龙须菜多糖硫酸化对免疫活性的影响

分别采用改良的氯磺酸- 吡啶法和HCl- 甲醇法对龙须菜多糖进行硫酸化修饰与脱硫处理,探讨不同硫酸基含量的天然多糖、硫酸化多糖和脱硫多糖对由环磷酰胺引起的免疫力低下小鼠免疫功能的影响。结果表明：与模型组比较,天然多糖对提高小鼠的脾脏指数(P ＜ 0.05)、巨噬细胞的吞噬活性(P ＜ 0.05)、脾细胞增殖转化能力(P ＜ 0.05)、NK 细胞杀伤活性(P ＜ 0.01)等作用最强,其次是硫酸化多糖,而脱硫多糖作用最弱;这3 种多糖都能显著促进免疫抑制小鼠的溶血素和溶血空斑的形成(P ＜ 0.01),其中天然多糖和硫酸化多糖优于脱硫多糖。显示龙须菜多糖能显著提高免疫力低下小鼠的免疫功能,但多糖中硫酸基含量与免疫作用非线性关系,增加或脱除天然多糖硫酸基其免疫活性均下降,尤其是脱除硫酸基后免疫活性显著降低。     

龙须菜纯多糖的制备及免疫活性研究

采用超滤分级、离子层析和分子筛凝胶层析方法,系统纯化龙须菜粗多糖,分离到多糖GCp F1–1B。经HPLC鉴定,GCp F1–1B为均一多糖,分子量为9.3×104 Da。紫外扫描显示其不含蛋白和核酸。高效阴离子色谱(HPAEC)分析发现,GCp F1–1B由半乳糖、果糖和葡萄糖醛酸组成,比例为14.28∶3.85∶1。生物活性研究显示,GCp F1–1B可以刺激小鼠脾淋巴细胞增殖作用和激活小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMMs)的作用,表明其具有良好的免疫调节活性。     

龙须菜中多糖含量测定方法的比较研究

采用热水浸提和乙醇沉淀的方法提取龙须菜多糖,然后分别运用蒽酮硫酸法和苯酚硫酸法测定多糖含量,比较两种测定方法得到数据之间的差异和准确性。结果表明,蒽酮硫酸法在20⁸0μg范围内线性关系良好（R2=0.9992）,苯酚硫酸法在10¹00μg范围内线性关系良好（R2=0.9993）;龙须菜多糖含量测定结果显示蒽酮硫酸法偏高于苯酚硫酸法,苯酚硫酸法结果稳定性、重现性较好,加样回收率为99.76%⁹9.97%,RSD为0.22%⁰.25%,此结果较优于蒽酮硫酸法。综上,蒽酮硫酸法和苯酚硫酸法均能测定龙须菜多糖含量,但相比较而言,苯酚硫酸法更为合理准确,在龙须菜多糖含量测定时可优先考虑苯酚-硫酸法。      

龙须菜多糖的提取及其免疫调节活性研究

本文采用水提法、酸提法和酶提法提取龙须菜多糖,比较了不同方法对提取率的影响,并测定了酸提法制备的龙须菜多糖的化学组成及免疫活性。结果发现:采用柠檬酸提取龙须菜多糖的提取率最高,为27.66±0.49%,为水提法的1.86倍;其产物多糖的总糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量以及硫酸基含量分别为62.24±1.09%、1.54±0.15%、6.25±0.72%和16.74±0.11%,未检出多酚类物质。此外,龙须菜多糖对RAW 264.7细胞具有显著的促增殖作用,并且能够显著地提高RAW 264.7细胞吞噬中性红的能力;且龙须菜多糖不仅能够提高光老化小鼠的胸腺指数和脾脏指数,还能降低小鼠血清白介素-10的含量,提高小鼠血清肿瘤坏死因子-α的含量,这些研究表明龙须菜多糖具有较强的提高小鼠免疫功能的能力,能够缓解光老化过程中的免疫抑制现象。     

龙须菜酸性多糖的非特异性免疫调节活性研究

本文从体外和体内两方面研究了龙须菜酸性多糖(GLSPs)对小鼠非特异性免疫的调节作用。结果显示,GLSPs在体外能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用且呈剂量依赖性,但是对小鼠脾NK细胞的杀伤活性未见显著影响;将GLSPs分别以200mg/kg·d和600mg/kg·d连续灌胃管理小鼠14 d,GLSPs能够显著提高小鼠脾NK细胞的杀伤活性,其中最大杀伤率近90%;能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用且与多糖剂量正相关,同时使小鼠白细胞和淋巴细胞略有增加但较空白组小鼠无显著差异,表明GLSPs对非特异性免疫具有显著的调节作用。     

盐酸水解——硫酸钡重量法测定硫酸酯化多糖硫酸基含量方法考察

对盐酸水解－硫酸钡重量法测定硫酸酯化多糖（SPS）中硫酸基含量进行了方法学考察。通过对测试样品水解时间，盐酸浓度，盐酸溶液用量，样品称重，重复性（精密度）及回收实验，表明称样量200－300mg，盐酸浓度为1mol/L，酸用量15ml，水解时间4h，按本方法的操作分析，所测得结果可靠，准确度均非常好。方法适用于硫酸酯化多糖及相关食品和健康食品中硫酸基含量测定。     

碱处理对龙须菜多糖抗氧化活性的影响

主要研究碱处理对龙须菜非琼胶多糖体外抗氧化活性的影响。水提经碱液处理及未经碱液处理后的2种龙须菜非琼胶多糖,寻找Sevage(氯仿:正丁醇=5:1)试剂除蛋白的最佳条件,通过分析粗多糖对·OH、O_2~-·的清除作用,卵黄脂质过氧化试验及小鼠红细胞氧化溶血试验探究2种提取条件所得粗多糖的抗氧化活性。4种抗氧化试验结果均显示,未经碱处理的多糖抗氧化效果较好,即碱处理降低龙须菜非琼胶多糖抗氧化活性。     

硫酸酯化枸杞多糖及其抗肿瘤活性研究

目的:通过硫酸酯化修饰枸杞多糖,并对比研究其体内外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法检测LBP_s对H_(22)肿瘤细胞的抑制率;建立H_(22)荷瘤小鼠模型,灌胃给药LBP_s,考察LBP_s对肿瘤细胞抑制率、对脾脏及胸腺的影响以及对血清中IL-2及TNF-α含量的影响。结果:LBP_s可显著抑制H_(22)肿瘤细胞增殖、提高免疫器官指数、提高血清中IL-2及TNF-α的含量,其活性优于未经修饰的LBP。结论:硫酸酯化修饰可显著提高枸杞多糖的抗肿瘤活性,该活性可能与免疫器官功能增强、IL-2及TNF-α释放增加有关。     

胡萝卜多糖硫酸酯化修饰及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取胡萝卜粗多糖,经Sevage法与木瓜蛋白酶相结合法除蛋白后,以DEAE纤维素柱层析分离纯化得到具有抗氧化活性的多糖组分。用浓硫酸法对其进行硫酸酯化修饰,经红外光谱比和硫酸钡比浊法定性定量分析多糖酯化率。研究结果表明:当硫酸取代度为18.4%,即硫酸酯化率为2.94时硫酸酯化胡萝卜多糖的抗氧化活性比未修饰多糖增加1.5倍。     

室温下龙须菜多糖提取工艺及免疫活性研究

本实验对室温下龙须菜多糖浸提工艺、分离纯化及多糖免疫活性进行研究。L9(34)正交试验结果显示,提取次数和提取时间是影响多糖得率的主要因素(p<0.05),最佳工艺为料液比1:20(m/V)、提取时间12h、提取次数3次,多糖得率为9.96%;蛋白去除实验结果显示：Sevag 法处理5 次效果较好,去除率达32%。免疫活性实验显示,室温下浸提多糖(GCp)刺激小鼠淋巴细胞增殖作用优于同浓度下采用高温提取工艺(100℃)和高压提取工艺(121℃)浸提多糖。采用冻融、超滤和Sevag 法对龙须菜粗GCp 进行纯化,获得GCp-1、GCp-2、GCpF1、GCpF2和GCp-S 五种多糖。免疫活性研究表明,6 种多糖均具有刺激淋巴细胞增殖作用,且表现剂量依赖性,其中GCp和超滤获得的多糖GCpF1、GCpF2 优于冻融多糖GCp-1、GCp-2 和除蛋白多糖GCp-S。     

硫酸多糖生物活性研究进展

硫酸多糖也被称为多糖的硫酸化衍生物,是硫酸根取代了多糖结构中单糖分子的部分羟基而形成的一类具有多种功能的物质,可以通过天然提取或硫酸化的结构修饰而得到。近年的研究证明硫酸多糖具有显著的抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗凝血等活性,对机体免疫系统有一定调控作用。作者对硫酸多糖生物学功能的近期研究进行了总结,并对后续研究进行了展望。     

灵芝多糖检测鉴定方法

灵芝多糖是灵芝真菌中的主要活性物质,具有多种生理功能,对灵芝多糖检验鉴定的深入研究将有助于控制产品质量及防伪。分析了国内外近年来对灵芝多糖的含量、多糖的组成、分子量检测及采用IR及1HNMR鉴定其结构的方法。     

核桃种皮多糖抑制大肠杆菌的研究

利用核桃种皮纯多糖WKPP-70-1-1,以大肠杆菌为供试菌,通过分析不同浓度下WKPP-70-1-1对大肠杆菌的作用,确定其最小抑制浓度MIC为400μg/mL.又通过对MIC下大肠杆菌的生长曲线的分析研究,确定WKPP-70-1-1对大肠杆菌的作用是抑制而不是杀死,而且其抑制时间集中在对数生长期,到一定时间WKPP...     

紫球藻多糖免疫调节作用初步探究

探究紫球藻多糖对体外免疫细胞免疫功能的影响。用不同浓度的紫球藻多糖刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为阳性对照,格里斯试剂(Griess)法检测细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)释放量,噻唑蓝(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法测定紫球藻多糖对RAW264.7细胞活力的影响,中性红法检测细胞的吞噬能力。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent,ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的分泌情况。结果表明:不同浓度紫球藻多糖能够促进NO的释放,增强巨噬细胞对中性红的吞噬能力,刺激TNF-α与IL-6的释放。紫球藻多糖浓度在12.5μg/mL～400μg/mL的范围内,对细胞无毒性。试验结果初步证明:紫球藻多糖对巨噬细胞RAW264.7具有免疫调节作用,这将为进一步开发应用紫球藻多糖奠定基础。     

扇贝性腺多糖提取物的抗氧化及免疫调节活性

通过酶解法制备扇贝性腺多糖提取物(SGP),研究其抗体外氧化及免疫调节活性。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼DPPH体系反应、Fenton反应和还原反应测定SGP的抗氧化活性;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定SGP 对活性氧叔丁基脂氢过氧化物(tBOOH)致细胞氧化损伤及淋巴细胞增殖活性的调节作用;分光光度法测定SGP 对补体活性的影响。结果表明：SGP具有DPPH自由基清除能力(IC50=9.92mg/mL)和羟自由基清除能力(IC50=7.31mg/mL)及还原能力(AC20=7.74mg/mL);0.2μg/mL的SGP可明显改善tBOOH致RAW264.7细胞的氧化损伤作用,还可显著提高脾淋巴细胞的增殖活性及补体经典途径活性。     

中药抗流感病毒活性研究方法发展现状

中药在流感治疗方面发挥着独特的优势,临床应用广泛.随着生命科学技术的发展及中药化学物质基础的深入研究,中药抗流感病毒活性和作用机制的研究方法 也在不断发展.本文综述了中药抗流感病毒活性体内外研究模型和分析技术发展现状,以冀为相关研究提供理论参考.     

海藻多糖生物活性研究

本文介绍了海藻多糖的结构和提取方法，综述了海藻多糖的多种生物活性，包括抗病毒，抗肿瘤，抗突变，抗氧化，调节免疫活性及其他一些功能，并对海藻的应用前景作了展望。     

核桃仁种皮多糖的提取及抑菌作用的研究

本文以0.25mol/L的NaOH-乙醇溶液作提取剂,从核桃仁种皮中提取多糖,提取液经去脂、去蛋白、醇析后得粗多糖WKPP-70。利用DEAE-Sephadex A-25凝胶柱和Sephadex G-75凝胶柱对粗多糖进行分离纯化,得纯多糖WKPP-70-1-1。通过紫外光谱分析证明其纯度,红外光谱分析显示其具有多糖类的特征吸收峰。抑菌试验表明,WKPP-70-1-1对大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、金黄葡萄球菌均有一定的抑制作用。     

大枣多糖抗氧化及抗炎活性的研究

本研究通过建立1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基、羟基自由基、还原力等4种体外模型研究大枣多糖的抗氧化活性;建立脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7模型研究大枣多糖的抗炎活性。实验结果表明,大枣多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的半抑制浓度IC50分别为0.9、2.8、1.1 mg/m L;总还原力为1.0时,对应的Vc和大枣多糖浓度分别为0.08 mg/m L和2.95 mg/m L,大枣多糖的抗氧化活性呈浓度依赖性。高剂量的大枣多糖能够显著降低RAW264.7细胞中炎症因子如环氧合酶-2(COX-2),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,表明大枣多糖具有较强的抗炎活性。大枣多糖可望作为抗氧化剂和抗炎制剂应用于功能性食品和医药工业。