一株产胶原蛋白酶嗜虫沙雷氏菌的分离与鉴定

以明胶为诱导物,从海洋混合菌中筛选出一株有效产生胞外胶原蛋白酶的菌株,其发酵上清液中的酶活达到22.46U/mL。通过形态学特征、生理生化特征测定对菌株进行常规鉴定,并结合菌株16SrDNA序列测定进行分析验证。结果表明,该菌株为嗜虫沙雷氏菌。      

低温保存肉制品中液化沙雷氏菌的分离鉴定与耐药性分析

目的 分离、鉴定引起低温保存肉制品腐败的液化沙雷氏菌, 并对其耐药性进行分析。方法 参考国标GB 4789.4-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验沙门氏菌检验》进行检测, 采用梅里埃全自动微生物生化鉴定仪VITEKⅡ进行生化鉴定分析; 纸片法药敏试验进行耐药性分析。结果 生化实验结果显示分离菌株使得三糖铁琼脂底层产酸、斜面产酸, 不产硫化氢, 产气迟缓, 在半固体琼脂中沿穿刺线扩散生长。梅里埃全自动微生物生化鉴定仪VITEKⅡ鉴定结果为液化沙雷氏菌。药敏试验结果表明该菌对链霉素、利高霉素、红霉素、盐酸林可霉素、恩诺沙星等常见的抗生素具有一定的耐药性。结论 本实验成功的分离并鉴定了低温保存肉制品中液化沙雷氏菌, 为液化沙雷氏菌检测标准的制定提供参考依据。     

一株粘质沙雷氏菌红色素稳定性的研究

红色素产生菌粘质沙雷氏菌D菌株经LB平皿培养后,采用乙醇时其红色素进行浸提.研究温度、光照、金属离子、pH、氧化剂及还原剂对该红色素稳定性的影响.结果表明,该红色素对温度、pH 5～10、H2O2和Na2SO3具有稳定性,但对紫外光照比较敏感.此外,Ca2+和Mg2+对该色素有保护作用,K+和CO2+对其消色作用明显.该红色素具有良好的应用潜力.     

粘质沙雷氏菌的分离鉴定及产红色素培养基的优化

为确定KMR-3菌株的分类地位,对其进行了分类鉴定;为了提高其红色素产量,对发酵培养基进行了优化。以分离到的KMR-3菌株为供试材料,通过形态学、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析对其进行了生物学分类鉴定。以LB液体培养基作为基础培养基,通过优化其不同组分（蛋白胨,酵母膏和NaCl）及含量以提高红色素产量。结果表明:KMR-3菌株归属为粘质沙雷氏菌,该菌株产红色素的最佳培养基为5g/L胰蛋白胨和1%甘油,pH5.0,温度28℃;该条件下,色素产量是基础培养基的13.4倍。该培养基蛋白用量少,促进粘质沙雷氏菌产生大量红色素,为其大规模生产提供依据。      

粘质沙雷氏菌的分离鉴定及产红色素培养基的优化

为确定KMR-3菌株的分类地位,对其进行了分类鉴定;为了提高其红色素产量,对发酵培养基进行了优化。以分离到的KMR-3菌株为供试材料,通过形态学、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析对其进行了生物学分类鉴定。以LB液体培养基作为基础培养基,通过优化其不同组分(蛋白胨,酵母膏和NaCl)及含量以提高红色素产量。结果表明:KMR-3菌株归属为粘质沙雷氏菌,该菌株产红色素的最佳培养基为5g/L胰蛋白胨和1%甘油,pH5.0,温度28℃;该条件下,色素产量是基础培养基的13.4倍。该培养基蛋白用量少,促进粘质沙雷氏菌产生大量红色素,为其大规模生产提供依据。     

一株温敏型产红色素粘质沙雷氏菌的分离及其培养条件研究

从土壤中分离纯化得到1株产红色素细菌,对该菌进行生理生化和16S rDNA鉴定,并对菌株色素产量的培养特性进行了研究.结果表明,该菌为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),有机氮和乳糖能促进其色素产生;K+、Ca2+、Cu2+ 和Mn2+ 能显著提高色素产量;25℃条件下培养红色素产量最高,37℃培养不产色素,该菌株是温敏型红色素产生菌.     

一株产灵菌红素粘质沙雷氏菌的筛选、鉴定及发酵条件

利用贫营养条件,从土壤样品中筛选到一株产红色素的菌株。经形态学、生理生化实验进行菌株初步鉴定,并经16S rDNA测序分析确定该菌株为粘质沙雷氏菌属,将其命名为:Serratiamarcescens JNB5-1。该菌株所产红色素经全波长扫描及LC-MS确定为灵菌红素。对Serratiamarcecens JNB5-1产灵菌红素做初步发酵研究,在蔗糖2 g/dL,牛肉膏1.5 g/dL,CaCl21 g/dL,脯氨酸0.75 g/dL,MgSO4.7H2O 0.02 g/dL,FeSO4.7H2O 0.006 g/dL的培养基中发酵72 h后,其发酵产量可达4.139 g/L。     

酱油生产中粘质沙雷氏菌污染的鉴别与控制

酱油试生产中种曲出现异常，通过对细菌数检验，典型菌落的菌株分离鉴定，控制方法试验，判定为主要是被新生产环境中的粘质沙雷氏菌污染所致，并总结出生产中有效防止杂菌污染的预防措施。应用于生产后，提高了种曲纯度，解决了种曲细菌数严重超标问题。     

黏质沙雷氏菌胞外几丁质酶的纯化及特性

黏质沙雷氏菌几丁质酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-琼脂糖凝胶阴离子交换层析和苯基-琼脂糖凝胶疏水层析,得到电泳纯的几丁质酶和几丁质结合蛋白CBP21。该几丁质酶和CBP21分子质量分别约为58 ku和21 ku,CBP21对该几丁质酶水解几丁质增效明显。几丁质酶反应最适温度为50℃,最适pH约为6.5～7.0。该酶在55℃以下、pH 4.5～8.0范围内稳定。酶的Km值为0.22 mg/mL,Vm为1.26μmol/(min.mg)。金属离子K+、Sn2+、Mn2+对酶有一定激活作用,而Pb2+、Hg2+和Cu2+则强烈抑制其活性。该几丁质酶的糖基含量约为3.3%。EDTA和2-ME可分别提高酶活力65%和105%。H2O2强烈抑制酶活力,提示其活性中心可能存在硫氢基。     

一株分离自鳜鱼肠道的粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)HFUT 1301的鉴定及灵菌红素的分析

灵菌红素是粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)产生的具有抗癌功效的一种色素。本研究从鳜鱼肠道中筛选出一株高产红色素的菌株,根据形态学特征、生理生化性质、16S r DNA对其进行鉴定,采用紫外可见光全波长扫描、LC-MS和FT-IR图谱鉴定该菌种产红色素的结构,研究表明:在基础培养基上菌落呈圆形、直径1~3 mm、中间红色不透明,呈隆起状、边缘整齐,16S r DNA片段大小为1445 bp,与粘质沙雷氏菌同源性为99%,将该菌株命名为S.marcescens HFUT 1301;通过超声波辅助乙醇浸提及硅胶色谱分离纯化,获得纯度超过95%的红色素;在p H 3和p H 10的甲醇溶液中,该色素分别在535 nm和470 nm波长处存在明显吸收峰;LC-MS图谱主要离子峰为323.5486和324.8468;FT-IR图谱的主要吸收波数为3396 cm-1、2923 cm-1、2851 cm-1、1710 cm-1、1465cm-1和1164 cm-1。根据已有报道灵菌红素结构特征,推测该红色素为灵菌红素。在发酵培养基上灵菌红素产量达到3.22 g/L。     

无花果沙雷氏菌（Serratia ficaria）CH-0203产壳聚糖酶发酵条件的研究

研究了无花果沙雷氏菌（Serratiaficaria）CH-0203发酵生产壳聚糖酶的条件。研究表明,该菌株的最适产酶条件为以0.5%壳聚糖（脱乙酰度99.8%）为唯一碳源和氮源,培养基初始pH6.5,培养温度为30℃,装液量40mL（250mL三角瓶）,接种量5mL,接种龄24h,添加0.05%吐温80。在上述培养条件下,该菌株发酵产酶的最高酶活达到5.4U/mL。      

无花果沙雷氏菌(Serratia ficaria )CH-0203产壳聚糖酶发酵条件的研究

研究了无花果沙雷氏菌(Serratiaficaria)CH-0203发酵生产壳聚糖酶的条件。研究表明,该菌株的最适产酶条件为以0.5%壳聚糖(脱乙酰度99.8%)为唯一碳源和氮源,培养基初始pH6.5,培养温度为30℃,装液量40mL(250mL三角瓶),接种量5mL,接种龄24h,添加0.05%吐温80。在上述培养条件下,该菌株发酵产酶的最高酶活达到5.4U/mL。     

黏质沙雷氏菌产红色素的理化性质及抗氧化活性研究

为了探索黏质沙雷氏菌所产的天然红色素应用于食品、药品和印染等领域的可能性,对该色素的光谱特性、溶解性、稳定性和抗氧化活性进行了实验研究。结果表明：该色素的最大吸收波长为500nm;色素易溶于水,且易溶于乙醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇和四氢呋喃,微溶于二氯甲烷和氯仿;随着自然光照射时间的增加以及温度的升高红色素的稳定性逐渐降低;色素在pH中性条件下稳定,弱酸条件对色素有一定的增色效果,在碱性条件下随着pH的增大色素稳定性逐渐降低;山梨酸钾、抗坏血酸、蔗糖、柠檬酸、氯化钠、磷酸二氢钠对红色素有不同程度的消色作用;金属离子Mg2+、Zn2+、Ca2+对色素稳定性影响较小,Al3+、Cu2+、Fe3+对色素稳定性影响较大;红色素对DPPH自由基、羟自由基、ABTS自由基均具有清除能力,表明该色素具有一定的抗氧化作用,但均弱于抗坏血酸。     

添加柠檬酸促进粘质沙雷氏菌发酵产过氧化氢酶

在优化1株粘质沙雷氏菌发酵产过氧化氢酶(CAT)的培养基成分时发现,柠檬酸可以显著提高该菌胞内CAT的活力。结合先前报道,探究了柠檬酸促进粘质沙雷氏菌合成胞内CAT的原因。以等摩尔碳含量的柠檬酸、葡萄糖、柠檬酸与葡萄糖的混合物分别作为碳源,测定了在不同碳源发酵产CAT时粘质沙雷氏菌胞内抗氧化的相关数据。结果显示:添加柠檬酸(20g/L)后,该菌细胞内H_2O_2和羟自由基含量均比对照组(葡萄糖)高,说明柠檬酸代谢物对其产生了活性氧胁迫,进而诱导更多CAT的合成。考察了甲萘醌和百草枯(活性氧O~(2-)·的来源物)对该菌合成CAT的影响,实验结果验证了适量的活性氧能够诱导该菌合成CAT的结论。     

粘质沙雷氏菌摇瓶发酵产灵菌红素的工艺优化

为提高灵菌红素产率,本研究通过单因素试验和正交试验优化粘质沙雷氏菌发酵培养基组分和发酵条件,结果表明,最佳培养基配方为：一级大豆油、蛋白胨、NaCl和K2HPO4的添加量分别为4 mL/100 g、1.5%、0.15%和0.15%;最佳发酵条件为：温度30 ℃、接种量1%、装液量70 mL/250 mL三角瓶、振荡培养转速200 r/min,发酵36 h后,灵菌红素的产量最大,为2.98 g/L。粘质沙雷氏菌的胞外脂肪酶活力为15 U/mL。     

粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1在大肠杆菌中的分泌表达及其条件优化

克隆粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1基因pla A,与载体p ET-22b（+）连接构建重组质粒p ET-22b（+）-pla A,并将重组质粒导入受体菌E.coli BL21（DE3）中表达,构建得到重组菌AP22,IPTG诱导表达目的蛋白后将培养基蛋白进行SDS-PAGE分析显示:重组蛋白以可溶性蛋白的形式大量存在于发酵液中,分子质量约35 ku,与预期蛋白大小一致。以磷脂酶A1酶活为指标,在单因素实验的基础之上,通过正交实验得到摇瓶培养最佳条件为:氨苄青霉素终浓度30μg/m L,IPTG加量0.25 mmol/L,温度为34℃,OD600值为0.3,诱导时间4 h。在此条件下重组胞外磷脂酶A1酶活可高达8.6 U/m L,比优化前提高了43.3%。      

1株产灵菌红素家族红色色素细菌的分离鉴定及其色素性质研究

对分离自重庆酉阳喀斯特槽谷石漠化地区土壤的1株产红色色素的细菌进行了形态学、生理生化特性和16S rRNA序列鉴定,进一步对该色素的溶解性、抑菌性和稳定性行进了研究,测定了其最大紫外吸收波长;同时,采用硅胶色谱柱对色素进行了纯化,通过薄层层析、质谱和光谱扫描对色素成分进行分析。结果显示,该菌在30℃培养时,色素产量较高。该色素在无水乙醇中的溶解性优于其他有机溶剂,在530 nm处有最大紫外吸收峰;该红色素对大肠杆菌(Escherichia coli)及耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)无抑菌作用;对极端pH值较敏感,尤其是强碱性pH值。且其光和热稳定性良好,耐氧化能力较强,耐还原能力较弱;金属离子对该色素有不同程度的消色作用,Cu~(2+)的消色作用最明显。16S rRNA序列分析结果显示,该菌与多株黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的16S rRNA序列一致。质谱分析结果显示,该色素的分子质量为324.2,与灵菌红素的分子质量非常接近,但光谱扫描结果与其不一致。     

粘质沙雷氏菌高产发酵灵菌红素的工艺优化及抗病毒活性

为提高粘质沙雷氏菌S3菌株的灵菌红素产率,本研究对粘质沙雷氏菌S3发酵过程中重要的发酵条件参数和关键组分进行逐项优化,并验证了发酵液灵菌红素提取物对本氏烟草病毒的抑制效果。结果表明,最佳培养基配方为：丙三醇0.5%,蛋白胨1.5%,氯化钠0.5%,氯化钾0.25%;最佳发酵条件为：接种量为10%,装液量为60%~70%,pH恒定为6.0,培养温度为28℃,振摇速度160r/min,发酵周期为60h。在该发酵条件下,既有利于粘质沙雷氏菌菌体生长,又能够使灵菌红素的产量达到最大化。按照该优化条件进行发酵后,其灵菌红素提取物溶液喷施于接种TMV、CMV和PVY的本氏烟,烟叶中TMV、CMV和PVY病毒量分别为空白对照的12.61%、29.41%和17.69%,对病毒的抑制效果优于氨基寡糖素。试验所得的发酵制备条件能够提高灵菌红素产量,提取物具备显著抗病毒特性,具有产业化开发潜力和经济应用价值。     

肉制品的防腐措施与复合防腐剂

肉制品的防腐理论和方法最广泛、最被接受的是栅栏理论在防腐中的应用。肉制品防腐的栅栏因子的作用效果是相互协同叠加的，微生物的生长由于栅栏因子的设置足以使微生物被抑制时，就达到了我们防腐的目的，正确的栅栏因子设置可以达到事半功倍的效果。主要介绍了肉制品的防腐措施与复合防腐剂的应用。