大孔树脂纯化红腰豆总黄酮的工艺优化及其体外抗氧化活性比较

以红腰豆总黄酮粗提液为原料,研究大孔树脂对红腰豆黄酮的纯化工艺和效果,比较了8种树脂对红腰豆总黄酮的静态吸附和解吸性能,对AB-8型大孔树脂分离纯化红腰豆总黄酮进行了单因素、BoxBenhnken中心组合设计和响应面法优化试验,并考察了红腰豆总黄酮纯化前后体外抗氧效果。结果表明:AB-8树脂为纯化红腰豆总黄酮的最佳树脂,其最佳的吸附工艺条件为:上样质量浓度4.0 mg/m L,上样液pH 6.3,上样流速2.0 m L/min,上样体积5.0 BV,在此条件下吸附率可达(98.03±0.30)%;最佳的解吸工艺条件为乙醇体积分数75%,洗脱流速3.0 m L/min,洗脱体积2.0 BV,在此条件下解吸率可达(94.52±0.24)%。纯化后红腰豆总黄酮纯度提高了约2.85倍,纯化前DPPH·、·OH和O-2·的清除率IC50值分别为1.18、1.40、6.51 mg/m L,纯化后分别为0.37、0.82、1.77 mg/m L,纯化后红腰豆总黄酮提取物的体外抗氧化活性明显增强。     

大孔树脂纯化酸浆果实多酚及其生物活性研究

以酸浆果实为研究对象,多酚经乙醇浸提,采用9种大孔吸附树脂对酸浆果实多酚进行初步纯化,利用化学方法对酸浆果实多酚的抗氧化活性以及对酶活性的抑制作用进行了研究。结果表明AB-8树脂纯化酸浆果实多酚效果较好,最佳纯化条件为:样液质量浓度0.3 mg/m L、p H为样品本身的p H值、上样流速1 m L/min、乙醇体积分数为80%,洗脱流速为1 m L/min。酸浆果实多酚具有一定还原能力,对OH自由基和DPPH自由基的IC50分别为0.604 4 mg/m L和2.262 mg/m L;并对胰脂肪酶、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有抑制作用,其IC50值分别为0.826 2 mg/m L、0.817 8 mg/m L和1.011 mg/m L。本研究表明酸浆果实多酚具有一定的体外抗氧化活性,并对胰脂肪酶、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性有抑制作用。     

淡竹叶多酚的提取纯化工艺优化、组分分析及体外抗氧化活性研究

目的 确定淡竹叶多酚提取纯化工艺,分析主要成分及体外抗氧化活性。方法 采用超声辅助提取淡竹叶多酚,通过响应面实验确定最佳提取条件。选取适合淡竹叶多酚纯化的大孔树脂,对纯化工艺参数进行优化。通过高效液相色谱-质谱法(high performance liquid chromatography-mass spectrometry, HPLC-MS)鉴定淡竹叶多酚的主要成分,并评价其体外抗氧化活性。结果 淡竹叶多酚的最佳提取工艺参数为:乙醇体积分数60%、超声功率500 W、料液比1:25 (g/mL)、超声时间24 min及超声温度59℃,该条件下淡竹叶多酚提取量为8.01 mg/g。淡竹叶多酚纯化工艺参数为:上样质量浓度6 mg/mL、pH 4、流速2 mL/min、解吸液为70%乙醇、解吸体积90 mL,纯化后的淡竹叶多酚纯度由12.86%提高到76.18%。通过HPLC-MS鉴定出16种酚类成分,且纯化后多酚有较高的抗氧化活性。结论 本研究得到了淡竹叶多酚提取纯化工艺,得到的多酚纯化物有明显的抗氧化活性。     

大孔树脂纯化黄秋葵黄酮及其体外抗氧化活性研究

以黄秋葵为原料,以总黄酮为研究对象,开展了总黄酮提取、分离纯化及抗氧化活性的研究。采用静态和动态吸附-解吸实验对8种不同型号大孔树脂进行筛选,以吸附、解析效果为指标,考察大孔树脂纯化黄酮的工艺参数,并利用DPPH、ABTS、Fe3+法测定黄秋葵黄酮体外抗氧化活性。结果表明AB-8型大孔吸附树脂纯化效果最好,最佳工艺条件如下:上样液质量浓度为0.927 mg/m L,上样量为50 m L,用5 BV的30%乙醇作为解吸剂,以1.0 m L/min的洗脱速度进行解吸。抗氧化结果显示黄酮提取物对DPPH、ABTS自由基有明显的清除能力（IC50值分别为0.440 mg/m L和0.256 mg/m L）,并对Fe3+表现出了较高的还原能力。      

红松壳多酚、黄酮和多糖含量及抗氧化活性相关性的研究

为了探究红松壳中主要活性成分的含量及其与抗氧化活性之间的相关性,试验以伊春红松壳为原料,使用不同浓度乙醇溶剂提取红松壳多酚、黄酮和多糖并分析其含量,采用SPSS软件分析松壳中活性物质与抗氧化活性之间的相关性。试验结果表明,当乙醇的浓度为40%时,红松壳多酚、黄酮和多糖得率均最高,分别为4.05 mg/g、1.7 mg/g和7.05 mg/g。抗氧化活性试验表明,红松壳多酚抗氧化活性显著高于黄酮和多糖,与Vc抗氧化活性相当。其中松壳多酚对DPPH·的IC50(半数清除率浓度)值是0.20±0.05μg/m L,对·OH的IC50值是13.04±0.04μg/m L,对总还原力的IC50值是40.15±0.06μg/m L。相关性分析结果也表明松壳多酚与抗氧化活性相关性最高,其中松壳多酚与DPPH·相关性是0.908,与·OH相关性是0.989,与总还原力相关性是0.989(p0.01),可以看出松壳多酚是主要的抗氧化成分。本实验研究的结果为伊春红松壳副产物的综合利用以及开发天然抗氧化剂提供了科学依据。     

秋葵黄酮的纯化和体外抗氧化活性研究

研究通过静态吸附试验比较NKA-9、AB-8、HPD-400、D101等4种大孔树脂对秋葵中黄酮类物质的吸附与解吸性能,并以VC为对照,对其还原力及羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、DPPH自由基(DPPH·)、ABTS~+自由基(ABTS~+·)清除能力进行探讨。结果表明,最适合分离纯化秋葵黄酮的树脂类型为AB-8型,通过动态吸附-洗脱试验得出AB-8树脂分离纯化秋葵黄酮的最佳工艺为上样浓度0.60 mg/m L,上样流速0.70 m L/min,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速0.40 m L/min,纯化后秋葵黄酮纯度由39.2%提高到67.3%。抗氧化结果显示秋葵黄酮对秋葵黄酮总还原力高于VC,对·OH、O_2~-·、DPPH·、ABTS~+·的IC_(50)值分别为0.56、0.42、0.62、0.52 mg/m L,其最大清除率分别为90.4%、80.4%、77.6%、88.4%,具有良好的体外抗氧化活性。     

地榆多酚分离纯化及其抗氧化性研究

通过比较7种大孔树脂对地榆多酚的吸附率和解吸率的影响,筛选出XAD-8树脂适宜分离地榆多酚。地榆多酚分离纯化的条件为:上样浓度2.5 mg/m L,p H5.0,平衡吸附时间3 h,洗脱液乙醇体积分数60%,上样流速1.0 m L/min,洗脱流速1.5 m L/min,纯化后地榆多酚纯度由20.79%提高到62.97%。地榆多酚具有较强的抗氧化能力,清除羟自由基和还原能力均高于VC,地榆多酚对羟自由基和DPPH自由基的半抑制质量浓度（IC50）分别为0.179 mg/m L和0.691 mg/m L。      

响应面试验优化黑脉羊肚菌多酚纯化工艺及其抗氧化活性

以吸附率和解吸率为评价指标,研究9 种大孔吸附树脂对黑脉羊肚菌多酚吸附及解吸性能,采用响应面法建立NKA-Ⅱ树脂纯化黑脉羊肚菌多酚的二次多项回归模型,对多酚的纯化工艺进行优化,并比较纯化前后多酚的抗氧化活性。结果表明：最佳纯化树脂为NKA-Ⅱ。吸附的最佳工艺条件为上样液质量浓度295.86 μg/mL、上样流速1.90 mL/min、上样液pH 2.84,解吸的最佳工艺条件为乙醇体积分数78.56%、洗脱速率0.80 mL/min、洗脱剂pH 3.08;在此条件下吸附率可达98.69%,解吸率可达92.75%,纯化前后羊肚菌多酚纯度提高了2.94 倍。黑脉羊肚菌多酚纯化前1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率、2,2’-联氮基-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐自由基清除率和还原力EC50值分别为1.48、0.015、2.35 mg/mL,纯化后分别为0.52、0.004、0.69 mg/mL,纯化后抗氧化活性明显增强。     

火麻籽壳多酚不同提取工艺及其抗氧化性

采用8种不同方法提取火麻籽壳多酚,通过对比不同提取方法的提取率与提取物抗氧化活性,筛选出火麻籽壳多酚的最佳提取方法。采用大孔树脂对最佳提取工艺的多酚粗提物样品进行纯化,确定其纯化条件。结果表明:超声波辅助醇提法多酚提取率最高,多酚提取率为2.34 mg/g。不同提取方法所得多酚提取液对DPPH·和ABTS⁺·都有清除能力,其中超声波辅助醇提法所得样品在不同浓度水平均表现出较强的自由基清除能力。纯化火麻籽壳多酚的最佳树脂为X-5,其吸附率和解吸率分别为74.5%和44.5%,乙醇解吸液浓度为90%。纯化后多酚对DPPH·和ABTS⁺·的清除能力与样品浓度之间存在量效关系,其IC₅₀值分别0.38 mg/mL和0.10 mg/mL,纯化后的火麻籽壳多酚具有较高的抗氧化活性。     

大孔树脂纯化“双红”花青素研究

以"双红"山葡萄为原料,研究NKA-Ⅱ,NKA-9,AB-8,D-101和HPD-100 5种大孔树脂对"双红"花青素的纯化作用。通过静态-吸附解吸试验,筛选出D101树脂为最佳纯化材料,确定最佳吸附-解吸温度为25℃。D101树脂最佳动态吸附-解吸工艺参数为:25℃,上样浓度22.5 mg/m L,上样量8 BV,上样流速为2 m L/min,洗脱剂为75%乙醇-0.01%盐酸,洗脱流速2 m L/min,洗脱剂用量7 BV。该条件下,"双红"花青素纯度为27.78%±0.043%。     

二维多通道色谱法分离松多酚的条件优化

以东北红松松塔为原料,采用本课题组设计的二维多通道色谱分离设备,确定其分离松多酚的最佳工艺条件。首先通过静态吸附解吸实验,筛选二维多通道色谱分离设备的固相介质和洗脱剂;然后进行单因素动态试验,考察影响二维多通道色谱设备分离效果的4 个因素：上样量、上样质量浓度、洗脱速率和色谱柱数量。结果表明：X-5大孔树脂为二维多通道色谱设备分离松多酚的最佳固相介质,0.5%甲酸-60%乙醇溶液为其最佳洗脱剂,其对松多酚的最大吸附量为 38.74 mg/g,解吸率达72.08%;二维多通道色谱设备分离松多酚的最佳工艺条件：上样量256 mg、上样质量浓度2.0 mg/mL、洗脱速率（200±20）mL/min和色谱柱联用数量4 根。在此条件下,松多酚纯度由2.37%提高到了23.257%,产率达到46.81%。     

大孔树脂对樟子松树皮多酚的纯化工艺的研究

目的:优化樟子松树皮多酚纯化工艺,提高松多酚资源利用率。方法:以吸附率和解析率为衡量指标,确定纯化樟子松树皮多酚的最佳树脂;以多酚纯度和回收率为衡量指标,研究纯化过程中影响较大的因素,并且利用响应面优化樟子松树皮多酚的纯化工艺。结果:樟子松树皮多酚纯化的最佳工艺条件为:上样浓度3.0mg/mL,上样体积30mL,样液pH3.5,上样流速5BV/h,洗脱流速4.25BV/h,洗脱乙醇浓度53%。在此条件下,樟子松树皮多酚纯度可达67.91%,回收率为68.12%。结论:经D101大孔树脂纯化,樟子松树皮多酚纯度由37.25%升高至67.91%,说明D101大孔树脂对樟子松树皮多酚的纯化具有显著作用。      

梨幼果多酚的纯化及其抗氧化性

采用5种大孔吸附树脂分离纯化梨幼果多酚,并测定其抗氧化性。结果表明,综合分析吸附与解吸效果,NKA-9大孔树脂性能较好,最适合用来纯化梨幼果多酚;NKA-9大孔树脂对梨幼果多酚进行纯化时,最适宜的条件为:将2 mg/m L的多酚提取液调至p H值为5.0,设定进样流速为1 m L/min,充分吸附,然后用70%的乙醇为洗脱液进行动态洗脱,洗脱流速为1 m L/min,用此方法纯化后的梨幼果多酚的纯度从6.23%提高到30.68%;梨幼果多酚粗品对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radicals,DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)radicals,ABTS~+·)、亚硝酸基的IC50值分别为:151.07、152.48、490.35μg/m L;梨幼果多酚纯品对DPPH自由基、ABTS~+·、亚硝酸基的IC_(50)值分别为:122.12、130.78、392.09μg/m L;纯化后的多酚样品抗氧化能力比粗品有所增强。     

AB-8型大孔树脂纯化蓝莓叶多酚的工艺研究

为了充分利用蓝莓叶这一丰富资源,本文用AB-8型大孔吸附树脂对蓝莓叶多酚纯化条件进行研究。以没食子酸为标准品,采用福林酚法测定蓝莓叶中多酚的含量;并通过动态吸附解吸实验,考察上样液浓度、吸附流速、解吸液浓度、解吸流速等因素对吸附率和解吸率的影响。实验结果表明,AB-8型大孔树脂对蓝莓叶多酚的优化吸附条件:上样溶液浓度为1mg/mL,吸附流速为1mL/min,上样时出现泄漏的体积为150mL;解吸流速为1mL/min,5倍柱床体积的50%乙醇作为洗脱液;蓝莓叶多酚的纯度为74.16%,回收率为85.47%。      

铜藻多酚的分离纯化及抗氧化活性研究

为研究铜藻多酚的分离纯化工艺及抗氧化活性。在超声辅助提取铜藻多酚的基础上采用大孔吸附树脂柱层析法分离纯化铜藻多酚提取物,以V_C为对照采用体外实验分析其抗氧化活性。结果显示:大孔吸附树脂LX-158具有最佳的吸附和解析条件,静态吸附和解析平衡时间为5 h,动态吸附和解析的最佳条件为:粗提液和洗脱剂流速为3 mL/min,上样体积为10 mL,洗脱剂为40%乙醇溶液,洗脱剂体积为120 mL。此条件下铜藻多酚纯度从7.52%提高到40.31%。体外抗氧化活性结果显示:不同浓度的铜藻多酚对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基有明显的清除作用和Fe³⁺还原力,随着多酚浓度增大其抗氧化能力增强,IC₅₀值分别为6.60μg/mL、75.70μg/mL、2.22 mg/mL、5.62 mg/mL。实验证明该纯化工艺可行且稳定,可以作为铜藻多酚纯化的工艺条件。     

辣木籽多酚的分离纯化研究

辣木籽多酚已经被证明有极好的抗氧化功能,为了更好的研究辣木籽多酚的生物活性及理化性质,对提取出的粗提物进一步的分离和去除杂质非常有必要。本研究对超声辅助提取的辣木籽多酚经一步纯化,测定了五种不同类型的大孔树脂中辣木籽多酚的吸附率、解吸率,筛选出分离纯化辣木籽多酚的最佳大孔树脂,采用静态、动态吸附解吸实验研究辣木籽多酚分离纯化的适宜条件。结果表明:D-101大孔树脂效果最好并确定最优的吸附,解吸条件为:样品液pH为5,上样液浓度为3mg/mL,洗脱液为80%的乙醇溶液,上柱流速为2mL/min,洗脱流速为2mL/min,在此条件下得到的辣木籽多酚的纯度由10.37%提高到32.29%。纯化效果明显,对辣木籽多酚的分离纯化提供了指导意义。     

红松种鳞中多酚HPLC指纹图谱的建立

建立红松种鳞中多酚HPLC指纹图谱分析方法。色谱条件为:C18反向色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以0.05%三氟乙酸溶液(A)和甲醇(B)作为流动相,洗脱梯度:0~11min,5%→15%B;11~16min,15%→17%B;16~23min,17%→23%B;23~36min,23%→35%B;36~50min,35%→40%B;50~65min,40%→50%B;65~70min,50%→5%B;流速为0.8mL/min,检测波长:280nm,该方法满足指纹图谱方法学考察。通过对8批样品的分析和比对,建立了红松多酚的指纹图谱,标示出14个稳定的共有峰,确定了咖啡酸为指纹图谱的参照峰。结果表明此方法简单、准确、重现性好,为红松多酚的质量控制标准提供了有效的方法。      

肉苁蓉总多酚纯化工艺及其抗运动性疲劳作用研究

为优化大孔树脂纯化肉苁蓉多酚提取物的工艺条件,通过静态吸附与洗脱试验筛选合适的大孔树脂型号,并研究其吸附等温与吸附动力学模型后,采取动态吸附与洗脱单因素实验确定最佳纯化工艺条件,同时进行动物的抗运动性疲劳研究。实验结果表明,HPD-400大孔树脂的吸附等温方程符合Langmuir模型,吸附量随温度升高而降低,且符合准二级动力学吸附过程。采用大孔树脂纯化肉苁蓉多酚提取物的最佳工艺条件为:配制体积60 mL,6 mg/mL上样溶液,以2 mL/min流速上样至HPD-400大孔树脂饱和吸附后,采用体积为180 mL,60%乙醇溶液,以1 mL/min流速洗脱,提取物中肉苁蓉多酚纯度由20.12%提高至42.63%。与空白对照组相比,不同剂量的肉苁蓉多酚纯化产物可显著延长小鼠游泳力竭时间(P<0.05,P<0.01),显著增加体内肝糖原、肌糖原含量与乳酸脱氢酶活力(P<0.05,P<0.01),并有极显著降低乳酸浓度水平(P<0.01),因此可较好地缓解机体疲劳,从而为肉苁蓉多酚化合物的后续开发利用提供参考。     

黑小麦麸皮中多酚类物质的纯化工艺优化及成分分析

为使黑小麦麸皮在全谷物功能性食品的研发中得到充分利用，对基于超声辅助法提取后的黑小麦麸皮中的多酚粗提物进行纯化，优化了大孔树脂纯化工艺，采用液相色谱与质谱联用（LC-MS）技术，对纯化后的麸皮多酚组成做了初步分析。结果显示：当样品溶液浓度为1.20 mg/mL、洗脱溶剂浓度为60%、进样流速为1.50 mL/min、洗脱速度为1.50 mL/min时，纯化效果较佳。纯化前后的黑小麦麸皮多酚纯度分别为2.60%±0.28%和14.27%±0.13%，纯化后多酚纯度约为纯化前的5.48倍。推测出纯化后的黑小麦麸皮多酚提取物中可能含有的九种多酚类物质。综上所述，大孔树脂纯化工艺有效地纯化了黑小麦麸皮多酚粗提物，一定程度上保持了多酚类物质的多样性。     

红松子种皮中多酚成分的分离纯化研究

研究AB-8大孔树脂对红松子种皮中多酚成分的吸附特性,通过静态吸附及动态吸附试验,确定适合于红松子种皮多酚分离纯化的条件。结果显示,提取物样品液浓度为1.5mg/mL,进样速度为2.0BV/h,以30%乙醇作为洗脱剂,洗脱速度为1.5BV/h,红松子种皮多酚纯度可达70.2%。