酶解反应与超滤膜分离一体化的必要条件(一)

通过对α－淀粉酶催化活力和活力稳定性的研究，寻找使酶解反应与超滤膜分离一体化得以实现的反应条件。通过研究不同ｐＨ值、不同温度下α－淀粉酶活力的变化情况，发现本研究中的α－淀粉酶的活力在ｐＨ５．５左右、温度５０～６０℃最大，并且在稳定剂０．０２ｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２和０．０２ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ存在下，α－淀粉酶的热稳定性大大提高，６０℃下保温３ｈ，酶活几乎不变，符合酶膜反应的要求。研究表明能在一定的ｐＨ值和温度下，保持酶活力，是酶解反应与膜分离一体化得以实现的必要条件。     

葛根淀粉水解工艺的试验研究

采用正交试验,确定了利用α－淀粉酶和β－分酶水解葛根液的 化条件：液化温度９５℃,ｐＨ６．０,α－淀粉酶添加量０．１％,酶解时间６０ｍｉｎ,糖化条件;糖化温度６０℃,ｐＨ６．０,β－淀粉酶添加量为８．０ｍＬ／ｋｇ原料,糖化时间６０ｍｉｎ。     

突变株U—616葡萄糖异构酶及其固定化研究

树状黄杆菌ＮＲＲＬ１１０２２的诱变株Ｕ－６１６所产葡萄糖异构酶在６０℃～８０℃范围有较高活性，最适ｐＨ为７．５～８．５。对其固定化异构酶的理化性质进行了实验性探索。实验结果表明：固定化酶保留了８３％的游离酶的活力，在５５℃～８５℃范围有较高活性，最适ｐＨ为７．０～８．０；在６０℃，底物ｐＨ值为８．０及含有１．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ钴、镁离子时，固定化异构酶的酶活达到最高。此异构酶及其固定化酶均对金属离子耐受性较强，Ｃｏ２＋和Ｍｇ２＋有激活作用，对Ｃａ２＋不敏感，热稳定性较好。树状黄杆菌变株Ｕ－６１６所产葡萄糖异构酶及其固定化异构酶具有较大的工业应用价值。     

糖化酶的分批发酵动力学研究

用国内常规糖化酶生产菌株黑曲霉ＵＶ－１１,利用５升全自动发酵罐培养,在以淀粉为碳源,ＮＨ４Ｃｌ为氮源的合成培养基中,３３℃,ｐＨ４．５条件下进行分批发酏,菌体比生长速率为０．０２～０．０３１／ｈ时,糖化酶的比生产速率可达最大,为１５００～１８００ｕ／ｇ．ｈ,酶活力为２１９０ｕ／ｍｌ。     

大麦根磷脂提取条件研究

大麦根中含有较高活力的磷脂酶。提取磷脂酶的条件为１０倍大麦根重量的水浸提２０小时,浸提温度２０℃,ｐＨ６．５。温度对磷脂酶提取影响最大,依次为ｐＨ和提取时间。Ｃａ＾２＋对磷脂酶有激活作用,当Ｃａ＾２＋浓度０．００５ｍｏｌ／Ｌ,反应温度４０℃时酶活力达最大值,６５℃以上酶基本失活。     

谷氨酸脱羧酶活性测定研究

酶活性测定是进行酶研究的关键,运用ＭＩＡ－３型微机化多功能离子分析仪,与ＣＯ２气敏电极相匹配,确定了谷氨酸脱羧酶活性测定体系。研究了不同的缓冲体系对酶活性测定的影响,确定了ｐＨ为４４,０１０ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４－００５ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸缓冲溶液作为反应缓冲体系。测定了谷氨酸脱羧酶的最适ｐＨ（５０）和最适温度（５５℃）,确定了ＧＤＣ活性测定体系为：ｐＨ为４４,０１０ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４－００５ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸缓冲溶液,反应温度为３７℃,溶液中底物浓度为１２ｍｍｏｌ／Ｌ。经测定谷氨酸脱羧酶活性为１７６ｍｍｏｌ／Ｌ·ｍｉｎ,相对平均偏差小于１％。     

绍兴腐乳毛坯中蛋白酶的检测

１．７５％ＮａＣｌ溶液可有效抽提林木毛霉菌丝体表面的蛋白酶，依此确立了腐乳毛坯中蛋白酶的检测法，该酶系在４０℃以下２ｈ酶活稳定不变，６０℃１ｈ能保持５８％活力；其最适作用温度和ｐＨ分别为５５－６０℃和６－７ｐｈ；ｐＨ稳定范围为４－７；ＮａＣｌ和ＣＨ３ＣＨ２ＯＨ对酶系有明显的保护作用，讨论了蛋白酶检测及其性质对腐乳工艺改进的指导意义。     

对几种相关酶联合固定化初探

用聚丙烯酰胺包埋,再以戊二醛交联联合固定了α淀粉酶、糖化酶和葡萄糖异构酶,对联合固定化的最适条件和联合固定化酶的性质进行了初步研究．结果表明联合固定化酶较固定化单酶更能发挥协同效应,能够将底物一步水解并转化为产物．文中所用的固定化方法与其他方法相比,固定化酶的稳定性、半衰期及酶固定化后活力均较高．在６０℃、ｐＨ５５时,α淀粉酶和糖化酶二酶的联合固定化酶的活力最高,其操作半衰期达到７９ｈ;在６０℃、ｐＨ７５时,α淀粉酶、糖化酶和葡萄糖异构酶三酶的联合固定化酶的活力最高,其操作半衰期达到９０ｈ．     

α—淀粉酶固态发酵的研究

研究了固态法发酵生产α－淀粉酶的工艺，用麸皮作原料，其优化条件是：在接种量０．０８％，拌水比１：０．６，ｐＨ６．０，培养温度３７℃，葡萄糖浓度１５％，发酵７２小时，其酶活力可达１７４２ｕ／ｇ。与液态发酵相比，固态发酵能有效地克服分解代谢产物的阻遏作用。     

培养基及培养条件对普鲁兰酶的影响

从土壤中分离出一株产普鲁兰酶的菌株，初步鉴定为芽孢杆菌，通过优化发酵培养基及发酵培养条件，在２５０ｍＬ的摇瓶中可达到４．５μｍｏｌ／（ｍｉｎ．ｍＬ）的普鲁兰酶酶活。优化后的发酵培养基成分如下：玉米支链淀粉２ｇ／ｄＬ，蛋白胨２ｇ／ｄＬ，牛肉膏１．５ｇ／ｄＬ，ＮａＣｌ０．５ｇ／ｄＬ，ＭｎＳＯ４２μｍｏｌ／Ｌ。摇瓶发酵工艺条件：接种量１７％，温３７℃，摇瓶转速２２０ｒ／ｍｉｎ，ｐＨ６．０，发酵周期３２ｈ     

碱性内切蛋白酶水解大豆蛋白的研究

以大豆分离蛋白为底物,通过单因素分析,正交试验以及对水解蛋白曲线分析,确定了Ａｌｃａｌａｓｅ碱性内切蛋白酶水解大豆蛋白的最佳水解条件,底物质量浓度为６０ｇ／Ｌ,ｐＨ值为７．５水解温度为６０℃,酶－底物比为４．０ｍＬ／ｋｇ,反应时间为１０ｈ。     

α－淀粉酶发酵工艺条件试验研究

本文以枯草杆菌ＢＦ－７６５８的诱变菌株Ｎｉｎｇ作为试验菌株，分别在摇瓶条件下和１０升发酵罐上进行α－淀粉酶的发酵工艺条件的试验研究。结果表明：该菌株的发酵培养基碳氮比为１．４∶１，最适ｐＨ为６．５，通风量的变化极大地影响产酶能力；在较佳的培养条件下，摇瓶产酶活力为４０９．０ｕ／ｍｌ，１０升发酵罐的产酶活力为３９７．２ｕ／ｍｌ，比原菌提高约１００ｕ／ｍｌ。     

SmCl3—CaCl2—MgCl2体系相图的研究

利用差热分析方法研究了ＳｍＣｌ３－ＣａＣｌ２－ＭｇＣｌ２三元体系相图。发现它属于简单共晶型，三元共晶点Ｅ５０．０ｍｏｌ％ＳｍＣｌ３，３０．５ｍｏｌ％ＣａＣｌ２，５２８℃。     

Cu(Ⅱ)-3,5-diCl-DMPAP-OP 显色反应及其应用研究

研究了在非离子表面活性剂ＯＰ存在下，２－（３，５－二氯－２－吡啶偶氮）－５－二甲氨基苯酚（３，５－ｄｉＣｌ－ＤＭＰＡＰ）与Ｃｕ（Ⅱ）的显色反应。实验表明，在ｐＨ７．５～１０．０的硼砂缓冲介质中，铜（Ⅱ）与试剂形成１∶２的稳定的红色配合物，其表观摩尔吸光系数ε５５８＝９．７×１０４Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１，铜浓度在０～６．５μｇ／１０ｍＬ范围内符合比尔定律。在柠檬酸三钠和二酮肟的存在下，可直接用于铝合金和纯铝中微量铜的测定，获得满意结果。     

焦化苯酚合成水杨醛,香豆素的实验研究

以焦化苯酚为原料,在５５￣６０℃下合成了水杨醛,反应时间为１．５ｈ,收率为５５．１％,再将水杨醛缩合帛蜊香豆素,收率可达６０％以上。最佳工艺条件下：水杨醛：醋酐＝１：３．５,催化剂加入量为０．２５ｍｏｌ／ｍｏｌ醛,反应温度为１８０－１８５℃,反应时间为５￣６ｈ。     

固定化黄色短杆菌生产L—苹果酸新工艺及动力学研究

研究了固定化黄色短杆菌ＭＡ－３在富马酸盐体系中转化生成Ｌ－苹果酸的新工艺，研究结果表明当富马酸铵盐浓度为１．８ｍｏｌ／Ｌ，体系ｐＨ为７．０￣８．０，反应温度为３７℃时，Ｌ－苹果酸的得率达２１６ｇ／Ｌ。对固定化黄色短杆菌的动力学研究结果为Ｖｍａｘ＝７６ｍｍｏｌ／［Ｌ·ｈ·ｇ（固定化湿细胞）］，Ｋｍ＝４．７６×１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ，Ｃｐｍ＝１．６９ｍｏｌ／Ｌ。     

水溶性C60—脂质体的循环伏安特性研究

本文通过卵磷脂包装技术，制备了水溶性Ｃ６０－脂质体，采用微电极循伏安法，在室温下，支持电解质为０．０５ｍｏｌ／Ｌ（ｎ－Ｂｕ）４ＮＢｒ／ＰＢＳ的水溶液中，于－０．７８Ｖ（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ）处记录到一对显著的、可逆氧化还原峰．     

磺胺甲基异恶唑在Nafion修饰玻碳电极上的伏安测定

本文用循环伏安法、差分脉冲溶出伏安法研究了磺胺甲基异恶唑（ＳＭＺ）在Ｎａｆｉｏｎ修饰玻碳电极上的伏安特性，并且测定了复方新诺明片剂中ＳＭＺ的含量发现在０．０２ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ底液中，ＳＭＺ在＋１．０５Ｖ（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ）处产生一灵敏而尖锐的氧化峰，峰电流在１×１０＾－６－４×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ范围内呈现良好的线性关系。其检测限为５×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ．Ｎａｆｉｏｎ修饰电极比未修饰的玻碳     

Mn（Phen）_3~（2＋）催化分解H_2O_2反应动力学研究

本文研究了Ｍｎ（Ｐｈｅｎ）_３~（２＋）催化分解Ｈ_２Ｏ_２反应，获得反应速率方程式，在ｐＨ＝５．８４－７．００；Ｉ＝０．４ｍｏｌ·ｄｍ~（－３）（ＮａＣｌ）；Ｔ＝３０３±１Ｋ条件下，测得速率常数ｋ，并对其反应机理进行了讨论。     

反胶团萃取α－淀粉酶的优化实验

采用新型ＤＭＢＡＣ／正庚烷反胶团体系，进行萃取分离提纯α－淀粉酶．考察了表面活性剂浓度、ｐＨ、离子强度、温度等参数对萃取的影响，确定了优化工艺条件，单级萃取α－淀粉酶的总收率可达７８．０％．