TritonX-100-硫酸铵双水相体系分离地榆根总黄酮

目的:研究利用双水相体系萃取地榆根总黄酮提取的最佳工艺条件。方法:探讨了Triton X-100质量分数,硫酸铵质量分数,黄酮粗提液质量分数、Na Cl质量分数和p H等因素对总黄酮萃取率的影响,并采用Box-Benhnken实验确定了最佳实验条件。结果:双水相萃取黄酮最佳条件为,确定双水相体系组成15%Triton X-100/15%硫酸铵,黄酮粗提液质量分数12%、Na Cl质量分数0.5%、p H6,地榆根总黄酮前萃取率达到80.02%;反萃取的最佳条件:取1.5m L黄酮萃取上相和2m L乙酸丁酯混合,反萃取率为80.03%。结论:采用双水相萃取地榆根总黄酮简单、易行,生产成本低,在中药提取中具有良好应用前景。      

乙醇/硫酸铵双水相体系分离纯化葡萄籽总黄酮

利用乙醇-硫酸铵双水相体系分离纯化葡萄籽中总黄酮,首先对无水乙醇、(NH4)2SO4、黄酮粗提取液质量分数、pH值、NaCl质量分数进行单因素研究,确定双水相体系组成为23%无水乙醇-17%(NH4)2SO4。然后利用Box-Benhnken Design实验,对黄酮粗提取液质量分数、pH值、NaCl质量分数进行了优化,结果表明:黄酮粗提取液质量分数21.3%、pH 7.2、NaCl质量分数1.97%,此条件下葡萄籽总黄酮的萃取率可达到98.8%;与预测值96.437 2%接近。     

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系萃取α-葡聚糖酶

采用聚乙二醇-硫酸铵(PEG-(NH4)2SO4)双水相体系对α-葡聚糖酶进行萃取,以两相比、酶活、蛋白浓度、比活力以及萃取率为参数进行比较,探讨了使用不同分子量的PEG、不同的PEG浓度以及不同(NH4)2SO4浓度下对酶分配行为的影响。实验结果表明,α-葡聚糖酶在质量分数13%的PEG4000以及13%的(NH4)2SO4的双水相系统中,可获得较高的比活力2364.97 U/mg以及萃取率99.94%。     

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系萃取松花粉中总黄酮的工艺研究

采用聚乙二醇-硫酸铵双水相体系萃取纯化松花粉中的总黄酮,确定双水相体系组成为26%PEG400-20%（NH4）2SO4,以萃取率和分配系数为指标,考察p H、温度和Na Cl添加量对双水相萃取分配行为的影响,并结合正交实验优化萃取工艺参数。确定最佳萃取工艺条件为Na Cl添加量为2.0%、p H4、温度为40℃,在此条件下松花粉总黄酮萃取率达到98.93%,其中Na Cl添加量对于萃取分配行为的影响最大。此方法操作简便,水环境温和,分相时间短、萃取率较高,是松花粉总黄酮等天然活性产物分离纯化的一种有效方法。      

异丙醇-硫酸铵双水相体系分离甜玉米芯多糖

以甜玉米芯为原料,采用超声波辅助异丙醇-硫酸铵双水相体系分离甜玉米芯多糖。对影响分离甜玉米芯多糖的主要因素:异丙醇体积分数、硫酸铵用量和超声时间进行单因素研究,以多糖回收率作为响应值进行响应曲面设计分析,建立二次回归模型,优化分离条件。结果表明超声波辅助双水相体系分离甜玉米芯多糖的最佳工艺条件为:异丙醇体积分数36%、硫酸铵浓度0.25 g/m L、超声处理时间25 min。在最佳的优化条件下,甜玉米芯多糖回收率为98.98%。异丙醇-硫酸铵双水相体系分离甜玉米芯多糖具有较好的脱蛋白和脱色效果,可用于甜玉米芯多糖的分离纯化。      

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系萃取螺旋藻藻蓝蛋白的研究

对聚乙二醇-硫酸铵双水相体系直接从螺旋藻破碎液中萃取藻蓝蛋白的技术进行了研究。结果表明,对于藻蓝蛋白含量为0.282mg/mL的螺旋藻细胞破碎液,10%PEG2000与20%的硫酸铵双水相体系萃取藻蓝蛋白的效果最佳,经2次萃取,藻蓝蛋白总萃取率为96.1,藻蓝蛋白纯度达到1.2。     

乙醇-硫酸铵双水相体系提取桃花总黄酮及其抗氧化性能

以桃花为主要原料,采用乙醇-硫酸铵双水相体系进行总黄酮提取工艺研究。在单因素实验基础上,以硫酸铵质量分数、液料比、提取温度、提取时间这4个因素作为自变量,以黄酮得率为指标,通过响应面法对桃花总黄酮提取工艺进行优化。以DPPH·、OH·和O₂^?·清除率为指标,对桃花总黄酮的抗氧化能力进行评价。结果表明,黄酮提取的最佳工艺参数为:硫酸铵质量分数15.2%,提取时间26 min,液料比27.8:1(mL/g),提取温度51℃。在此条件下,黄酮得率理论值可达45.64%,验证值为45.65%,与理论值十分接近。抗氧化实验结果表明,桃花总黄酮表现出较强的自由基清除能力,当浓度为0.56 mg/mL时,DPPH·清除率为94.21%,当浓度为0.672 mg/mL时,OH·和O₂^?清除率分别为91.23%和80.65%。响应面法优化双水相提取桃花总黄酮工艺合理可行,模型能较好地预测黄酮得率,得到的黄酮具有良好的抗氧化性能,可进一步开发利用。     

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系分离纯化黄花蒿黄酮的研究

采用聚乙二醇-硫酸铵双水相体系分离纯化黄花蒿黄酮。通过单因素实验考察聚乙二醇平均分子量、（NH4）2SO4质量分数、聚乙二醇质量分数、pH和体系温度等对分配系数、萃取率的影响,并通过正交实验对萃取工艺条件进行进一步的优化,获得最佳工艺条为:双水相体系组成30%PEG600-25%（NH4）2SO4,体系温度45℃,体系pH为3。在此条件下,黄花蒿黄酮主要分布在上相,分配系数为21.86,萃取率达到96.33%。      

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取大豆脂肪氧合酶的研究

采用聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH4)2SO4]双水相体系对大豆中脂肪氧合酶进行分离萃取研究;通过综合考察酶分配系数、相比和回收率,探讨了(NH4)2SO4、PEG2000、Na Cl浓度以及p H对脂肪氧合酶萃取的影响,并通过正交实验进一步优化实验条件,结果表明在单一因素下的最佳工艺条件为:(NH4)2SO415%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、Na Cl 1%(wt%)、p H5.8;正交实验优选出的最佳工艺条件为:(NH4)2SO417%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、p H5.2,可获得酶的分配系数最高可达9.710,萃取率为87.6%。      

乙醇-硫酸铵双水相体系萃取坛紫菜多糖

探究不同系线长度的乙醇-硫酸铵双水相体系对坛紫菜多糖萃取的影响。采用浊点滴定法绘制乙醇-硫酸铵双水相相图,选取不同系线长度体系,测定其对紫菜多糖分配情况。结果表明：在乙醇质量分数27%、硫酸铵质量分数18%（即系线长度为40）、体系相比R为1.1时,紫菜多糖的回收率可达79.8%,分配系数K为0.23;其蛋白去除率明显高于传统醇沉法（双水相萃取多糖蛋白含量为1.20%,醇沉多糖蛋白含量为6.17%）,且具有较好的脱色效果,可用于紫菜多糖的分离纯化。     

双水相萃取法分离鱼腥草总黄酮的研究

利用聚乙二醇（PEG）-硫酸铵双水相体系对鱼腥草总黄酮进行萃取分离。通过单因素实验分别考察了PEG分子量、两相质量比、萃取温度、萃取p H对分离提取鱼腥草中总黄酮的影响,并用正交实验优化了萃取工艺。经优化后,鱼腥草总黄酮在以mPEG800∶m（NH4）2SO4=2.0∶2.0为双水相体系,萃取p H为3.0,水浴温度为50℃时,萃取率可高达98.96%。本方法简单高效,绿色环保,可为鱼腥草总黄酮的高效利用提供参考。      

乙醇-硫酸铵双水相体系提取柠檬渣中柠檬苦素研究

以低温烘干的柠檬渣为原料,利用乙醇-硫酸铵双水相体系提取柠檬渣中的柠檬苦素。通过单因素实验和正交实验考察了乙醇浓度、料液比、硫酸铵用量、提取温度和提取时间对得率的影响。结果表明乙醇体积浓度为30%,料液比为1∶25g/mL,硫酸铵用量为9g,提取温度为60℃,提取时间为1h时,得率最高。在此条件下进行了3次平行实验,平均得率可达0.279%,而且实验重现性好。      

聚乙二醇/硫酸铵双水相萃取猪胃蛋白酶工艺研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/（NH4）2SO4]建立稳定的双水相体系以分离猪胃蛋白酶。通过上下相体积比（VR）、比活力（SA）、纯化因子（PF）、酶活回收率（η）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析测定萃取效果。结果表明,萃取猪胃蛋白酶的最佳配比体系为25%PEG1000:18%（NH4）2SO4,所萃取的猪胃蛋白酶酶活回收率为91.5%,SDS-PAGE结果显示,萃取的蛋白质和猪胃蛋白酶对照品分子量大小一致。      

乙醇-磷酸氢二钾双水相体系萃取测定椒蒿中总黄酮的含量

采用乙醇-磷酸氢二钾双水相体系测定了椒蒿中黄酮的含量,研究了乙醇和盐的用量对双水相体系的影响,确定了最佳的双水相萃取体系.在乙醇用量为7.0mL,K2HPO4用量为1.5g的萃取条件下,用紫外分光光度法测定了椒蒿提取液中黄酮的含量.     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。     

PEG/(NH4)2SO4双水相相图制作新方法的研究

以PEG4000/(NH4)2SO4和PEG6000/(NH4)2SO4双水相系统为研究对象,研究了双水相相图制作的新方法--用直接电导法测出双水相体系上下两相中(NH4)2SO4的质量分数,用碘沉淀法测出上下两相中PEG的含量,并对改进方法的准确度进行了考察.结果表明,PEG4000和PEG6000的最大吸收峰分别为517.6nm和515.8nm.经可行性实验验证,(NH4)2SO4理论值-检测值与PEG理论值-检测值之间无显著性差异.     

山茱萸籽总黄酮的响应曲面法优化微波辅助提取工艺的研究

目的:利用微波辅助提取技术对山茱萸籽总黄酮的提取工艺进行研究。方法:以芦丁为对照品,采用紫外-分光光度法测定山茱萸籽中总黄酮的含量,以总黄酮含量为考察指标,采用响应曲面优化法(RSM)优化山茱萸籽总黄酮的提取工艺。结果:优化的山茱萸籽总黄酮微波辅助提取工艺参数为:微波功率350W,乙醇体积分数50%,液料比20mL/g,提取时间13min。在此最佳条件下,山茱萸籽总黄酮的一次提取率为6.68%。结论:山茱萸籽含有较高的总黄酮含量,所确定的提取工艺提取率高、速度快、操作简便。     

木瓜蛋白酶在PEG-IDA-Fe~(3+)/(NH_4)_2SO_4双水相体系中亲和分配行为研究

目的:研究木瓜蛋白酶在PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO4亲和双水相体系中分配行为。方法:采用浊点法,构建双水相相图,考察各成相剂对木瓜蛋白酶活性的影响;研究不同PEG4000和(NH4)2SO4的质量分数、不同PEG-IDA-Fe3+的取代量时,木瓜蛋白酶在两相体系中分配行为的变化;用响应面法优化亲和双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳分离条件;同时对木瓜蛋白酶在萃取体系中的结构进行表征。结果:当两相体系中p H6.9,PEG4000质量分数16%,(NH4)2SO4质量分数20%,PEG-IDA-Fe3+为3%时,木瓜蛋白酶的上相酶活性回收率达90.5%,蛋白分配系数达1.85,而其在PEG/(NH4)2SO4中的酶活回收率及蛋白分配系数都低于PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO4亲和双水相体系。结论:PEG-IDA-Fe3+/(NH4)2SO亲和双水相系统能有效提高木瓜蛋白酶的分配效果,采用Fe3+螯合PEG成相剂的双水相萃取木瓜蛋白酶条件温和,不影响酶的特征结构。