羊骨汤不同酶解方式对其成分的影响

将羊骨以1：1的骨水比于0．05MPa高压2．0h后，再以不同的酶、酶浓度和酶解时间酶解骨汤，分析水解度（DH）、肽链长度（PCL）及游离钙含量的变化，并各筛选最优方案。结果表明：①游离钙含量最高：中性蛋白酶，酶浓度1500U／L，酶解6h；②DH最高：胰蛋白酶，酶浓度1：100，酶解6h；③PCL值最低：胰蛋白酶，酶浓度1：125，酶解6h；PCL值最高：碱性蛋白酶，酶浓度1500U／L，酶解8h。     

中性蛋白酶酶解羊骨产物抗菌性的研究初探

研究利用中性蛋白酶对羊骨进行酶解，采用五因素五水平正交旋转设计对羊骨进行酶解，以抗菌率为指标，对酶解条件进行优化，并对最优条件下所得产物的抗菌性进行详细对照评定。以大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄球菌为供试菌种。结果发现，第21组酶解液（即酶浓度200U／g，底物浓度1：3，时间6h，酶解温度50℃，pH值为7．0）的抗菌性相对较强，但其抗菌性的强度相当于0．015％～0．019％亚硝酸钠溶液的抑菌力。21号酶解液对大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄球菌在第4h～10h的生长时间范围内，表现出明显的抑制作用。     

羊骨酶解物中促进钙吸收肽的酶解工艺优化

研究利用中性蛋白酶酶解羊骨,以酶解液中游离钙含量为考核指标,以酶浓度、底物质量浓度、pH值、温度和水解时间为实验因子,采用5因子2次正交通用旋转设计进行试验,对羊骨的水解条件进行优化。试验结果为:中性蛋白酶的添加浓度为150U/g,底物质量浓度1∶4,pH值7.0,温度55℃,酶解时间为7h。在这样的酶解条件下,酶解物的钙含量为196.8mg/100g。     

贻贝酶解物对羟自由基清除作用的试验研究

通过测定贻贝酶解物对离体实验系统（Fenton体系）产生的羟自由基的清除效果，从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶3种酶中筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解贻贝制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的理想水解酶；并通过正交实验L9（3^4）对2种酶的水解条件进行优化。结果表明木瓜蛋白酶在温度60℃、酶解时间15min、DH7．5、酶质量分数1．00％的水解条件下，酶解物对羟自由基的清除效果最佳；胰蛋白酶在温度45℃、酶解时间35min,pH8，5、酶质量分数0．75％的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果最佳。木瓜蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时有最大羟基自由基清除率峰，清除率为76．15％，在最大峰处酶解物中活性肽的分子量为1．4kDa；胰蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时也有最大羟基自由基清除率峰，其清除率为69．13％，该峰处活性肽的分子量也为1．4kDa。     

鲤鱼肉酶解物清除羟自由基的研究

通过测定鲤鱼肉酶解物对Fenton体系产生的·OH的清除效果,从木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶和复合风味蛋白酶中,筛选出复合蛋白酶作为酶解鲤鱼肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的水解酶.用响应面分析法(RSM)对该酶的水解条件进行优化,得到最佳酶解条件为:温度55℃、酶解时间1.5 h、pH=6.5、酶加量为250 U/g底物、底物质量分数为25%,在此条件下酶解物的水解度为4.5%.利用Sephadex G-15凝胶层析测定酶解物分子量分布,结果显示,活性肤分子量为477 u～1 058 u.     

人工饲养大鲵皮胶原蛋白肽提取工艺研究

对6种蛋白酶进行筛选,优选出大鲵皮明胶酶解制备小分子胶原蛋白肽的三种最佳用酶为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶及风味蛋白酶,添加量分别为木瓜蛋白酶8 000U/g,中性蛋白酶3 000U/g、风味蛋白酶600U/g。实验采用复合酶解工艺方法,以蛋白质回收率为参考指标,确定了最佳工艺参数:酶解时间为7h,酶解温度为55℃,料液比为1∶4。此时蛋白质的回收率为78.9%,其中相对分子量≤5 000Da占46.86%。     

双酶分步酶解提取羊骨中可溶性钙

为提高羊骨的高值利用,研究了木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分步酶解提取羊骨中可溶性钙的最佳工艺条件。以羊骨粉为原料,游离钙含量为指标,通过单因素试验和响应面优化2种酶的酶解工艺,并在不同加入顺序和时间组合下进行分步水解,提取羊骨中可溶性钙。结果表明,木瓜蛋白酶和胃蛋白酶的最佳酶解条件分别为酶解温度55、40℃,酶解时间均为4 h,酶解pH 6. 0、2. 5,加酶量5 000、5 300 U/g,所测实际游离钙含量是79. 02和1 008. 68 mg/100 g;在双酶各自最优酶解条件下,按先木瓜蛋白酶后胃蛋白酶的加入顺序,分别酶解3 h,游离钙含量达到了1 839. 14 mg/100 g,极显著高于单酶和其他组合(P <0. 01)。     

响应面法优化酶解工艺条件提高羊骨泥营养效价的研究

考察了蛋白酶的种类、酶的添加量、酶解温度和酶解时间因素对羊骨泥中氨基态氮、游离钙和多肽含量指标的影响规律,并利用响应曲面优化出最优酶解条件。研究结果显示:添加0.64%的胰蛋白酶,在51.3℃下酶解6 h,可以使羊骨泥中蛋白质的水解度达到12.93%,游离钙含量达到32 mg/100 g,较未处理羊骨泥提高了4.5倍。研究表明,酶解处理羊骨泥可以提高其营养效价,增强其营养保健功能。     

酶解酪朊酸钠制备ACE抑制肽研究

目的：探讨利用Alcalase2．4L酶解酪朊酸钠制备高活性ACE抑制肽的工艺条件；方法：以ACE抑制活性、肽得率和水解度（DH）为主要评价指标，通过正交试验优化制备ACE抑制肽的工艺条件；结果：在最佳工艺条件为pH8．0、反应温度印℃、底物浓度6％、酶用量1000U／g底物、酶解时间10h条件下测得ACE抑制率为40．38％，肽得率为53．76％，DH为22．07％，高效体积排阻色谱（HPSEC）对酶解产物的分析结果表明分子量小于3kDa的肽占总蛋白的16．38％。     

羊骨胶原钙螯合肽酶解工艺的研究

本试验采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶四种蛋白酶酶解羊骨胶原蛋白,以酶解液中游离钙含量为试验指标,采用正交实验以及极差分析法确定了酶解羊骨蛋白获得胶原钙螯合肽的最佳用酶和酶解工艺条件。试验结果表明:胃蛋白酶为最佳用酶,最佳酶解工艺条件为:酶解时间6h,底物浓度为0.2kg/L,酶用量为1900U/g,酶解温度37℃,最适pH值3.0。酸性条件有利于钙的溶出。     

Protex-6L碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白的工艺研究

选用Protex-6L蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解生成肽和氨基酸。以水解度为考察指标,对其酶解工艺进行优化。基于单因素实验,考察了酶解参数:pH、酶解温度、底物浓度、加酶量、酶解时间等对酶解的影响,利用designexpert软件设计响应面对酶解条件进行优化分析,并在最优条件下通过SephadexG-75分析水解产物的分子量分布。结果表明:pH8.85、酶解温度57.34℃、底物质量分数7.00%、加酶量6884.36U/g、酶解时间4.19h,此条件下的绿豆分离蛋白的水解度(DH)为36.60%。水解得到的小肽分子量大部分都小于4000u。     

扇贝裙边酶解过程中呈味组分的变化规律研究

本研究以扇贝裙边为原料,利用复合蛋白酶对扇贝裙边进行酶解,在确定扇贝裙边最佳酶解温度的基础上,探索了扇贝裙边酶解液在不同酶解时间下的呈味特点,并探讨了不同酶解液中呈味分子的变化规律,探明不同酶解时间下扇贝裙边酶解液的呈味规律。结果表明不同酶解时间制备酶解液的滋味存在显著性差异,其中8 h的扇贝裙边酶解液鲜味强度最高(9.32分),而12 h酶解液的苦味(7.33分)和饱满度(8.33分)最强。主要是因为酶解时间对酶解液鲜味氨基酸和苦味氨基酸的含量及比例存在较大影响,当酶解8 h时,扇贝裙边酶解液中鲜味氨基酸比例最高(46.80%),而苦味氨基酸比例最低(51.67%);此外,肽分子分布结果显示8h酶解液中5000 u的肽段(对呈味贡献小)和180 u的肽段(苦涩味明显)比例较低,可能是8 h扇贝裙边酶解液取较好的鲜味和饱满度,较低苦味的主要原因。本研究通过研究扇贝呈味组分在酶解过程中的变化规律,为工业上利用扇贝裙边制备高品质呈味基料提供理论基础和指导。     

基于Plackett-Burman设计和响应面法优化羊肝抗氧化肽的制备工艺

以羊肝为原料,分别测定5种蛋白酶酶切羊肝所得的酶解液的羟基自由基清除率和肽得率。结果表明,风味蛋白酶羟自由基清除率（84.50%）和肽得率（22.49%）最好。在单因素试验基础上,以羟基自由基清除率为评价指标,采用响应面法优化最佳酶解条件。结果表明,羊肝抗氧化肽制备的最佳酶解条件为料液比1∶3（g∶mL）、加酶量2 400 U/g、酶解温度50 ℃、pH7.50、酶解时间2.8 h。在此优化条件下,测得实际羟自由基清除率为93.70%,与模型理论值相接近。羊肝酶解产物中总氨基酸含量为57.23 g/100 g,其中疏水性氨基酸和必需氨基酸占总氨基酸含量分别为46.47%和41.63%,表明以风味蛋白酶酶解羊肝产物具有较高的抗氧化活性和营养价值。     

超声辅助酶解制备草鱼鳞胶原肽及其理化特性评价

以草鱼鳞为原料,基于研究室原有工艺条件,在酶解过程中施加超声,研究超声功率（0?600 W）和超声时间（0?40 min）对胶原肽得率及理化特性的影响。结果表明,超声对产物得率影响显著。单酶酶解使用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶。超声条件增加,水解度和氮收率先升高后降低;在碱性蛋白酶酶解时施加300 W、20 min超声,水解度从5.37%升到7.27%;分步酶解使用碱性蛋白酶和风味酶,在每步酶解各施加300 W、10 min超声时,水解度从9.26%升到11.05%。超声对产物分子量和氨基酸含量有一定影响,产物分子量集中在500 u~1 ku,单酶酶解胶原肽在该段分布从24.26%升至33.99%,分步酶解胶原肽在该段分布从31.99%升至39.28%;单酶酶解氨基酸含量从66.30 g/100 g升至73.75 g/100 g;分步酶解从66.05 g/100 g升至70.70 g/100 g。超声对产物乳化性、起泡性和泡沫稳定性影响显著。综上,单酶酶解最佳工艺为碱性蛋白酶酶解中施加300 W、20 min超声;分步酶解最佳工艺为在每步酶解中各施加功率300 W、时间10 min的超声。     

响应曲面法骨胶原蛋白酶解条件的优化

根据Box-Behnken的中心组合试验设计原理,在单因素和双因子交互作用试验的基础上,运用Minitab14数据统计分析软件,采用三因素三水平的响应曲面分析法,建立Protamex复合蛋白酶水解骨粉制备骨多肽液的二次多项数学模型,并以多肽生成量为响应值作响应面和等高线,得到酶水解骨粉制备骨多肽液的优化工艺条件为：底物浓度为15%(W/V)、pH7.5、酶浓度为0.25%(W/W)、温度55℃、水解时间为13h,多肽生成量为121.45mg/g骨粉。     

方便型阿胶元粉的生物复合酶酶解工艺技术研究及开发

对阿胶提取液的生物复合酶酶解工艺进行了研究.研究结果表明,酶解后产品低肽分子量80％小于2000u,各种氨基酸组成合理,易于人体吸收利用.最佳酶解工艺条件为选用2709碱性蛋白酶和Alcalase 2.4L碱性蛋白酶按1:1比例复配成复合酶制剂,底物浓度8％,酶浓度3％,温度55℃,pH值8.5,水解时间2h.     

胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白的动力学研究

针对从细菌中提取的胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白的动力学性质进行研究。通过全波长扫描和SDS-PAGE电泳,对酶解的动态变化及其多肽分子量的变化进行了研究,考察了温度、酶用量、底物浓度等因素对酶解动态的影响,并对酶解的过程动力学进行了分析。结果说明:胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白得到的多肽分子量分布不均匀,分子量大小随反应时间的增大而减小;在一定范围内,增大酶浓度、提高温度可使酶解反应更彻底。     

绿豆蛋白酶解物抗氧化活性与其结构、氨基酸组成的相关性

本试验以碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶四种不同来源的蛋白酶酶解绿豆蛋白,测定酶解物的抗氧化能力,结合傅里叶红外光谱技术（FTIR）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、圆二色谱（CD）以及氨基酸分析仪,分析酶解物的氨基酸组成以及抗氧化活性与结构变化的相关性。结果表明,绿豆蛋白4 h中性蛋白酶酶解物抗氧化能力最强,其DPPH自由基清除率、羟自由基清除率分别达到71.03%、51.94%,TBARS值达到0.4045 mg/L,Fe2+螯合率达到52.31%;结合SDS-PAGE、FTIR、CD等分析得出:绿豆蛋白酶解物的抗氧化能力与其分子量大小、二级结构构象及氨基酸组成变化紧密相关,与绿豆蛋白相比,绿豆蛋白酶解物的α-螺旋结构含量增加了4.12%、β-折叠结构含量降低了19.99%,而抗氧化活性与其α-螺旋含量的增加、β-折叠含量的降低密切相关;影响抗氧化活性的疏水氨基酸增加了0.208 g/100 g,芳香氨基酸增加了0.207 g/100 g,分子量低于10 kDa的小分子量酶解物具有更好的抗氧化性。综合以上研究结果证实绿豆蛋白酶解物活性与其α-螺旋、β-折叠的相关性较大。     

超声波复合酶法提取双孢菇多糖的研究

采用超声波辅助复合酶提法提取双孢菇粗多糖。实验中利用单因素实验探索并确定了超声波的最佳提取时间和料液比分别为30min,1:20。对于复合酶的反应条件,采取L9(34)正交试验确定纤维素酶和中性蛋白酶的最佳工艺条件分别为:纤维素酶加酶量480u/g,pH4.0,酶解温度50℃,酶解时间100min;中性蛋白酶的加酶量100u/g,pH7.5,酶解温度45℃,酶解时间100min。实验中采用超声波辅助破壁方法,提高了纤维素酶的破壁效率,提高了双孢菇多糖的提取率。     

二次旋转正交组合设计优化羊骨蛋白酶解工艺

以新鲜羊骨为原料,选用碱性蛋白酶和风味蛋白酶按序分步水解羊骨蛋白,采用二次旋转正交组合设计优化双酶水解羊骨蛋白工艺条件。结果表明,在初始pH为8.5,初始温度为55℃,羊骨蛋白的最佳酶解方案为：底物浓度为10%,碱性蛋白酶添加量为3000u/g,作用时间为5h;风味蛋白酶添加量为3500u/g,作用时间为3.5h。