Fenton试剂氧化-荧光分析法测定果蔬中叶酸的含量

利用Fenton试剂作为氧化剂,建立测定叶酸含量的间接荧光法。在pH5.2HAc-NaAc缓冲溶液中,80℃水浴中加热8min,Fenton试剂产生的羟自由基可将叶酸氧化为蝶吟-6-羧酸,氧化产物的荧光值较叶酸的荧光值大大增强,其荧光强度与叶酸质量分数在0.02～1.0mg/L范围内呈线性关系,检出限为2.69μg/L,平均加标回收率为91.0%～96.1%。将此方法应用到梨、苹果、卷心菜中叶酸含量的测定,结果满意。     

反相高效液相色谱 -增敏化学发光测定VB6

基于维生素B6对于鲁米诺(Luminol)和高碘酸钾(KIO4)化学发光反应的增敏作用原理,建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离柱后化学发光检测VB6的新方法,并成功运用于饮料中VB6的测定。其中在鲁米诺中加入KBr可以大大增敏该反应。该方法测定VB6的线性范围为5.0×10-7～5.0×10-4g/mL,检测限为2.0×10-8g/mL。对1.0×10-5g/mL的VB6进行连续5次测定的相对标准偏差分别为2.8%,回归方程为Y=954.472X 1.488。     

磺胺二甲嘧啶间接竞争化学发光酶免疫分析法的建立及应用

建立一种更加灵敏的磺胺二甲嘧啶(SM₂)免疫学检测方法。方法 本研究制备抗SM₂单克隆抗体(SM₂-mAb),用于建立SM₂间接竞争化学发光酶免疫分析法(SM₂-CLEIA),并检测主要动物食品中SM₂残留。结果 本研究制备的SM₂-mAb为IgG_2b亚类,亲和常数为0.12×10⁷ L/mol;SM₂-CLEIA曲线在0.1～1 000 μg/L之间呈现良好的线性关系,相关系数r²=0.990 4,半数抑制浓度(IC₅₀)为4.006 μg/L,检测限为0.174 μg/L,添加回收率为94.41%～104.40%,批内和批间变异系数分别为3.07%和8.22%,与磺胺脒等药物无交叉反应,与SM₂-ELISA试剂盒的阴阳性符合率为100%。结论 建立了灵敏、特异、准确、检测范围宽的SM₂-CLEIA检测方法。     

呋喃它酮代谢物直接竞争化学发光酶免疫分析法的建立

采用以对碘苯酚为增强剂的鲁米诺-辣根过氧化物酶-过氧化氢化学发光检测体系,建立检测动物组织中呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-2-氨基-2-僫唑烷基酮（AMOZ）残留的直接竞争化学发光酶免疫分析法（dc-CLEIA）。结果表明:此方法IC50为0.62 ng/m L,检测限为15.52 pg/m L,线性范围0.038⁹.78 ng/m L,变异系数均小于10%;该方法中抗体除了与呋喃它酮原药有一定交叉外,与其他结构类似物无交叉,表现了良好的特异性;鸡肉样品添加回收率为83%⁹4%,验证了该方法的准确性,为实际动物组织中AMOZ残留提供了便捷、准确、快速筛查的手段。      

反相高效液相色谱-增敏化学发光测定VB6

基于维生素B6对于鲁米诺（Luminol）和高碘酸钾（KIO4）化学发光反应的增敏作用原理,建立了反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离柱后化学发光检测VB6的新方法,并成功运用于饮料中VB6的测定。其中在鲁米诺中加入KBr可以大大增敏该反应。该方法测定VB6的线性范围为5.0×10-7～5.0×10-4g/mL,检测限为2.0×10-8g/mL。对1.0×10-5g/mL的VB6进行连续5次测定的相对标准偏差分别为2.8%,回归方程为Y=954.472X+1.488。      

粮谷中呕吐毒素管式化学发光免疫分析法的研究与应用

目的:建立一种准确度高、重复性优的快速检测粮谷中呕吐毒素（DON）的管式化学发光免疫分析法（CLIA）。方法:本研究基于抗原抗体的特异性反应,选择磁性微粒为固相载体,通过优化磁微粒的稀释度、反应时间等工作条件,建立了高准确度、重复性良好的DON-CLIA。结果:本研究建立的DON-CLIA的检测范围为5¹85 ng/m L;最低检测限为3.82 ng/m L（样本检测限为0.076μg/g）;准确度相对偏差为6.64%,重复性变异系数为2.32%,均小于10%;DON的添加回收率在90%¹10%之间。结论:本研究建立的DON-CLIA的检测范围、检测限、准确度、重复性、回收率,均符合实际工作的要求,是一种快速、高效、准确的化学发光免疫分析法,适用于大量样本的DON含量的测定。      

化学发光酶免疫分析法检测食品中赭曲霉毒素

目的：建立检测食品中赭曲霉毒素(OA)快速灵敏化学发光酶免疫方法。方法：采用棋盘滴定法确定OABSA抗原的包被质量浓度、包被量以及一抗和二抗的工作稀释度,建立间接竞争抑制曲线,确定线性范围、检出限和回收率。结果：确定的检测工作条件为：OA-BSA 最佳包被质量浓度60ng/mL,抗OA 单克隆抗体的最佳工作稀释度1:400,校正曲线线性范围6～400ng/mL,赭曲霉毒素的检出限为0.02ng/mL,50% 抑制质量浓度145ng/mL,在100～2000ng/g 添加水平的回收率范围为83.6%～105.8%。用所建方法对质控样品进行了分析,检测结果符合率达到100%。结论：所建方法准确、灵敏,适用于食品中OA 的筛选。     

化学发光酶免疫分析法快速测定牛奶中恩诺沙星的含量

目的 建立快速测定牛奶中恩诺沙星的化学发光酶免疫检测方法.方法 采用竞争法,即将牛奶样品中的恩诺沙星与标记有碱性磷酸酶的恩诺沙星同时与限量的特异性固相恩诺沙星抗体进行竞争结合反应,通过分离未结合的标记抗原,测定标记抗原与抗体复合物化学发光强度,经相应的数学函数计算出待测抗原的含量.根据这一基本原理,利用金刚烷类体系作为化学发光底物,快速地测定牛奶中恩诺沙星残留量.结果 检出限可达239.9 pg/ml,检测范围为350～1 000 pg/ml,批内与批间相对标准偏差均小于15％.结论本方法在抗生素恩诺沙星残留检测及监控等领域有很好的应用前景.     

浅析高效液相色谱分析法在各领域的应用及发展前景

作为一种分离分析方法,高效液相色谱分析法具有准确、高效以及快捷的特点,广泛应用在食品安全、医药、环境、生命科学以及石油化工中,并且已经成为这些领域中进行检测工作的首选方法。文章对液相色谱分析法在不同领域中的应用情况进行了分析和介绍。     

谷物中赭曲霉毒素A化学发光酶免疫分析法的建立

建立了间接竞争化学发光酶免疫法检测赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA),该方法IC50为112 pg/mL,检出限是2.47 pg/mL,平均批内和批间变异系数分别为7.03%和14.7%。在大米和小麦样本中添加浓度1.5～6μg/kg的OTA标品,平均回收率在66.97%～97.96%之间,与其他常见真菌毒素未见交叉反应。将该方法应用于30份谷物样本(包括20份大米样本和10份小麦样本)中OTA的检测,检测结果与商品化ELISA试剂盒的相关系数R2=0.942 4。该方法简单、灵敏、快速、准确适用于谷物中OTA的检测。     

固定化酶化学发光法测定食品中的淀粉含量

用MCM-41介孔分子筛固定α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和葡萄糖氧化酶,将其用于流动注射化学发光分析体系,可实现对淀粉的快速检测.在酶柱使用温度为55℃,淀粉溶液的酸度为pH =5.0,淀粉溶液的流速为2 r/min的条件下,体系发光强度与淀粉浓度呈良好线性关系,测定的线性范围为1～150mg/L,相关系数0.999 8,检出限为0.3 mg/L,回收率为97.2％～102.2％,连续10次测定的RSD为2.1％,单次测定能在1 min内完成.方法简便、快速、灵敏、准确,对8个样品的测定结果与国标方法的测定结果无显著性差异.     

固定化红曲霉液体发酵Lovastatin的研究

以红曲霉为研究材料,采用海藻酸钠包埋法固定化红曲霉高产Lovastatin菌株,将其与游离细胞的发酵进程进行比较,分析了固定化细胞的发酵特性及发酵稳定性。结果表明,固定化细胞和游离细胞具有相似的前期发酵过程和Lovastatin最高值,但固定化细胞表现出更长的稳定期和更好的稳定性。     

固定化多元菌液态发酵米酒的研究

对以根霉、米曲霉、酿酒酵母共固定化细胞混合液态发酵米酒进行了研究,结果表明:发酵液中米粉浓度为35%,菌种比例为根霉:米曲霉:酿酒酵母=3∶1∶2,发酵温度为30℃,发酵时间为5d,后发酵温度为25℃,发酵时间为15d,产酒为10%(v/v)制得米酒酒体丰满,香气丰富,是一种低度保健的米酒。     

固定化乳糖酶的研究

用明胶作为固定化乳糖酶的载体，研究比较载体的用量、交联剂的浓度，用酶量、制备的pH值。结果表明，选择150g／L质量浓度的明胶为载体，体积分数为0．5％的戊二醛为交联剂，用酶量为0．5g／L，在pH值为7．2．混和搅拌时间为3min的条件下制备固定化果胶酶．其酶活力回收率可达78．12％，重复回收使用7次后，酶活力还可以保留75％以上，是乳糖酶固定化的一种较好的方法。     

不同方法制备PVA载体进行固定化细胞发酵酒精的研究

本研究分别用PVA(聚乙烯醇)冷冻法和PVA-H3BO3交联法制备固定化细胞载体进行发酵酒精,结果表明:PVA冷冻法制备的载体多次发酵时性能稳定,酒精含量最高可达8.37%,实现了重复利用,大大降低了生产成本;PVA-H3BO3交联法制备的载体单批次发酵效果较好,酒精含量为8.26%,残糖为0.18%,但多次发酵载体变形严重,不适宜重复利用。     

固定化生长细胞用于改善氨基酸调味液品质的研究

利用固定化生长的酵母细胞和黑曲霉菌丝体,对酸法水解的氨基酸水解液进行发酵后,水解液异臭味被除去,口味和风味得到明显改善。     

固定化酶载体的研究进展

作为固定化酶技术的重要组成部分,载体的结构及性能在很大程度上直接影响着固定化酶的催化活性及操作稳定性。综述了近年来国内外有关固定化酶载体材料的研究现状和发展趋势。     

Luminol-KMnO4化学发光新体系测定小麦中的微量砷

目的:研究一种快速测定小麦中砷的方法,为小麦的安全监测提供一种方便快速的分析技术。方法:基于As3+定量还原KMnO4的反应和Luminol-KMnO4化学发光反应相偶合,建立了化学发光法测定小麦中总砷的方法。结果:该法的检出限为5.0×10-10g/ml,RSD<5%(n=5),线性范围2×10-9～1.4×10-8g/ml,加标回收率为98%～107%。结论:方法用于小麦中总砷的测定,结果满意。     

Novel Measurement of Hypoxanthine in Fish Using Direct Measurement Probe and Chemiluminescence Flow Injection Analysis

Direct measurements of hypoxanthine (Hx) in fish flesh were carried out using a sardine and a grunt twice with the same fish, and the average of 10 successive measurements (from 120 sec to 480 sec after pressing the probe against fish tissue) was taken as the Hx concentration by direct measurement. Results with two nearby tissues of one sample were 42.9 ± 4.9 μM and 42.6 ± 2.6 μM for the sardine, and 639 ± 33 μM and 598 ± 29 μM for the grunt. For sardine, Hx results from this direct method did not agree well with perchloric acid extraction measurements, but they were much better for grunt.     

柔性固定化木瓜蛋白酶的制备及在酶解波纹巴非蛤中的应用

在壳聚糖膜的表面接上分子链较长的双醛淀粉作为柔性固定化酶的载体,将木瓜蛋白酶固定在该载体上制成柔性固定化木瓜蛋白酶,并应用于酶解波纹巴非蛤制备小分子肽。通过考察温度、pH 值、加酶量和固定化时间等条件对柔性固定化木瓜蛋白酶的酶活、酶活回收率的影响,确定最优固定化条件。结果表明：双醛淀粉用量0.8mg/g 壳聚糖、柔性固定化酶温度25℃、柔性固定化酶时间20h、加酶量40mg/g 壳聚糖、pH8.0 条件下所得的固定化酶酶活最高,酶活回收率63.35%。将该柔性固定化酶在酶解温度40℃、pH7.0、加酶量1.0%、酶解时间4h条件下制备波纹巴非蛤小分子肽,产率为3.4055%。