牛乳纤溶酶及其活性影响因素研究进展

纤溶酶是影响牛乳产品货架期质量的重要因素。纤溶酶的水解活性受到激活剂、抑制剂以及激活剂抑制因子等调控因子的影响，其热灭活参数、水解特性，以及所诱导凝胶表观特性、凝胶机制和检测方法均不同于嗜冷菌所分泌的蛋白酶。奶牛品种、泌乳阶段、胎次、体细胞数、细菌所分泌的蛋白酶等都会影响生乳中纤溶酶含量和活性。由于乳清蛋白、酪蛋白和美拉德反应会对纤溶酶的结构和底物识别产生影响，因此，热加工、膜浓缩和高压等加工工艺都会对牛乳中纤溶酶活性产生影响。本文通过对纤溶酶系组成及其调控机制、纤溶酶诱导牛乳老化凝胶形成机制、影响纤溶酶活性因素和纤溶酶的检测方法进行综述，以期为牛乳纤溶酶的进一步研究提供参考。     

豆豉纤溶酶等微生物源纤溶酶的研究与应用进展

豆豉纤溶酶是从我国传统发酵食品豆豉中分离得到一种具有溶解血纤维蛋白作用的蛋白酶。该文对近五年以豆豉纤溶酶为代表的微生物源纤溶酶的产生菌株筛选诱变与基因克隆表达、发酵工艺优化、酶的分离纯化、纤溶酶功能研究与相关制剂及保健品的开发方面的研究进行综述,对当下国内外对纤溶酶的研究现状进行分析探究,对其应用前景与发展方向进行展望,并对纤溶酶的研究方向提出建议。     

纤溶酶分离纯化的研究进展

对动物纤溶酶(蝮蛇抗栓酶、蚓激酶)及微生物纤溶酶(纳豆激酶、豆豉纤溶酶、链激酶、葡激酶)分离纯化技术进行了综述。     

豆豉纤溶酶载纳米脂质体的制备与表征

为提高豆豉纤溶酶口服生物利用度,建立了豆豉纤溶酶载纳米脂质体系统,并对其表征进行评价。采用硫酸铵梯度法制备的豆豉纤溶酶纳米脂质体的包封率为(52.74±4.24)%,粒径(72.04±31.2)nm,平均Zeta电位-44.2 mV,PdI 0.237。试验结果表明:豆豉纤溶酶纳米脂质体在体外稳定性好,在人工肠液中的释放符合一级动力学释放规律,豆豉纤溶酶在12 h后释放接近完全,无突释现象。豆豉纤溶酶及载酶纳米脂质体肠吸收液酶活性测定结果表明:豆豉纤溶酶及其载酶纳米脂质体在小肠均有吸收,吸收后仍具有纤溶活性。纳米脂质体可有效促进豆豉纤溶酶的吸收。     

豆豉纤溶酶研究概况及进展

豆豉纤溶酶是从我国传统发酵食品豆豉分离得到一种具有强烈纤溶作用丝氨酸蛋白酶。该文对豆豉纤溶酶产生菌筛选与诱变、发酵工艺、酶分离纯化、理化性质、分子生物学研究进行综述;同时还简介豆豉纤溶酶活性测定方法和抗栓、溶栓作用,并对其应用前景进行展望。     

豆豉纤溶酶活性检测及其纯化研究

通过琼脂糖-纤维蛋白平板法测定收集到的豆豉中纤溶酶的活性,实验结果显示,采集于贵州南明蔡家关的豆豉样品DC-H8的纤溶酶活性最高,达到了285.759IU/mL.以该豆豉样品为研究对象,对其中的纤溶酶进行了纯化研究,实验确定的最佳纯化方案为:取一定体积的豆豉纤溶酶粗酶液,在低温(4℃)下,加入4％的活性炭粉末脱色35min;在分段盐析中,首先选择15％饱和度的硫酸铵除去杂蛋白,再用75％饱和度的硫酸铵使纤溶酶充分沉淀分离;最后用葡聚糖凝胶G-50层析分离纯化纤溶酶,收集具有较高纤溶活性的组分,得到了纯化的酶液.最终得到的豆豉纤溶酶酶液纯化倍数达到了27.74倍,活性回收率69.7％,比活力达到了13946.1IU/mg.     

豆豉纤溶酶冻干保护剂的研究

采用正交试验对豆豉纤溶酶冻干保护剂进行了优化。分别以脱脂乳、乳糖、明胶为正交试验因素,以不同添加量为水平。试验结果表明,影响豆豉纤溶酶冻干后残余酶活力的保护剂的主次顺序为15%脱脂奶粉>1%明胶>6%乳糖。豆豉纤溶酶冻干保护剂的最佳组合为A2B4C1,即15%脱脂奶粉与6%乳糖的体积比为1:3;纤溶酶与保护剂的体积比为1:2;残余酶活力超过90%。     

高产溶纤酶菌株的选育

以枯草芽孢杆菌 YL-P2、YL-F2作为出发菌株,分别采用紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变以及紫外线和硫酸二乙酯复合诱变,以脱脂牛奶平板法为初筛方法结合纤维蛋白平板复筛的方法选育出溶纤酶活力高的菌株, 获得了高产溶纤酶菌株 UV-8。UV-8溶纤酶活力达到2 314 IU/mL,与出发菌株相比,酶活力提高了2倍。结果表明,经多次传代后菌株 UV-8的溶纤酶酶活达到稳定,具有很好的潜在开发前景。     

好食脉孢霉产纤溶酶的液体发酵条件优化

以麸皮、豆渣为原料,对好食脉孢霉液体发酵产纤溶酶的发酵条件进行优化。通过单因素试验和正交试验,以纤溶酶酶活为指标,确定好食脉孢霉液体发酵产纤溶酶的最佳发酵条件,其最佳产酶条件为:麸皮添加量10g/100 m L、豆渣添加量32.5 g/100 m L、葡萄糖添加量2 g/100 m L以及摇床转速275 r/min,此条件下纤溶酶酶活可达到134.48 U/m L。     

固定化蚯蚓纤溶酶热稳定性及热失活动力学研究

通过纤维蛋白平板法测定蚯蚓纤溶酶在不同温度下的酶活力,对固定化和游离蚯蚓纤溶酶的热失活动力学进行初步分析。实验表明:随温度升高固定化和游离蚯蚓纤溶酶活性减小趋势逐渐增大,酶失活速率加快。当温度超过60℃时,两者失活现象明显,但固定化蚯蚓纤溶酶的热稳定性明显优于游离酶。动力学分析表明,在30~60℃范围内,固定化和游离蚯蚓纤溶酶热失活的表观活化能分别为130.43 k J·mol-1和116.65 k J·mol-1。     

酶工程研究和酶工程产业的新进展(Ⅰ)——国际酶工程研究领域的若干“热点”和前沿课题

概要介绍了国际上酶工程研究和酶工程产业的新进展。第一部分着重介绍国际酶工程研究领域的若干“热点”和前沿课题 ,包括基因工程和蛋白质工程 ,人工合成酶和模拟酶 ,核酸酶和抗体酶 ,酶的定向固定化技术 ,酶化学技术 ,非水酶学 ,糖生物学和糖基转移酶 ,酶标药物 ,极端环境微生物和不可培养微生物的新酶种 ,酶在环境保护方面的应用等。     

蛋白酶的固定化及其在生物活性物质开发中应用的研究进展

从动植物蛋白中通过酶学方法释放具生物活性的肽类物质是目前酶工程研究的热点课题.固定化酶技术是酶工程的核心技术之一,在生物科学研究、生物产品的制造、食品科学、化学化工及环境科学领域得到了广泛应用.开发新型载体材料,设计简单、方便、高效、条件温和的固定化方法,是固定化酶技术研究的重点.本文结合自己的工作,重点介绍了壳聚糖材料、纳米材料在固定化酶制备中的应用,定向固定化方法研究进展,蛋白酶的固定化及其在生物活性物质开发方面的一些研究进展.     

磁性微球固定化酶工艺研究进展

磁性微球固定化酶就是利用磁性微体作为载体进行酶的固定化,由于其具有环保、酶重复利用效果好和降低生产成本等优点,近几年已经成为研究的焦点。本文重点对磁性微球固定化酶制备工艺的研究现状、应用及发展前景进行阐述,为同行们今后开展研究提供参考。     

葡聚糖在酶催化中的应用进展

酶是能够进行复杂化学反应的生物催化剂,具有活性高、选择性好和环境友好等优良特性。然而用于催化反应的酶来源较窄,空间结构相对柔性易失活,以及催化稳定性差等不足,客观上限制了其应用的进一步扩大,强化酶催化性能包括提高酶活性和增加酶催化稳定性是近年生物工程领域的研究热点。不同的糖类物质对酶的活性均有不同程度的保护作用,葡聚糖是一种以葡萄糖为单元通过糖苷键连接而成的同型多糖,在酶催化性能强化的过程中得到了越来越多的关注。近几年来有关葡聚糖在酶催化性能强化中的研究报道相对较多,本文主要综述了葡聚糖作为交联剂、修饰剂和添加剂在酶固定化过程中的研究进展,介绍了葡聚糖在有机溶剂和无溶剂酶催化体系中的应用实例,分析了葡聚糖对酶催化性能的影响,为葡聚糖在酶催化中的进一步应用奠定基础。     

鸡蛋蛋白质凝胶特性影响因素的研究进展

为了进一步了解不同因素对鸡蛋蛋白质凝胶特性的影响，国内外研究者已经针对性的进行了大量的研究工作。本文综合论述了鸡蛋中蛋白质的组成和凝胶的形成机理，分析了温度、压力、pH、酶、盐、蛋白质浓度、处理时间等因素对鸡蛋蛋白质凝胶特性的影响，其中温度、压力、pH、盐、处理时间几个因素对鸡蛋蛋白质凝胶特性的影响研究已较为全面，但生物酶对鸡蛋蛋白凝胶特性的影响研究相对较少，所研究的酶种类较为单一。通过对这些影响因素的研究状况进行综述，以期为鸡蛋深加工过程中工艺参数的控制提供一定依据，为进一步提升鸡蛋加工产品的凝胶品质提供理论参考。     

酶工程研究和酶工程产业的新进展(Ⅱ)——国内外酶制剂工业的现状、发展趋势和对策建议

概要介绍了国际上酶工程研究和酶工程产业的新进展。第二部分着重介绍国内外酶制剂工业的现状和发展趋势 ,并就加快发展我国酶制剂工业 ,提出了若干对策建议。     

天然多糖在酶固定化载体材料中的应用

简述了5种常用的酶固定化方法及近年来国内外酶固定化载体的研究新进展，介绍了几种天然聚多糖如纤维素及其衍生物、壳聚糖及其衍生物、甲壳素等在酶固定化载体材料中的应用，及其固定化过程，并对酶固定化用材料的发展前景予以展望。     

酶制剂在啤酒澄清方面的研究进展

啤酒生产中添加合适的酶,可以稳定或提高啤酒的质量,这使得越来越多的企业在啤酒生产过程中添加各种酶制剂。该文主要综述了酶制剂在啤酒澄清方面的应用效果,为今后利用酶制剂解决啤酒非生物性浑浊现象及啤酒酶澄清剂研发提供思路和参考。     

微生物低温碱性蛋白酶的研究进展

综述了微生物源低温碱性蛋白酶的研究状况 ,包括酶的微生物来源、生产菌株的选育、酶学特性、酶的结构及人工进化和安全性评价 ,并对其前景进行了展望     

酶制剂在制革工业中的研究进展

综述了酶在制革准备工段、鞣制及鞣后湿加工工段、制革废弃物利用等方面的研究现状,并对酶制剂在制革中的应用前景进行了展望。