TD-GC-MS技术分析不同提取方法对椰子油挥发性成分的影响

研究采用热脱附结合气质联用技术(TD-GC-MS)对冷榨法、超临界法、亚临界法和溶剂提取法所得椰子油中的挥发性成分组成与含量进行分析测定。结果表明:从4种椰子油中共鉴定出83种挥发性成分,主要包括醇类、酸类、酮类、酯类、醛类、烃类等化合物;亚临界法制得的椰子油中检出醇类化合物种类最多,达8种,与其他3种椰子油几乎无共同性;辛酸在4种椰子油中均有检出,在亚临界油中含量最高,达58.75%;酮类及醛类化合物在4种椰子油中种类与含量均较少;酯类化合物在各椰子油中种类最为丰富,δ-辛醇内酯在溶剂提取油中含量最高,达21.53%;D-柠檬烯在溶剂提取油中含量最高,为2.68%;1,3,4,6,7,8-六氢-4,6,6,7,8,8-六甲基环五-γ-2-苯并吡喃在超临界油中含量最高,为2.86%。     

基于核桃油-辛酸酶法合成的 新型结构脂

本文研究了以核桃油、辛酸为实验原料,通过Box-Benhnken响应面优化核桃油-辛酸结构脂的制备工艺,以其辛酸插入率为评价标准从固定化脂肪酶Novozym 435、Lipozyme TL IM 和 Lipozyme RM IM 中筛选出辛酸插入率最高的酶,考察底物摩尔比、酶的添加量、反应时间及反应温度对核桃油-辛酸结构脂中辛酸插入率的影响,在单因素试验的基础上,利用四因素三水平响应面法确定核桃油-辛酸结构脂的制备工艺。结果表明固定化脂肪酶 Lipozyme TL IM 较适合制备核桃油-辛酸结构脂,其最佳酸解反应的条件为底物摩尔比(辛酸:核桃油)为3:1,酶添加量为10wt%,反应时间为12.6h,反应温度为44.8℃,在此条件下,辛酸插入率为32.37%。该条件适于制备的核桃油-辛酸结构脂,通过对核桃油-辛酸结构脂制备工艺的优化可为结构脂的开发与应用提供理论借鉴。     

MLM型结构脂的酶法合成及其理化性质分析

以醇解反应制得单甘酯和辛酸为底物,1,3-特异性固定化脂肪酶为催化用酶,在单因素试验的基础上,通过正交试验获得酯化反应制备MLM型结构脂质的最适条件：Lipozyme RM IM酶加入量9%(以底物质量计)、反应时间14h、反应温度40℃、单甘酯与辛酸(底物)物质的量比1:6;该条件下辛酸插入率达60.48%,其中92.84%的辛酸分布在甘油结构的1,3位上。经二级分子蒸馏纯化后得到的MLM型结构脂质,辛酸插入率达到73.34%;对其进行理化指标检测分析表明,该产品最低可达国家四级菜籽油的标准。     

气相色谱法检测酶法合成MCT组成及含量的研究北大核心CSCD

采用气相色谱法分析酶法合成MCT中脂肪酸和甘油酯的组成及含量。结果表明：辛酸（FFA）、辛酸甘油一酯（MG）、辛酸甘油二酯（DG）、辛酸甘油三酯（MCT）分离效果较好;4种标准物质的色谱峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,线性相关系数达0.994 7-0.999 8,方法的精密度实验中相对标准偏差（RSD）为0.261%-2.527%;加标回收率为95.732%-102.703%,RSD为0.728%-3.028%,检测时间为18 min。该方法可以完成对合成反应中间产物MG、DG及终产品MCT的快速准确分析。     

单辛酸甘油酯的酶法合成

以Novo435固定化脂肪酶为催化剂,在无溶剂条件下催化甘油和辛酸合成单辛酸甘油酯。通过单因素试验确定加酶量、反应温度、反应时间三个因素的取值范围,并用响应面实验设计和分析方法对合成反应条件进行了优化。结果表明,在甘油辛酸摩尔比1:1、反应温度66.8℃、脂肪酶与反应底物质量比0.88%、无水的条件下反应11.5h,辛酸转化率达93.53%,单辛酸甘油酯含量为47.69%。     

Br?nsted酸性离子液体催化合成辛酸甘油酯的研究

以双磺基的Brnsted酸性离子液体1-磺酸丁基-3-甲基咪唑硫酸氢盐[MIm(CH2)4SO3H][HSO4)]催化辛酸与甘油酯化合成低热量的中碳链三酰甘油,研究了催化剂用量、酸醇物质的量比、反应温度、反应时间对酯化反应的影响,在最优条件下考查了工艺稳定性及催化剂重复使用性能。结果表明,[MIm(CH2)4SO3H][HSO4]具有较高的酯化催化活性和重复使用性能。优化的合成辛酸甘油酯的工艺条件为:辛酸甘油物质的量比为3.5∶1,催化剂用量为底物质量的1%,反应温度160℃,反应时间6 h。在此条件下,酯化率达85%,三酰甘油质量分数达到80%。催化剂重复使用5次,仍保持90%的催化活性。     

基于因子分析和神经网络分析预测评价酱香酒轮次与工艺

以酱香轮次基酒和酱香成品酒为研究对象,采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）法测定其58组风味物质计算出气味活力值,并进行了因子分析和神经网络分析。结果表明,多层感知器对仁怀大曲酱香一至七轮次基酒的轮次预测正确百分比达80.2%,酱香成品酒的酱香工艺预测正确百分比达94.5%以上。通过多层感知器自变量重要性与因子分析成分矩阵共同分析发现,酱香基酒轮次的预测与异戊醛、乙酸、苯乙酸乙酯、糠醛、乙酸乙酯、2,3,5-三甲基吡嗪等化合物存在较大的相关性;酱香成品酒工艺的预测与辛酸乙酯、正己醇、癸酸乙酯、2,3,5-三甲基吡嗪、辛酸、丁酸等化合物存在较大的相关性。     

离子液体基磷钨酸催化合成香料辛酸甲酯及动力学研究

以正辛酸和甲醇为原料,以离子液体负载磷钨酸为催化剂,考察反应时间、醇酸物质的量比、催化剂用量及反应温度等因素对正辛酸甲酯酯化率的影响,并采用响应面分析法对这些参数进行优化。研究表明优化的最佳反应条件为:催化剂用量为正辛酸用量的4%,醇酸物质的量比8∶1,反应时间3.0 h,温度363 K,在该条件下,正辛酸甲酯的收率达92.5%,结果与模型预测相符。优化条件下,3.0 h内正辛酸甲酯合成反应的活化能为32.09 k J/mol,动力学方程为:r=-dC_A/dt=1.22×10~3exp(-32.09/RT)C_A~(1.73)。     

水稀释法分离鸡卵黄免疫球蛋白的研究

本研究详细探讨了水稀释法分离鸡卵黄免疫球蛋白（Immunoglobulin of Yolk:IgY）的主要工艺条件，当蛋黄液的稀释倍数为6、pH5.2时，IgY的提取率和纯度分别是6.73mg IgY/ml蛋黄、14.66%。比较了水稀释法和聚乙二醇法分离IgY的效果。结果表明，水稀释法更适合于大规模分离食品级IgY。     

除膻菌株分离鉴定及其对膻味脂肪酸降解能力的研究

为了分离筛选出能作用于膻味脂肪酸的微生物,从火腿和土壤中分离出11株菌,这11株菌均能对羊油脂进行水解。通过形态学、生理生化特征鉴定及16S rRNA基因序列和ITS基因序列分子生物学鉴定,确定为6株细菌和5株霉菌。分别将11株菌接种到加入4-甲基辛酸和4-乙基辛酸的液体培养基进行发酵,发现4-甲基辛酸的减少量达到30%～70%,4-乙基辛酸减少量达到10%～70%。这11株菌对膻味脂肪酸具有不同程度的降解作用,该研究结果可为微生物羊肉除膻提供理论基础。     

冰乙醇分级离心法分离纯化鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的研究

采用冰乙醇分级离心法提取鸡卵黄免疫球蛋白 (Immunoglobulin of egg yolk,IgY).通过低温乙醇沉淀、DEAE 葡萄糖凝胶 A-50 离子交换层析、Tris-HCl 缓冲液洗脱及 Sephadex G200 凝胶过滤等逐步纯化免疫球蛋白.研究卵黄稀释倍数、pH 值、乙醇添加量以及盐浓度对纯化效果的影响.分离纯化后所得的提取物经检测 IgY 纯度可达98%,且很好地保持了免疫球蛋白的活性.     

低温乙醇除脂法纯化鸡卵黄中免疫球蛋白

采用低温乙醇除脂法提取鸡卵黄免疫球蛋白 (immunoglobulinyolk,IgY)。通过低温乙醇沉淀、透析和葡聚糖凝胶等不同方法逐步纯化免疫球蛋白。研究了卵黄稀释倍数、乙醇浓度、NaCl浓度以及离心转速对纯化效果的影响。分离纯化后所得的冷冻干燥制品 ,经SDS PAGE和抑菌试验检测可知 :可溶性蛋白质得率为每毫升蛋黄 1 2 6mg ,可溶性蛋白质含量占总蛋白质量的 97% ,且保持了免疫球蛋白的活性     

抗人大肠杆菌蛋黄抗体的分离纯化及理化性质研究

以人源大肠杆菌(ATCC23985)免疫产蛋母鸡所产免疫蛋为原料，通过蛋黄水提物制备、乙醇分级沉淀、离子交换色谱和凝胶排阻色谱对其中的免疫蛋黄抗体进行了分离纯化，并对其基本理化性质进行了分析。结果表明：蒸馏水-氯仿法是制备蛋黄水提物的最优方法，而35％的乙醇添加量能够很好地将水提物中的抗体沉淀出来。经DEAE-Sepharose柱和SephacrylS-200柱连续纯化的抗体在电泳检测时只有1个区带。研究获得的抗人大肠杆菌卵黄抗体的等电点为5.5，包含分子质量分别为65900u和24600u的2类亚基。该抗体的氨基酸组成与普通蛋黄抗体的氨基酸组成差异不大。     

单增李斯特菌(Listeria monocytogens)鸡卵黄抗体的制备及其抑菌活性研究

以单增李斯特菌为抗原免疫产蛋母鸡,比较了不同方法对于鸡卵黄中单增李斯特菌抗体(IgY)的分离效果,研究确定了所得IgY的主要理化性质及其对于单增李斯特菌的体外抑菌效果。研究结果表明,采用硫酸铵盐析法可以取得较好的提取纯化效果,提取液中的单增李斯特菌抗体效价可以达到1∶10 000以上,且蛋白组分较为单一。IgY具有较好的理化稳定性,pH3～9范围内均可保持70%以上的免疫活性,经60℃、4 h处理后仍保持约67%的免疫活性。体外抑菌实验显示,液态培养8 h、固态培养24 h后,该抗体能够对于单增李斯特菌的生长产生显著的抑制率效应;这表明其有望作为新型天然抗菌剂用于生物体及动物性食品中单增李斯特菌的预防和控制。     

绿色高效连续分离技术制备蛋黄中活性蛋白质和磷脂

为了实现蛋黄功能性成分的充分利用，采用绿色溶剂从新鲜蛋黄中高效连续分离具有生物活性的卵黄免疫球蛋白（immunoglobulin Y, IgY）、卵黄高磷蛋白（phosvitin, PV）和磷脂（phospholipids, PL）。首先采用水稀释法（稀释倍数为1:10）分离水溶性组分与脂蛋白，通过35%饱和(NH₄)₂SO₄和0.5% NaCl（w/v）对上清液进行盐析并用8% PEG 6000纯化IgY。脂质组分中的PV在pH5.0，90 ℃条件下的NaCl溶液（w/v）中进一步纯化。采用乙醇/乙酸乙酯比例为1:2（v/v）提取蛋黄中全部脂类，进一步采用乙酸乙酯在0 ℃下提纯蛋黄总脂中的PL。经脱盐、冷冻干燥后，IgY、PV和PL的纯度分别为97.38%、78.63%和85.94%。IgY和PV的得率分别为6.15、10.15 mg/mL。蛋黄总脂中PL的含量为35.18%。因其良好的多不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸比率（0.70）和相对较低的n-6/n-3比率（5.37），该PL产品可应用于食品加工中。本方法简便、环保并且高效，可从蛋黄中依次分离出高纯度IgY、PV和PL，并为蛋黄的综合利用提供技术支持。     

Detection and serological relationships of cymbidium mosaic potexvirus isolates

Twenty-two isolates of Cymbidium mosaic virus (CyMV) were isolated from 35 orchid plants suspected of being infected with CyMV. Among the three methods used for detecting CyMV, immunoelectron microscopy (IEM-1) was shown to be the most sensitive method, being able to detect the virus in 71.43% of suspected CyMV-infected plants while the electron microscopic method and the indexing plant method could detect 51.43 and 42.86%, respectively. Out of 12 symptomless plants investigated, 25% were found by IEM-1 method to be infected with the virus. Purified CyMV were flexuous rods having lengths between 470-490 nm. A few end-to-end aggregates were also observed and the 280 260 absorbance ratios were from 0.884 to 0.929. The yield of CyMV was 31.07 to 44.09 mg per kg of Datura leaves. Antibodies against purified CyMV D2 were produced in rabbits and hens. The antibody titers in the yolk and sera of hens indicated that 0.5 mg of virus per immunization efficiently generated an abundant supply of IgY in the yolk, however 1 mg of virus per immunization gave a stronger immune response in both sera and yolk. The average yields of IgY were 6.5 +/- 0.6 and 9.4 +/- 0.9 mg/ml of yolk in the group that received 0.5 mg and the group that received 1.0 mg of the virus, respectively. Positive ELISA reactions were observed in 18 and 20 of 22 CyMV isolates when detected with rabbit IgG and IgY, respectively, demonstrating that those isolates were serologically related and the ELISA reactions were shown to be stronger with IgY than those with rabbit IgG in most isolates. The degree of reaction between the CyMV isolates, O(2) and O(4), and IgY was less than that of the other isolates. The two isolates, D(6) and Cat(6), gave negative reactions to rabbit IgG. The results of ELISA assays showed that the homologous serological reaction was not consistently stronger than the heterologous one. Twelve isolates out of twenty-two gave stronger reactions than the homologous antigen (CyMV D(2)) when IgY was used as the detecting antibody while nine isolates gave stronger reactions when using rabbit IgG. No reactions were observed with other plant viruses and plant proteins from healthy Datura.     

Protective Effect of Microencapsulation Consisting of Multiple Emulsification and Heat Gelation Processes on Immunoglobulin in Yolk

ABSTRACT: Two different emulsification methods involving multiple emulsification and heat gelation were used for preparation of whey protein-based microcapsules containing immunoglobulin in yolk (IgY). The residual activity of IgY during the emulsion preparation and the effects of microencapsulation on IgY stability under harsh conditions were investigated. The residual activity of IgY in an emulsion prepared with a membrane emulsifier was higher than for an emulsion using a homogenizer. Microencapsulated IgY showed remarkable stability against both pepsin and acid. Both microencapsulated IgY and nonencapsulated IgY were relatively stable in bile and artificial intestinal juice. Microencapsulated IgY retained 74% of initial activity during heat treatment. There were no significant differences in the residual activities of microencapsulated IgY under storage temperatures of 4, 25, and 37°C.     

Immunoglobulin Separation from Egg Yolk: A Serial Filtration System

A serial filtration system was developed for separating immunoglobulin from egg yolk (IgY). Egg yolk was diluted 10 times with water, adjusted to pH 5.0, frozen, then thawed. The diluted yolk was diafiltered through a hard filter paper at 4-6°C to produce a clear water-soluble fraction (WSF). The WSF was then delipidated by filtering through a hydrophobic membrane filter. Ultrafiltration of delipidated WSF at pH 9.0, at 4-6°C, in the presence of 1.5M NaCl resulted in electrophoretically pure (>90%) IgY with a recovery of about 92%. Advantages of this method are the use of only a few mild chemicals and the potential of developing a continuous process.     

PEG6000用于卵黄抗体提取条件初探

本研究采用单因素试验设计,以紫外分光光度法测定的各处理蛋白质浓度为指标,探讨以1:1的稀释倍数,PEG6000浓度、稀释液(PBS)pH值及介质温度对鸡卵黄抗体提取的影响,结果表明:PEG6000浓度、介质温度和稀释液PBS的pH值对鸡卵黄抗体提取存在极显著的影响。稀释液PBS的pH值为7.2,介质温度为31℃左右,PEG6000浓度分别为0、1%、2%、3%、4%、5%六个处理中,以4%浓度的提取效果最好;稀释液PBS的pH值为7.2,PEG6000浓度为3%,介质温度为3、8、14、20、28、36℃六个处理中,以36℃的提取效果越好;稀释液PBS的pH值为7.2,介质温度为31℃左右,稀释液PBS的pH值分别为5.7、6.2、6.8、7.0、7.4、8.0六个处理中,pH值7.0的提取效果最好,且与pH值6.8的处理间差异不显著。