况下,酶活力随lgP的增高而增大;在异戊醇为介质的反应体系中,水含量为3·2%、pH为7·0、温度为64℃左右的条件下,酶有最大的催化活力。      

米曲氨基酰化酶液态发酵条件的研究

通过单因素和正交试验 ,对米曲霉 3 0 42产氨基酰化酶摇瓶液态发酵条件进行优化。结果表明 ,较优培养基为 :麸皮 2 %,蛋白胨 1 5 %,玉米浆 0 5 %,酵母膏 0 1 %,KH2 PO4 0 2 %,无水MgSO4 0 1 %,吐温 80 0 0 5 %。酶活最高达到 1 2 5 8u/g(湿菌体 ) ,通过对培养条件的研究 ,最佳起始 pH 7.0、温度 2 6℃、装液量 1 0 0mL/L三角瓶。     

硫酸铵电解液添加剂对铅酸电池电化学性能的影响

采用循环伏安、线性极化和恒流充放电等电化学方法研究硫酸铵添加剂对铅酸电池正极、负极、板栅合金及电池电化学性能的影响.结果表明,适量(15～20 g/L)硫酸铵用作电解液添加剂的加入可以改善电极性能,增强板栅合金的耐腐蚀性,提高电池放电容量。     

亚硫酸铵法造纸蒸球应力腐蚀裂纹的检测与预防

本文针对近年来经常发生的亚铵法造纸蒸球内表面裂纹情况，介绍了对典型蒸球裂纹的检测和试验分析，确定了裂纹成因是应力腐蚀，进一步分析了蒸球壳体产生应力腐蚀的原因，提出防止应力腐蚀裂纹在定期检验，使用工艺和管理、设计制造等方面应采取的措施。     

引发剂对瞬时聚合PAM浆料性能的影响

以丙烯酰胺为单体,过硫酸铵-亚硫酸氢钠氧化还原体系为引发剂,通过瞬时聚合法制成固体聚丙烯酰胺浆料.研究了引发剂不同配比对浆料的水溶性、分子量、黏度、黏附力等性能的影响.研究表明,亚硫酸氢钠:过硫酸铵为2:5时,制备浆料的综合性能较佳.     

米曲霉As-W6脂肪酶的分离纯化及酶学性质研究

米曲霉As-W6的脂肪酶发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-75葡聚糖凝胶过滤层析纯化后得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为86.7倍,回收率为23.2%,相对分子质量为40.8 ku,酶学性质研究结果表明,该脂肪酶最适反应温度和最适p H分别为40℃和7,在40℃以下和p H6⁸之间有较好的稳定性;Ca2+、Mg2+和丙酮能够明显促进提高脂肪酶的活性,而Cu2+、Fe2+、Mn2+和SDS对其有显著抑制作用;当大豆油作为底物时该脂肪酶的酶活力最高,表明其对大豆油具有显著的特异性。      

米曲霉蛋白酶动力学特性的研究

研究了在不同底物浓度、温度和pH下米曲霉蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的动力学特性。在反应时间为10min时,最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为9。实验表明米曲霉蛋白酶水解酪蛋白生成酪氨酸的反应符合米氏方程,根据实验数据回归得到温度为40℃时的速度方程为r=0.243CS/0.0282+CS,反应速度与氢离子浓度的关系为r=lgCH++3.14013/0.19759+0.05484(lgCH++3.14013)+(lgCH++3.14013)2。该蛋白酶在50℃下的失活规律符合双指数模型,相对酶活力与时间的关系为a=0.82531e(-0.02169t)+0.17469e(-0.41914t)。在4～50℃的范围内,蛋白酶水解反应的活化能Ea为30.67kJ。还研究了不同化学组分对蛋白酶活力的影响,发现10mmol/L的H3BO3和Mg2+对该蛋白酶有一定的激活作用,而EDTA、SDS、Zn2+、Mn2+和Sn2+对蛋白酶有明显的抑制作用,10mmol/L的H2O2对该蛋白酶的抑制作用不明显。     

利用米曲霉制作腊八豆的研究

以酿造酱油用的米曲霉经紫外线诱变选育后，人工接种于煮熟的黄豆制作腊八豆。结果表明，接种量为熟豆重量的0．5％(孢了含量10^10个／g菌剂)，经32～35℃、48h前发酵便可得优质霉豆胚，加适量食盐、食用白酒及生姜等拌匀入坛进行10～15d的后发酵，便可获得品质极鲜美，食后余味甘甜的腊八豆，优于毛霉型腊八豆，更优于传统方法制作的腊八豆。比传统腊八豆的制作周期缩短近1个月，便于工业化生产。     

荔枝酒中游离SO2与总SO2的关系研究

果酒中所添加的SO2以游离态和结合态两种形态存在,其中游离SO2主要起抑制杂菌、抗氧化等作用.在荔枝酒中,不管总SO2含量多少,游离SO2含量均在4～8 mg/L.本文探讨了荔枝酒中游离SO2偏低的原因,并研究了通过添加N源营养素来增加游离SO2的含量.实验结果表明,添加磷酸氢二铵或硫酸铵,能将酒中游离SO2占总SO2的比率从4.0%提高到17.5%左右,在总SO2一定的情况下,增加了游离SO2的量,为生产中减"S"提供理论依据.     

牛磺酸对米曲霉蛋白酶活性影响的初步研究

将牛磺酸作为米曲霉生长的强化剂,对米曲霉生长阶段的发芽率、孢子量、蛋白酶活进行了研究。结果表明,添加一定浓度的牛磺酸对米曲霉的生长有促进作用,牛磺酸的添加量0.1%、温度30℃平板培养5 h,米曲霉发芽率为95.12%,比空白组提高了10.3%;牛磺酸添加量0.1%、温度30℃发酵培养基培养72 h,米曲霉孢子数为1.09×1010个/g,比空白组提高了60.3%,米曲霉中性蛋白酶活达到15548 U/g,比空白组提高了38.8%。添加牛磺酸提高了米曲霉的产酶能力,为牛磺酸作为功能因子添加于豆制品提供了理论依据。      

米曲霉发酵豆渣酶解液的研究

目的 对豆渣进行酶解发酵, 提高豆渣的利用率。方法 新鲜豆渣经过蛋白酶和纤维素酶协同部分水解后, 再利用米曲霉进行发酵, 生产食品添加剂。结果 正交实验确立的最优发酵条件为发酵温度为30 ℃, 接种量为4%, 在转速为130 r/min的摇床中发酵48 h。豆渣中52.87%的固形物变为可溶性成分, 约51.8%的蛋白质变为多肽。产物中主要含有多糖、可溶纤维和分子量在5000 Da以下的肽类。     

碳酰胺改善稻草浆漂白性能的应用实践

就碳酰胺[CO(NH2)2,俗称尿素]如何改善碱法(Soda-AQ法)稻草浆单段次氯酸盐漂白性能,节约漂剂,减少洗涤时间,提高成浆白度,改善成纸特性等进行了探讨.