转Bt基因大米暴露对雄性子代生殖系统影响的研究

目的 研究转Bt基因大米(TT51)暴露对Wistar大鼠雄性子代生殖系统发育的影响.方法 亲代雌雄大鼠分别连续给予市售大米、亲本大米和TT51大米70 d后,交配并产生子代,孕期和哺乳期各组雌性大鼠继续给予相应受试大米;子代雄性大鼠断乳后各组均给予普通饲料至70日龄,其间每周称量体重并记录食物消耗量和动物生长发育状况.雄性仔鼠至70日龄处死,进行血常规、血生化、血清性激素水平、生殖器官重量以及精子参数等指标检测.结果 TT51大米组与市售和亲本大米组比较,雄性子代体重、食物利用率、血常规、血生化、血清性激素水平以及精子各项指标差异无统计学意义.结论 转Bt基因大米暴露对雄性大鼠子代生殖系统发育未见不良影响.     

亲代大鼠转Bt基因水稻暴露对其子代部分早期生理和神经发育指标的影响

研究亲代大鼠转Bt基因水稻(TT51大米)暴露对其子代部分早期生理和神经发育指标的影响。方法 亲代大鼠随机分为3组,每组雄性15只,雌性30只,分别给予按60%比例掺入市售大米、明恢63大米和TT51大米的饲料,连续喂养70d后同组雄雌大鼠交配并产生子代,孕期和哺乳期各组母鼠继续给予相应受试大米的饲料。亲代大鼠每周称量和记录体重及食物消耗量,同时观察动物生长发育状况,观察和记录亲代雌鼠生殖指标。仔鼠出生后记录0、4、7、14及21d体重,并观察仔鼠部分生理指标发育情况,同时进行听觉惊愕等神经发育指标的测定。断乳后,对各试验组部分仔鼠取脑等主要脏器进行病理检查。结果 TT51大米组与明恢63大米组和市售大米组比较,亲代大鼠一般毒性及生殖指标间差异均无统计学意义;子代部分生理发育指标和神经发育指标差异均无统计学意义;各试验组仔鼠脏器病理检查均未见有意义的变化。结论 未见亲代大鼠转Bt基因水稻暴露对其子代早期部分生理和神经发育指标有不良影响。     

转Bt基因大米暴露对亲代雌性大鼠免疫系统影响的研究

目的 研究转Bt基因大米(TT51)对亲代雌性大鼠免疫系统的影响.方法 试验分为转Bt基因大米组(TT51组)、亲本明恢63大米组(明恢63组)和市售大米组,各组大米按60％的比例掺入饲料进行全食物喂养.Wistar雌、雄大鼠喂养10周后进行交配繁殖,对亲代雌性大鼠于断乳后进行免疫毒性评价.指标包括血常规、全血淋巴细胞分型、脾细胞的NK活性检测、刀豆蛋白A诱导淋巴细胞转化试验、抗体生成细胞检测以及淋巴结的淋巴细胞分型.结果 脾淋巴细胞分型中,TT51组的Th细胞、T细胞比例与市售大米组比较差异有统计学意义(P＜0.01),明恢63组的B细胞、T细胞比例与市售大米组比较差异有统计学意义(P＜0.01);颈部淋巴结淋巴细胞分型中,TT51组的Th细胞比例与市售大米组比较差异有统计学意义(P＜0.01);各组其他功能性试验结果之间差异无统计学意义.结论 转Bt基因大米(TT51)对亲代雌性大鼠免疫系统功能未见不良影响.     

茶树菇凝集素AAL、AAL-2检测小鼠CD8~+T淋巴细胞表面糖基化研究

本研究使用两种大型真菌茶树菇新型凝集素AAL(Agrocybe aegerita lectin)和AAL2(Agrocybe aegerita lectin 2),以检测小鼠CD8~+T淋巴细胞表面糖基化。用生物素标记的AAL和AAL2结合流式细胞仪,分别分析从C57BL/6小鼠脾脏和腹股沟淋巴结分离出来的CD8~+T淋巴细胞表面的糖基化水平,及其细胞因子表达水平。结果发现脾脏中AAL~+CD8~+,AAL2~+CD8~+T淋巴细胞所占的比例(%)分别为6.72±3.00和12.18±5.28,而腹股沟淋巴结的AAL~+CD8~+,AAL2~+CD8~+T淋巴细胞所占的比例(%)分别为12.18±5.28和10.15±3.46。细胞因子表达水平结果发现小鼠脾脏AAL2~+CD8~+T细胞表达perforin的细胞比例低于AAL2-CD8~+T细胞(p0.05,有统计学意义),腹股沟淋巴结中AAL~+CD8~+T细胞表达perforin的细胞比例则高于AAL-CD8~+T细胞(p0.05,有统计学意义)。该数据为研究小鼠脾脏和腹股沟淋巴结CD8~+T细胞表面糖基化提供了新的数据,也为两种新型凝集素AAL和AAL2的应用提供理论依据。     

转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规血生化及免疫指标的影响

目的 评价转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规、血生化及免疫指标的影响.方法 以转sFat-1基因猪肉、普通猪肉为受试物,配成配合饲料后分别设立低、高2个剂量组和基础饲料对照组,经口喂饲小鼠30天后,比较各组小鼠血常规、血生化、免疫球蛋白和外周血T淋巴细胞比例.结果 同性别的各组血常规和免疫球蛋白指标差异均无统计学意义;转sFat-1基因猪肉高剂量组血清BUN浓度与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);雌性小鼠中,转sFat-1基因猪肉低剂量组的CD3+ CD4+细胞比例、转sFat-1基因猪肉高剂量组的CD3+ CD8+细胞比例与普通猪肉低剂量组相应指标比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在本研究的剂量下,未发现转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规、血生化和免疫指标有影响.     

茶树菇凝集素检测醋酸格拉替雷诱导小鼠的CD8~+T淋巴细胞表面糖基化研究

醋酸格拉替雷是治疗多发性硬化症的一线药物,可通过诱导调节性CD8+T细胞发挥免疫调节作用。为研究GA诱导的CD8+T淋巴细胞,我们将茶树菇分离的两种凝集素AAL(Agrocybe aegerita lectin)和AAL2(Agrocybe aegerita lectin 2),通过生物素标记结合流式细胞仪,分别分析GA诱导的免疫耐受小鼠模型中脾脏、腹股沟淋巴结CD8+T淋巴细胞的糖基化水平,及细胞因子的表达。发现脾脏AAL+CD8+,AAL2+CD8+T淋巴细胞的比例(%)分别为8.46±3.1和9.08±2.8,淋巴结AAL+CD8+,AAL2+CD8+T淋巴细胞的比例(%)分别为10.65±4.6和8.25±5.9,且脾脏、淋巴结CD8+T淋巴细胞中AAL+细胞的百分比均显著高于CD8-T淋巴细胞(p0.05)。淋巴结中AAL+CD8+T细胞表达IFN-γ的细胞比例显著高于AAL-CD8+T细胞,AAL2+CD8+T细胞表达IFN-γ和perforin细胞比例均显著高于AAL2-CD8+T细胞。该结果为CD8+T淋巴细胞表面糖基化研究提供了初步数据,并暗示糖基化水平与细胞因子分泌有关。     

杭菊花乙醇提取物对大鼠生殖发育毒性研究

目的研究杭菊花乙醇提取物(CME)经过亲代、宫内、哺乳期和断乳后持续暴露对子代的影响。方法设对照组和CME低、中和高剂量组,CME掺入饲料,剂量分别为0、1、3、9 g/kg BW;参照OECD TG 443开展一代延长试验,每组孕鼠20只及其子鼠每组40只(雌雄各半),子鼠断乳后持续给予CME 13周,测定生长发育、生殖发育、血象、血生化指标,做组织病理学检查。结果 CME高、中剂量组子鼠睁眼时间明显迟于对照组;低剂量组子代雌性大鼠出生后(PND)56～112天体质量明显高于对照组,子代雌性大鼠CME高、低剂量组红细胞计数(RBC)和血红蛋白浓度(HGB)均降低,CME高剂量组谷丙转氨酶(ALT)升高,高、中剂量组谷草转氨酶(AST)、血磷(P)升高,CME各剂量组血糖(GLU)均降低、乳酸脱氢酶(LDH)均升高;子代雄性大鼠CME高、低剂量组血清钾(K~+)降低;子代雌雄大鼠CME高剂量组脾脏/体质量系数均高于对照组;以上均差异有统计学意义(F=2.818～42.75,P0.05)。结论低剂量CME促进子代雌性大鼠体质量生长发育,降低子代雌性大鼠的血糖,影响RBC、HGB和LDH;高、中剂量CME影响子代大鼠发育和子代雌性大鼠的肝功能,高剂量CME影响子代雌雄大鼠脾脏/体质量系数。     

重组人乳铁蛋白对子代大鼠免疫功能影响的一代繁殖毒性扩展试验

目的研究转基因牛乳腺生物反应器表达的重组人乳铁蛋白(rh LF)对子代大鼠免疫功能的影响。方法参照一代繁殖毒性扩展试验指南设计试验,将Wister大鼠分为对照组(酪蛋白)、重组人乳铁蛋白组,每组30只雌鼠、15只雄鼠;按照蛋白占比为20%的比重掺入饲料进行全食物喂养。雌/雄大鼠喂养相应饲料两周后进行交配,各组雌鼠在交配期、妊娠期和哺乳期继续给予相应饲料,子代大鼠从断乳到处死继续给予相应饲料。子代大鼠分别在PND0(出生后0天)、PND21(出生后21天)和PND56(出生后56天)进行免疫功能评价。结果重组人乳铁蛋白组与对照组比较,重组人乳铁蛋白组子代大鼠血常规、血生化和淋巴细胞分型结果未见明显改变;溶血空斑试验(PFC)、淋巴细胞增殖试验及自然杀伤细胞(NK细胞)活性试验指标结果均差异无统计学意义(P0.05)。结论在本研究的试验条件下,重组人乳铁蛋白对子代大鼠免疫功能未见不良影响。     

转GmDREB3基因小麦对大鼠免疫系统的影响

目的:研究转Gm DREB3基因抗旱小麦长期食用对大鼠免疫系统的影响。方法:将140只大鼠随机分为7组,分别为AIN93对照组(CN)、转Gm DREB3基因小麦低、中、高剂量组(GL、GM、GH)和亲本小麦低、中、高剂量组(nGL、n GM、n GH),各组大鼠按比例掺入一定量小麦喂养90d后,取外周血进行全血淋巴细胞分型、免疫球蛋白和补体、细胞因子、免疫器官重量及肝肾组织免疫复合物检查。结果:全血淋巴细胞分型结果显示,与CN组相比,n GM组雌性大鼠CD4细胞百分比明显减少(P0.01);GM组和n GM组雄性大鼠T淋巴细胞明显降低(P0.05或P0.01);GH、nGL、n GM、n GH组B淋巴细胞明显降低(P0.05或P0.01);nGL组NK细胞明显升高(P0.05)。转基因小麦与相应亲本小麦组比较,除n GM组雌性大鼠CD4细胞百分比与GM组相比明显减少(P0.01)外,其他各指标组间均无显著性差异(P0.05)。脏器重量结果显示,与CN组相比,各剂量组转基因小麦和亲本小麦雄性大鼠胸腺重量明显降低(P0.01);但转基因小麦和亲本小麦相应剂量组之间比较无显著性差异(P0.05)。其他各检测指标各组间均未见显著性差异(P0.05)。结论:转Gm DREB3基因小麦喂养大鼠90d未对大鼠免疫系统产生不良影响。     

转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠的亚慢性毒性研究

目的:研究转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠的亚慢性毒性。方法:初断乳Wistar大鼠140只,随机分为7组:转基因玉米高中低3个剂量组(60%、30%、15%)、亲本玉米高中低3个剂量组(60%、30%、15%)以及1个常规基础饲料对照组,每组20只,雌雄各半。动物2只1笼喂养,自由进食饮水,连续观察90 d。每周称量饲料量及大鼠体重,在试验中、末期采集大鼠尿液和血液进行尿常规、血常规和血生化分析。实验末期称重脏器并计算脏器体重比,最后对大鼠脏器进行病理组织学检查。实验末期称重脏器并计算脏器体重比,最后对大鼠脏器进行病理组织学检查。结果:90 d的实验期内,各组大鼠均未发现中毒死亡情况。转基因玉米组个别评价指标虽与亲本玉米对照组或常规基础饲料对照组存在统计学差异,但指标水平在文献报道正常范围和历史对照范围内,且均未发现有生物学意义的改变。各受检脏器未见与受试物相关的病理改变。结论:现有实验结果不能证实转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠有亚慢性毒性作用。     

应用间接ELISA方法定量检测转基因抗虫玉米

应用纯化的Bt1杀虫晶体蛋白质作为标准蛋白和免疫抗原 ,通过抗体 抗原 酶标抗体反应 ,建立了间接酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,以快速检测转基因抗虫玉米中的Bt1表达蛋白 .用建立的ELISA法对 4种进口玉米实物样品进行了测定 ,实验结果得到了免疫印迹分析的验证 ,并与进口试剂盒方法的定量分析结果相一致     

ω-6亚油酸对小鼠免疫系统的调节作用

目的：探索ω-6 亚油酸对小鼠免疫系统的调节作用。方法：将市购的ω-6 亚油酸以口服、腹腔注射、耳静脉注射3 种方式作用于小鼠,分别在3、2、2h 后取血分离血清,用液体芯片检测技术测定小鼠血清中的IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-12(p40)、IFN-γ、G-CSF、MCP-1、VEGF 等24 种细胞因子含量的变化。结 果：灌胃组中显著升高的细胞因子有IL-1α、Eotaxin 和VEGF,显著降低的有IL-6、IL-12(p40)、G-CSF 和KC;腹腔注射组中炎症细胞因子IL-1 和IL-17 显著升高的同时也伴随着IL-4、IL-10 抗炎细胞因子的显著升高以及趋化因子G-CSF 的显著降低;静脉注射组总体表现为促炎作用,IL-2、IL-5、IL-6 浓度显著升高,抗炎细胞因子IL-3、IL-4、IL-9、IL-10、IL-12(p40)、IL-17 浓度显著降低。结论：ω-6 亚油酸能通过小鼠胃肠黏膜系统和血液系统传递信号,调节机体的免疫系统。灌胃组主要激活了PKC/NF- κB 途径以及STAT 的部分途径,抑制NF- κB、JAK-STAT3、PI3K 途径;腹腔注射组激活的信号途径有NF- κB、JNK\p38\MAPK、PI3K 和JAK\STAT6 途径,抑制STAT3 途径;静脉注射组激活的信号途径有NF- κB、MAPK 和JAK\STAT3。抑制的信号途径有PI3K/ATK、ERK/MAPK、STAT1、STAT4、STAT5。     

Fate of maize intrinsic and recombinant genes in calves fed genetically modified maize Bt11

The presence of maize intrinsic and recombinant cry1Ab genes in the gastrointestinal (GI) contents, peripheral blood mononuclear cells (PBMC), and visceral organs of calves fed genetically modified Bt11 maize was examined by PCR in a subchronic 90-day performance study. Samples were collected from six Japanese Black/Holstein calves fed Bt11 maize and from six calves fed non-Bt maize. Fragments of maize zein (Ze1), invertase, chloroplast, and cry1Ab were detected inconsistently in the rumen fluid and rectal contents 5 and 18 h after feeding. The chloroplast DNA fragments of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase and tRNA were detected inconsistently in the PBMC, the visceral organs, and the longissimus muscle, while the cry1Ab gene was never detected in PBMC or in the visceral organs. These results suggest that feed-derived maize DNA was mostly degraded in the GI tract but that fragmented DNA was detectable in the GI contents as a possible source of transfer to calf tissues. These results also suggest that the recombinant cry1Ab genes were not transferred to the PBMC and tissues of calves fed Bt11 maize.     

应用ELISA定量检测转基因玉米中Bt1蛋白的研究

应用纯化的Bt1杀虫晶体蛋白作为标准蛋白和免疫抗原,通过抗体-抗原-酶标抗体反应,建立了酶联免疫吸附测定法(ELISA),以定量检测转基因玉米中的Bt1表达蛋白。用建立的ELISA法对4种进口玉米产品进行了测定,实验结果得到了免疫印迹分析的验证,并与进口试剂盒方法的定量分析结果相一致,因而建立的ELISA法具有操作简便、快速特异、定量准确、经济实惠的优点,特别适合于大批量检测,有着良好的应用前景。     

β-伴大豆球蛋白天然活性亚基的分离纯化

本研究将离子交换层析和金属螯合亲和层析方法相结合,建立了系统的分离纯化β-伴大豆球蛋白天然状态亚基的方法,通过梯度脲透析复性,使纯化亚基恢复天然构象。利用β-伴大豆球蛋白免疫动物制备抗血清对纯化亚基的免疫活性进行检测。结果表明：离子交换层析结合金属螯合亲和层析方法可以有效地纯化β-伴大豆球蛋白的α、α＇和β亚基,该方法产率高,制备的亚基纯度好,而且能与抗β伴大豆球蛋白血清特异性结合,表明提纯的亚基具有免疫活性。     

亲代暴露致敏原对子代BN大鼠致敏模型的影响

研究BN大鼠亲代暴露致敏原后子代对致敏原免疫反应变化。方法 亲代分成暴露与非暴露致敏原,两组所产大鼠均随机分为卵清蛋白(OVA)组、空白对照组,分别每日经口给予1 mg/ml OVA溶液、灭菌蒸馏水1 ml,共6周;第2周、第4周、第6周取血分离血清,测定特异性抗体IgG和IgE;第3天和第5天取血分离血浆,测定组胺;最后测定两组胃肠道渗透性。结果 亲代非暴露致敏原的大鼠可激发较强的过敏反应,特异性IgG、特异性IgE、组胺水平均升高;亲代暴露致敏原的大鼠激发后免疫反应较弱。结论 BN大鼠亲代接触致敏原后,其子代致敏免疫反应减弱。     

Monitoring of Bt11 and Bt176 genetically modified maize in food sold commercially in Brazil from 2005 to 2007

BACKGROUND: The first genetically modified (GM) maize lines were approved for trading in Brazil after December 2007 and they were T25, MON810, Bt11, NK603 and GA21. The polymerase chain reaction (PCR) method was employed to monitor the presence of Bt11 and nested PCR was used to detect the presence of Bt176 in 81 maize‐derived products (maize flour, corn meal, maize flour flakes and polenta) that were sold in Brazilian market from 2005 to 2007, before the release of GM maize in Brazil. RESULTS: The PCR detection limit for Bt11 was 10 g kg^?1 and for nested PCR of Bt176 it was 1 g kg^?1. All Brazilian samples analyzed showed no positive signal for these GM maize events. CONCLUSION: Bt11 and Bt176 GM maize lines were not detected by specific PCR in 81 maize‐derived food samples sold in Brazil from 2005 to 2007, before the commercial release of GM maize in Brazil. These Brazilian food industries were in compliance with the rules stipulated by the current legislation with respect to consumer requirements about GMO labeling. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry