60Co γ射线诱发的MCF-7细胞周期阻滞

以60Co γ射线照射体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,运用流式细胞术探讨了受照射后细胞周期进程的变化规律.结果表明,MCF-7细胞受5.0Gy γ照射后呈现短暂的S期阻滞(持续约6h),主要为G2期阻滞(持续约63h).S期和G2期阻滞高峰分别出现在照射后9h和18h,阻滞峰值分别达正常值的1.6倍和6.2倍.照射后9h和照射后18h的剂量-效应曲线截然不同.照射后9h S期阻滞和照射后18h G2期阻滞均与照射剂量呈现明显剂量-效应关系.     

60Co γ射线照射对K562细胞凋亡的影响及其作用机制的研究

采用不同剂量的^60CoY射线照射人红细胞系白血病细胞（K562细胞）,于照射后不同时间用流式细胞仪检测细胞凋亡率、蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bel-2和Bax、流式细胞仪检测细胞周期的变化,以探讨^60CoY射线照射对K562细胞凋亡的影响及其作用机制。结果表明,与正常对照组相比,3和7Gy剂量组在照后48和72h,10、15和20Gy剂量组在照后72h细胞凋亡率显著升高。2Cy照射后24h,照射组的Q／M期阻滞明显（P〈0．05）,S期细胞比例明显减少（P〈0．05）,照射组Bel-2／Bax比例明显比正常对照组降低。以上结果说明,随着照射剂量的增加和时间的延长,细胞凋亡率有随之上升的趋势;y射线对细胞周期的影响主要是显著的G2／M期阻滞和S期细胞减少;y射线可能是通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。     

3Gy γ射线对不同肿瘤细胞细胞周期进程的影响

本实验旨在研究电离辐射对不同肿瘤细胞细胞周期进程的影响，为肿瘤的放射治疗提供科学依据。以3Gyγ射线照射指数生长期的肿瘤细胞，用流式细胞术测定细胞DNA含量并确定细胞周期各时相的细胞百分比。实验结果显示，γ射线照射后，SMMC-7721，hepG2和HO-8910细胞的G2／M期发生明显阻滞，且都在辐射后12h累积达到最大值，但S期只发生短暂的延迟，即辐射后6h明显累积，之后下降至接近对照水平或低于对照；Hela细胞的G2／M期和S期均发生显著阻滞。实验结果说明，电离辐射后，不同肿瘤细胞的G2／M期和S期检查点的激活和维持是有差异的。     

~(60)Co γ射线照射K562细胞后培养基转移介导的旁效应研究

通过培养基转移实验,观察人红细胞系白血病细胞(K562)受60Coγ射线照射(0.5、1.0、2.0、5.0和8.5Gy)后的条件培养基(ICM)对未受照细胞的损伤情况,用健康人外周血自然杀伤(NK)细胞活性的变化来间接反映,并观察了未受照的K562细胞的凋亡率。结果显示,以受照后K562细胞的培养基去培养未受照的K562细胞,检测到其对NK细胞的敏感性明显升高,未受照的K562细胞的凋亡率明显升高。提示辐射引起的旁效应现象,初步分析了旁效应的剂量学特征和时间效应特征。     

X射线照射对EL—4淋巴瘤细胞周期进程及细胞倍增时？…

目的 研究不同剂量Ｘ射线照射对ＥＬ－４淋巴瘤细胞周期进程及细胞倍增时间的影响。方法 离体培养ＥＬ－４细胞，计算细胞倍增时间。ＰＩ荧光探针标记，流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞周期各时相细胞的变化。结果０．５Ｇｙ－４．０Ｇｙ Ｘ射玫照射使ＥＬ－４细胞倍增时间明显延长，Ｇ１及Ｇ２期细胞数明显增加。结论 ０．５Ｇｙ￣４．０ＧｙＸ射线照射诱导ＥＬ－４细胞明显的Ｇ１及Ｇ２期细胞阻滞，此变化显示出明显的剂量效应和     

60Co γ射线照射人肝癌细胞诱导PIF1基因mRNA变化

分别用2 Gy和4 Gy ⁶⁰Co γ射线照射人肝细胞HepG2,利用real-time PCR方法检测PIF1基因mRNA表达量的变化,以探讨PIF1基因是否参与电离辐射致DNA损伤应答。结果表明,不同剂量的γ射线照射HepG2细胞后,PIF1 mRNA表现出一致的变化规律:即照后先轻微降低随后一直高表达,高表达至少持续到照射后12 h。提示电离辐射能够诱导PIF1表达,表达水平与剂量、时间相关。     

60Co γ射线照射人肝细胞传40代后的差异表达基因谱的变化

利用基因芯片技术比较经4 Gy和8 Gy 60Co γ 射线照射后传40代的人正常肝细胞子代克隆的基因表达图谱,探讨辐射对人肝细胞基因表达的影响;利用实时荧光定量RT PCR技术对受照细胞子代两个共有的差异表达基因VTN 、INS IG1进行验证.结果显示,4 Gy照射后子代细胞差异表达显著的基因有58条;8 Gy照射后子代细胞差异表达显著的基因有882条;4 Gy和8 Gy共同差异表达的基因有16条;差异表达的基因与照射剂量有相关性.这些差异基因的功能涉及到免疫、信号转导、细胞周期调控、代谢等.RT PCR检测结果与基因芯片结果一致.结果表明不同剂量的照射可导致人肝细胞基因组的差异表达,该结果为从分子水平上探讨辐射诱发的基因组不稳定性提供基础资料.     

60Co γ射线诱发CHL细胞基因组不稳定性的研究

本研究采用60Coγ射线照射中国仓鼠肺成纤维细胞（CHL），利用单细胞凝胶电泳技术和检测克隆形成率对辐射诱发的基因组不稳定性进行了探讨，将对数生长期的细胞分成不同剂量组，60Coγ射线照射后传代培养，在33代后各剂量组再次统一照射2Gy，进行辐射损伤的检测，结果表明，首次照射剂量与子代二次照射后的损伤程度存在剂量效应关系，本次实验结果说明，60Coγ射线不仅在CHL细胞中产生直接的生物效应，而且可以在子代中诱发产生基因组不稳定性。     

高温诱导小鼠胚胎对60Co γ射线的适应性反应

为研究高温复合电离辐射对小鼠早期的胚胎效应,选用以孕９ｌＬＡＣＡ小鼠,给予４２℃１０ｍｉｎ１．０Ｇｙ＾６０Ｃｏγ射线处理。于孕后第１８天取出胎鼠,观察生长发育情况,测量脑ＤＮＡ、ＲＮＡ、蛋白质含量。结果显示,与对照组相比１．０Ｇｙ胚鼠组发育迟缓,核酸、蛋白质含量明显下降,而４２℃组变化不显著,４２℃＋１．０Ｇｙ照射组损伤程序介于４２℃组与１．０Ｇｙ组之间。这表明１．０Ｇｙ＾６０Ｃｏγ线使胎鼠生长发     

电离辐射对HelaS3细胞凋亡与细胞周期的影响

研究了电离辐射对HelaS3细胞凋亡和细胞周期的影响,进一步探讨细胞凋亡与细胞周期的关系,为肿瘤放化疗方案的制定提供基础资料。采用PI、Hoechst33342双梁和PI单梁,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果表明,给予0.5-4.0Gy X射线照射后8h细胞凋亡开始增加,12h达最大值,12－24h有下降趋势,但24h开始又逐渐增加,到72h时又接近12h水平。S期和G2／M期细胞均明显增加,并呈剂理依赖性,Go/G1期细胞则呈剂量依赖性减少,且这种变化在受照射后24h最明显。说明一定剂量电离辐射可以诱导明显的G2/M阻滞和S期阻滞,并可诱导HelaS3细胞凋亡的产生,两者之间有一定的关系。     

不同剂量 X射线全身照射对小鼠胸腺细胞周期进程的影响

本文采用细胞计量术研究了不同剂量Ｘ射线全身照射后小鼠胸腺细胞周期进程的变化。结果表明,７５ｍＧｙ Ｘ射线全身照射后２４～７２ｈ胸腺细胞周期各时相细胞数目发生明显变化,Ｇ０／Ｇ１期细胞数低于对照组,Ｓ期细胞数增多,说明其ＤＮＡ合成能力增强,至７ｄ时达到对照组水平;２．０Ｇｙ全身照射后４ｈ时胸腺细胞便开始出现明显的Ｇ２阻滞,１２ｈＧ２阻滞达最高点,７２ｈ其细胞周期进程明显加快,至７ｄ时达对照组水平。不     

细胞因子组合对受照射脐带血AC133+细胞周期和早期凋亡的影响

采用免疫标记法,使用流式细胞仪测定受到2.5Gy 6 MV-X射线照射的脐带血AC133+细胞加细胞因子组合(IL-3+FL+SCF)在培养不同天数后的细胞周期及早期凋亡情况的变化.结果表明,新鲜分离的未受照的脐带血AC133+细胞在无细胞因子的短期液体培养体系中培养2天,99%的细胞处于G0/G1期;受照的脐带血AC133+细胞加细胞因子组合(IL-3+FL+SCF)培养不同天数后,脐带血AC133+细胞迅速进入增殖循环,在照后第3天,有近50%的细胞进入S期.脐带血AC133+细胞受照后不加细胞因子,培养48小时后,镜下观察到细胞全部死亡;加细胞因子组合(IL-3+FL+SCF)培养48小时后,有(38.0±6.8)%的受照的脐带血AC133+细胞被"救活",且随着培养时间的延长,被"救活"的AC133+细胞又出现了增殖.因此,可认为细胞因子组合(IL-3+FL+SCF)对受照的脐带血AC133+细胞具有保护作用.     

5 cGyγ射线照射正常人淋巴母细胞基因表达转录谱的变化

应用基因芯片技术分析5cGγ低剂量60^Coγ射线照射正常人淋巴母细胞（AHH-1）后基因转录产物水平变化,探讨低剂量辐射对基因表达的影响规律。5eGy印Co7射线照射AHH-1细胞后4h,提取总RNA,用包含有14112个基因探针的人类cDNA芯片分析基因转录谱,照射组与对照组细胞的基因表达量差异比值大于2或小于0．5,两次检测结果一致的基因点为有效差异表达基因;用RT-PCR进一步验证部分差异表达基因;Western blot分析蛋白表达变化。结果筛选出了11个表达上调基因,9个表达下降基因：RT-PCR检测结果与芯片结果相一致,包括Connexin43、BMPR2、NOL6、IDC51760、LYK5等基因;Western blot证实Connexin43基因在翻译水平表达亦增加。实验结果表明所筛选出的差异表达基因有助于阐述低剂量辐射生物效应机理,部分基因有可能成为低剂量辐射暴露的生物标志物。     

不同剂量X射线全身照射对小鼠脾细胞周期进程的影响

采用流式细胞术研究了Ｘ射线全身照射后小鼠脾细胞周期的进程及其剂量效应关系。结果表明,７５ｍＧｙＸ射线全身照射后１２￣７２ｈ脾细胞周期各时相细胞数目发生明显变化,Ｇ０／Ｇ１期细胞数低于假照组,Ｓ组细胞数增多,说明其ＤＮＡ合成能力增强,至７ｄ时回复至假照组水平;２．０Ｇｙ全身照射后８ｈ时脾细胞出现明显的Ｇ２阻滞,１２ｈ时Ｇ２阻滞和ＤＮＡ合成抑制达最高点,７２ｈ其细胞周期进程则明显加快,至７ｄ时回复至假     

X射线照射对 EL-4 淋巴瘤细胞周期进程及细胞倍增时间的影响

目的研究不同剂量Ｘ射线照射对ＥＬ４淋巴瘤细胞周期进程及细胞倍增时间的影响。方法离体培养ＥＬ４细胞，计算细胞倍增时间。ＰＩ荧光探针标记，流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞周期各时相细胞的变化。结果０．５Ｇｙ～４．０ＧｙＸ射线照射使ＥＬ４细胞倍增时间明显延长，Ｇ１及Ｇ２期细胞数明显增加。结论０．５Ｇｙ～４．０ＧｙＸ射线照射诱导ＥＬ４细胞明显的Ｇ１及Ｇ２期细胞阻滞，此变化显示出明显的剂量效应和时间效应。细胞周期进程变化与细胞倍增时间延长密切相关。     

60Co γ射线照射对AT和GM细胞增殖能力及O2.-浓度的影响

为探求AT5BIVA细胞辐射敏感性与超氧阴离子自由基O2.-之间的联系,以正常人皮肤成纤维细胞GM0639为对照,用3H-TdR掺入法和细胞色素C还原法分别测定正常及照射条件下细胞增殖能力及其培养介质中O2.-浓度(nmol/106细胞).结果表明,在正常培养条件下,两种细胞的增殖能力和向培养介质中释放O2.-的量均随培养时间的延长而增加.在不同剂量60Co γ射线照射条件下,两种细胞的增殖能力和向培养介质中释放O2.-的量均随剂量增大而减小;两种细胞的增殖能力均与其培养介质中O2.-浓度密切相关,且AT5BIVA细胞的增殖速率大于GM0639细胞.提示AT5BIVA细胞高辐射敏感性与O2.-产生量密切相关.     

60Co γ射线照射对培养小鼠骨髓基质细胞IL-6表达的影响及机制研究

观察了^60Coγ射线照射对培养小鼠骨髓基质细胞（BMSCs)的白细胞介素－6（IL－6）mRNA及蛋白表达的影响。采用Dexter方法体外培养小鼠BMSCs,8.0Gy^60Coγ射线照射后用放射免疫法测定培养上清液中IL－6的浓度,应用逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）的方法检测IL－6的mRNA表达,同时与NF－KB抑制剂PDTC或地塞米松预处理的BMSCs相比较。结果表明,培养小鼠BMSCs在正常情况下低表达IL－6,辐射后2h时其mRNA水平表达升高,4h时达峰值,之后开始下降;其蛋白表达在2h时开始升高,8－12h时达峰值,24h时基本恢复正至正常水平;而BMSCs在受照射前2h用PDTC或地塞米松预处理后,辐射并不引起IL－6mRNA表达的改变。结果显示,^60Coγ射线照射能够激活培养小鼠BMSCs细胞IL－6基因的转录,使细胞分泌IL－6增多,其机制可能与照射引起的NF－KB活化有关。     

5Gy 60Co γ射线照射小鼠5-羟色胺昼夜节律的变化

采用荧光分光光度法,对小鼠脑、肝组织中5－羟色胺（5－HT）的含量进行了测定。结果表明,小鼠受照射后两种组织中的5－HT深度随尽夜节律的变化表现出明显不同,与对照组相比,P＜0．01。     

60Coγ射线对胃癌细胞STAT3表达的影响研究

为了探讨电离辐射对胃腺癌细胞中STAT3活性及定位的影响,首先利用Western Blot方法检测60Coγ射线照射后胃癌BGC-823细胞内STAT3蛋白含量及活性变化,随后提取60Coγ辐射前后BGC-823细胞核蛋白,检测细胞核内STAT3水平,最后利用免疫荧光染色进一步验证辐射前后STAT3在BGC-823细胞...     

^32P持续照射对HeLa细胞周期影响规律的研究

研究^32P照射体外培养HeLa细胞细胞周期影响特点,以探索肿瘤核素治疗放射生物学机制。采用人宫颈癌HeLa细胞系体外培养,制作^32P放射性贴片照射细胞,通过观察照射后细胞周期再分布,研究不同剂量、剂量率、照射时间细胞放射效应特点。结果表明,照射后G2期阻滞为剂量依赖性,但阻滞达峰值后,随照射时间延长,累积剂量增加滞程度不再增加,有坪值,其大小与剂量率有关;G2期阻滞峰值的时间为24h左右,24--32h之后下降。结果提示,^32P放射性贴片照射HeLa细胞,照射后细胞表现为G2期阻滞,阻滞程度与剂量相关,G2期阻滞达峰值的时间与细胞周期内在属性相关,与剂量、照射时间无关。