蜀葵子生药学检测与芦丁、山奈素和槲皮素的含量测定

依据《中国药典》(2015版)对蜀葵子进行生药学检测,并新建了蜀葵子中芦丁、山奈素和槲皮素的薄层色谱和高效液相色谱检测方法。结果表明,对比10批蜀葵子药材,其横切面有木栓层细胞数列,4～7束维管束排列成环带,外被大量非腺毛;10批蜀葵子中芦丁、山奈素和槲皮素的R_f值均与标准品一致,且斑点清晰。蜀葵子中芦丁、山奈素和槲皮素的平均含量分别为0.617 mg·g~(-1)、0.034 mg·g~(-1)和0.033 mg·g~(-1);线性范围分别为2.55～206.67μg·mL~(-1)(R=0.9993)、2.38～199.33μg·mL~(-1)(R=0.9994)和2.88～233.33μg·mL~(-1)(R=0.9997);精密度RSD(n=6)分别为0.263%、0.290%、0.405%;平均加标回收率分别为99.86%(RSD=1.83%)、100.72%(RSD=2.03%)和105.91%(RSD=1.87%)。为蜀葵子药材质量控制标准提升奠定了基础。     

甘草黄酮的提取工艺优化、含量测定及体外抗氧化活性研究

以95%乙醇为提取溶剂提取甘草黄酮,以提取率为评价指标,采用响应面法优化提取工艺;以芦丁为对照品,采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定不同产地甘草黄酮含量;通过DPPH自由基清除反应,比较不同产地甘草黄酮的体外抗氧化活性。结果表明,醇提法提取甘草黄酮的最优工艺条件为:提取温度86.7℃、提取时间4.0 h、液料比80.0∶1.0(mL∶g);在此工艺条件下,甘肃、新疆、内蒙古的甘草黄酮含量分别为18.22 mg·g~(-1)、17.75 mg·g~(-1)、16.82 mg·g~(-1),其对DPPH自由基的清除率分别为63.82%、62.74%、51.41%;3个产地的甘草黄酮的含量及体外抗氧化活性大小顺序均为:甘肃新疆内蒙古。该结论可作为甘草原产地鉴别及质量评价的参考依据之一,为甘草药材的开发利用提供帮助。     

HPLC法测定红参中人参皂苷Rg1的含量

建立红参药材中人参皂苷Rg1的含量测定方法。利用高效液相色谱(HPLC)法测定红参中人参皂苷Rg1的含量,采用Ulitimate XB-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相∶乙腈-水(23∶77);柱温:室温;流速:0.7 m L·min-1;检测波长:203 nm;进样量为10μL。人参皂苷Rg1的线性回归方程为A=438355.8C-1328.9(r=0.9999)。人参皂苷Rg1在0.1~5μg范围内呈良好的线性关系。人参皂苷Rg1的平均回收率为103.6%,RSD为1.581%。采用此法测定红参中人参皂苷Rg1的含量,准确可靠,可用于该药材的质量控制。     

HPLC法测定益真健脑丸中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量

目的 采用HPLC对益真健脑丸中西洋参药材3种主要成分人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁进行含量测定。方法 采用C₁₈色谱柱，流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)，梯度洗脱，检测波长203nm，流速1.0mL·min^-1，柱温40℃。结果 人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁分别在2.00～20.00μg·m L^-1、4.00～40.00μg·m L^-1、10.00～100.00μg·m L^-1浓度范围内线性关系良好。结论 该方法简单、稳定，可用于益真健脑丸中3种人参皂苷的含量测定。     

通脉降脂咀嚼片质量标准提高

[目的]对原有通脉降脂咀嚼片质量标准进行提高。[方法]采用HPLC法测定处方中三七的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量。[结果]三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1进样量分别在0.238~2.380μg、0.788~7.880μg、0.542~5.420μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为:100.68%、100.06%、99.57%,RSD分别为0.38%、0.50%、0.69%,(n=9)。[结论]本方法结果准确,重现性良好,可用于通脉降脂咀嚼片的药品质量控制。     

复方参蛭胶囊的质量标准研究

采用TLC法对复方参蛭胶囊中的人参、黄芪、红曲、陈皮进行定性鉴别,采用HPLC法测定制剂中人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1的含量。结果表明,人参、红曲、黄芪、陈皮的TLC鉴别专属性好;人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1检测进样质量的线性范围分别为49.93～499.3、47.22～472.2、50.87～508.7μg/mL,精密度、稳定性、重复性试验的RSD2%(n=6),平均加样回收率分别为100.11%、100.19%、100.28%,RSD2%(n=9)。研究建立的方法专属性强,简便易行,结果准确可靠,可作为复方参蛭胶囊的质量控制方法。     

人参柔顺洗发水中人参皂苷的鉴别和含量测定

建立了人参柔顺洗发水中人参皂苷Rg1,Re和Rb1的鉴别和含量测定方法.采用薄层色谱(TLC)法,以氯仿-甲醇-水(体积比2∶1∶0.1)为展开溶剂,对人参皂苷进行鉴别;通过高效液相色谱(HPLC)法,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,测定洗发水中人参皂苷的含量.结果显示TLC法能同时鉴别人参皂苷Rg1,Re和Rb1;HPLC法中人参皂苷Rg1,Re和Rb1的线性回归方程分别为Rg1∶y=246 683x -7 070.6,r=0.999 9;Re∶y=388 224x - 11 320,r=0.999 9;Rb1∶y=216 383x+3 644.9,r=0.999 9;平均回收率分别为99.69％,97.39％和98.05％,RSD值分别为1.62％,1.75％和0.68％.     

高效液相色谱法同时测定三七提取物中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1含量

建立了高效液相色谱法同时测定三七提取物中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1含量的方法。采用高效液相色谱仪,Agilent ODS-C18(5μm,4.6mm×250mm)液相色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为1.0 mL/mim,检测波长为203 nm,柱温为35℃。结果表明,三七皂苷R1在度15.29~244.60 mg/L的范围内(r=0.9998),人参皂苷Rg1在14.30~228.90 mg/L范围内(r=1.0000),人参皂苷Rb1在13.13~210.11 mg/L范围内(r=1.0000),线性关系良好。三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1平均加标回收率分别为99.54%、101.61%、102.99%,峰面积相对标准偏差RSD(n=6)分别为1.67%、0.93%、0.92%。该方法简便、准确,重现性好,可以对三七提取物中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1进行定量分析。     

槐花米中清除自由基活性成分的提取及其性能研究

用体积分数75%的乙醇提取了槐花米中具有清除自由基活性的粗提物,然后用碱提酸沉法从槐花米中提取了芦丁,并制备了芦丁的水解产物槲皮素.测定了不同质量浓度的粗提物、芦丁和槲皮素对DPPH自由基的清除能力,它们对DPPH自由基均有良好的清除作用,清除能力大小顺序为槲皮素＞粗提物＞芦丁＞BHT;0.5 mg/mL的槲皮素、芦丁、粗提物对DPPH自由基的最高清除率分别为83.75%、80.16%、80.89%;而1.0mg/mL的槲皮素最高清除率可高达88.95%.     

人参发酵液的活性物质分析及其功效研究

为开发人参发酵液在化妆品领域的应用,使用食用级黄酒酵母发酵人参并测定发酵液中多糖、蛋白质和人参皂苷的含量。通过DPPH自由基清除实验和羟自由基清除实验测定其抗氧化能力,并将其作用于成纤维细胞,采用MTT细胞毒性试验评估其对成纤维细胞的增殖作用。用荧光定量PCR检测12种炎症相关的基因在人参发酵液作用的永生化表皮细胞中的表达量,评估人参发酵液的抗炎症效果。结果表明,人参发酵液富含多糖,质量浓度为6.982 g/L,蛋白质和人参皂苷的质量浓度分别为1.039和0.045 g/L。体积分数为10.49%的人参发酵液可清除50%的DPPH自由基,19.62%的人参发酵液可清除50%的羟自由基;体积分数为0.01%的人参发酵液培养的成纤维细胞存活率甚至超过100%,可有效促进细胞增殖;人参发酵液能引发炎症反应,并在短时间内激活并募集白细胞到炎症部位发挥免疫功能。     

柚皮黄酮抑制硝化和氧化作用的研究

以抑制过氧亚硝酸根硝化酪氨酸生成3－硝基酪氨酸评价了柚皮黄酮的抗硝化作用;以Fenton反应产生羟基自由基体系和邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基体系,用紫外可见分光光度法测定了柚皮黄酮对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除效果。结果表明．柚皮苷的抗硝化作用较强,而芦丁和橙皮苷没有明显的抗硝化作用;3种柚皮黄酮清除羟基自由基的效果在μg·mL^-1水平就已经比较显著（超过50％）．且显示出浓度依赖性．作用大小依次为;柚皮苷〉橙皮苷〉芦丁13种柚皮黄酮在μg·mL^-1水平清除超氧阴离子自由基的作用大小依次为：芦丁〉柚皮苷〉橙皮苷。     

HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量

目的:采用HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1含量。方法:采用SGE protecol C18(5μm,4.6×250mm)色谱柱,流动相为乙腈—水梯度洗脱(0~12min,19∶81;12~60min,19~36∶81~64),检测波长为203nm,流速1.0mL/min,进样量20μL。结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1分别在25.625~430mg/L、26.875~410mg/L、10.625~170mg/L范围呈线性,相关系数r分别为0.9999、0.9998、0.9996;该方法重复性及回收率均符合要求。结论:本法用于同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量,具有简便、准确、高效等特点。     

人参香皂中人参总皂苷含量的测定

采用超声提取法对人参香皂中的人参总皂苷进行提取,溶剂萃取法对人参总皂苷进行纯化,用香草醛-高氯酸比色法对纯化后样品进行了人参总皂苷含量的测定,检测波长为540 nm。实验结果表明,香草醛-高氯酸比色法在0.02~0.24 mg内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为96.04%,RSD为2.29%(n=5)。所测6种人参香皂中人参总皂苷的质量分数为1.72~9.66 mg·g-1。     

糙米黄酮的提取及其抗氧化作用的研究

本实验采用乙醇浸提法提取糙米黄酮。首先考察溶剂浓度、料液比、提取温度、提取时间等因素对提取率的影响。在单因素试验的基础上,根据正交试验设计原理,采用极差分析法,对提取条件进行优化。确定糙米黄酮的最佳提取工艺条件为:提取温度60℃,提取时间6 h,料液比为1∶40,乙醇浓度为60%,在此条件下糙米黄酮的提取量为0.556 mg/g。最后,以邻二氮菲-亚铁化学法测定其抗氧化作用。和VC对比,考察糙米黄酮对羟自由基(·OH)的清除能力,结果表明糙米黄酮对羟自由基(·OH)具有较强的清除能力,且在同质量浓度下,糙米黄酮对羟自由基(·OH)的清除能力大于VC对羟自由基的清除能力。     

红旱莲不同部位槲皮素和芦丁的含量测定

建立了红旱莲中槲皮素和芦丁的高效液相色谱法。采用C18(5μm,4.6mm×250mm)柱、以CH3OH∶H2O∶CH3COOH(50∶40∶2)为流动相、254nm为检测波长、流速为1.0mL·min-1、在柱温30℃时对红旱莲不同部位槲皮素和芦丁的含量进行检测。结果表明:槲皮素的线性范围为0.14~1.20μg,相关系数r=0.998 9,平均回收率为95.1%,RSD=1.3%;芦丁的线性范围为0.16~0.88μg,相关系数r=0.998 2,平均回收率为98.7%,RSD=1.6%。该方法简便、准确,适合于对红旱莲中槲皮素和芦丁两种有效成分的检测。     

RP-HPLC-UV法测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量

目的采用RP-HPLC-UV色谱法同时测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量影响。方法采用色谱柱:依利特C_(18)柱(Sinochrom ODS-BP,4.6mm×200mm,5μm),流动相采用A为乙腈,B为水,梯度洗脱,流速为1.0mL·min~(-1),进样量为10μL,检测波长为203nm,柱温25℃,理论塔板数大于6000。结果在100min内,人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1分离度良好,进样的含量与色谱峰面积具有良好的线性关系,人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的线性方程分别为:y=0.5752x-0.0961 (r=0.9994)、y=1.3157x-0.2006(r=0.9998)、y=0.6637x+0.2091(r=0.9997),人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的平均加样回收率分别是:101.08%(RSD=1.77%)、99.40%(RSD=2.55%)、100.11%(RSD=2.83%)。结论本文建立的含量测定方法快捷稳定可靠,加样回收率高,适用于清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量测定,为清心莲子饮的质量评价提供了理论支持和实验依据。     

紫荆花黄酮类化合物体外抗氧化活性研究

采用Fenton反应体系产生羟自由基和邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基,研究了紫荆花黄酮类化合物对两者的清除作用。并以芦丁为对照品,测定了其总黄酮含量。结果表明:紫荆花中总黄酮含量为9.094 mg/g。紫荆花黄酮类化合物对羟自由基和超氧阴离子自由基均有清除作用,其浓度的添加量在试验范围内与其抗氧化活性呈正相关。紫荆花黄酮类化合物对羟自由基半数清除量(IC50)为127.822μg/mL。     

高效液相色谱法测定紫丹活血胶囊中人参皂苷Rg1的含量

建立高效液相色谱法测定紫丹活血胶囊中人参皂苷Rg1的含量。色谱条件:色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150×4.6 mm,5μm);流动相︰乙腈-水(19︰81);流速:1.0 m L/min;检测波长:203 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。线性范围为0.17875~0.89375 mg/m L(r=0.9999),加标平均回收率为99.03%,RSD为0.61%。本方法准确度高、精密度高、重复性好、简捷易操作,可以作为紫丹活血胶囊中人参皂苷Rg1含量的测定方法。     

弯萼金丝桃总黄酮提取及抗氧化、降糖活性

摘要：为获得弯萼金丝桃总黄酮（TF）最佳提取工艺及抗氧化活性、降糖活性,探究5种提取工艺(超声辅助提取、酸解提取、酶解提取、热水提取、热醇提取) 对TF提取量的影响,通过单因素和响应面实验优化提取工艺。采用高效液相色谱(HPLC)测定并分析7种主要黄酮苷元的分布及含量,并进一步研究TF与体外抗氧化活性（DPPH?清除能力、ABTS自由基清除能力、羟基自由基清除能力、还原能力）的相关性及对α-葡萄糖苷酶的体外降糖能力。结果表明,超声辅助提取TF提取量最高。响应面优化最佳提取工艺为：温度68 ℃,时间23 min、乙醇体积分数24 %、液料比63:1 mL/g,在该条件下,TF提取量为34.85 mg RT/g（以每克弯萼金丝桃中黄酮类化合物相当于芦丁RT质量表示）;高效液相色谱法分别鉴定出TF中7种主要黄酮类化合物,其中TF中含量最高的黄酮化合物为槲皮素-3-O-洋槐糖-7-0-鼠李糖苷、槲皮素,分别为3.897 mg/g、2.874 mg/g;TF质量浓度与DPPH?清除能力、ABTS自由基清除能力、羟基自由基清除能力、还原能力呈显著正相关,对α-葡萄糖苷酶的降糖能力可达到92.6 %。     

不同干燥方式对人参配方颗粒的质量影响研究

目的：考察不同干燥方式对人参配方颗粒质量的影响。方法：采用喷雾干燥、冷冻干燥、鼓风干燥和真空干燥法结合干法制粒技术制备人参配方颗粒，以国家药典委员会公示的人参配方颗粒质量标准为依据，以水分、粒度、溶化性、浸出物、重金属及有害元素、薄层色谱(TLC)、含量测定和特征图谱为评价指标，比较4种人参配方颗粒的质量差异。结果：4种人参配方颗粒的人参皂苷Rg₁+人参皂苷Re和人参皂苷Rb₁含量范围分别为0.789%～0.812%、0.631%～0.664%，特征图谱均呈现8个特征峰，相似度均为1.000，水分、粒度、溶化性、浸出物和薄层鉴别均无明显差异，各检验项均符合要求。结论：不同干燥方式的人参配方颗粒质量无明显差异，可为人参配方颗粒的工业化生产提供依据。