生产蜂王酸(10-HDA)菌株的筛选与评价

从新鲜的蜂王浆、蜂巢以及其他可能含有脂肪酸的物质中筛选出3株菌株——QYF005、QYF017、QYF024,依据它们产蜂王酸的重现率,确定QYF005作为进一步研究的对象.通过稀释涂布平板的方法,将菌株在30℃培养60h后,选择平板上的单菌落,在160r/min摇床中30℃培养64h,提取产品,用HPLC和GC-MS方法检测该菌株是否在发酵过程中产生蜂王酸.检测结果显示菌株QYF005能够产生蜂王酸,产量达到25mg/L.     

发酵液中提取10-HDA的研究

10-HDA为10-羟基-2-癸烯酸（10-Hydroxy-2-Decenoic酸）,是蜂王浆中的特殊活性物质,抗菌、灭菌、强壮肌体和具有强烈抑制移植性AKR白血病、TA3乳腺癌及多种腹水型艾利虚癌等癌细胞生长的作用。蜂王浆中10-HDA的提取方法有乙醚萃取法、乙醇提取法、溶液沉淀结晶法、醇中沉淀结晶法及从发酵液中提取法等。不同浓度、不同体积的乙醇对产率及质量有影响;不同体积的反萃取剂水对产率也有影响;不同温度对结晶有影响。     

10-HDA抗菌实验的初步研究

本文初步探讨了从蜂王浆中提取10-HDA的工艺，并利用提取得到的10-HDA对实验室常见的几种细菌进行了抑菌活性实验，结果表明：10-HDA抑菌作用因菌种不同而最低抑菌浓度有所不同，大肠杆菌0．625mg·mL^-1、枯草芽孢杆菌为1．25mg·mL^-1、金黄色葡萄球菌为2．5mg·mL^-1，其抑菌效果为：大肠杆菌〉枯草芽孢杆杆菌〉金黄色葡萄球菌，实验表明对常见细菌有较好的抑制作用。     

10-HDA抗菌实验的初步研究

探讨了从蜂王浆中提取10-HDA的工艺，并利用提取得到的10-HDA对实验室常见的几种细菌进行了抑菌活性实验，结果表明：10-HDA抑菌作用因菌种不同而最低抑菌浓度有所不同，大肠杆菌为0．625mg／mL、枯草芽孢杆菌为1．25mg／mL、金黄色葡萄球菌为2．5mg／mL，其抑菌效果为：大肠杆菌〉枯草芽孢杆杆菌〉金黄色葡萄球菌，实验表明对常见细菌有较好的抑制作用。     

苎麻微生物脱胶菌株的筛选

为改进苎麻脱胶工艺,采用选择平板初筛,脱胶发酵实验复筛,从60 株保藏菌种中筛选得到可用于苎麻微生物脱胶的优良菌种———An6。在以未经刮制的苎麻韧皮为主要碳源,015 %(NH4 ) 2 SO4 为氮源,添加0105 % MgSO4 ,0105 %KCl ,011 %K2HPO4 ,01001 %FeSO4 的培养液中,接入An6 ,置30 ℃下150 rPmin处理40 h左右,脱胶麻残胶率为15193 %。     

发酵液中10-HDA的药理保健作用及分析确定

在论文中,说明了10-HDA的药理保健作用,同时研究了硅胶G薄层层析、HPLC和GC—MS法分析发酵液中10-HDA的分析争件和分析步骤,并且利用这三种方法逐步分析和确定了发酵液中的10-HDA,最终确定在发酵液中10-HDA的存在。     

蜂王浆10-HDA提取和饮料加工技术研究

本论文研究峰王浆10-HDA饮料的加工技术。蜂王浆浓度在2％-10％，10-羟基癸烯酸(10-HDA)提取率高，蜂王浆提取液10-HDA有效成分利用率最好。蜂王浆10-HDA提取温度为75℃，pH值为5．0左右。以6000-7000r／min离心10min蜂王浆悬浮液变的透明。蜂王浆饮料的配方为蜂王浆澄清液80份，蜂蜜10份，蔗糖10份，柠檬酸0．1份，加水240份，哈蜜瓜香精适量。此饮料含10-HDA0．82mg/g。     

常压室温等离子体诱变与微生物微液滴培养选育谷胱甘肽高产菌株

为提升野生毕赤酵母菌株BY-1产谷胱甘肽的能力,通过常压室温等离子体（atmospheric and room temperatureplasma,ARTP）诱变技术得到诱变菌株BY-1-26。进一步在摇瓶培养过程中添加1,2,4-三氮唑,提高诱变菌株产量。最后将1,2,4-三氮唑作为筛选因子,利用微生物微液滴培养（microbial microdroplet culture system,MMC）仪对诱变菌株进行适应性进化,获得了1株高产谷胱甘肽的突变株BY-2-24,并对其遗传稳定性进行研究。结果表明：出发菌株BY-1经过ARTP诱变处理、抗性梯度平板初筛、MMC适应性进化、摇瓶复筛等,可以选育高产谷胱甘肽突变株。突变株BY-2-24摇瓶产量达（312.13±2.62）mg/L,较出发菌株提高134.26%,且经过7次传代培养,仍然具有较好的遗传稳定性。同时,生物量提高118.33%,表明诱变菌株的生长能力得到提高。研究表明,ARTP与MMC联合应用作为一种简便高效的微生物诱变方式,可用于定向诱变筛选高性能微生物菌株,为高通量选育目标菌株提供了参考。     

生物合成10-HDA的代谢途径

本文在已有的10-HDA和其他比虫生物信息素与脂肪酸等生物合成研究的基础上，通过将10-HDA的生物合成分为起始脂肪酸、碳链长度的修饰、双键的形成，羟基的形成和10-HDA的转化等几个过程进行分析和讨论，推导得到10-HDA可能的生物合成途径。     

10-HDA生理活性的研究进展

本文介绍了10-羟基-2-癸烯酸（10-HDA）的来源、基本性质、生理活性，并初步阐述了生理活性的功能机制。     

Primary Screening of 10—Hydroxy—2—Decenoic Acid Productive Strains

Introduction10-Hydroxy-2-Decenoic Acid , naturally existed in royal jelly ,isa kind of unsaturated fatty acid, which possesses strong inhibition tothe growth of cancer cells, namely transferable AKR leukemia, TA3breast cancer etc. the molecular formula is: HO-CH2-(CH2)6-CH=CH-COOH (C10H18O3). Recent studies showed that 10-HDAnot only possessed the effect of immuno-regulation and anti-canceractivities [1], it can promote the growth of Tlymphocycte subsets,Interleukin-2 [2] and the ge…     

基于氯化锂复合紫外诱变:10-HDA高产菌株的筛选

实验通过氯化锂复合紫外线诱变手段,寻求10-HDA高产菌株,采用薄层分析法初筛,继续诱变摇瓶复筛,经高效液相色谱检测10-HDA含量,得到一株与出发菌株QYW001相比生物量、10-HDA的含量均有所提高的诱变株QYWT002,10-HDA的产量可达1.4312μg/mL。     

Nisin(乳链菌肽)高产菌选育研究进展

乳链菌肽是某些乳链球菌产生的一种多肽物质,对引起食品腐败的大多数革兰氏阳性菌有很好的抑制作用,是一种高效、无毒副作用的天然生物防腐剂,已经广泛应用于许多领域.综述在选育Nisin高产菌株领域的研究新进展,并进行展望.     

延胡索酸产生菌的筛选

本文报道了延胡索酸产生菌的分离和筛选以及发酵产物的提纯和鉴定。所筛的41株根霉均具有从葡萄糖和淀粉产生延胡索酸的能力,但延胡索酸产量差别很大。在这些菌株中。R_(25)菌株具有较高的产延胡索酸的能力,并产生部分L-苹果酸。R_(25)菌株被鉴定为无根根霉(Rhizopus arrhizus)。无根根霉R_(25)当振荡培养于含有12％葡萄糖的培养基时。延胡索酸产量达5.35g/100ml,并产生2.12g/100mlL-苹果酸、从发酵液中分离提纯的产物为白色结晶,该结晶的Rf值和红外吸收光谱与已知的延胡索酸一致。     

生物转化法生产L－苹果酸的研究（Ⅰ）──富马酸酶产生菌株的筛选

经对３０余份采自不同地区土样的菌种筛选，得到２０株可将富马酸转化为Ｌ－苹果酸的菌株，其中尤以Ｇ（０４）株的转化活力最高。对该菌株的较佳转化条件研究表明：较适的转化温度为３７℃，基质初始ｐＨ值为７．５。菌体经０．２％胆酸３８℃处理２０ｈ，可使富马酸转化率较未处理的对照提高７４．３％。另外，采用０．２％胆酸或０．０６％ＴＰＣ处理菌体，均可在转化反应中抑制琥珀酸副产物的形成。     

蜂王浆中10-HDA提取工艺的研究

比较3种有机溶剂乙醚、乙酸乙酯、乙醇,采用5种方法提取蜂王浆中的10-HDA。利用高效液相色谱法得出:使用乙醇、采用振荡提取法的提取效果最好。通过正交试验优化提取工艺,结果表明,最佳提取工艺条件为萃取剂乙醇浓度100%vol,料液比1∶6,萃取时间60min,萃取1次,10-HDA提取率为33.893%。     

固态发酵生产菜籽肽菌种的筛选

以黑曲霉、白地霉、宇佐美曲霉、雅致放射毛霉、产朊假丝酵母、地衣芽孢杆菌、米曲霉和枯草芽孢杆菌为出发菌,菜籽粕为原料,氮溶解指数、氨基酸态氮、肽得率和蛋白酶活力为评价指标,对固态发酵生产菜籽肽的菌种进行研究结果表明:宇佐美曲霉、雅致放射毛霉和枯草芽孢杆菌发酵效果较好,发酵后产生了较多的低分子量菜籽肽,而枯草芽孢杆菌更适合单菌固态发酵生产菜籽蛋白肽。     

微生物原果胶酶高产菌株的筛选及发酵特性的研究

从24种不同来源的样品中筛选得到一株编号为XZ3的原果胶酶高产菌株，其酶活达126．4U／ml。通过对菌落形态及孢子囊形态的观察，初步鉴定是曲霉属菌株。在不同发酵时间内测定发酵液中还原糖、pH、湿菌体重、PPase及PGase活性。结果表明：该菌株发酵过程中，发酵液中的还原糖含量在菌体生长初期升高很快，在对数生长期又迅速下降；发酵液的pH保持恒定：菌体产酶与菌体生长几乎同步且PPase与PGase活性的变化规律一致，比值在一定范围内保持恒定。     

超高效液相色谱—串联质谱法测定蜂蜜中10-羟基-2-癸烯酸

目的：为蜂蜜的真假鉴别提供一种内源性成分分析方法。方法：采用超高效液相色谱—串联质谱（UHPLC-MS/MS）检测方法,样品用甲醇—水溶液提取,经PLS固相萃取柱净化,用Agilent ZORBAX SB C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.8 μm） 分离,以甲醇—5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾负离子扫描,多反应监测模式检测,外标法定量。结果：10-羟基-2-癸烯酸在质量浓度为0.05~0.80 μg/mL内呈良好的线性关系,相关系数为0.995;方法检出限为 0.03 mg/kg,定量限为 0.10 mg/kg。在0.10,0.20,1.00 mg/kg添加浓度下,10-羟基-2-癸烯酸平均回收率为96.9%~108.3%,相对标准偏差为4.5%~10.7%;日内精密度和日间精密度分别为5.9%~9.2%和3.5%~14.3%。结论：该方法适用于蜂蜜中10-羟基-2-癸烯酸的检测,实际样品测定结果表明10-羟基-2-癸烯酸作为内源性成分在蜂蜜中是普遍存在的。