紫娟茶提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用

首先对从蘑菇中提取的酪氨酸酶的反应条件进行了探讨。采用单因素和正交实验确定了酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的最适反应条件。结果显示单酚酶最适反应条件为:底物L-酪氨酸为10.0mmol/L,酪氨酸酶为0.30g/mL,反应时间为15min,反应温度为30℃;二酚酶最适反应条件为:底物邻苯二酚为7.5mmol/L,酪氨酸酶为0.035g/mL,反应时间为15min,反应温度为15℃。然后对紫娟茶的3种提取物的酪氨酸酶活性的抑制作用进行了探讨。结果表明,3种提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有较好的抑制作用,特别是含有花青素和茶多酚混合物的提取物I的抑制作用最强;3种提取物对单酚酶和二酚酶的半抑制浓度IC50分别为6.85×10-4、8.21×10-4、16.29×10-4g/mL和6.37×10-4、7.62×10-4、13.53×10-4g/mL。      

龙井乙醇提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用

以龙井、柿叶、贡菊和银杏叶为原料,用L-酪氨酸和L-DOPA为底物测定各原料的乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,四种原料的乙醇提取物对酪氨酸酶均有一定的抑制作用,以龙井的抑制率最高,当浓度达到4mg·mL-1（以生药计）时,抑制率为30.36%,其IC50值为7.5mg/mL。龙井乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用属于可逆过程,其抑制类型为混合型,KI为3.1,KIS为9.3。      

红酒对酪氨酸酶抑制作用的研究

通过研究红酒对酪氨酸酶的抑制作用,发现红酒对该酶具有良好的抑制作用.红酒中的多酚成分是抑制酪氨酸酶的重要活性物质,对酪氨陵酶的半抑制浓度(IC50)为0.14mg/L～0.18mg/L,抑制动力学类型为非竞争型.同时,通过测量红酒面膜原液中多酚含量及对酪氨酸酶的抑制活性,对市售红酒面膜产品的真伪及功效进行了鉴别和评价.     

酱油对酪氨酸酶抑制作用的研究

酪氨酸酶是合成黑色素过程的关键酶,通过测定酱油对酪氨酸酶活性的影响来确定其对酪氨酸酶的抑制作用及抑制机理。结果表明:酱油对酪氨酸酶具有较强的抑制作用,酶抑制率达到50%时(IC50)酱油固形物含量浓度为19.8g/L。酱油对酪氨酸酶的抑制作用动力学行为表现为可逆混合性抑制类型。     

儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制作用

采用分光光度计法测定酶液加入量、底物浓度、温度、pH 值对酶活力的影响,确定最适反应条件。在30℃、pH6.8 的Na2HPO4-NaH2PO4 缓冲体系中,采用酶动力学方法研究儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制效应。结果表明：反应最适条件为酶液加入量0.5mL、底物浓度2mmol/L、温度30℃、pH6.8。儿茶素对马铃薯酪氨酸酶有抑制作用,抑制率达到50% 的儿茶素质量浓度(IC50)约为0.27mg/mL;Lineweaver-Burk 图显示儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制作用表现为竞争型抑制,抑制常数(KI)为0.16mg/mL。     

甘薯叶提取物对酪氨酸酶的抑制作用

为探究甘薯叶提取物对酪氨酸酶活性的影响,利用不同极性溶剂萃取甘薯叶乙醇提取物,分别得到石油醚层、三氯甲烷层、乙酸乙酯层及正丁醇层萃取物,并采用多巴速率氧化法考察不同溶剂提取物对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,甘薯叶提取物中存在能抑制酪氨酸酶活性的物质,其中甘薯叶正丁醇萃取物对酪氨酸酶的抑制作用最明显,根据正丁醇萃取物抑制酪氨酸酶的Lineweaver-Burk双倒数拟合方程可得,甘薯叶提取物对酪氨酸酶的抑制作用是可逆过程,其抑制类型是混合型,KI与KIS分别为0.198、0.209 mg/mL,即甘薯叶提取物与游离酶的结合程度大于与酶-底物络合物的结合。     

山杏花总黄酮抗氧化活性及其对酪氨酸酶抑制作用的研究

利用闪式提取法提取山杏花总黄酮,并以X-5大孔树脂进行分离。通过测定分离前后山杏花总黄酮对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力,总还原能力和总抗氧化能力,评价了其抗氧化活性;通过测定酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率,以V_C和β-熊果苷为阳性对照,研究了分离前后山杏花总黄酮对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且分离后抗氧化活性得到明显提高;分离前后山杏花总黄酮对酪氨酸酶的抑制能力均强于β-熊果苷弱于V_C,其IC₅₀值分别为2.24、3.08 mg/m L。综上所述,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且能有效抑制酪氨酸酶的活性。      

山杏花总黄酮抗氧化活性及其对酪氨酸酶抑制作用的研究

利用闪式提取法提取山杏花总黄酮,并以X-5大孔树脂进行分离。通过测定分离前后山杏花总黄酮对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力,总还原能力和总抗氧化能力,评价了其抗氧化活性;通过测定酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率,以V_C和β-熊果苷为阳性对照,研究了分离前后山杏花总黄酮对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且分离后抗氧化活性得到明显提高;分离前后山杏花总黄酮对酪氨酸酶的抑制能力均强于β-熊果苷弱于V_C,其IC_(50)值分别为2.24、3.08 mg/m L。综上所述,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且能有效抑制酪氨酸酶的活性。     

银杏叶提取物对酪氨酸酶活力的抑制作用

酪氨酸酶活性与黑色素的形成有关。用L-酪氨酸作底物,测定了银杏叶提取物对酪氨酸酶的非竞争性抑制作用。其抑制常数（ki)为34mg/ml;银杏叶提取物浓度为0.16mg/ml时,最大抑制率为52.83%,银杏叶提取物有望成为预防和治疗黑色素疾病的药物。     

酶解鱼鳞胶制备小分子多肽的研究

以鱼鳞为原料采用蛋白酶酶解，确定制备小分子多肽的最佳工艺条件。发现用混合蛋白酶进行阶段酶解效果最好；对两种脱苦、脱腥的方法进行了比较，发现用复配脱色剂比用活性碳优越；发现超滤分离技术和反渗透膜分离技术对水解液有纯化、浓缩作用；最后经微胶囊化包埋喷雾干燥等技术得到的粉末制品含有较多的小分子多肽，是医药和食品的良好中间体产品。     

根皮苷及苹果幼果多酚对酪氨酸酶活性的抑制作用

为比较苹果幼果多酚及其主要组分根皮苷作为酪氨酸酶抑制剂的潜质,本文以曲酸为阳性对照,分析并比较了三者对酪氨酸酶的抑制效果及抑制动力学。结果表明,根皮苷、苹果幼果多酚和曲酸均能有效抑制酪氨酸酶单酚酶及二酚酶活性,三者抑酶效果的强弱顺序为曲酸苹果幼果多酚根皮苷,对单酚酶活性的IC50分别为55.80、54.30和23.81μg/m L,对二酚酶活性的IC50分别为75.30、56.15和23.45μg/m L;根皮苷浓度为200μg/m L时为竞争型抑制,低于200μg/m L时为混合型抑制,苹果幼果多酚为非竞争型抑制,曲酸为混合型抑制。因此,抑制剂的组成成分和浓度均能影响其抑酶效果和抑酶机理,三种抑制剂均可通过抑制酪氨酸羟化生成多巴及抑制多巴氧化成多巴醌来减少黑色素的合成,苹果幼果多酚对酪氨酸酶活性的抑制效果优于根皮苷,且含量丰富,价格便宜,更适合作为酪氨酸酶抑制剂,有望开发应用于美白产品中。     

柠檬精油抑制酪氨酸酶活性的研究

本文通过测定抑制酪氨酸酶活性,DPPH (1, 6-双(二苯基膦)己烷)清除自由基能力以及铜离子螯合能力,研究了柠檬精油和其组成中的六种挥发性成分抑制酪氨酸酶的机理。结果表明：柠檬精油和挥发性成分对酪氨酸酶均产生良好的抑制作用,通过空间位阻效应和清除氧自由基等非抑制酪氨酸酶活性部位的机理;其中柠檬醛（含量为2.16%）和乙位蒎烯（含量为14.30%）对酪氨酸酶的抑制率分别为76.64%和61.82%,表现出显著的抑制能力;然而,D-柠檬烯（含量为61.41%）的抑制率仅有33.25%;六种挥发成分的协同效应使得这些物质的混合物对酪氨酸酶的抑制作用强于柠檬精油;随着浓度的增加,柠檬精油抑制能力增加,其中达到50%的抑制能力的浓度为620±15.72 μg/mL;Linewear-Burk曲线说明柠檬精油的抑制类型为非竞争性,并且Km=0.30±0.003mM;基于DPPH实验得知柠檬精油和柠檬醛具有较强的清除自由基能力,两者的50%清除率浓度分别为123.65±20.20 mg/mL和176.54±23.20 mg/mL;铜离子螯合实验证明六种组分虽然表现为良好的抑制酪氨酸酶作用但均不与酪氨酸酶活性部位相结合。以上结果表明柠檬精油在食品和化妆品行业中可作为潜在的生物性和功能性天然原料。     

银耳多糖醇沉级分对酪氨酸酶的抑制作用

采用分步醇沉法得到4种银耳多糖级分——STP 20、STP 40、STP 60、STP 80,分析其得率、纯度和相对分子质量及纯化STP 60的单糖组成,研究其对酪氨酸酶的抑制作用及作用类型。结果表明, STP 60的得率和纯度均为最高,分别为19.28%和81.12%; 4种银耳多糖级分均具有一定酪氨酸酶抑制作用,其中STP 60的抑酶作用最大,质量浓度1 mg/mL时对酪氨酸酶活性的抑制率为37.55%; STP 60对酪氨酸酶的抑制作用属于非竞争性可逆抑制。银耳多糖在美白类化妆品中具有潜在应用价值。     

5种天然植物提取物抗氧化性和酪氨酸酶抑制作用的比较

本研究检测了5种天然植物提取物体外抗氧化及酪氨酸酶活性抑制作用,并分析其黄酮和总酚含量,探讨提取物美白与抗氧化之间的关联。研究表明通过ABTS+、DPPH+、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能力测定得5种提取物的抗氧化能力强弱顺序虽有所差异,但四种抗氧化方法均表明提取物具有一定的抗氧化能力。同时酪氨酸酶活性抑制检测也表明它们均对酶活有一定抑制作用。5种植物提取物抗氧化及酪氨酸酶活性抑制能力均随样品浓度增加而增大,这些结果提示提取物抗氧化能力与其对酪氨酸酶活抑制作用相关联,可能是与提取物中黄酮和总酚物质有关。当采用ABTS+、DPPH+方法时,5种提取物的抗氧化性与酪氨酸酶抑制作用相关性更大,这可能与黄酮和酚类物质对酪氨酸酶活性抑制机理有关,研究结果可为天然美白植物原料的筛选和研发提供一定理论依据与借鉴。     

白藜芦醇对酪氨酸酶体外抑制活性的动力学研究

在30℃,pH 6.8的Na2HPO4-NaH2PO4的缓冲体系中,采用酶促动力学方法,研究了白藜芦醇对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的抑制作用。结果表明,白藜芦醇对酪氨酸酶、单酚酶和二酚酶均有抑制作用,对单酚酶抑制活性的IC50值(抑制率达到50%时的白藜芦醇质量浓度)约为5.1mg/mL,对二酚酶抑制活性的IC50值约为5.6 mg/mL。此外,白藜芦醇可延长单酚酶的迟滞效应,8 mg/mL的白藜芦醇能使迟滞时间从22 s延长至62 s,而对二酚酶则无此迟滞作用。Lineweav-er-Burk图分析表明,白藜芦醇对酪氨酸酶的抑制作用为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为3.4 mg/mL和35.98 mg/mL。     

2-茚酮基姜黄素类似物对酪氨酸酶的抑制作用

酪氨酸酶抑制剂可作为食品添加剂用作果蔬保鲜和防腐,芳香醛在适宜的条件下与2-茚酮进行缩合反应,合成5种含2-茚酮基的对称姜黄素类似物(A1～A5)。利用紫外分光光度法测定其对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明:合成的对称性姜黄素类似物均对酪氨酸酶有较强的抑制作用,其中A2～A4的半数抑制浓度(IC50)分别为25.42、13.51、10.71μmol/L,比广泛使用的食品添加剂曲酸(IC50为28.59μmol/L)的抑制作用强。     

米曲霉发酵大米中抗氧化物质对酪氨酸酶的抑制作用

本实验采用两种不同米曲霉菌种(Aspergillus soji,A.orgzae)在35℃和湿度>90%的条件下对大米进行固态发酵6 d,比较发酵大米在发酵过程中活性物质的金属螯合、多酚氧化酶抑制、氧自由基吸收能力及总酚含量的变化。A.orgzae发酵的大米在金属螯合、多酚氧化酶抑制和氧自由基吸收能力上优于A.soji,两者在总酚含量上没有较大差别,且在发酵第4 d时大米的上述四项活性都趋于稳定,故选取A.orgzae发酵4 d的大米探讨其所含活性物质对酪氨酸酶的抑制作用。采用Lineweaver-Burk双倒数法探讨A.orgzae发酵大米中活性物质对蘑菇酪氨酸酶催化L-多巴氧化的抑制作用并推测其抑制机理。同时,虾血淋巴和虾黑变的抑制实验也证明了米曲霉发酵大米对酪氨酸酶的有效抑制作用。