板栗花粉总黄酮提取及HPLC定量

对板栗花粉总黄酮提取工艺进行优化,最佳提取条件:提取温度60℃、提取时间1.5h、乙醇浓度80%、液固比(V/m)20:1.HPLC条件:紫外检测波长280nm、柱温30℃、进样量20μL、流速1mL/min、流动相甲醇:水=75:25(V/V),在此色谱务件下HPLC法测定板栗花粉总黄酮含量为5.00g/100g.     

板栗花粉总黄酮提取及HPLC定量

对板栗花粉总黄酮提取工艺进行优化,最佳提取条件:提取温度60℃、提取时间1.5h、乙醇浓度80%、液固比(V/m)20:1。HPLC条件:紫外检测波长280nm、柱温30℃、进样量20μL、流速1mL/min、流动相甲醇:水=75:25(V/V),在此色谱条件下HPLC法测定板栗花粉总黄酮含量为5.00g/100g。      

板栗花粉总黄酮提取工艺的研究

用乙醇提取板栗花粉中的总黄酮,对提取条件进行优化,最佳提取条件为：提取温度60℃、提取时间1.5h、乙醇浓度80%、液固比10：1,水浴加热提取,在此条件下,用＂NaNO2-Al（NO3）3-NaOH＂显色法测定板栗花粉中的总黄酮含量为1.68%,采用高效液相色谱法（HLPC）定性分析黄酮物质。     

板栗多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

从板栗中分离纯化得到多糖并研究其抗氧化活性.采用沸水提取、Sevag法除蛋白、80%乙醇沉淀的方法从板栗中提取得到板栗多糖CPS.CPS经DEAE-纤维素柱分离纯化后,于蒸馏水洗脱液中得到一个纯化多糖组分CPS1.以VC为对照,试验了CPS与CPS1对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除能力及还原能力.结果表明,CPS与CPS1均具有一定的清除羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的能力及还原能力,而且与多糖的浓度成正相关性.其中,CPS对过氧化氢的清除作用效果与VC相当.另外,经纯化精制后的CPS1对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除作用及还原能力均低于CPS.     

板栗壳色素提取工艺研究

对板栗壳色素的提取工艺及抗氧化活性进行了研究。以色素含量为评价指标,研究乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比、提取次数5个因素对提取率的影响。在单因素实验的基础上设计四因素三水平的正交实验,得出板栗壳色素的最佳提取工艺为:乙醇浓度40%,提取温度90℃,料液比1∶10,提取时间2.5 h。以还原力和对羟自由基的清除率为评价指标,研究结果表明,板栗壳色素具有一定的还原力和清除羟自由基的活性。     

鲍鱼脏器糖蛋白超声辅助提取工艺及分离纯化的研究

以冻藏鲍鱼脏器为试验原料,分析了鲍鱼脏器的基本成分组成,研究了鲍鱼脏器糖蛋白的分离纯化及纯化物基本组成。通过单因素试验、正交试验确定了最适提取条件为:5%NaCl溶液、料液质量比1∶9、超声功率为300 W、超声处理时间为40 min,在此条件下,糖蛋白提取率为69.7 mg/g(干重),比传统方法提高了28.5%。糖蛋白粗品经硫酸铵沉淀,DEAE-Cellulous 52柱层析,SephacrylS-300 HR柱层析后,经SDS-PAGE电泳鉴定得到分子质量为73.7 ku的组成均一的糖蛋白AGP-Ⅱ,AGP-Ⅱ含有总糖12.4%,总蛋白76.6%。     

纳豆激酶分离纯化的工艺研究

通过对纳豆激酶分离纯化工艺的研究,得出:纳豆激酶发酵液经离心、过滤及CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析纯化后,纯化液经SDS-PAGE电泳为一条单一色带,纯化倍数达29.6.经中试扩大试验,效果基本一致.通过初步的冻干试验,得出最佳赋型剂为1%甘露醇和2%甘氨酸.     

油松花粉多糖分离纯化及初步结构鉴定

采用水提法从油松花粉中提取多糖,用DEAE-纤维素52柱色谱和Sephaeryl S-200凝胶柱色谱进行分离纯化,获得2种均一组分D11和D31.经过Sephaeryl S-300凝胶柱色谱进行纯度鉴定,表明D11和D31是均一多糖,用凝胶过滤法测定D11分子量为76468u,紫外光谱证明D11不含蛋白质,红外光谱表明D11中含有多糖类物质的特征吸收峰.     

油菜花粉多糖提取工艺条件研究

对油菜花粉多糖的提取工艺进行研究。探讨浸提次数、时间、料液比和温度对多糖得率的影响,在单因素试验的基础上,通过正交试验确定最佳提取工艺条件。结果表明:温度对多糖得率的影响最大,其次为提取时间、次数,料液比的影响最小。油菜花粉多糖提取的最优条件为1:4的料液比,90℃水浴条件下,浸提4次,每次浸提4h,其水溶性多糖提取率达1.450%。     

玉米花粉活性多糖的分离提取研究

利用不同破壁技术对玉米花粉进行破壁处理，采取正交设计对玉米花粉多糖的分离提取条件进行研究。结果表明，花粉破壁处理是影响多糖产量的主要因素，其次为料液比，浸提温度和浸提时间。酶解破壁法和机械破壁法均显著优于温差破壁法，而酶解破壁法与机械破壁法差异不明显。机械破壁法操作方便且成本较低，因此认为适合在多糖提取中使用。玉米花粉多糖分离提取的最优条件为：采取机械破壁法，料液比为1：6，浸提温度为70℃，浸提时间2h。     

板栗壳中酚性抗氧化成分的提取分离工艺优化

采用响应面法优化超声提取板栗壳多酚的工艺条件,研究大孔树脂对板栗壳多酚的静态吸附解吸动力学和最适静态吸附解吸工艺条件,评价不同方法得到的板栗壳多酚对DPPH自由基的清除能力及对Fe3+的还原能力。结果表明,乙醇体积分数及超声功率是影响板栗壳酚类物质提取效果的主要因素;超声提取板栗壳多酚的最佳条件为:乙醇体积分数43%,料液比1:18.5(g/mL),提取时间17.5min,提取功率305W、提取次数为3次,在此最优工艺条件下板栗壳多酚提取得率为2.86g/100g;大孔树脂纯化板栗壳多酚的最适工艺条件为:LX-17型树脂,于25℃吸附1.5h,以体积分数50%乙醇为解吸剂,于20℃解吸4h;超声提取的板栗壳多酚对DPPH自由基的清除能力及对Fe3+的还原能力均优于回流法,大孔树脂处理能提高板栗壳多酚提取物的抗氧化活性。     

洋葱皮中黄酮类物质的提取及分离纯化研究

采用超声波辅助法提取洋葱皮中黄酮类物质,通过柱层析等方法进行分离纯化,利用高效液相色谱对黄酮类物质进行检测,在超声波辅助萃取洋葱皮中总黄酮的研究中,确定乙醇浓度80%、料液比1∶10、超声时间20min条件下对总黄酮提取率最高。获得总黄酮物质后采用萃取、聚酰胺柱层析进行分离纯化,获得不同浓度乙醇洗脱组分,建立HPLC方法为进样量5μL、检测波长360nm、甲醇∶水（含0.1%冰乙酸）=45∶55、柱温为室温。分离纯化中得到结晶,通过质谱、核磁共振鉴定此晶体物质为槲皮素。     

油菜蜂花粉酚类化合物的初步分离和抗氧化性研究

采用甲醇提取油菜蜂花粉,提取物再经正丁醇萃取后,用聚酰胺层析得到各分离组分,并对各分离组分进行抗氧化性指标测定,并进行TLC、HPLC 分析。结果表明：甲醇提取物酚类化合物含量为3.69%,正丁醇萃取物为6.32%,聚酰胺层析中80% 和100% 乙醇洗脱组分酚类化合物含量分别为15.92% 和16.87%。同时,测定蜂花粉中各分离组分在浓度为1mg/ml 时的还原力和DPPH·清除率,甲醇提取物还原力为26μgVC/mg,正丁醇萃取物为84μgVC/mg,80%和100%乙醇洗脱组分提高到154μgVC/mg 和104μgVC/mg;甲醇提取物DPPH·清除率为83.45%,正丁醇萃取物为88.66%,聚酰胺层析中80% 和100% 乙醇洗脱组分DPPH·清除率分别为97.20% 和94.34%。实验表明：蜂花粉经过甲醇提取、正丁醇萃取和聚酰胺层析后,80% 乙醇和100% 乙醇分离组分酚类化合物含量和抗氧化活性均显著性提高。     

板栗种仁多糖的提取纯化及体外抗肿瘤活性筛选

以燕山地区板栗为原料,利用加压溶剂萃取法提取板栗种仁粗多糖,以多糖得率为指标,通过单因素结合响应面法优化提取工艺条件。将最优提取条件下得到的粗多糖经除蛋白、脱色素、透析后得到纯化多糖,继而借助制备型高效体积排阻色谱得到板栗多糖的高分子量组分(YCP-H),分析了其形貌特点、结构特征和单糖组成,并针对8种人体肿瘤细胞模型进行了体外抗肿瘤活性筛选。结果表明,高压溶剂萃取法提取板栗种仁粗多糖的最佳提取条件为:当投料量为10 g,静态提取次数为3次时,设定温度60 ℃、时间9 min、压力6 MPa,多糖得率可达19.78%±0.27%。组分YCP-H是具有β-吡喃构型的酸性多糖,重均分子量范围为217~5900 kDa,在扫描电镜下呈现纤维状的微观形貌,单糖组成包含阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和岩藻糖。YCP-H对人肝癌细胞HepG2的增殖具有显著(P<0.05)的抑制作用,其半数抑制浓度可达0.08 μg/mL。此外,YCP-H对人结肠癌细胞HCT-116和肺癌细胞A-549的增殖也有较强的抑制作用。     

板栗壳原花青素提取及其稳定性研究

为充分利用板栗壳资源,采用响应面法优化板栗壳原花青素提取工艺,并对其稳定性进行探讨以获得最佳贮藏条件。研究乙醇体积分数、料液比、浸提温度和浸提时间对原花青素提取得率的影响;考察pH值、光、温度、部分添加剂和金属离子对板栗壳原花青素稳定性的影响。结果显示,板栗壳原花青素最佳提取工艺为乙醇体积分数51.1%、料液比1:14.5(g/mL)、浸提温度67.3℃、浸提时间2h,在此条件下板栗壳原花青素提取得率理论值为40.35mg/g,实测值为40.23mg/g。板栗壳原花青素在pH2.2～6条件下稳定,对光不稳定,宜避光低温(4～20℃)保藏;适量的亚硫酸氢钠对板栗壳原花青素有一定的保护作用,苯甲酸钠对其稳定性有影响;板栗原花青素在Na+、K+、Mg2+和Al3+存在时较稳定,而Ca2+、Fe2+和Cu2+不能与之共存。因此,固态条件下,要保持板栗壳原花青素稳定,需对温度、光照、金属离子加以控制;水溶液中,弱酸性环境及适量亚硫酸氢钠有利于改善板栗壳原花青素的稳定性。     

酶辅助法提取板栗中多糖的工艺研究

本研究以板栗为原料,运用酶辅助法提取多糖,通过单因素试验和正交试验的设计,对提取液pH值、酶添加量、提取时间和提取温度查找最优值,确定酶辅助法提取板栗中多糖的最佳工艺条件。结果表明:酶辅助法提取板栗中多糖的最佳工艺条件为:提取液pH值5.5、酶添加量3%、提取时间6h和提取温度为50℃,在此最佳条件下,板栗中多糖的提取率为0.1211%。     

油菜蜂花粉中一种核苷类成分的分离

为了研究油菜蜂花粉中核苷类成分的组成,本实验采用15%乙醇进行超声提取,结合薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC )分析(展开剂为氯仿-甲醇-氨水,体积比为6.5:8.0:1.5),再经D101大孔吸附树脂柱层析(洗脱剂为5%乙醇)、水饱和正丁醇萃取及高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)分离纯化,最终分离得到单一化合物,通过液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(liquid chromatography - quadrupole - time of flight mass spectrometer,LC-Q-TOF)对其相对分子质量、不饱和度、同位素匹配度、相似度进行分析,通过HPLC法比较样品与标准品的保留时间、紫外光谱图比对,确认该化合物为腺嘌呤(adenine)。     

荸荠黄酮提取技术研究

采用分光光度法,研究影响荸荠中黄酮类化合物提取量的多种因素,并通过L9（3^4）正交试验设计优化出提取荸荠中黄酮类化合物的最佳工艺条件。结果表明,荸荠中总黄酮的含量为0．8621％,乙醇提取法的最适工艺参数是浸提剂乙醇浓度60％、提取温度70℃、料液比1：50、浸提时间3．5h。     

油菜蜂花粉中抑菌活性成分的分离纯化和结构鉴定

以对枯草芽孢杆菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌能力为活性跟踪指标,以最小抑菌质量浓度(MIC)和最小杀菌质量浓度(MBC)为评价指标,从油菜蜂花粉水提物中分离得1个化合物,用波谱学进行结构解析,鉴定为山奈酚,其抑菌效果显著,是油菜蜂花粉抑菌活性成分,可作为植物源抗菌剂,提高油菜蜂花粉的应用价值。