γ-氨基丁酸测定方法的研究

在用乳酸菌发酵生产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)时,为了对发酵液中的GABA进行定性与定量分析,本文对纸层析法、高效液相色普法(HPLC)进行了研究,结果发现用本文中实验所确定的改良纸层析法进行初步的定性与定量分析是可行的,再配合PITC柱前衍生-紫外检测的HPLC法进行精确定量分析,结果准确,重复性好。     

高效液相色谱法测定乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸

通过对衍生试剂浓度、衍生时间、衍生温度、检测波长、流动相比例与柱温条件的选择,建立了一种高效液相色谱（HPLC）法灵敏检测发酵液中γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。以邻苯二甲醛为衍生化试剂,衍生时间5 min,衍生温度为室温,色谱条件为：检测波长228 nm,流动相为乙腈-20 mmol/L结晶乙酸钠溶液（21∶79,V/V）,柱温30℃,流速0.8 m L/min。结果表明,在γ-氨基丁酸含量0.05μg/m L～0.50 mg/m L范围内线性关系良好（相关系数R2=0.999 4）,平均加标回收率为91.87%～105.58%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为0.55%～3.74%(n=5),检出限为0.02μg/m L。采用该方法检测发酵液中γ-氨基丁酸含量,其含量范围在0.157～0.369 mg/m L之间。该方法操作简单、灵敏、准确可靠,适用于发酵液中γ-氨基丁酸含量的检测。     

高效液相色谱法测定乳酸菌中的γ-氨基丁酸

建立了邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法.定量测定短乳杆菌中γ-氨基丁酸的方法,为进一步研究乳酸菌中的γ-氨基丁酸奠定了方法基础.在对浓缩发酵上清液柱前衍生后,利用Nova2pakC18色谱柱,以50mmol/L的乙酸钠(pH6.8)-甲醇-四氢呋喃(A相,82:17:1;B相,22:77:1,V/V)为流动相进行梯度洗脱,可以检测到痕量γ-氨基丁酸(2.2mg/100g).精确度和回收率实验表明,该方法可以用于痕量γ-氨基丁酸的检测.     

三种L-苏氨酸的测定方法比较

目的:比较3种测定L-苏氨酸含量的方法。方法:对三种L-苏氨酸的测定方法:纸层析法、薄层层析法、高效液相PITC柱前衍生法进行了比较和优化。并用以上三种方法测定10份发酵液样品中的L-苏氨酸含量及加标回收率。结果:纸层析法、薄层层析法和高效液相PITC柱前衍生法三种方法的决定系数分别为0.9938、0.9971和0.9992,检出限分别为:5、7和1.2 μg/L。在每组样品的方差方面,高效液相PITC柱前衍生法方差最小,纸层析法和薄层层析法相近。三种方法平均样品加标回收率分别为95.60%、95.10%和99.30%。三种方法用来检测样品中的L-苏氨酸含量均效果良好。在准确性方面,高效液相PITC柱前衍生法的准确性最好,纸层析法和薄层层析法次之。结论:纸层析法和薄层层析法成本低,适合部分对精确度要求不高的含量测定。高效液相PITC柱前衍生法测定精确,成本较高,速度快,适合精确测定。     

食品中三种γ-氨基丁酸检测方法比较

应用高效液相色谱(HPLC)、改良纸层析法和Berthelot 色法对不同来源介质中的γ-氨基丁酸(GABA)检测效果进行了比较研究,分别建立了3种方法的GABA检测体系.结果表明,HPLC测定结果准确,灵敏度高,适用范围广;改良纸层析法和Berthelot色法操作简单快速,可用于大量样品中GABA的检测.进一步地,改良纸层析法可用于微生物发酵液等色素含量较少介质中的GABA检测,而比色法更适合成分相时单一介质中的GABA检测.     

高效液相色谱法测定乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸的含量

建立了高效液相色谱邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生-紫外检测法对乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸的含量进行了测定.乳酸菌发酵液经离心,OPA柱前衍生后,利用Luna-C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以15 mmol/mL醋酸钠缓冲液∶甲醇为55∶45为流动相,在流速为0.8 mL/min,柱温30℃,紫外检测波长334 nm的条件下进行测定.结果表明:γ-氨基丁酸在50～800 μg/mL的浓度范围内线性关系良好,线性方程为y=5465.9x-5411(R2=0.9996),检测限为2.6714 μg/mL,平均回收率为98.31％,RSD=2.27％.该方法操作简单、快速,分离度好,精密度高,满足痕量分析要求.     

发芽米中γ-氨基丁酸含量的测定

应用氨基酸自动分析仪测定功能食品发芽米中的γ-氨基丁酸.利用60%的乙醇溶液水浴提取样品,茚三酮柱后衍生,采用氨基酸分析仪测定发芽米中的γ-氨基丁酸.结果显示,加标回收率在98.6%～107.0%之间,GABA最低检出限为0.97 pmol.该方法简便,检测结果准确可靠,重现性好.     

HPLC法定量分析微生物法制备液中产物γ-氨基丁酸和底物L-谷氨酸

建立一种测定微生物法制备液中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)和L-谷氨酸(L-glutamic,L-Glu)的高效液相色谱法。样品经10%三氯乙酸溶液预处理后,用4 mmol/L氯甲酰芴甲酯进行柱前衍生。采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以A[50 mmol/L乙酸钠溶液(p H 4.8)-甲醇-乙腈-四氢呋喃(82∶8.5∶8.5∶1,V/V)]∶B[50 mmol/L乙酸钠溶液(p H 4.8)-甲醇-乙腈-四氢呋喃(22∶38.5∶38.5∶1,V/V)]=30∶70为流动相,流速1.0 m L/min,柱温40℃洗脱,检测波长265 nm。该方法稳定、灵敏、测定周期短、重复性好。在GABA和L-Glu质量浓度为20~400μg/m L范围内有良好的线性关系。与常用衍生剂邻苯二甲醛相比,衍生产物的稳定性更好,且无需梯度洗脱。     

HPLC法测定青稞中γ-氨基丁酸含量的研究

建立了一种测定青稞中γ-氨基丁酸含量的方法,青稞样品中的γ-氨基丁酸与邻苯二甲醛进行衍生反应,采用高效液相色谱法测定,通过色谱柱分离,用外标法定量,最后得出样品中γ-氨基丁酸的含量,γ-氨基丁酸含量在0.1～1.0 mg/m L范围内线性关系良好,平均回收率为98%～103%,RSD为2.0%,此方法可以准确快速的检测青稞中γ-氨基丁酸的含量。     

高效液相色谱法测定发芽米胚芽中的γ-氨基丁酸

建立一种高灵敏度的邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生荧光检测高效液相色谱法测定发芽米胚芽中γ-氨基丁酸(GA-BA)含量的方法。色谱柱为Shimadzu VP-ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:0.05mol/L乙酸钠∶甲醇=60∶40,荧光发射波长λex 338nm,激发波长λem430nm。方法的线性范围为0.10～1.0μg/mL,检出限为0.005μg/mL。日间和日内测定的精密度分别为1.36%和2.54%,加标回收率在98.5%～99.8%。该法简便、快速、灵敏度高,可用于发芽米胚芽中GABA的质量控制。     

基于氨基酸模式的牛奶蛋白掺假分析

以市售合格牛奶及奶粉为材料,采用面粉及淀粉对其进行模拟掺假,通过柱前衍生化-高效液相色谱法(HPLC)对样品中的色氨酸(Trp)、苏氨酸(Thr)、缬氨酸(Val)、赖氨酸(Lys)进行检测,建立判别牛奶蛋白掺假的氨基酸简洁模式.结果表明,建立的牛奶氨基酸模式为:色氨酸∶苏氨酸∶缬氨酸∶赖氨酸=1.0∶2.7∶3.5∶5.4,与世界卫生组织(WHO)提出的牛乳标准氨基酸模式吻合;奶粉氨基酸模式为:色氨酸∶苏氨酸∶缬氨酸∶赖氨酸=1.0∶3.0∶4.5∶5.4;掺假牛奶、奶粉的氨基酸模式与上述氨基酸模式相比有明显差异.利用柱前衍生化-高效液相色谱法建立牛奶及奶粉的氨基酸简洁模式可有效判别出牛奶及奶粉的蛋白掺假,能满足常规检测及乳品的安全控制需要.     

纸色谱萃取分光光度法测定γ-氨基丁酸的研究

对γ-氨基丁酸的定量方法（纸色谱萃取分光光度法和高效液相色谱法）进行了初步研究。分析研究了纸色谱萃取分光光度法测定γ-氨基丁酸的最佳实验条件，结果表明该方法最低检测浓度为0．0176g／L，线性测量范围为0．3-10g／L，平均回收率为99．04％，平均相对标准偏差为2．376％。与高效液相色谱法相比，纸色谱萃取分光光度法具有良好的相关性和较高的准确性和精密度，是一种简单、有效和费用低廉的方法。     

高效液相色谱法测定黑莓果汁及黑莓啤酒中的γ-氨基丁酸

建立了一种黑莓果汁及黑莓啤酒中测定γ-氨基丁酸的高效液相色谱法。采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)为柱前衍生试剂,色谱柱为Waters Acc Qo Tag TM氨基酸分析柱,梯度洗脱,紫外检测波长248 nm。结果表明γ-氨基丁酸线性方程为y=21 012x+155 852,在1~1 000 mg/L范围内呈现良好线性关系,相关系数R2=0.999 4,综合黑莓原汁、浓缩汁及黑莓啤酒样品的结果,加标回收率为87.9%~114.9%,相对标准偏差为2.7%~12.3%,检出限为0.7 mg/L。采用此法检测黑莓果汁及黑莓啤酒中的γ-氨基丁酸方法简便易行,结果稳定性好。     

大豆异黄酮分离检测及保健功效的研究

针对近年来国內外大豆异黄酮的保健功能及结构的相关研究,分析了层析法、高效液相色谱法、高速逆流色谱法分离大豆异黄酮的方法,讨论了紫外分光光度法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱法、气相色谱法、毛细管电泳法、薄层扫描色谱法、双向纸层析色谱法及免疫法等检测大豆异黄酮的方法及其这些分离检测方法的特点.     

液相色谱法与氨基酸分析仪法测定人乳中水解氨基酸的比较研究

目的研究氨基酸自动分析仪法和液相色谱法测定人乳中水解氨基酸含量的比较。方法采用液相色谱柱前衍生和氨基酸分析仪测定人乳中水解氨基酸,液相色谱法选用C18+柱和AQC进行衍生,氨基酸分析仪采用阳离子交换柱和柱后茚三酮衍生。结果两种方法的方法学参数无明显差异,所测结果差异均在4.65%以内。结论两种方法均可采用,可作为互相验证的方法。     

HPLC法测定中国白酒中的γ-氨基丁酸和核苷类物质

建立测定白酒中γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）和核苷类物质（腺苷、尿苷）的高效液相色谱分析方法。确定检测γ-氨基丁酸的色谱条件为流动相A∶B（A-乙腈;B-50 mmol/L三水合乙酸钠）=35∶65（体积比）,流速为1.0mL/min,柱温40℃,检测波长为436nm;确定检测核苷类物质的色谱条件为：流动相10%甲醇,流速为0.8 mL/min,柱温40℃,检测波长为254 nm。对20种白酒分析结果显示,不同香型白酒中功能成分差异明显。GABA在浓香型白酒中较高,其中2号酒样中GABA含量达0.867 mg/L。核苷类物质在芝麻香型和酱香型白酒中要高于浓香型,其中9号达到438.960 mg/L。该方法用于白酒中GABA和核苷类物质的分析具有分离效果佳、精密度高、稳定性高的特点。     

反相高效液相色谱法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量

建立了一种测定发芽糙米中γ-氨基丁酸含量的反相高效液相色谱法.采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生,色谱柱为Wa-tera Sunfire C18,梯度洗脱,检测波长为360 nm.在最适条件下,γ-氨基丁酸的线性检测范围为0.01～0.25 mg/ml,线性关系良好,回收率为99.28%～100.36%.该方法易于操作、稳定、灵敏、准确.用该方法测定发芽前后糙米中GABA的含量,结果显示:糙米中的γ-氨基丁酸由5.01 ms/100 g提高到35.03 mg/100 g.     

UPLC法和HPLC法对比检测乳酸菌发酵液中的γ-氨基丁酸

采用超高效液相色谱（UPLC）与高效液相色谱（HPLC）邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生-紫外检测法对比分析乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸（GABA）含量,建立GABA质量浓度与吸光度值的线性回归方程。2种方法测得的GABA在质量浓度100.0～1 000.0 mg/mL范围内均有良好的线性关系（相关系数R2＞0.998）。UPLC法和HPLC法精密度试验结果相对标准偏差（RSD）均＜1.5%,UPLC法的平均相对标准偏差（MRSD）为0.529%,平均回收率为99.59%;HPLC法的平均相对标准偏差为1.175%,平均回收率为98.06%。结果表明2种检测方法均可准确定量分析乳酸菌发酵液中GABA含量,二者相比较,UPLC法更快捷,更适合大量样品检测。     

液相色谱法与氨基酸分析仪法测定人乳中 水解氨基酸的比较研究

目的：研究氨基酸自动分析仪法和液相色谱法测定母乳中水解氨基酸含量的比较。方法：采用液相色谱柱前衍生和氨基酸分析仪测定母乳中水解氨基酸,液相色谱法选用C18 柱和AQC进行衍生,氨基酸分析仪采用阳离子交换柱和柱后茚三酮衍生。结果：两种方法的方法学参数无明显差异,所测结果差异均在4.65 %以下。结论：两种方法均可采用,可作为互相验证的方法。     

软枣猕猴桃根中蒽醌类化合物的分离纯化和含量测定

利用聚酰胺柱层析和硅胶柱层析法从软枣猕猴桃根中分离纯化蒽醌化合物,采用高效液相色谱法分析法检测软枣猕猴桃根中蒽醌类化合物的含量。结果表明：分离的最佳条件为200 目硅胶、φ1.1 cm×100 cm层析柱、洗脱剂流速1.5 mL/min;甲醇-水（90∶10,V/V）流动相、254 nm检测波长的高效液相色谱测定软枣猕猴桃根中蒽醌主要组分为大黄素和大黄酚,其含量分别为46 μg/g和157.5 μg/g。