中国根霉12菌株抗生物质产生条件和性质

中国根霉（ＲｈｉｚｏｐｕｓＣｈｉｎｅｓｉｓ）１２能产生一种对芽孢菌属细菌有独特抑制作用的抗生物质。其发酵条件研究结果表明：在以正交实验确定的最佳培养基（豆饼粉酶解液８０ｍｌ、玉米粉水解液２０ｍｌ、葡萄糖２ｇ、ｐＨ自然）和最适发酵工艺条件（种龄１８ｈ、接种量１％、发酵培养基初始ｐＨ６．０～６．５、装液量５０ｍｌ／２５０ｍｌ三角瓶，摇床转速１６０ｒ／ｍｉｎ、２８～３０℃培养４８ｈ）下，Ｒ．ｃｈｉｎｅｓｉｓ１２菌株产生的抗生物质的抑菌圈直径为２１．５ｍｍ，抑菌面积３０９．３６ｍｍ２，是对照少孢根霉（Ｒ．ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ）ＩＦＯ８６３１菌株的６倍。该物质可被胰蛋白酶所破坏，由纸电泳和茚三酮反应等实验结果判定该抗生物质为碱性多肽或蛋白质性质的物质。     

中国根霉12菌株抗生物质的分离提纯及分子量测定

中国根霉１２（Ｒ．ｃｈｉｎｅｓｉｓ１２）菌株产生的抗生物质存在于发酵液中，首先经过饱和度为７０％硫酸铵盐析处理，再经半透膜透析去离子后，通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ７５凝胶柱层析，浓缩含有活性组分的层析洗脱液，得到抗生物质粗制品。经ＨＰＬＣ和薄板层析法证明为一纯组分。而且用Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ７５凝胶柱层析法测得抗生物质的分子量为４８０００道尔顿     

中国根霉12~#菌株抗生物质分子量的测定——Sephadex-G75凝胶层析法

通过胰蛋白酶敏感实验和透析实验确定了中国根霉12＃菌株所产生的抗生物质为蛋白质类物质。通过Sephadex-G75凝胶层析法确定了该蛋白类抗生物质的分子量约为48000道尔顿。     

中国根霉12^#菌株抗生物质分子量的测定：Sephadex—G75凝胶层析法

通过胰蛋白酶敏感实验和透析实验确定了中国根霉１２＾＃菌株所产生的抗生物质为蛋白质类物质通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ７５凝胶层析法确定了该蛋白类抗生物质的分子量约为４８０００道尔顿。     

从泡菜水中分离抗生物质产生菌的筛选方法

报道了一种用1.5mL Ep管培养菌液,用滤纸片法筛选抗生物质产生菌的新型初筛方法。与传统方法相比具有工作量小,检测手段灵敏,特别适用于微好氧菌及兼性厌氧菌的筛选等特点。使用此法一天时间可以制备4000～5000个滤纸片样品,每个EP管至少可以检测对十种以上致病菌的抑菌效果,这些是传统的琼脂块法无法比拟的。使用此种筛选方法从泡菜水中检出抗生物质产生茵的比率高达71.3％。     

甜酒曲根霉的筛选及发酵特性研究

采用马铃薯琼脂固体培养基(PDA),对贵阳及江西的地方特色甜酒曲中的根霉分离纯化,得到菌株Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）。以优良根霉菌株Q303为对照,探究其发酵性能。结果表明,Q303、Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）的糖化酶活力分别为238.6 mg/h·g、243.3 mg/h·g、195.4 mg/h·g,液化酶活力分别为0.237 g/g·h、0.253 g/g·h、0.178 g/g·h,Rhi-1的糖化力和液化力水平都高于Q303,是一株拥有良好发酵性能的菌株。将Rhi-1、Q303制成纯种根霉曲,接入蒸熟的糯米饭中,定时取样,测定不同阶段酒酿糖化酶活力、液化酶活力、总糖及总酸的变化趋势。通过GC-MS分析根霉的发酵产物发现Rhi-1的发酵产物里富含β-苯乙醇和乙偶姻,以及特征物质异己酸乙酯。     

根霉酒精发酵特性的研究

本文对以2-2根霉等几株纯根霉作糖化发酵剂酿酒, 与2-2根霉和活性干酵母混合制曲酿酒作对照,对发酵过程中化学成分的变化规律进行了对比研究。结果表明:用纯根霉产酒精的发酵性能前期虽比加了酵母的根霉曲发酵更迟缓,但2-2菌株发酵结束时酒醪中的酒精含量与对照无显著差异。     

纯种根霉和中草药在传统法生产甜酒曲中的应用

使用纯种根霉,中草药和甜酒曲母混合制造甜酒曲,既能保持甜酒的传统风味,又有利于控制甜酒生产中的酸度和温度,防止酸败和产生异味,提高产品的糖分。     

根霉产凝乳酶的固态发酵条件优化

对根霉产凝乳酶固体发酵条件进行研究。通过单因素分析和响应面试验设计,确定根霉产凝乳酶的发酵条件及发酵培养基的最佳组成为:24℃发酵7d;麸皮与江米质量比为0.96:1、培养基固液比(m/V)为0.99:1、奶粉添加质量分数为0.81%,所产的凝乳酶活力达到72.92SU/mL。     

五株优良根霉的特性比较及其推广应用

对5株根霉的特性进行了分析.①将这5株根霉分为四川型和上海型.②最适生长糖化温度为30～35℃,最适发酵温度为30℃.在相同温度下,四川型根霉生长糖化较上海型慢.③最适pH在3.0～5.5之间.④各根霉生酸能力差别较大.四川型产酸力较弱,上海型较强.⑤发酵力的大小为3.868＞3.852＞3.867＞3.851＞3.866.⑥根霉的糖化力很强,可代替曲霉作麸曲使用.⑦该5株根霉适于多种类型、多种原料、多菌种、不同工艺的曲药生产.(丹妮)     

根霉凝乳酶的分离纯化及其酶学特性研究

采用70%乙醇对凝乳酶进行粗提,回收率为52.65%.采用DE-52和Sephadex G-75柱进行纯化,经冷冻干燥成酶粉,其活力1813.74 U/mg,回收率为11.25%.该酶的最适反应pH为5.7,在pH 5～7.5范围酶活力保持稳定;最适反应温度45℃,60℃保持20min,酶完全失活.Ca2+、Fe2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+、Al3+对该酶的活力有不同程度的促进作用,其中以Al3+和Ca2+的促进作用最显著,Na+和K+对该酶的活力有抑制作用.通过SDS-PAGE测定,该酶的分子质量约35kDa.     

泰国优质甜酒曲中根霉发酵特性的研究

以优良根霉菌株Q303为对照,研究分离纯化培养所得泰国优质甜酒曲中的根霉菌株R1、R2的液化力及其影响因素,同时,比较3者的发酵产品。结果表明:根霉菌株R1、R2和Q303在pH5.2～6.4、温度55～65℃、培养时间3d的条件下,液化力达到最大值;在所分析的条件下,根霉菌株R1、R2的液化力不及根霉菌株Q303的液化力;与根霉菌株Q303相比较,根霉菌株R1、R2的发酵产品色泽更好,在风味方面稍差。     

孝感凤窝酒曲中根霉的分离及特性研究

采用马丁孟加拉红培养基对孝感凤窝酒曲中的根霉进行分离,得到2株根霉M1和M2。M1和M2的糖化酶活力分别达到2015．48mg/h·g和D2125．61mg／h·g经形态学鉴定,它们分别是黑根霉（Rhizopu nigricans）和米根霉（Rhizopus oryzae）。同时,将这2株根霉分别接入糯米饭中进行发酵,测定酒酿的糖化酶活力、还原糖含量、总酸和总糖,并对酒酿进行了感官评定。     

福建药白曲中根霉的分离鉴定及菌株特性分析

采用选择性培养基对福建各地区药白曲中的根霉进行分离纯化,得到6株根霉纯菌株。经菌落形态特征观察以及分子生物学方法鉴定,确定这6株根霉均为米根霉属Rhizopus oryzae strain CBS 112.07。通过糯米基质固态发酵法跟踪测定米根霉产液化酶、糖化酶以及产还原糖和总酸能力,结果显示:6株米根霉的液化力在前5 d呈递增的趋势,其中以菌株M1,M2,M3产液化酶活力最高,并在第5天达到最大值;糖化力则在前5 d内呈现快速上升后保持稳定的趋势,其中以菌株M2,M3,M6产糖化酶活力最高,其糖化力均在第2天达到最大值,三者差异不具有显著性;还原糖产量变化趋势与糖化力相似,其中以M2、M3产还原糖量最高,并与其他菌株之间呈显著差异性;此外,M4产总酸能力最高,可达到1.17%(以乳酸计),其产还原糖量和糖化酶活力最低。M1,M2和M3是可应用于红曲黄酒酿造的优良米根霉菌株。     

酸性条件下毛霉和根霉蛋白酶的催化特性

研究比较了Actinomucor elegans蛋白酶和Rhizopus oligosporus蛋白酶在pH 3.0～6.0的条件下催化大豆分离蛋白(SPI)降解的特性,结果表明:在pH3.0和pH3.5的条件下,SDS-PAGE显示毛霉和根霉蛋白酶都能迅速地催化大豆7S和11S蛋白的降解,但此时水溶性蛋白的得率不高,均在35%以下;在pH5.0、5.5和6.0时,毛霉和根霉蛋白酶催化大豆分离蛋白降解的能力增强,水解度升高,水溶性蛋白的得率增加,但毛霉蛋白酶的水解产物水溶性蛋白得率始终高出约10%,SDS-PAGE显示毛霉蛋白酶催化下的大豆分离蛋白各个亚基降解消失的速度下降,同时伴随有新的条带产生,特别是碱性亚基几乎不能在4h内降解,根霉蛋白酶催化下的大豆分离蛋白各个亚基降解消失的速度在pH5.0和5.5时还比较强,但在pH6.0时明显下降,酸性亚基和碱性亚基均不能在4h内消失,表明在酸性条件下2个霉菌的蛋白酶其催化特性有明显的差异。     

奇孢根霉强化中温大曲对糟醅发酵过程的影响

以奇孢根霉（Rhizopus azygosporus）强化的大曲为研究对象,以普通大曲作为对照,通过在6 L容器中装入蒸熟的高粱和大曲进行模拟发酵,探究根霉强化对糟醅微生物群落结构和挥发性风味成分的影响。结果表明,根霉强化改善了大曲的理化性质,同时降低了糟醅的淀粉含量,增加了糟醅的酸度、还原糖含量和酒精度。根霉强化使糟醅挥发性风味物质总量增加,发酵28 d时,根霉糟醅挥发性物质总量为59.52 mg/kg,对照仅为28.11 mg/kg,且己酸乙酯和乙酸乙酯含量分别是对照的1.71和1.44倍。涉及糟醅风味差异代谢物共12种,主要是酯类,且21 d是挥发性风味成分变化的关键时间节点。根霉强化使糟醅微生物群落结构差异显著,嗜热真菌属及高温放线菌属等是根霉糟醅中属水平的特征真菌和细菌,毕赤酵母属、横梗霉属则是普通糟醅的特征真菌属。冗余分析（RDA）结果显示,根霉和糟醅中大多数优势挥发性物质呈正相关。根霉强化通过调整大曲的微生物群落结构,从而提高了糟醅中特征微生物的相对丰度,增加了优势挥发性组分的含量,改善了风味和香气。     

应用中国根霉12发酵制备高溶栓活性淡豆豉的条件优化

为探究中国根霉12发酵淡豆豉生产高活力溶栓酶的最佳条件,以中国根霉12为发酵菌株,分别以5种豆类(黑豆、黄豆、红豆、绿豆、白芸豆)为原料,筛选淡豆豉加工最佳原料及预处理方式,以溶栓酶活力为指标,通过响应面试验优化淡豆豉发酵工艺,并对产品品质进行分析。结果表明:经过发芽处理的黑豆更适合作发酵原料,得到的最佳工艺条件:黑豆发芽38 h,接种量15%,发酵温度31℃,发酵时长7 d,在此工艺下得到的发酵淡豆豉溶栓酶活力为(17122±392.7) U/g。该淡豆豉氨态氮含量显著高于以传统发酵方式制作的市售淡豆豉(p < 0.05),而其硬度、弹性和咀嚼性显著低于市售淡豆豉(p < 0.05),口感更佳。另外,干燥后的淡豆豉粉溶栓酶酶活力为16350 U/g,显著高出于某品牌纳豆粉的溶栓酶酶活力22%(p < 0.05)。研究发现,中国根霉12能显著提高淡豆豉溶栓酶酶活力(p < 0.05),对进一步开发高溶栓活性的淡豆豉有重要意义。     

中国优秀的酒曲种供应基地：Q303根霉种曲

产品经过贵州茅台镇五星酒厂、浙江宁波天泉黄酒酿造公司、浙江杭州西湖黄酒酿造厂、湖南酒鬼酒有限公司、云南香格里拉藏秘有限公司、遵义仙台酒业有限公司、贵州金沙窖酒厂、江西四特酒厂、湖北劲酒厂、陕西西安海星现代饮品有限公司、广东名纯酒业公司、广西博白制曲厂、广西桂林银荔酒业等上千家白酒、黄酒生产制曲企业使用,深受广大酿酒客户的喜爱,产品畅销全国各省市及东南亚地区。     

应用TH—AAADY和优质纯根霉曲提高小曲米酒出酒率的研究报告

采用湖北宜昌耐高温活性干酵母和湖南轻工研究所纯根霉曲替代传统小曲酿制米香型小曲酒，不但克服了炎热夏季所引起的酸败现象，而且还稳定提高了出酒率６．６％以上，经上年使用，稳定保证了小曲米酒的出酒率和质量。     

Q303根霉种曲中高活性凝乳酶特性及新型乳制品的研究

通过Q303根霉三级种、3866根霉三级种、冷干Q303根霉三级种、Q303根霉四级种及其对应产品所酿醪糟浸出液与奶粉发生凝乳反应的各种因素试验发现,高活性凝乳酶活力除了与温度、pH值、添加量等因素有关外,还与制成曲的干燥工艺有关,同时利用酿醪糟浸出液的凝乳特性开发新型风味乳制品,可为凝乳酶生产菌种的选育提供资源及制备方法.