用L-谷氨酸脱羧酶电极测定蕃茄酱中谷氨酸的含量

本文利用试制的 L—谷氨酸脱羧酶电极对蕃茄酱中的谷氨酸进行了测定实验,结果令人满意。测定的最佳条件为 pH=3.8,温度为37℃,测定的相对误差为±2%。     

铜在L-谷氨酸螯合树脂上的吸附

合成了L-谷氨酸修饰的树脂,用于去除重金属离子Cu^2＋。通过静态吸附和动态吸附-脱附研究,考察了螯合树脂对Cu^2＋的吸附性能和去除Cu^2＋的工艺参数。实验表明,L-谷氨酸螯合氯球对Cu^2＋吸附效果良好。     

新型 L-乳酸盐酶电极的研制

本文研制一种新型乳酸盐酶生物传感器，此传感器以复合酶ＮＡＤ＋与ＬＤＨ共固定在经ＣＮＢｒ活化的琼脂糖上作为敏感膜。用厚为０３ｍｍ的粒状琼脂糖制成的敏感膜电极，其响应性能最佳。此乳酸盐酶电极测试的最优条件是：在ｐＨ８５的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液中进行，温度２５℃，此缓冲液中含１５ｍｍｏｌ·Ｌ－１Ｖｋ３电子介体。此电极的线性反应范围为００４～２１μｍｏｌ·Ｌ－１，每μｍｏｌ·Ｌ－１乳酸盐的敏感度为１３７ｎＡ，工作寿命为１９天。已将此电极用于检测血清中乳酸盐含量，得到满意的结果。     

柠檬酸复合酶电极的研制与应用

本文研究了柠檬酸复合酶电极电极活化及工作条件选择,利用碳酸酐酶提高 CO_2电极的灵敏度,并提出了连串型酶电极理论模型,与实验很好吻合.     

柠檬酸钠对L-谷氨酸发酵代谢流迁移的影响

为更全面深入地理解细胞内谷氨酸代谢的调控机制,以黄色短杆菌GDK-9为供试菌株,应用MATLAB软件和代谢流分析方法,定量研究了添加柠檬酸钠后L-谷氨酸发酵中后期胞内的代谢流迁移．在L-谷氨酸发酵中后期添加3．0g／L柠檬酸钠后,合成副产物L-丙氨酸和乳酸的代谢流量明显减少,分别降低了18．7％和27．4％,EMP途径和乙醛酸循环的代谢流分别减少了0．88和2．12,HMP途径的代谢流增加了0．88,而L-谷氨酸生物合成的代谢流从73．59增长至76．47,较未添加前提高了3．9％．添加柠檬酸钠能使关键节点发生代谢流迁移,提高L-谷氨酸合成中心代谢途径的代谢流量．     

固定化谷氨酸脱羧酶的稳定性研究

用羧甲基化的以Ｎ,Ｎ’－甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡聚糖（简称ＣＭ－ＣＡＤＢ）凝胶酶载体用树脂为新型载体,将谷氨酸脱羧酶固定在ＣＭ－ＣＡＤＢ树脂上。研究了固定化谷氨酸脱羧酶和自由酶与ｐＨ、温度的依存性,使用热稳定性和寿命。经测定谷氨酸脱羧酶经过固定化后,最适ｐＨ向碱性方向偏移０２个单位,ｐＨ为５２,最适温度为４８℃。固定化酶使用热稳定性比自由酶下降了５℃,但固定化酶的使用寿命得到显著改善,经测定固定化谷氨酸脱羧酶在４℃保存时,半衰期为１２７天。     

过表达hom基因对谷氨酸棒杆菌发酵L-异亮氨酸的影响

谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）中hom基因编码的高丝氨酸脱水酶为L-异亮氨酸合成过程的关键酶,本研究通过在L-异亮氨酸生产菌cglutamicum YILW中过表达高丝氨酸脱水酶,考察过表达高丝氨酸脱水酶对发酵卜异亮氨酸产量的影响．以L-异亮氨酸生产菌cglutamicum YILW基因组为模板克隆horn基因,将horn基因与表达载体pXMJ19连接构建出重组质粒pXMJ19-hom,再转入Cglutamicum YILW构建C．glutamicum YILW（pXMJ19．hom）．通过5L罐发酵研究重组质粒对工程菌的生长、耗糖、L-异亮氨酸产量及副产物积累等方面的影响．结果显示,重组酶的表达使菌株对卜苏氨酸的抗反馈抑制作用得到加强．最终L-异亮氨酸和L-蛋氨酸积累量分别为36．5g／L和2．8g／L,分别较出发菌株提高7％和33％,同时L-赖氨酸合成量仅为2．1g／L,较出发菌株降低了63．8％．     

谷氨酸脱羧酶活性测定研究

酶活性测定是进行酶研究的关键,运用ＭＩＡ－３型微机化多功能离子分析仪,与ＣＯ２气敏电极相匹配,确定了谷氨酸脱羧酶活性测定体系。研究了不同的缓冲体系对酶活性测定的影响,确定了ｐＨ为４４,０１０ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４－００５ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸缓冲溶液作为反应缓冲体系。测定了谷氨酸脱羧酶的最适ｐＨ（５０）和最适温度（５５℃）,确定了ＧＤＣ活性测定体系为：ｐＨ为４４,０１０ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４－００５ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸缓冲溶液,反应温度为３７℃,溶液中底物浓度为１２ｍｍｏｌ／Ｌ。经测定谷氨酸脱羧酶活性为１７６ｍｍｏｌ／Ｌ·ｍｉｎ,相对平均偏差小于１％。     

谷氨酸生物传感器的研制

采用海藻酸钙凝胶包埋法及海藻酸钙凝胶包埋与戊二醛化学交联相结合的固定化方法，制备了固定化谷氨酸脱羧酸膜，与ＣＯ２气敏电极偶联制成谷氨酸生物传感器。经测试，对谷氨酸的线性响应范围为（１．０×１０＾－２－２．０×１０＾－４）ｍｏｌ／Ｌ，斜率为５５．７ｍＶ，检测下限为２．３×１０＾０４ｍｏｌ／Ｌ，稳态响应时间为（９－１５）ｍｉｎ。     

L-天冬氨酸α-脱羧酶异源表达和转化条件的优化

为提高L-天冬氨酸α-脱羧酶粗酶液催化L-天冬氨酸生产β-丙氨酸的效率,研究了诱导剂添加时间、诱导剂浓度、诱导温度和培养时间对重组菌株产酶的影响,并优化了粗酶液的反应温度、pH和底物浓度等转化条件.得到最优诱导条件:在OD600达到0.6左右时加入诱导剂IPTG 0.5 mmol/L、25℃下诱导表达18h时,酶活力达...     

FIA型微生物探针动态响应过程的研究I：谷氨酸的测定

将固定化细胞柱和流动注射系统相结合，以大肠杆菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）为工作菌株配合ＣＯ２选择性电极，制成谷氨酸微生物传感器。它具有以下特性；传感器对谷氨酸溶液的适用测量浓度范围为４００－２０００ｍｇ／Ｌ谷氨酸；一个样品的检测在２０ｍｉｎ内完成；固定化细胞柱的使用寿命在４周以上；除Ｌ－谷氨酸酰胺外，其余氨基酸均不干扰传感器对谷氨酸的测定。     

葡萄糖氧化酶电极的研究

重点研究了一种新型介体酶电极－硫堇介体葡萄糖氧化酶电极,并系统讨论分析了PH值,底物浓度,硫堇与酶量的比值对电极响应的影响,根据Michaelis和Albery理论研究了酶电极动力学过程,研究结果表明酶电极动力学过程是饱和酶动力学和底物扩散联合控制,同时发现硫堇介体酶电极的稳定性及 重现性很好,经一个月内近600次测量,电极响应几乎不变,使葡萄糖氧化酶电极向实用化迈进了一大步。     

穿刺复合PH电极的研制及应用

本文用自行研制的锑复合电极直接测定水果、蔬菜、皮革等表面的pH值,并详细地研究了电极的性能、测试条件、干扰物的影响以及在高分子溶液中与玻璃电极的差异。方法简便、快速、具有应用推广价值。     

全固态奎宁选择电极的研制与应用

首次报道了以奎宁碘化物与碘化铋形成的分子缔合物为电活性物的全固态盐酸奎宁选择电极 ,电极的线性响应范围为 1 .0× 1 0 - 1～ 1 .0× 1 0 - 5 mol/L ,级差为 4 0mV/pC ,检测限为 2 .5× 1 0 - 6 mol/L。pH值在 3.0 8～ 6.1 0范围内变化时 ,引起的电势变化不超过± 1mV。该电极制作简便、操作灵活、重现性好 ,结果与药典法相符。     

全固态奎宁选择电极的研制与应用

首次报道了以奎宁碘化物与碘化铋形成的分子缔合物为电活性物的全固态盐酸奎宁选择电极,电极的线性响应范围为1.0*10^-1-1.0*10^-5mol/L,级差为40mV/pC,检测限该电极制作简便,操作灵活,重现性好,结果与药典法相符。     

L-赖氨酸修饰玻碳电极测定维生素C片中抗坏血酸含量的研究

文章研究了L-赖氨酸修饰玻碳电极的制备,采用快速循环伏安法测定维生素C片剂中抗坏血酸含量,并对实验条件进行了选择。结果表明,在pH值为4．8的磷酸盐缓冲溶液中测抗坏血酸浓度时,其线性形范围为0．0600～0．6000g．L^-1,R2=0．9872。该修饰电极用于抗坏血酸含量的分析,有良好的稳定性和抗干扰能力,结果令人满意。     

柠檬酸复合酶电极的动力学

在单一酶电极的理论模型基础上，提出了复合酶电极的理论模型，并对其动力学过程进行了分析与研究，推出了复合酶电极的动力学方程。该理论方程与实验得出的回归方程基本吻合，为复合酶电极的理论研究提供了依据。