酵母葡聚糖硫酸酯的制备及抗凝血活性

利用浓硫酸-正丁醇法对酵母葡聚糖进行硫酸酯化修饰,制得多种酵母葡聚糖硫酸酯,其取代度在0.232~0.418之间。选择取代度为0.418的产物进行结构和抗凝血活性分析,该产物相对分子量为1.68×105,IR和1H NMR图谱显示该产物引入了硫酸基团;抗凝血活性测试结构表明,一定浓度的酵母葡聚糖硫酸酯可显著延长全血凝血时间和血浆凝结时间。     

发酵液中硫酸酯化茯苓多糖(SP)的制备及其结构改性的研究

茯苓菌株HD06-10进行液态发酵培养,获得的茯苓多糖进行硫酸酯化结构改性处理,制备硫酸酯化茯苓多糖(SP),并采用正交设计法优化其制备条件。采用柱层析纯化得到SP精制品,并通过紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳和红外光谱对SP进行纯度和理化、结构性质鉴定,结果表明:SP为多糖纯品,符合多糖及其硫酸根反应特征,分子量大约为5000～6000u;SP特性黏数降低,水溶性增加,IR分析有硫酸根的特征吸收峰,说明茯苓多糖的硫酸酯化成功。     

胡萝卜多糖硫酸酯化修饰及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取胡萝卜粗多糖,经Sevage法与木瓜蛋白酶相结合法除蛋白后,以DEAE纤维素柱层析分离纯化得到具有抗氧化活性的多糖组分。用浓硫酸法对其进行硫酸酯化修饰,经红外光谱比和硫酸钡比浊法定性定量分析多糖酯化率。研究结果表明:当硫酸取代度为18.4%,即硫酸酯化率为2.94时硫酸酯化胡萝卜多糖的抗氧化活性比未修饰多糖增加1.5倍。     

硫酸酯化辛夷多糖的制备及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取辛夷多糖,用磺酰化法对其进行硫酸酯化,经红外光谱定性分析,硫酸钡比浊法定量计算得出硫酸基的含量。采用邻二氮菲-Fe~(2+)氧化法测定辛夷多糖和辛夷硫酸酯对羟自由基的清除作用。结果表明:硫酸基含量为14.3%,硫酸酯化率为1.33时,硫酸酯化辛夷多糖的抗氧化活性比辛夷多糖增加2.7倍。硫酸酯化修饰能提高辛夷多糖的抗氧化活性。     

多糖的硫酸酯化及其对结构和功能活性的影响研究进展

硫酸酯化是近年来常见的多糖分子修饰方法,通过对多糖进行硫酸酯化修饰可以极大的改善多糖的功能特性。因此,本文首先综述了近年来常见的多糖硫酸酯化方法,然后从结构和功能两个方面,深入阐述了硫酸酯化对多糖分子结构和功能活性的影响,旨在为多糖硫酸酯的进一步研究提供参考。     

Escherichia coli K5胞外多糖硫酸酯衍生物的制备及其体外抗氧化活性研究

对Escherichia coliK5菌株进行发酵培养,发酵液上清经超滤、醇沉、Sevage法脱蛋白、透析冻干,再经DEAE琼脂糖柱、G75葡聚糖柱分离纯化后得到K5多糖(K5)。以三氧化硫吡啶为硫酸酯化剂,对K5多糖N位进行了硫酸酯化,制备了K5多糖的硫酸酯衍生物(NS-K5),二糖分析结果显示,N位硫酸酯化率达到57%。并对硫酸酯化前后的K5多糖的抗氧化性能进行了研究,结果显示,一定浓度范围内,NS-K5多糖还原力较K5高,当K5和NS-K5浓度达到1mg/mL时,对羟基自由基的清除率分别达到17.7%、25.6%,对DPPH自由基的清除率分别达到26.1%、45%。实验结果表明,NS-K5的抗氧化活性要高于K5。     

硫酸酯化裂褶菌多糖的制备及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取裂褶菌多糖,用磺酰化法对其进行硫酸酯化,经红外光谱定性分析,硫酸钡比浊法定量计算得出硫酸基的含量。采用邻二氮菲-Fe~(2+)氧化法测定裂褶菌多糖和裂褶菌硫酸酯对羟自由基的清除作用。结果表明:硫酸基含量为13.9%,硫酸基取代度(DS)为1.26时,硫酸酯化裂褶菌多糖的抗氧化活性比裂褶菌多糖增加2.6倍。硫酸酯化修饰能提高裂褶菌多糖的抗氧化活性。     

硫酸酯化洋葱多糖的制备及其抗氧化活性的研究

以洋葱为原料,采用水提醇沉法制备洋葱多糖。用浓硫酸法对洋葱多糖进行硫酸酯法修饰,采用硫酸酯取代度为指标,对硫酸酯化反应的浓硫酸与正丁醇的体积比和反应时间进行优化,并对不同浓度的硫酸酯化洋葱多糖进行体外抗氧化实验。结果表明,制备硫酸酯化洋葱多糖的较佳工艺为浓硫酸和正丁醇体积比3∶1,反应时间20min和反应温度0℃,在此条件下多糖硫酸根取代度为0.51。同时,洋葱多糖硫酸酯化改性后可显著提高抗氧化性。     

白芨多糖硫酸酯化及生物学活性的比较研究

在分离纯化白芨多糖并对其硫酸酯化的基础上,比较研究白芨多糖（Bletilla striata polysaccharide,BSPS）及其酯化产物白芨多糖硫酸酯（BSPSS）的部分理化性质及生物学活性。实验结果表明,BSPSS在水中的溶解度明显提高,分子量为9．0607×104,BSPS分子量为9．9658×104;酯化物硫酸基取代度为1．31,硫酸基接在C-6上。BSPSS在化学模拟系统中去除超氧阴离子自由基（O2-·）的作用显著增强,低浓度时也明显具有去除羟基自由基（·OH）的作用,各实验浓度的BSPS清除O2-·的作用不明显,而对清除·OH而言则随着浓度升高其清除作用也趋增强。一定浓度的BSPSS和BSPS均具有抑制H2O2诱导的红细胞溶血作用;白芨多糖的硫酸酯化有助于增强B淋巴细胞的增殖作用和对体外白血病细胞株U937生长的抑制作用。     

籽瓜多糖硫酸酯的制备工艺、化学结构及其抗氧化活性研究

从籽瓜中提取籽瓜多糖(SWP),用氯磺酸-吡啶法制备籽瓜多糖硫酸酯(SSWP)。以籽瓜多糖硫酸酯中硫含量为指标,依据响应面设计对影响硫酸酯中硫含量的反应时间、温度和酯化试剂的比例(氯磺酸∶吡啶)三个因素进行优化组合。得出最佳组合条件为:反应时间3.2h,温度61℃,酯化试剂的比例(氯磺酸∶吡啶)1∶1.3。在此条件下,籽瓜多糖硫酸酯中硫含量可达到11.98%。用红外光谱对籽瓜多糖进行了扫描,在1250.76、810.74cm-1处出现了新的吸收峰,说明硫酸化是成功的。用GC-MS分析其单糖组成,结果表明籽瓜多糖硫酸酯由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖六种单糖组成,摩尔比为4.29∶11.72∶8.66∶5.35∶13.62∶56.36。用体积排阻色谱测得籽瓜多糖硫酸酯的分子量,重均分子量Mn=2.717×105,数均分子量Mw=1.232×105。通过测定籽瓜多糖和籽瓜多糖硫酸酯对DPPH自由基、羟自由基的清除率,表明籽瓜多糖硫酸酯对羟基自由基及DPPH自由基的清除率比未酯化前显著提高。     

硫酸化修饰对红枣多糖结构及抗氧化活性的影响

目的：探究纯化红枣多糖ZJP-1和硫酸化红枣多糖S-ZJP-1的结构和抗氧化活性之间的关系。方法：以残次红枣为原料,经热水浸提、DEAE-52离子交换色谱及Sephadex-200葡聚糖凝胶柱层析纯化得到纯化红枣多糖(ZJP-1),通过氯磺酸—吡啶法硫酸化修饰获得红枣多糖硫酸化衍生物(S-ZJP-1)。结果：ZJP-1和S-ZJP-1均由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖3种单糖组成,但是比例有所不同。两种多糖具有多糖特征吸收峰,S-ZJP-1具有硫酸基的特征吸收峰,表示硫酸化修饰成功。ZJP-1和S-ZJP-1不具有三股螺旋结构,表观呈片状结构。活性试验结果证实多糖ZJP-1和S-ZJP-1对DPPH自由基具有显著的清除活性,并具有一定的还原力,当多糖质量浓度达到0.5 mg/mL时,DPPH自由基清除活性分别为40.4%和47.6%,还原力分别为0.419和0.531。结论：硫酸化修饰的红枣多糖抗氧化活性更高,是一种良好的天然抗氧化剂。     

益生菌发酵刺麒麟菜制备硫酸多糖工艺优化及性质分析

为制备粘度低、溶解性高、生物利用度高的刺麒麟菜硫酸多糖,利用发酵食品中常见的益生菌鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）发酵刺麒麟菜制备发酵刺麒麟菜硫酸多糖（Fermented Eucheuma spinosum sulfate polysaccharide,F-ESP）,借助响应面法以粗多糖得率为指标进一步优化制备工艺;以冷冻刺麒麟菜硫酸多糖（Low temperature freeze-thaw Eucheuma spinosum sulfate polysaccharide,L-ESP）为对照,经DEAE-52柱层析纯化后测定总糖、还原糖、硫酸根等物质的含量以及单糖组成,分析F-ESP的化学成分;测定粘度、溶解度、分子量及微观形貌,表征F-ESP的物理性质;利用红外光谱解析F-ESP的官能团结构;通过大鼠嗜碱性粒细胞脱颗粒实验评价F-ESP的抗过敏活性。当料液比为1:70,接菌量为5%,发酵时间为24 h时,F-ESP得率最高（41.70%±2.00%）;经纯化的F-ESP-3单糖结构主要由半乳糖构成,总糖含量为97.77%±1.10%、硫酸根含量为28.40%±1.40%,与L-ESP-3相比,F-ESP-3还原糖含量（7.87%±0.09%）极显著提高（P<0.01）、分子量（33.58 kD）极显著降低（P<0.01）、比浓粘度（0.01±0.002 dL/g）极显著降低（P<0.01）、溶解度（89.33%±3.10%）极显著提高（P<0.01）、在扫描电镜下观察发现L-ESP-3为光滑致密的片状,F-ESP-3为粗糙的不规则颗粒状;发酵制备的F-ESP-3糖链结构并未发生改变,是一种含3,6内醚半乳糖残基的α-硫酸吡喃糖,且能够通过抑制β-氨基己糖苷酶释放从而抑制嗜碱性粒细胞的激活。综上所述,益生菌发酵可以作为刺麒麟菜硫酸多糖的制备方式,并通过改变其物理性质显著提高抗过敏活性。这一结果为刺麒麟菜多糖工业化生产和开发利用提供了数据支撑和理论依据。     

乳酸菌联合酿酒酵母发酵对龙须菜多糖结构特征及抗氧化性的影响

为明确微生物发酵对龙须菜浆液多糖体外抗氧化活性的改善效果,以期为龙须菜的高值化利用提供理论参考。采用乳酸菌副干酪乳杆菌亚种RP38与酿酒酵母JJ4复合发酵龙须菜浆液,利用色谱及光谱分析技术解析了龙须菜多糖的结构变化,考察了发酵前后浆液多糖的自由基清除能力。研究结果表明,龙须菜经发酵后浆液多糖质量分数由0.30%提高至0.79%,其中硫酸酯多糖质量分数由0.03%提高至0.12%。多糖的凝胶渗透色谱及红外光谱研究结果表明,微生物发酵不改变龙须菜多糖的官能基团,但可降解龙须菜多糖分子质量,进而使其结构暴露出更多的硫酸酯基团。核磁共振扫描发现,硫酸酯多糖的硫酸酯主要分布在半乳糖的C-6位,微生物发酵并不改变硫酸酯在糖链上的分布位置,但可以提高硫酸酯的含量。进一步研究发现,发酵后的龙须菜浆液多糖的羟自由基清除能力提高了5.33%,超氧阴离子自由基清除能力提高了32.12%。龙须菜浆液发酵后多糖抗氧化活性提高可能与生成更强给氢能力的小分子多糖以及硫酸酯基团暴露量增多有关。     

柑橘囊衣果胶多糖及其降解产物硫酸酯化对抗肿瘤活性的影响

果胶是广泛存在于植物细胞壁中的大分子多糖,具有多种生理活性功能.有研究发现对多糖进行改性,可以提高其生物活性.本文以柑橘罐头废水中回收的柑橘囊衣果胶(PP)及其降解寡糖(POS1和POS2)为研究对象,通过硫代巴比妥酸(TBA)和二甲基亚砜(DMSO)两种方法进行硫酸酯化,提高其活性.分子质量和单糖组成分析表明:经两种...     

单环刺螠体壁多糖的分离纯化、理化性质及抗脂质过氧化活性

为研究和开发单环刺螠中活性多糖成分,采用酶法提取和色谱分离技术,从单环刺螠的体壁中提取分离多糖组分,采用化学和仪器分析方法对其单糖组成、分子质量等理化性质进行研究,并通过体外清除脂质过氧化物实验对其进行初步的活性评价。结果表明：采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶两步酶解后,单环刺螠多糖（unicinctus polysaccharide,UP）得率为5.3%。通过离子交换柱层析分离纯化后主要得到两个组分UP-1和UP-2。UP-1是主要由葡萄糖（Glc）组成的高聚葡聚糖,分子质量340 kD,而UP-2为组成复杂的类糖胺聚糖,分子质量约为7.9 kD,主要含有葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、氨基葡萄糖（GlcN）和岩藻糖（Fuc）,还含有少量的甘露糖（Man）和氨基半乳糖（GalN）。其单糖组成Man、GlcN、GalN、Glc、Gal、Fuc物质的量比例为1.0∶1.47∶0.64∶6.49∶2.5∶3.0。和其他海洋动物来源类糖胺聚糖类似,UP-2还含有少量的硫酸基,含量为7.4%。对UP-1和UP-2进行初步体外抗氧化活性研究表明,类糖胺聚糖UP-2具有显著的脂质过氧化物清除活性,半数清除质量浓度为5.0 mg/mL。     

仿刺参纵肌多糖的纯化及体外抗氧化

目的：以仿刺参纵肌多糖为对象,探讨其纯化方法,并对其抗氧化活性进行研究。方法：仿刺参纵肌经木瓜蛋白酶水解、三氯乙酸去蛋白、Sephacryl S-400凝胶柱层析,得到一种多糖,进行红外光谱、分子质量和硫酸基含量测定,并进行硫酸酯化及体外抗氧化实验。结果：红外光谱初步显示所得纯化多糖具有酸性糖胺聚糖结构,分子质量约为676kD,硫酸基含量为10.98%,取代度为0.285;硫酸酯化后硫酸基含量为17.43%,取代度为0.360;纯化多糖及酯化多糖都具有抗氧化活性。结论：仿刺参纵肌多糖随着硫酸基含量及取代度的提高,抗氧化活性逐渐增强。     

硫酸酯化猴头菌多糖的结构与构象分析

利用碱提醇沉法从猴头菌(Hericium erinaceus)子实体中获得水不溶性多糖HEPFA,氯磺酸-吡啶法对HEPFA进行硫酸化修饰,制得能溶于水的硫酸化猴头菌多糖(S-HEPFA);通过DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和Sephacryl S-500凝胶柱层析对S-HEPFA进行纯化;运用化学方法和波谱技术对S-HEPFA进行结构分析。碱提醇沉得到相对分子量为5.38×105u,硫酸基含量为19.5%的硫酸酯化的猴头菌多糖(S-HEPFA);红外光谱分析表明,在波数1236cm-1、820cm-1处有硫酸酯键的特征吸收峰;离子色谱检测,该组分只含有葡萄糖,甲基化分析得S-HEPFA糖链主要的葡萄糖残基由1-连接Glcp、1,3-连接Glcp和1,3,6-连接Glcp组成,摩尔比为2.07:1:1.83;刚果红实验分析得S-HEPFA在水溶液中或微碱溶液中为三股螺旋构象。     

Heat-induced phase behavior of β-lactoglobulin/polysaccharide mixtures

The influence of polysaccharides on the thermal stability of β-lactoglobulin at pH 6.8 was investigated regarding polysaccharide type, concentration and size. Two kinds of polysaccharides, sulfate-containing polysaccharides (carrageenans and dextran sulfate with different molecular mass) and neutral polysaccharides (dextran with different molecular mass), were investigated. At low ratios of sulfate-containing polysaccharide to β-lactoglobulin, heat-induced aggregation was decreased as shown by lower turbidity. Increasing the ratio induced a significant increase in turbidity, leading to segregative phase separation. Phase diagrams were established by centrifugation, chemical assays and visual observation for β-lactoglobulin/kappa-carrageenan and β-lactoglobulin/dextran sulfates. Significant phases (stable, separated and gel) were found, indicating the varieties of phase behavior and a strong competition between phase separation and gelation caused by thermal treatment. Moreover, gelation was reversible in β-lactoglobulin/dextran sulfate systems depending on the polysaccharide concentration.     

三个不同种源的铁皮石斛多糖比较及其初步的药理活性评价

本文通过对云南、丹霞、浙江三个不同种源的铁皮石斛多糖进行了同样的提取、分离、纯化,分别对其分子量、单糖组成、红外光谱进行比较,以及初步的药理活性评价,来讨论不同产地的铁皮石斛差异.采用高效凝胶渗透色谱法(High Performance Gel Permeation Chromatography,HPGPC)对纯化的多...     

硫酸化大蒜多糖的制备及其鉴定

为开发大蒜资源、增加功能性多糖种类,以大蒜为原料,用水提取、过滤、去蛋白、DEAE纤维素层析、冷冻干燥获得大蒜多糖,SephadexG100检测其纯度;三氧化硫-吡啶法对其进行硫酸酯化,产物以硫酸钡比浊法测定含硫量,红外光谱和核磁共振碳谱分析其硫酸根的取代情况。得到了纯大蒜多糖,其硫酸酯化产物含硫量为18.19%,硫的取代度为2.19,红外光谱和核磁共振碳谱分析结果表明,硫酸基取代主要发生在果糖残基的C-3和C-5位上。这些结果表明:三氧化硫-吡啶法硫酸酯化大蒜多糖是成功的。