a1-抗胰蛋白酶的制备及其防治急性肺损伤的疗效

目的以FIV-1为原料,制备较高纯度α1-AT制剂,用该制剂干预急性肺损伤动物模型作疗效考核.方法 KIV-1抽提液经PEG沉淀,离子交换,病毒灭活、超滤、除菌、分装,冻干制备α1-AT制剂.用急性肺损伤动物模型,比较静脉注射与雾化吸入α1AT的治疗效果.结果 3批制剂纯度＞70%,无菌、热原、安全试验均符合生物制品规程要求.静脉注射或雾化吸入,可降低由内毒素诱发急性肺损伤程度.结论α1-AT制备工艺适合大规模生产.在防治急性肺损伤时有一定效果.     

α1—抗胰蛋白酶制剂的制备及其病毒灭活

目的从CohnFⅣ中提纯α1-抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin,α1-AT),制备较高纯度α1-AT制剂.方法对CohnFⅣ抽提液经沉淀、超滤、离子交换及凝胶过滤,提纯α1-AT.用巴氏法(液态,60℃,10h加热)作病毒灭活,并考察其效果.用免疫单扩散、双向交叉免疫电泳、SDS-PAGE及合成基质法检测α1-AT蛋白及生物活性.用区带扫描法测定α1-AT制剂的纯度.结果3批试制的α1-AT制剂的纯度为91.3±1.52%,比活0.49±0.08u/mg,比活性比抽提液提高了27.4倍.巴氏法处理可使VSV、Sindbis、PolioⅠ型疫苗病毒分别降低10.0±0.3,10.0±0.3l及7.11±0.3lgTCID50/ml,但仍能检出PolioⅠ型疫苗病毒.结论可从CohnFⅣ中制得较高纯度的α1-AT制剂,巴氏法能对α1-AT制剂作有效的病毒灭活处理.     

α_1-抗胰蛋白酶制剂的制备及其病毒灭活

目的 从Ｃｏｈｎ　ＦⅣ中提纯α１－抗胰蛋白酶（α１－Ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ　α１－ＡＴ，制备较高纯度α１－ＡＴ制剂。方法 对Ｃｏｈｎ ＦⅣ抽提液经沉淀、超滤、离子交换及凝胶过滤，提纯 α１－ＡＴ用巴氏法（液态，６０℃，１０ｈ加热）作病毒灭活， 并考察其效果。用免疫单扩散、双向交叉免疫电泳、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及合成基质法检测α１－ＡＴ蛋白及生物活性。用区带 扫描法测定α１－ＡＴ制剂的纯度。结果３批试制的α１－ＡＴ制剂的纯度为９１．３±１．５２％，比活０．４９±０．０８μ／ｍｇ，比活性 比抽提液提高了２７．４倍。巴氏法处理可使ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、Ｐｏｌｉｏ　Ｉ型疫苗病毒分别降低１０．０±０．３，１０．０±０．３１及７．１１ ±０．３ｌｇＴＣＩＤ５０／ｍｌ，但仍能检出Ｐｏｌｉｏ型疫苗病毒。结论 可从 Ｃｏｈｎ ＦⅣ中制得较高纯度的 α１－ＡＴ制剂，巴氏法能对 α１－ＡＴ制剂作有效的病毒灭活处理。     

可溶性重组人成骨蛋白-1的制备

目的制备可溶性重组人成骨蛋白-1(rhOP-1),并尝试制备注射制剂。方法rhOP-1工程菌经发酵表达,收集菌体,提取包涵体,用SP-FF阳离子层析柱纯化。取纯度达95%以上的rhOP-1蛋白,透析复性,加入L-精氨酸作为复性助溶剂,制备成冻干粉末,以不加助溶剂的rhOP-1为对照。将制备的冻干粉末复溶后,观察rhOP-1溶解性,并检测其活性。结果复性液中加入L-精氨酸的复性rhOP-1蛋白浓度为0.5mg/ml,回收率可达60%,冻干粉末复溶后,溶解性及rhOP-1活性良好。结论用此复性方法制备的rhOP-1溶液作为注射剂,有较好的应用前景。     

穿心莲内酯对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤中NF-κB信号通路的影响

目的探讨穿心莲内酯(Andrographolide,AP)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)中NF-κB信号通路的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:空白对照组、LPS组和AP+LPS组。AP+LPS组腹腔内注射10 mg/kg的AP,空白对照组腹腔内注射等体积的NS,2次/d,连续3 d,第3天注射后2 h,LPS组和AP+LPS组气管内雾化吸入LPS(1 mg/kg),空白对照组气管内雾化吸入等剂量的NS,12 h后处死小鼠,开胸取肺,10%甲醛溶液固定,随后进行石蜡切片及常规HE染色,光镜下观察各组小鼠肺组织的病理学变化;免疫组化法观察肺组织中血管细胞黏附分子-1(Vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)蛋白的表达;Western blot法检测肺组织中磷酸化抑制蛋白IκB(Phospho-inhibitor ofκB,p-IκBα)和p-NF-κB(P65)蛋白的表达。结果 LPS组小鼠肺损伤明显,有明显的炎症反应;AP+LPS组小鼠肺损伤明显减轻,炎症细胞浸润明显减少。与LPS组相比,AP+LPS组小鼠肺组织中VCAM-1蛋白的表达明显抑制;p-IκBα和p-NF-κB(P65)蛋白的表达明显降低(P<0.05)。结论 AP可通过抑制磷酸化的IκBα的降解及P65单体的磷酸化来调节NF-κB通路,从而减轻小鼠肺损伤的炎症变化。     

布地奈德治疗婴幼儿哮喘40例疗效观察

目的对比观察布地奈德联合博利康尼雾化溶液治疗婴幼儿哮喘的疗效。方法通过随机分组,对40例婴幼儿哮喘急性发作进行布地奈德加博利康尼雾化溶液雾化吸入治疗,另40例用甲基强的松龙静点加博利康尼雾化溶液吸入治疗,观察用药前、用药后患儿症状体征(呼吸困难、咳嗽、喘息、喘鸣音)改善情况。结果实验组治疗后1h各症状体征评分的改善分数为:呼吸困难1.1、咳嗽1.1、喘息1.4、喘鸣音1.4;对照组分别为0.9、0.7、1.0、0.9分;实验组各症状体征改善分数明显优于对照组(P<0.05)。结论对哮喘急性发作患儿,雾化吸入布地奈德和博利康尼雾化溶液联合应用疗效优于静点甲基强的松龙加雾化吸入博利康尼雾化溶液。     

溶剂法生产1-硝基蒽醌及其衍生物的工业化——纪念溶剂法1-硝基蒽醌工艺研制成功二十年

本文回顾了非汞法制备α-取代基团的蒽醌类中间体的历程,首次披露了溶剂法制备1-硝基蒽醌的工业生产实例,提出了用硝化法制备蒽醌类中间体中值得研究的问题。     

盐酸氨溴索雾化吸入治疗支气管扩张疗效观察

目的 探讨盐酸氨溴索雾化吸入对支气管扩张治疗效果。方法 将73例支气管扩张病人随机分成2组,2组均在控制感染的基础上,治疗组加用氨溴索雾化吸入,对照组用а-糜蛋白酶雾化吸入。对2组的痰液全部排出时间、肺部音的消失时间、住院天数进行比较。结果 使用盐酸氨溴索雾化吸入的治疗组在痰液排出时间、肺部音的消失时间、住院天数上均比对照组短,有显著差异。结论 盐酸氨溴索雾化吸入可提高支气管扩张患者治疗效果。     

156例治疗小儿急性喉炎疗效观察

目的 观察布地奈德雾化吸入治疗小儿急性喉炎的疗效。方法 通过随机分组156例患儿分为观察组(80例)和对照组(76例),观察组给予雾化吸入布地奈德混悬液,对照组加用全身肾上腺皮质激素,吸入生理盐水,2组其他治疗相同,比较2组治疗后症状、体征持续时间。结果 观察组的疗效与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论 雾化吸入布地奈德治疗小儿急性喉炎能有效缩短病程,改善缺氧,减少心力衰竭的发生。     

羟基磷灰石分离纯化抗TNF-α单克隆抗体

目的用填料为羟基磷灰石的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体。方法经protein A为填料的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体后,通过Do E实验设计,对填料为羟基磷灰石的层析柱的洗脱流速、p H值及盐浓度进行优化,确定最佳洗脱条件后,进行抗TNF-α单克隆抗体的纯化,纯化产物经HPLC及毛细管电泳法检测其浓度、多聚体含量及纯度。结果抗TNF-α单克隆抗体经protein A层析纯化后,回收率达96.1%,纯度为96.0%,多聚体含量下降至1.9%。通过Do E优化,筛选出最佳条件范围为:流速1~3 ml/min,0.25~0.30 mol/L Na Cl,p H 7.0~7.3,选定1 ml/min流速、0.25 mol/L Na Cl、p H 7.0、作为洗脱条件进行纯化,回收率为93.1%,纯度为97.3%,多聚体含量为0,优于参比制剂。结论将羟基磷灰石用于抗TNF-α单克隆抗体的中度纯化,获得符合参比制剂质量的产品。     

雾化吸入治疗急性感染性支气管炎53例疗效观察

目的探讨雾化吸入治疗急性感染性支气管炎疗效。方法收集我校门诊部2006年3月至2007年4月来诊的符合急性感染性支气管炎诊断的患者53例,随机分成治疗组和对照组,治疗组在常规对症治疗同时加用雾化吸入治疗,对照组只给予常规对症治疗,比较两组患者症状变化以评估疗效。结果治疗组53例应用雾化吸入治疗治愈41例,有效10例,总有效率96.2%,两组总有效率差异有非常显著性(P<0.01)。结论雾化吸入治疗急性感染性支气管炎可明显提高疗效,迅速改善症状。     

煤基活性炭固定化脂肪酶制备手性苯乙醇

在有机溶剂中制备高选择性固定化脂肪酶是获得高对映体纯度的手性药物中间体的关键步骤.探讨了不同类型的活性炭作为固定化酶载体,应用于拆分手性1-苯乙醇反应,用N2吸附法和扫描电镜表征了活性炭载体.以固定化酶催化拆分(R,S)-1-苯乙醇为典型反应,研究了用不同活性炭为载体制备的催化剂的催化活性以及反应效果随反应时间的变化规律.结果表明,以微孔活性炭作载体制备的固定化酶催化活性最好,当反应时间达到12.8h时,转化率达到最大理论转化率50%.     

α1-酸性糖蛋白单克隆抗体的制备及检测方法的建立

目的制备α1-酸性糖蛋白(α1-Acid glycoprotein,α1-AGP)单克隆抗体(McAb),建立α1-AGP的ELISA检测方法,用于检测人体血液、尿液及各种组织液中α1-AGP的水平。方法用高氯酸沉淀人血清中α1-AGP,经离子交换层析和高压液相层析纯化后,免疫BALB/c小鼠,建立特异性抗α1-AGP单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备并鉴定McAbs,分析各株分泌抗体的效价、特异性、位阻群、类及亚类。制备针对α1-AGP的双抗体夹心ELISA检测试剂盒,分析其稳定性、灵敏度和特异性,并进行临床评价。结果建立了9株特异性抗α1-AGP单克隆抗体杂交瘤细胞株,均分泌IgG抗体,所有抗体的轻链均为κ链。根据位阻分析结果,将9个细胞株分泌的抗体分为5个位阻群,腹水效价在1×10-4~1×10-7之间,且均有较好特异性。制备的α1-AGP双抗体夹心ELISA试剂盒灵敏度达2ng/ml,且检测结果与α1-AGP含量呈现良好的线性关系(r=0.9916),并与其他血清蛋白无交叉反应,试剂盒置37℃放置3d及4℃放置2个月,稳定性良好。用该试剂盒检测96份正常人血样,其α1-AGP平均值为0.43~1.32mg/ml;105份Ⅱ型糖尿病患者血样,其平均值为0.88~2.35mg/ml,经统计学分析,两者差异有显著意义。结论已成功制备出α1-AGP McAb,并建立了针对α1-AGP的双抗体夹心ELISA,制备的试剂盒可用于临床检测。     

α1b型基因工程干扰素大规模纯化工艺的建立

应用α1b型基因工程干扰素大规模纯化工艺制备了3批干扰素，每批使用16kg菌体，其干扰素平均得率和纯化倍数分别为11．55％和1659倍。按照WHO规程的要求，其纯度经SDS—PAGE银染色法检定，呈一条带，其分子量约为20KD，纯度在98．97％以上。用HPLC检定纯度均为单一峰形，纯度在96％以上。其它检定项目如残余DNA和鼠IgG含量、热原、水分和安全试验等均符合规程要求。     

沐舒坦雾化吸入对老年骨科患者并发肺部感染的疗效观察

目的观察沐舒坦雾化吸入对肺部感染患者的疗效。方法将50例老年骨科并发肺部感染患者,随机分为实验组和对照组各25例,2组均在使用抗生素及营养支持下,实验组用沐舒坦雾化吸入治疗,对照组用沐舒坦静脉滴注治疗,观察比较2组痰量、痰色及稀薄度,肺部啰音减少程度。结果实验组总有效率92%,对照组总有效率60%。2组化痰效果有显著差异,并有统计学意义(P<0.005)。结论沐舒坦静脉滴注及雾化吸入对肺部感染均有效果,而雾化吸入的效果明显优于静脉滴注。     

1-甲氧基-2-甲基萘的合成研究

以2-甲基萘为原料,在惰性的卤代烃溶剂中低温下进行溴化反应,制备1-溴-2-甲基萘;溴化产物在碘化亚铜催化下,和甲醇钠进行烷氧基化反应制得1-甲氧基-2-甲基蔡。产品纯度〉99％（GC）,总收率87．4％．产品结构经MS和^1H NMR确认。考察了反应条件对产品收率和纯度的影响。     

小牛胸腺素的动物实验及临床应用

目的　提取胸腺素并检测药物指标 ,观察其临床应用和动物实验效果 ,探讨胸腺素对哮喘豚鼠肺组织Gα表达的影响。方法　采用酸碱沉淀加离心法制备胸腺素 ,经多肽定量、活性鉴定、细菌培养、毒性试验和热原实验 ,临床疗效观察 ,并以卵蛋白雾化吸入致敏法复制哮喘模型 ,Westernblot分析法测定哮喘豚鼠肺组织Gα水平。结果　所制胸腺素符合中国药典标准。临床疗效确切 ,经治疗后 ,哮喘豚鼠肺组织Giα、Gqα水平显著降低 (P <0 0 5 ) ,Gsα无显著变化。结论　采用酸碱沉淀加离心法可制备胸腺素 ,其治疗哮喘动物的机理可能是通过改变肺组织Gα水平来达到。     

α_1-肾上腺素受体的制备及其分析

文章文围绕α1-肾上腺素受体的纯化及制备展开研究,将细胞经复苏后,以含有抗生素200μg/m L G418和10%FBS的DMEM溶液为培养液,在37℃和5%CO2的培养箱培养,获得大量α1-AR高表达细胞,并获得该受体,与文献通过亲和色谱法得到的该受体相比,具有纯度高、省时、省力的特点,能为后续的受体生物色谱模型的建立提供有利的保障,并且为进一步采用亲和色谱法进行受体纯化提供了足量的细胞。     

N,N′-二叔丁氧基羰基-1H-吡唑-1-甲脒的合成

1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐在碳酸钾存在下和二碳酸二叔丁酯反应制备了N-叔丁氧基羰基-1H-吡唑-1-甲脒(PB),PB和二碳酸二叔丁酯在4-二甲氨基吡啶的催化下反应制备了N,N,N′-三叔丁氧基羰基-1H-吡唑-1-甲脒(PT),PT和高氯酸镁六水合物反应制备了标题化合物。反应条件温和,总收率65.9%,产品纯度大于99.0%,产品结构经熔点、核磁和质谱确定。     

应用免疫印迹法检测人基因工程干扰素中大肠杆菌残余成分

用大肠杆菌抽提物免疫家兔制备相应的抗血清,并用该血清建立免疫印迹法,检测基因工程干扰素中大肠杆菌残余成分。初步试验结果表明,该方法的灵敏度高于SDS-PAGE银染法。检测3批人α_1.型基因工程干扰素的结果表明,制品的纯度较好。