全蝎白术白头翁组方发酵前后可溶性蛋白质分子量分析

通过Tricine-SDS-PAGE电泳法比较全蝎白术白头翁组斱収酵前后水溶性蛋白质相对分子量的变化。按照超声水提的最佳工艺,分别制备全蝎白术白头翁组斱(SAPZF)、全蝎白术白头翁组斱収酵物(SAPZFFW)的超声水提醇沉冻干粉。通过Tricine-SDS-PAGE电泳法对SAPZF、SAPZFFW醇沉物中的蛋白进行凝胶电泳分离。结果表明:12%T、3%C的Tricine-SDS-PAGE电泳图谱显示SAPZF醇沉物的蛋白主要出现了4个条带,相对分子量主要集中在130、70、50、35 kDa左右;SAPZFFW醇沉物的蛋白主要出现了3个条带,相对分子量分别集中在50、20、15 kDa左右。Tricine-SDS-PAGE电泳图谱显示収酵前后的全蝎白术白头翁中蛋白相对分子量大小具有显著性差别,収酵之后的蛋白质相对分子量较未収酵的变小。     

中药全蝎白术白头翁组合品发酵前后水提液不同截留分子量段的活性成分及体外抗肿瘤研究

比较全蝎白术白头翁组合发酵品(SAPZFP)与未发酵品(SAPZP)水提液不同截留分子量冻干粉活性成分及体外抗肿瘤活性的差异。分别测定各截留分子量段水溶性氨基酸、蛋白质、多糖的含量,并采用MTT法研究其对乳腺癌细胞株MCF-7的抑制作用。SAPZFP截留分子量5、5～10、10 kDa冻干粉对乳腺癌细胞株MCF-7的IC_(50)分别为0.854、0.315、0.071 mg·mL~(-1);SAPZP的分别为1.128、0.360、0.115 mg·mL~(-1)。SAPZFP截留分子量10kDa的抗肿瘤活性显著,球孢白僵菌双向固体发酵技术可显著增强本组合物的体外抗肿瘤活性。     

全蝎白术白头翁组合发酵品不同醇浓度提取物的活性成分分析及体外药理研究

评价全蝎白术白头翁组合发酵品(SAPZFP)不同醇浓度提取物的活性成分含量及体外抗肿瘤活性差异。分别测定SAPZFP不同醇浓度提取物的醇溶性总蛋白、总多糖、总黄酮的含量,并采用MTT法检测不同醇浓度提取物抑制肿瘤细胞体外增殖的能力。SAPZFP不同醇浓度提取物均具有体外抗肿瘤活性,其中75%醇提物抑制乳腺癌细胞株MCF-7、肺腺癌细胞株A549体外增殖的能力最强,IC50分别为0.066、0.022 mg·mL-1。综上所述,SAPZFP的25%、50%、75%醇提物均具有体外抗肿瘤活性,且75%醇提物效果最优。     

超临界萃取的海星内脏油成分分析及体外抗肿瘤活性研究

研究超临界萃取海星内脏油的化学成分组成及其体外抗肿瘤活性,初步探讨其发挥抗肿瘤药效的物质基础.采用超高效液相-飞行时间质谱联用仪(UPLC-QTOF-MS)及气相质谱联用仪(GC-MS)建立超临界萃取海星内脏油的化学成分轮廓谱,将样品分子离子或碎片离子分子质量信息与相关文献或数据库信息进行比对,鉴定化学成分;采用CCK...     

洋甘菊总黄酮体外抗肿瘤活性研究

采用CCK-8法研究了洋甘菊总黄酮对人肺癌细胞A549、人胃癌细胞AGS、人宫颈癌细胞HeLa及SiHa、人食管癌细胞Eca-109及TE-1、人肝癌细胞HepG2体外增殖的抑制作用,并采用流式细胞术检测了洋甘菊总黄酮对SiHa细胞周期分布及凋亡率的影响。结果表明,与正常对照组比较,洋甘菊总黄酮对7种肿瘤细胞增殖均有不同程度的抑制作用,其中对SiHa细胞的抑制作用最强,作用48 h的IC₅₀值为(97.74±4.02)μg·mL^-1;洋甘菊总黄酮低、中剂量组(25μg·mL^-1、50μg·mL^-1)干预SiHa细胞24 h后,细胞阻滞在G₀/G₁期,总凋亡率由5.88%±0.29%分别升至11.57%±0.27%、18.08%±1.63%,说明低剂量洋甘菊总黄酮可抑制SiHa细胞增殖,诱导SiHa细胞凋亡。     

吴茱萸碱的体外抗肿瘤活性研究

采用MTT法在不同的时间点检测了不同浓度的吴茱萸碱对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源HepG2肝癌细胞的抑制情况,探讨了吴茱萸碱的体外抗肿瘤活性。结果表明,吴茱萸碱在一定浓度下对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源HepG2肝癌细胞有明显的抑制作用,且随药物浓度的增大,抑制率逐渐增大,与正常组比较作用极其显著。吴茱萸碱作用24h时,对H22肝癌细胞的生长抑制作用较好,IC50值最小(17.49μg·mL-1);作用48h时,对S180肉瘤细胞的抑制作用相对较好,IC50值最小(17.54μg·mL-1);作用72h时,对HepG2肝癌细胞的抑制作用最好,IC50值最小(13.26μg·mL-1)。     

贺兰山紫蘑菇萃取物抗肿瘤活性研究

以贺兰山紫蘑菇为材料,研究石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物和水提物对乳腺癌231细胞的抑制效果,通过乙醇浸提以及有机溶剂萃取等步骤得到各有机相后,采用MTT法筛选各相萃取物抗肿瘤活性。结果表明:贺兰山紫蘑菇石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物对乳腺癌231细胞均有抑制作用,石油醚萃取物效果最佳,在浓度为0.225 mg/m L时抑制率可达96.99%。而水相提取物对癌细胞抑制作用较弱。     

藜芦胺类似物的合成及体外抗肿瘤活性研究

以黎芦属植物中含量丰富的甾体生物碱藜芦胺(Ⅰ)为原料,经结构修饰,共得到5种藜芦胺类似物Ⅱ~Ⅵ。经核磁共振谱、质谱确定化合物结构。以已知的Hedgehog信号通路抑制剂环巴胺为阳性对照,采用人胃癌细胞SGC-7901和人胰腺癌细胞Aspc-1进行体外抑制肿瘤细胞增殖活性筛选。结果表明,化合物Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ的抑制肿瘤细胞增殖活性优于环巴胺。初步构效关系研究表明,在藜芦胺的哌啶环上引入烟酸及对硝基苯甲酰基团,可显著提高其抗肿瘤活性。     

发酵蜣螂粉乙醇提取物抗肿瘤活性研究

目的:研究蜣螂发酵产物经乙醇回流提取对乳腺癌MCF-7细胞、肺腺癌A549细胞的抑制效果。方法:采用新型固体发酵方式对蜣螂粉进行深层加工,再经乙醇回流提取旋蒸后,用MTT法测定不同浓度的发酵蜣螂醇提物对乳腺癌MCF-7细胞和肺腺癌A549细胞的抑制率。结果:发酵蜣螂醇提物对MCF-7和A549具有较好的抑制作用,且作用强度与药物浓度成正比。其IC50分别为1.51和0.94 mg/mL。结论:蜣螂发酵产物醇提物具有一定的抗肿瘤效果,为临床用药提供新思路。     

响应面法优化中药乌贼墨酶解工艺及体外抗肿瘤活性研究

以水溶性总蛋白及总多糖双指标优化中药乌贼墨酶解法提取工艺并进行了体外抗肿瘤活性研究。以中药乌贼墨总蛋白、总多糖为指标,采用单因素实验,分别考察酶解时间、加酶量和酶解p H值对双指标的影响,在此基础上,应用响应面试验设计法优化中药乌贼墨酶解提取工艺,最后在最佳酶解提取工艺的条件下,采用MTT法对酶解物冻干粉进行体外抗肝癌Bel-7402细胞株的实验研究。结果最佳工艺条件为:酶解时间4.50h,加酶量为2500u,pH为10.6;在此条件下,乌贼墨水溶性总蛋白的得率最高为38.34%,水溶性总多糖的得率最高为12.26%。最佳条件下制得的乌贼墨酶解液对肝癌Bel-7402细胞株有一定的抑制作用,抑制率达到70%～80%。通过响应面法优化乌贼墨酶解工艺条件,使水溶性总蛋白及总多糖得率增加,为乌贼墨活性成分及抗肿瘤研究奠定基础。     

不同弹性蛋白酶酶活力条件下野生与养殖全蝎活性成分含量及体外抗肿瘤实验的对比研究

研究了弹性蛋白酶酶活力对野生与养殖全蝎活性成分含量及体外抑制肿瘤细胞生长的影响,筛选了弹性蛋白酶的最佳用量。依据全蝎混合酶解工艺中最佳提取条件,在弹性蛋白酶酶活力分别为2000、1000、400、200、20和0 U的条件下,分别测定野生与养殖全蝎中蛋白质和糖胺聚糖的含量及对肺腺癌(A549)细胞的抑制率。结果养殖全蝎的蛋白质含量显著高于野生的,而糖胺聚糖含量则显著低于野生的;养殖全蝎对肺腺癌细胞的抑制效果高于野生全蝎的抑制效果,且当弹性蛋白酶的酶活力为200U时,养殖全蝎对A549细胞的抑制效果最佳,IC_(50)值为0.331 mg/mL。养殖全蝎对肺腺癌细胞具有较高的抑制作用,弹性蛋白酶的最优酶活力为200 U。     

野芹菜中原白头翁素内酯类活性物质超声波萃取研究

通过4因素3水平的正交实验,确定了超声波萃取野芹菜中原白头翁素内酯化合物的最佳工艺条件是:用20倍量的75%乙醇超声波萃取3次,每次25 min.     

Box-Behnken优化微波萃取桂花果皮多酚提取工艺及体外抑制酪氨酸酶活性研究

桂花作为我国传统名花,具有观赏和绿化的作用,但是果实一直没有被综合开发利用.为此,在单因素研究基础上,采用响应面中心组合设计,以微波功率、提取时间、乙醇浓度为因素,优化微波萃取桂花果皮多酚最佳工艺.结果表明:微波功率600 W,提取时间32 min,乙醇浓度63％,多酚提取量在40.58 mg/g,预测值为40.61 ...     

大黄酸酯类衍生物的合成及体外抗肿瘤活性研究

以天然产物大黄酸为先导化合物,通过酯化反应合成了10个大黄酸酯类衍生物,对于位阻较小的醇以SOCl_2作催化剂,合成了大黄酸甲酯、乙酯和正丁酯;对于位阻较大的醇以DCC作脱水剂、DMAP作催化剂,合成了大黄酸异丙酯、异丁酯、异戊酯、苄酯、2-苯乙醇酯、2-氯乙醇酯,并通过熔点、IR和~1H NMR对目标产物的结构进行了表征,其中5个化合物未见文献报道。通过MTT法对部分目标产物抑制人宫颈癌细胞Hela活性进行了体外评价,结果表明:化合物2对Hela具有较高的抑制活性,在浓度为100μg·mL~(-1)时抑制率为70%。     

银可叶活性成分萃取工艺的研究

采用ψ（乙醇）＝７０％的乙醇回流法和超临界ＣＯ２萃取法提取银杏叶中的活性成分,并用定性、定量的方法测定了银杏叶提取物中活性成分及其质量分数,结果表明：两种方法萃取的物质是相同的。ψ（乙醇）＝７０％的乙醇热回流法提取率为２．５６％。总黄酮质量分数为２７．１％;超临界ＣＯ２萃取法提取率为３．９５％。总黄酮质量分数为３５．２８％。超临界ＣＯ２萃取法有着明显的优越性。     

银杏叶活性成分萃取工艺的研究

采用 φ(乙醇 ) =70 %的乙醇热回流法和超临界CO2 萃取法提取银杏叶中的活性成分 ,并用定性、定量的方法测定了银杏叶提取物中活性成分及其质量分数 ;结果表明 :两种方法萃取的物质是相同的。φ(乙醇 ) =70 %的乙醇热回流法提取率为 2 5 6 % ,总黄酮质量分数为 2 7 1% ;超临界CO2 萃取法提取率为 3 95 % ,总黄酮质量分数为 35 2 8% ,超临界CO2 萃取法有着明显的优越性。     

壁虎不同部位红外光谱分析及体外抗肿瘤活性的研究

研究壁虎不同部位红外光谱分析及体外抗肿瘤活性。采用红外光谱法对壁虎头、身、尾、足、全体粉末进行分析测定。采用MTT法测定壁虎水提液对人肺腺癌A549细胞的抑制作用。红外图谱显示壁虎不同部位均含有大量的蛋白质和脂类物质,其中足部蛋白质、尾部脂类相对含量较高。壁虎各部位对A549细胞均有一定的抑制作用,其中足部最明显。壁虎各部位均有抗肿瘤作用,其中足部最强,可能与其蛋白质相对含量较高有关。     

全蝎酶解液超滤物对三种细胞抗肿瘤活性比较研究

目的:比较全蝎酶解液10kDa分子量段超滤物对喉癌Hep-2、肺腺癌A549、乳腺癌MCF-7三种细胞的抗肿瘤抑制作用。方法:根据张盼盼~([1])等人方法进行酶解,经过10kDa超滤膜滤过,采用MTT法探究不同浓度超滤物对三种癌细胞的抑制作用。结果:药物对喉癌Hep-2的抑制作用比对肺腺癌A549的抑制作用强,在实验设置浓度内药物对乳腺癌MCF-7的抑制作用先增强后降低。     

芥酸环己酯的微型有机合成及体外抗肿瘤活性研究

运用微型有机合成技术,以芥酸和环己醇为原料、浓硫酸为催化剂合成芥酸环己酯,采用柱层析分离纯化,红外光谱IR、氢核磁共振谱1H-NM确证结构;通过观察芥酸环己酯体外对Tca8113舌癌细胞的生长状况的影响,研究芥酸环己酯对Tca8113舌癌细胞的杀伤作用.结果表明,采用微型合成法能够快速、方便地合成出高级不饱和脂肪酸酯,芥酸环己酯在500 μg/mL以上时对Tca8113舌癌细胞具有明显杀伤作用.     

藤黄酰甘氨酸的合成及体外抗肿瘤活性测试

以藤黄酸和甘氨酸甲酯为原料,采用N-乙基-N-二甲胺基丙基碳二亚胺(EDCI)法合成藤黄酰甘氨酸甲酯,再经水解得到藤黄酰甘氨酸。目标化合物的化学结构经红外光谱、核磁共振氢谱及质谱确证。考察了反应溶剂、反应温度、反应液pH值三个因素对水解反应产率的影响,优选出最佳合成工艺。最佳合成工艺为:反应溶剂为丙酮-水体系、反应温度25～30℃、反应液pH值为10～11。藤黄酰甘氨酸收率达70%(以藤黄酸计)。采用溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法测试目标物的体外抗肿瘤活性,结果表明,藤黄酸酰甘氨酸具有很好的抗肿瘤作用。