虾青素对秀丽隐杆线虫衰老的改善作用及机制研究

通过寿命实验、氧化应激、热应激实验研究虾青素（Astaxanthin）对秀丽隐杆线虫衰老和急性应激效应的改善作用并探究其作用机制。秀丽隐杆线虫分为对照组和虾青素处理组（0.8、1.2和1.6 mmol/L）,首先研究不同浓度虾青素对野生型线虫寿命的影响,通过平均与最大寿命确定作用的最佳剂量;选用最佳剂量的虾青素作用于野生型和突变株线虫,采用热应激和氧化应激实验研究其可能机制。结果表明:与对照组相比,采用1.2 mmol/L虾青素饲喂秀丽隐杆线虫,野生型线虫平均寿命延长了41.79%（p<0.01）,最大寿命延长了32.72%（p<0.01）。热应激及氧化应激实验中,采用1.2 mmol/L虾青素饲喂秀丽隐杆线虫,野生型线虫平均生存时间分别延长了22.54%和24.23%（p<0.01）。1.2 mmol/L虾青素可显著提高sir-2.1突变株线虫的存活时间,但对daf-2、daf-16和eat-2突变株线虫均无显著影响。综上所述,浓度为1.2 mmol/L的虾青素可显著延长野生型线虫的平均寿命和最大寿命,并显著延长其在氧化应激及热应激条件下的平均生存时间和最大生存时间。虾青素延长线虫寿命的功效可能是通过提高线虫的在热及氧化恶劣环境下的耐受能力而实现的,其作用机制可能与胰岛素信号通路及能量限制通路有关。      

酸浆宿萼抗衰老作用及机理研究

为系统探究酸浆宿萼水提物对秀丽隐杆线虫衰老的影响并初步阐明作用机理,以胡桃醌为氧化剂,构建氧化应激模型,观察酸浆宿萼水提物处理后野生型线虫(N2)和突变体线虫(eat-2、daf-2、clk-1)氧化应激条件下存活时间以及对野生型线虫(N2)的运动能力、生殖能力和寿命的影响。通过qPCR测定相关抗氧化基因的表达水平。酸浆宿萼水提物能够显著延长(N2、eat-2、daf-2)线虫氧化应激条件下的存活时间(P<0.01或P<0.05),提高野生型线虫(N2)的运动能力和生殖能力(P<0.05),但不影响饮食限制信号通路突变体线虫eat-2的抗氧化应激能力和寿命(P>0.01),能够提高基因gst-4、gst-7、sod-3和hsp16.2的转录水平(P<0.01)。酸浆宿萼水提物具有显著的体内抗氧化生物活性,能够延缓线虫衰老,其作用机理可能为通过激活饮食限制信号通路,上调相关抗氧化基因表达水平,增强线虫抗氧化应激能力,延缓线虫衰老。     

D-手性肌醇对高糖导致氧化损伤线虫延缓衰老的作用及机制

目的:研究D-手性肌醇(D-chiro-inositol,DCI)对高糖膳食导致氧化损伤的线虫延缓衰老的作用,并探究其延缓衰老的作用机制。方法:将线虫同期化后分别培养在含有0、5、10、20 μm/L的DCI的高糖培养基中,记录线虫死亡数目,检测线虫体内脂褐素自发荧光强度及体内的活性氧(ROS)水平;试剂盒法检测线虫的体内相关抗氧化酶活力;PCR 法检测抗衰老相关基因mRNA表达水平。结果表明:DCI可以显著延长线虫的平均寿命(10、20 μm/L,p<0.05),极显著降低线虫体内脂褐素和ROS水平(20 μm/L,p<0.01)。此外,20 μm/L剂量组氧化损伤线虫体内超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力显著增加(p<0.05),age-1、daf-2基因mRNA 表达水平显著下调(p<0.05),而sir-2.1、sod-3、daf-16、ctl-1基因的mRNA表达水平显著上调(p<0.05)。结论:DCI对高糖导致氧化损伤线虫有保护作用,其延缓线虫衰老的作用机制可能与其调控抗衰老相关基因表达有关。     

紫薯提取物对秀丽隐杆线虫抗氧化作用的影响

目的:以秀丽隐杆线虫为对象,研究紫薯提取物(purple sweet potato extract,PSPE)抗氧化作用及其可能的作用机制。方法:将秀丽隐杆线虫饲喂于含有不同质量浓度(70、140、280μg/mL)PSPE的线虫生长培养基,研究PSPE对线虫寿命、抗氧化酶活力以及相关基因表达水平、急性氧化应激的影响。结果:PSPE能明显延长秀丽隐杆线虫的寿命,提高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力,上调daf-16、ctl-1、sod-3、sir-2.1基因表达水平,下调age-1、daf-2基因表达水平,同时延长在H_2O_2、胡桃醌及百草枯氧化应激的存活时间。结论:PSPE能够有效延缓秀丽隐杆线虫的衰老、抑制脂褐素累积、提高抗氧化酶活力及抗氧化基因表达水平,增强对H_2O_2、胡桃醌及百草枯急性氧化应激的抵抗能力。     

赤芍多糖延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用及机制研究

目的 基于模式生物秀丽隐杆线虫(简称线虫)探究赤芍多糖延缓衰老的作用。方法 将线虫随机分为空白组和不同质量浓度的赤芍多糖组(100、200、400μg/mL),观察赤芍多糖对线虫寿命、运动能力和应激能力的影响,测定线虫体内脂褐素、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、活性氧(reactive oxygen species, ROS)的含量以及相关抗氧化酶的活力,分析赤芍多糖对线虫体内抗氧化能力的影响;运用实时荧光定量酶链式反应技术检测赤芍多糖对线虫衰老相关基因mRNA表达的影响。结果 与空白组相比,赤芍多糖高剂量组(400μg/mL)能够显著延长线虫寿命,增强线虫运动能力和应激能力,明显降低线虫体内脂褐素、MDA、ROS的含量,显著提高过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活力;同时,赤芍多糖能够显著上调daf-16、skn-1、sod-3 mRNA的表达,下调daf-2、age-1 mRNA的表达。结论 赤芍多糖能够通过提高线虫应激能力、增强抗氧化酶活力以及调控胰岛素/类胰岛素生长因子信号通路(IIS)相...     

白藜芦醇对线虫寿命的影响及分子机理研究

目的:研究白藜芦醇延长寿命的效果和抗衰老的分子机理。方法:以模式生物秀丽线虫为材料,观察在正常（25℃）和热应激（35℃）培养条件下,空白对照组和终浓度为50mg/L和100mg/L的白藜芦醇药物组对秀丽线虫寿命的影响;用半定量RT-PCR方法对衰老相关基因Abnormal dauer formation protein 16（daf-16）、superoxide dismutase-3（sod-3）、heat shock protein-16.2（hsp-16.2）的表达情况进行了分析。结果:在两种培养条件下,与空白组比较,药物组的线虫寿命都显著延长,且100mg/L终浓度白藜芦醇对线虫寿命延长作用更显著;药物组衰老相关基因表达上调。结论:白藜芦醇通过上调daf-16、sod-3和hsp-16.2基因的表达实现对秀丽线虫寿命的延长,研究结果为白藜芦醇抗衰老机制研究提供重要参考。      

铁皮石斛多糖调控线虫寿命及抗氧化作用的研究

摘 要: 目的 基于秀丽隐杆线虫自然衰老模型, 探讨铁皮石斛多糖(Dendrobium candidum polysaccharides, DOP)抗衰老作用及其机制。方法 将秀丽隐杆线虫野生型N2随机分为对照组和铁皮石斛多糖组(低、中、高), 观察铁皮石斛多糖对线虫N2寿命、运动能力和咽泵能力的影响; 通过检测氧化应激、抗氧化酶试剂盒以及活性氧评估铁皮石斛多糖对N2线虫抗氧化能力的影响。基于skn-1基因缺陷型突变株(EU1)线虫及带有荧光标记的转基因线虫CL2166分析铁皮石斛多糖延长健康寿限的可能作用途径; 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术测定铁皮石斛多糖作用下线虫抗氧化、胰岛素信号途径相关基因转录水平。结果 铁皮石斛多糖中剂量组(250 μg/mL)可显著延长线虫N2的寿命, 平均延寿率达12.73%, 可显著提高运动、咽泵、抗氧化应激能力; 显著提高过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide disumutase, SOD)活性和谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量, 降低活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量; 铁皮石斛多糖干预处理对skn-1基因缺陷线虫的延寿效果缺失; 但能够增强CL2166线虫的荧光强度; 同时上调sod-5、sod-3、ctl-1、ctl-2、daf-16和skn-1基因的表达水平, 下调daf-2基因的表达水平。结论 铁皮石斛多糖可能通过激活Nrf2/SKN-1和DAF-16途径拮抗氧化应激从而延缓线虫衰老。     

桑椹果粉乙醇提取液对秀丽隐杆线虫衰老的影响及机制

目的:探究桑椹果粉乙醇提取液对秀丽隐杆线虫动物模型(Caenorhabditis elegans,C. elegans,线虫)抗衰老的作用机制。方法:研究桑椹果粉乙醇粗提取液(Mulberry ethanol extract,MEE)对线虫刺激后,其寿命、抗热应激、运动能力、吞咽能力、生殖能力的变化,同时进行了线虫体的SOD活力、CAT活力及抗衰老基因转录水平等研究。结果:与对照组相比,用5 mg/mL的MEE刺激线虫后使剂量组最长寿命极显著增加了22.24%(P<0.01)、显著提高了线虫运动能力和抗热应激能力(P<0.05),使吞咽能力提升了30.43%且不显著影响线虫的生殖能力(P>0.05),同时在该刺激下线虫体内的SOD、 CAT酶活力分别增加了21.44和13.84 U/mg prot,氧化应激反应阈值降低。经5 mg/mL的MEE处理后,抗氧化基因sir-2.1、skn-1表达水平分别上调了45.70%和51.73%,胰岛素基因daf-16表达水平上调161.63%、daf-2表达水平下调57.10%,寿命和抗压力、热冲击性能的关键调节基因hsp-16....     

紫薯提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响

以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)作为模式生物研究紫薯提取物(purple sweet potato extract,PSPE)对寿命的影响及其可能的作用机制。将秀丽隐杆线虫分别培养在普通培养基及添加不同浓度(70、140、280μg/m L)PSPE的NGM培养基,研究PSPE对线虫寿命、体内脂褐素含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力以及抗氧化相关基因表达水平的影响。结果显示,喂饲280μg/m L PSPE的线虫比空白组线虫平均寿命延长33%,脂褐素水平降低30%,体内SOD和CAT抗氧化酶活力分别提高了17.7%和47.5%。饲喂PSPE后线虫体内daf-16、ctl-1和sod-3基因m RNA水平均有不同程度的提高,其中280μg/m L PSPE组线虫体内daf-16基因转录水平提高23.2%,ctl-1基因转录水平提高37.4%,sod-3基因转录水平提高84.6%,而age-1基因转录水平呈下降的趋势,280μg/m L剂量组降低了26.4%。     

乙醇对秀丽隐杆线虫寿命的影响及其分子机理

以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)作为模式生物,在其生长培养基中分别添加4、40、400 mmol/L的乙醇试剂,观察乙醇对线虫寿命的调控作用。通过检测对照组和喂食乙醇溶液实验组线虫体内寿命相关基因(age-1、pdk-1、akt-1、let-363)的表达差异,探究乙醇调控线虫寿命的分子机制。结果表明,喂食400 mmol/L乙醇可有效提高线虫寿命,分别将寿命中位数和平均寿命提高了11.76%和15.78%,且与对照组相比均具有显著性差异(P0.05)。利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测基因表达,结果表明乙醇可能通过抑制age-1基因表达,引发胰岛素信号传导通路中一系列相应下游基因表达变化从而延长线虫寿命;雷帕霉素受体信号传导通路中let-363基因也因乙醇的摄入及胰岛素信号传导通路下游基因的抑制作用而表达下降,两者联合达到显著延长线虫寿命的作用效果。     

1-脱氧野尻霉素对秀丽隐杆线虫的抗衰老作用

研究1-脱氧野尻霉素(DNJ)对秀丽隐杆线虫的抗氧化、抗衰老作用。考察10、100、1000 mg/L DNJ对秀丽隐杆线虫的寿命、运动能力、排泄周期、吞咽频率、热应激能力的影响,探索DNJ对秀丽隐杆线虫的抗氧化酶活力以及衰老相关基因的作用。结果表明,10、100 mg/L DNJ能够显著(p<0.05)延长秀丽隐杆线虫寿命、极显著(p<0.01)降低肠道氧自由基水平、提高体内抗氧化酶活力、提高运动能力、缩短排泄周期并提高吞咽频率;同时,秀丽隐杆线虫在35℃热激6 h条件下,100 mg/L DNJ处理的线虫也能显著提高热应激能力,延长寿命。结果表明,100 mg/L DNJ处理也能延长突变体daf-2和daf-16的寿命、提高热应激能力、极显著(p<0.01)提高运动能力、缩短排泄周期。然而,突变体与野生型在100 mg/L DNJ处理下,寿命、运动能力、排泄周期、热应激能力各项指标差异不显著(p>0.05)。因此,1-脱氧野尻霉素对秀丽隐杆线虫起到了抗衰老作用,但其作用机制与daf-2和daf-16基因无关。     

根皮素对秀丽隐杆线虫寿命的影响

目的:研究根皮素对秀丽隐杆线虫延长寿命作用及其作用机制.方法:给予秀丽隐杆线虫一定质量浓度的根皮素(25、50、75μg/mL),分析根皮素对线虫寿命、运动能力、吞咽能力、抵抗应激能力、活性氧和脂褐素水平的调控作用,通过测定正常及突变体线虫的抗氧化酶活力、相关基因表达水平,对根皮素延长寿命的潜在机理进行了初步探讨.结果...     

忧遁草乙醇提取物对秀丽隐杆线虫的抗衰老作用及机制

目的：以秀丽隐杆线虫为模式生物,探究忧遁草乙醇提取物（Clinacanthus nutans ethanol extract,CNEE）对线虫的抗衰老作用及作用机制。方法：通过寿命、产卵、运动等实验检测忧遁草乙醇提取物对线虫抗衰老的作用;通过急性氧化应激、抗氧化酶活力测定、活性氧（ROS）测定、实时荧光定量PCR等实验初步探究忧遁草乙醇提取物的抗氧化能力及延缓衰老的作用机制。结果：忧遁草乙醇提取物在100μg/mL时能延长N2野生型线虫寿命（P<0.001）,对其运动能力也有促进作用（P<0.001）,同时对产卵能力没有毒性影响（P>0.05）;该提取物还可以提高线虫在急性氧化应激条件下的寿命（P<0.05）及过氧化氢酶的活力（P<0.01）,并有效降低体内ROS的堆积情况（P<0.05）,上调daf-16(P<0.01)及下游ctl-1(P<0.001)基因的表达水平。但在daf-16突变株线虫中,没有观察到正常条件或急性氧化应激条件下延寿的作用,也没有提高过氧化氢酶的活力、降低ROS水平、提高daf-16和ctl-1表达水平的情况（P...     

基于秀丽隐杆线虫模型探讨白芥子水提物抗氧化作用及机制

摘 要：目的 研究白芥子水提物抗氧化活性,探讨其抗氧化的相关机制。方法 采用2,2-联苯基-1-苦基肼基(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟基自由基、铁离子还原能力3种方法对其体外抗氧化活性进行评价。采用秀丽隐杆线虫野生型N2线虫观察白芥子水提物对线虫寿命、运动能力、生殖能力的影响;通过氧化应激、热应激、脂褐素和活性氧(reactive oxygen species, ROS)评估其对线虫抗氧化能力的影响。采用实时荧光定量技术测定白芥子水提物作用下线虫抗氧化、胰岛素信号途径相关基因表达情况。结果 白芥子水提物具有一定的DPPH·、羟基自由基清除能力。通过氧化应激筛选出最佳给药浓度为10 mg/mL,且该给药浓度对线虫的运动能力和生殖能力无影响(P>0.05),并能够显著延长线虫的平均寿命和中位寿命(P<0.01);10 mg/mL给药组显著提高线虫抗热应激能力,降低脂褐素积累和ROS水平;同时上调daf-16、sod-3、clt-2、skn-1的mRNA表达量,下调daf-2的mRNA的表达量。结论 白芥子具有良好的体内外抗氧化能力,可能与调控胰岛素/胰岛素样生长因子(insulin like growth factor, IGF)-1信号(insulin/IGF-1 signaling, IIS)通路上的基因表达有关。     

Glucosamine Extends the Lifespan of Caenorhabditis elegans via Autophagy Induction

Glucosamine (GlcN) is commonly used as a dietary supplement to promote cartilage health in humans. We previously reported that GlcN could induce autophagy in cultured mammalian cells. Autophagy is known to be involved in the prevention of various diseases and aging. Here, we showed that GlcN extended the lifespan of the nematode Caenorhabditis elegans by inducing autophagy. Autophagy induction by GlcN was demonstrated by western blotting for LGG-1 (an ortholog of mammalian LC3) and by detecting autophagosomal dots in seam cells by fluorescence microscopy. Lifespan assays revealed that GlcN-induced lifespan extension was achieved with at least 5 mM GlcN. A maximum lifespan extension of approximately 30 % was achieved with 20 mM GlcN (p<0.0001). GlcN-induced lifespan extension was not dependent on the longevity genes daf-16 and sir-2.1 but dependent on the autophagy-essential gene atg-18. Therefore, we suggest that oral administration of GlcN could help delay the aging process via autophagy induction.     

鹿茸乙醇提取物对秀丽隐杆线虫抗衰老的作用

以秀丽隐杆线虫为模式生物,探究鹿茸乙醇提取物对秀丽隐杆线虫抗衰老的作用。通过寿命、紫外应激、热应激、运动、产卵等实验检测鹿茸乙醇提取物对线虫衰老的影响;通过检测鹿茸乙醇提取物对野生型线虫和突变体线虫抗氧化应激能力的实验,初步探究其衰老作用及机理。结果表明,鹿茸乙醇提取物为2.5 mg/mL时能延长线虫寿命,最长寿命为28 d;具有抗紫外和热应激的能力,线虫平均寿命分别为2.81和3.28 d,优于对照组;能提高线虫运动和产卵能力;氧化应激条件下能显著（P<0.05）延长野生型线虫生存时间;加药组与对照组的clk-1突变体线虫在氧化应激条件下生存时间无明显差异,表明其作用机理可能为激活线粒体信号通路,上调抗氧化基因gst-4、gst-7和skn-1及热抗性基因hsp16.2的转录水平。因此,鹿茸乙醇提取物对线虫具有抗衰老的作用。