鸡烟碱样胆碱能受体与[~(125)I]-α-银环蛇毒素结合动力学的研究

从鸡脑及骨骼肌中分离提取烟碱样胆碱能受体,用[~(125)I]-α一银环蛇毒素进行受体-配体结合动力学研究。结果表明,这种结合呈二级动力学反应性质。脑视叶中提纯的受体和骨骼肌中分离的受体,K_D值分别为129pM及4pM(25℃)。烟碱、箭毒碱等可抑制受体-配体的结合反应并测得各自的抑制常数及Hill系数。     

~(125)I-6-酮-前列腺素F_(1α)放射免疫分析试剂盒的研制

研制了~(125)I标记的PGI_2稳定的代谢产物6-酮-PGF_(1α)RIA试剂盒。以碳化二亚胺法将6-酮-PGF_(1α)与BSA联接免疫家兔制备抗血清,其效价为1:32000,平衡常数为6.26×10~9L/mol,与其它前列腺素的相对百分交叉反应<1%。用氯胺T法制备~(125)I-组织胺-6-酮-PGF_(1α)标记物,比放射性活度>14.8MBq/μg(400μCi/μg),最高结合率>80%,二月内无脱碘现象。放免测定按常规法,最低检出值为2,2pg/管,检出率为97.2～102.3%,精密 度为6.62%,批内和批间C.V.分别为7.17、8.41%,Cerceo“效点系统”评分为31分,属优良。直接测定健康成人血浆6-酮-PGF_(1α)浓度为22.9±6.3pg/mL。     

~(125)I-神经生长因子的制备及其药代动力学研究

用氯胺T法制备了^125I－神经生长因子（^125I－NGF），放化纯度大于95％。经静注和肌注两种途径并采用十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶（SDS－PAGE）电泳法测定了小鼠血浆中NGF的浓度。研究结果表明，静注^125I－NGF后的小鼠体内代谢符合二房室分布模型；胴注^125I－NGF小鼠体内代谢符合－房屋分布模型。按剂量25μg/kg静注^125I－NGF后，测得消除相半衰期（t1/2（β）为3．65h。按剂量75，25，10，3．3μg/g肌注^125I－NGF，测得消除相半衰期（t1／g（β））分别为1．79，2．25，2．30，3．24h，平均达峰时间（tmax）为0．58h，平均血浆清除率（CLs）为0．37L／（h.kg），表现分布容积（Vd )为1．18L／kg，体内平均滞留时间（tr）为2．78h。     

~(131)I-甲苯胺蓝的制备

~(131)I-甲苯胺蓝对早期食管癌进行体外定位检测是一个有效的方法。本文采用一种简易的方法制备了~(131)I-甲苯胺盐,并经小白鼠口服试验表明产品无毒,胰脏、甲状旁腺和肾脏中有少量浓集,经胃、小肠大量排出,十二小时后,各脏器均无放射性。合成路线如下:     

~(125)I-DNA的制备

~(125)I-DNA是个重要的标记化合物,在生物学、免疫学、病理学和某些疾病的临床诊断、愈后观察等方面都具有十分重要的意义。因此,寻找简便的方法制备~(125)I-DNA是急需解决的问题。最初,人们用一氯化碘法制备~(125)I-DNA,需把DNA转化成溶于有机溶剂的盐,从而导至DNA降解,影响了产品质量;继后采用N-典丁二酰亚胺法制备~(125)I-DNA,但~(125)I-DNA的比放射性很低。近期,人们采用生物标记法即~(125)I-脱氧尿嘧啶核苷(~(125)I-UdR)由大肠杆菌转化生成~(125)I-DNA。用这种方法制得的~(125)I-DNA具有较好的生物活性和纯度,其缺点是操作十分繁杂,~(125)I的利用率低,~(125)I-DNA的比放射性也很低。另外,还用三氯化铊法制备~(125)IDNA,虽然方法简便,~(125)I-DNA的比放射性也较高,但是三氯化铊不稳定,必须新鲜配制,使用十分不便。本文采用三氧化二铊制备~(125)I-DNA,克服了上述缺陷。~(125)I利用率达30～60％,~(125)I-DNA的比放射性达10μCi/μg,放射性杂质小于1％。方法十分简便,利于推广使用。     

~(125)I-白蛋白融合干扰素α2b大鼠体内排泄研究

为研究125I-白蛋白融合干扰素α2b大鼠体内排泄行为,利用氯胺-T法制备了125I-白蛋白融合干扰素α2b,其标记率为82.72%,放化纯度为95.53%,放射性比活度为0.26MBq/μg。体外WISH/VSV系统抗病毒活性比较分析表明,白蛋白融合干扰素α2b和125I-白蛋白融合干扰素α2b具有相近的抗病毒活性。SD大鼠皮下注射125I-白蛋白融合干扰素α2b后,0～6、6～12、12～24、24～48、48～96、96～192和192～300h7个不同时段的尿、粪的放射性分析结果表明,125I-白蛋白融合干扰素α2b主要通过肾脏排泄,部分可通过粪便排泄,300h时尿、粪中平均累积排泄率分别为80.10%和16.00%;0～1、1～2、2～4、4～6、6～12、12～24和24～30h7个不同时段的胆汁的放射性分析结果表明,125I-白蛋白融合干扰素α2b也可通过肝脏代谢后经胆汁排泄,但这不是它的主要排泄途径,30h时,胆汁中的平均累积排泄率仅为1.61%。     

~(125)I-白蛋白融合干扰素α2b大鼠体内分布研究

采用氯胺-T法对白蛋白融合干扰素α2b进行125I标记,PD-10柱纯化,三氯醋酸沉淀法测定放化纯;体外以WISH/VSV系统比较白蛋白融合干扰素α2b和125I-白蛋白融合干扰素α2b的抗病毒活性;SD大鼠皮下注射125I-白蛋白融合干扰素α2b,分别于给药后0.5、2、6、24、48、90、180、300 h放血处死,取血和相关脏器,称重并测定放射性,计算每克脏器放射性占注入量的百分率(%ID·g-1).结果显示,氯胺-T法制备的125I-自蛋白融合干扰素α2b标记率为82.72%,放化纯95.53%,放射性比活度为0.26 MBq/gg;抗病毒活性比较结果表明标记前后的生物学活性几乎无变化;皮下注射大鼠体内分布研究表明,125I-白蛋白融合干扰素α2b在血中于6 h达高峰,消除缓慢,未见特异性组织或器官的浓聚.     

~(125)I-苯妥英放免分析测定盒的质量控制

我们使用了自己生产的~(125)I-苯妥英放免测定盒及卫生部药检所的苯妥英质控血清进行质量控制的实验。计算了十六批测定数据的内质量控制的各质量控制数值:平均批变异系数(ABCV),RER,精密度图,剂量反应曲线的r、a、b及ED值,并用Rodbard介绍的方差分析法计算批内、批间精密度,最后作了质控图及2-样本youden图。以此评价批内及批间漂移,检定苯妥英放免药盒的质量并为使用该药盒的临床实验室提供质控参考数值。这些方法     

~(125)I-血栓烷B_2放射免疫分析的总结

报告了~(125)I-TXB_2放射免疫分析法。将TXB_2-牛血清白蛋白联结物免疫家兔产生抗TXB_2抗体,用氯胺T法制备TXB_2-组织胺-~(125)I示踪剂。抗体效价为1:20,000;结合常数为3.9×10~9L/mol;放射免疫分析的精密度为6.5%:最小检出值为10pg/mL。健康成人血浆正常值为135.99±81.80pg/mL。本法具有直接、快速、简便、可靠与费用低廉等优点。     

~(125)I标记甲状腺素的制备

一、前言在四十年代初,就有人用放射性碘标记甲状腺素,当时都采用生物合成法和化学合成法。此后有人用同位素交换法标记甲状腺素。由于这种方法简便、易行,因而进行过不少研究工作。目前应用同位素交换法标记甲状腺素和它的类似物是相当广泛     

~(125)I-甲_2巨球蛋白在小白鼠体内的分布

我们已经将从人血中提取的甲_2巨球蛋白(α_2M)制剂应用于治疗各种晚期的放射性皮肤或粘膜溃疡,取得了甚为满意的结果,疗效可达85％以上。鉴于α_2M在人体内的含量极为恒定,作为药物应用而进入体内的此种外源性α_2M,它们在体内的吸收、分布和排出等情况是人们所关注的,为此特进行如下动物实验,为临床应用提供资料。     

~(125)I-心得静的标记及β-肾上腺素能受体的结合试验

本文报道了用生物作用最强的β-受体阻断剂(一)心得静作配基,用~(125)I标记制备高亲和力和高比活性的放射配基。     

辐射法制备固定化乳过氧化物酶及其在~(125)I-胸腺素中的初步应用

本文建立了利用辐射共聚交联制备固定化乳过氧化物酶的方法。在γ射线辐照下,液态乳过氧化物酶较易失活。但是酶与丙烯酰胺、丙烯酸混合单体的体系,在-20℃冷冻状态下,对9×10~5R的照射量却是稳定的,并且能转变成一种酶凝胶。乳过氧化物酶活力仍保持在50％左右。制得的固定化乳过氧化物酶的最适pH为5.4,最适温度为40℃。此固定化酶可用于催化放射性~(125)I标记胸腺素。     

5-~(125)I-2''''-脱氧尿嘧啶核苷的制备

本文介绍了在加适量偏重亚硫酸钠的情况下,用稀硝酸氧化法制备5—~(125)I—2′—脱氧尿嘧啶核苷(简称~(125)I—UdR)。应用葡聚糖凝胶G—10柱分离、纯化,用聚酰胺薄层层析法测定标记率和放化纯度。在本实验条件下,使用不同批号国产的Na~(125)I溶液生产无载体的~(125)I-UdR,其标记率一般都高于95%,产品的放化纯度大于95%。     

~(125)Ⅰ标记蛋白质示踪物的制备

近年来,我们用聚丙烯酰胺电泳法制备了猪前胰岛素、人生长激素、甲胎蛋白及胰岛素等~(125)I标记物。经鉴定和应用于放射免疫分析,效果较满意。     

[~(125)I]TZDM的制备

优良的Aβ显像剂必须对Aβ斑块有较高的亲和性,而体外竞争结合实验是筛选Aβ斑块显像剂的有效方法,实验中需要使用放射性配基[125I]TZDM。以对溴苯胺为起始原料,经过四步反应合成了[125I]TZDM的前体化合物Bu3Sn-TZDM,并通过125I进行标记制备了[125I]TZDM,标记率为62.5%。粗产物通过HPLC分离后,获得放射化学纯度大于97%的[125I]TZDM,实际产率为25%。     

~(125)I-白三烯B_4放射免疫分析药盒的研制及临床应用

用高效液相层析法从猪血PMNL中提取白三烯B_4(LTB_4)。将LTB_4与牛血清白蛋白联接后免疫家兔制备抗血清。抗体效价1:7000;抗体的亲和常数为2.1×10~9L/M;与LTA_4、 LTC_4、LTD_4及其它花生四烯酸代谢物的交叉反应率为0.4％～6.4％。用氯胺T法制备~(125)I-LTB_4示踪剂。放免测定的最低检出值为25pg/管;检出率为84.2％～113％,批内CV与批间CV分别为5.2％与9.7％。正常人多形核白细胞经钙离子载体A23187与花生四烯酸刺激后生成的LTB_4量为695.5±329.7pg/10~6细胞。各种急性白血病与慢性粒细胞白血病病人的PMNL产生血栓烷B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(1a)(6-附-PGF_(1a))与LTB_4的能力均有不同程度的增加。急性脑血栓与急性心肌梗塞PMNL的LTB_4生成也有增加的趋势,但脑溢血与非梗塞冠心病无明显改变。     

~(125)I-白三烯B_4放射免疫分析药盒的研制及临床应用

用高效液相层析法从猪血PMNL中提取白三烯B_4(LTB_4)。将LTB_4与牛血清白蛋白联接后免疫家兔制备抗血清。抗体效价1:7000;抗体的亲和常数为2.1×10~9L/M;与LTA_4、LTC_4、LTD_4及其它花生四烯酸代谢物的交叉反应率为0.4％～6.4％。用氯胺T法制备~(125)I-LTB_4示踪剂。放免测定的最低检出值为25pg/管;检出率为84.2％～113％,批内CV与批间CV分别为5.2％与9.7％。正常人多形核白细胞经钙离子载体A23187与花生四烯酸刺激后生成的LTB_4量为695.5±329.7pg/10~6细胞。各种急性白血病与慢性粒细胞白血病病人的PMNL产生血栓烷B_2(TXB_2)、6-酮-前列腺素F_(lα)(6-酮-PGF_(lα))与LTB_4的能力均有不同程度的增加。急性脑血栓与急性心肌梗塞PMNL的LTB_4生成也有增加的趋势,但脑溢血与非梗塞冠心病无明显改变。     

~(125)I制备中照射条件的选择

通过计算、分析,讨论了由Xe制备~(125)I时照射条件的选择问题。一般地说,为得到一定比度的~(125)I,采用高通量、短时间照射比较经济。为得到最大的纯~(125)I(~(126)I含量≤1%)产额,可选用尽可能高的通量,采用本文推荐的照射时间,然后冷却较长时间。