木瓜蛋白酶提取草鱼皮胶原蛋白的工艺研究

采用木瓜蛋白酶从淡水草鱼鱼皮中提取胶原蛋白,通过正交实验对草鱼皮胶原蛋白提取工艺进行优化.结果表明,料液比为1g/20ml、酶与原料比为1∶50、在pH值为6.0、酶解36h时得到胶原蛋白提取率为13.98%.     

木瓜蛋白酶提取草鱼皮胶原蛋白的工艺研究

采用木瓜蛋白酶从淡水草鱼鱼皮中提取胶原蛋白,通过正交实验对草鱼皮胶原蛋白提取工艺进行优化。结果表明,料液比为1g/20ml、酶与原料比为1∶50、在pH值为6.0、酶解36h时得到胶原蛋白提取率为13.98%。     

酸处理对酶法提取鲟鱼皮胶原多肽的影响

以人工养殖的鲟鱼鱼皮为研究对象,通过单因素实验比较乳酸、柠檬酸、乙酸对酶法提取鲟鱼皮胶原多肽的影响,并考察了酸溶胀浓度、溶胀固液比、溶胀时间及溶胀温度对其的影响。在此基础上利用正交实验对提取鲟鱼皮胶原蛋白肽的酸处理工艺进行优化。结果表明,采用溶胀酸为乳酸,在质量浓度为3%,溶胀固液比为1∶5,溶胀时间为2h,溶胀温度为30℃的条件下,鲟鱼皮胶原蛋白肽的水解度为43.58%,短肽得率为55.84%,水解度比不经酸溶胀的要高出23.08%。      

草鱼皮酶法脱脂工艺优化

以脱脂率为指标,采用酶法研究草鱼皮的脱脂工艺,并采用单因素及响应面试验优化提取条件。结果表明,草鱼皮脱脂的最适工艺条件为:反应温度42℃,反应时间为62min,p H为8.6,加酶量0.3%。此条件下草鱼皮脱脂率可达70.24%。     

酸处理对酶法提取鲟鱼皮胶原多肽的影响

以人工养殖的鲟鱼鱼皮为研究对象,通过单因素实验比较乳酸、柠檬酸、乙酸对酶法提取鲟鱼皮胶原多肽的影响,并考察了酸溶胀浓度、溶胀固液比、溶胀时间及溶胀温度对其的影响。在此基础上利用正交实验对提取鲟鱼皮胶原蛋白肽的酸处理工艺进行优化。结果表明,采用溶胀酸为乳酸,在质量浓度为3%,溶胀固液比为1∶5,溶胀时间为2h,溶胀温度为30℃的条件下,鲟鱼皮胶原蛋白肽的水解度为43.58%,短肽得率为55.84%,水解度比不经酸溶胀的要高出23.08%。     

鲨鱼皮胶原与罗非鱼皮胶原的理化性质及酶解特性研究

为了系统比较深海鱼和淡水鱼胶原的差异,利用酸法提取鲨鱼皮胶原和罗非鱼皮胶原,并对它们的理化性质和酶解特性进行了考察。氨基酸组成分析表明,鲨鱼皮胶原中异亮氨酸含量大约是罗非鱼皮胶原的2倍,但脯氨酸含量较少。鲨鱼皮胶原α肽链和β肽链的分子量,以及胶原热变性温度都低于罗非鱼皮胶原,但在紫外光谱和红外光谱中没有发现明显的差异。另一方面,电泳图谱和液相图谱都表明,鲨鱼皮胶原和罗非鱼皮胶原容易被胶原酶和胰蛋白酶酶解,不易被木瓜蛋白酶酶解。在胶原酶与底物质量比为0.05%,pH8.0和50℃的酶解条件下,经过240min酶解,鲨鱼皮胶原肽中小于1000u的肽含量达到23%,而罗非鱼胶原肽中却只有17%。      

皮胶原的结构、性质与提取方法

简要介绍了动物皮胶原的结构组成和物化性质,着重综述了最近几年国内外从猪皮、牛皮和鱼皮中提取胶原的工艺方法。     

鲫鱼皮胶原肽对小鼠的促钙吸收作用

目的：研究胶原肽（collagen peptides,CPs）对小鼠的促钙吸收作用。方法：采用小鼠低钙膳食模型法, 以昆明雄性小鼠为实验动物,设置正常组、低钙模型组、碳酸钙组、CPs低剂量（500 mg/kg mb＋CaCO3）、高剂量 （1 000 mg/kg mb＋CaCO3）组、酪蛋白磷酸肽对照组,连续灌胃6 周,考察小鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活力、钙吸收率、各项骨指标及骨微观结构、骨小梁形态变化。结果：CPs低、高剂量组小 鼠的ALP活力显著低于低钙模型组（P＜0.05）,其骨长度、干质量指数、骨钙含量、骨矿物密度（bone mineral density,BMD）、骨矿物含量（bone mineral content,BMC）均显著高于低钙模型组（P＜0.05）,CPs低剂量 组可使喂食低钙饲料的小鼠的各项指标达到正常组小鼠的水平。CPs低剂量组小鼠的ALP活力显著低于碳酸钙组 （P＜0.05）,其骨钙含量、BMD、BMC均显著高于碳酸钙组（P＜0.05）,提示补充碳酸钙的同时补充CPs,其促钙吸 收效果更好。结论：CPs可提高小鼠钙吸收率,增加骨小梁数目及强度,促进骨骼生长,从而能有效促进钙的吸收。     

几种生物大分子对罗非鱼皮Ⅰ型胶原自聚集性的影响

研究海藻酸钠、硫酸软骨素、透明质酸和壳聚糖对罗非鱼皮Ⅰ型胶原自聚集动力学和聚集后微观结构的影响。结果表明:在海藻酸钠、硫酸软骨素、透明质酸和壳聚糖存在的情况下,胶原自聚集过程仍然包含两个阶段:成核阶段和生长阶段,但是各物质对两阶段的动力学参数影响不同。海藻酸钠、透明质酸和壳聚糖均能够降低生长阶段的速率常数,然而对成核阶段的影响各有差异。海藻酸钠对成核阶段的速率常数没有显著影响,但是随着含量的增加能够延长成核时间;壳聚糖能够提高成核阶段的速率常数,同时缩短成核时间;透明质酸对成核阶段的速率常数和成核时间却没有显著影响。而硫酸软骨素对成核阶段和生长阶段均没有显著影响。扫描电子显微镜结果表明海藻酸钠、硫酸软骨素、透明质酸易使胶原纤维横向聚集形成纤维束,影响其直径大小的顺序为硫酸软骨素海藻酸钠透明质酸,而壳聚糖却未表现类似作用。     

超声波辅助酶法提取草鱼皮胶原蛋白及其纯化

本文研究了超声波辅助提取草鱼皮胶原蛋白的工艺。以超声功率、超声时间和酶解时间为实验因素,胶原蛋白提取率为响应值,利用Box-Behnken设计实验及响应面法分析实验,确定其最佳提取工艺条件。结果显示:最佳工艺条件为超声功率310 W,超声时间10 min,酶解时间29 h,此时胶原蛋白提取率达到68.67%,与模型理论预测值（68.80%）较为相近,相对误差仅为0.189%。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱（SDS-PAGE）和傅里叶红外光谱（FTIR）谱图,对比超声波作用下与无超声波作用的胶原蛋白发现,超声波对胶原蛋白结构无明显影响。      

草鱼脆化过程中肌肉胶原蛋白、矿物质含量和脂肪酸组成变化

研究草鱼脆化过程中主要营养成分的变化规律,在草鱼脆化养殖过程中定期采样,比较研究不同脆化周期的鱼肉胶原蛋白、矿物质含量和脂肪酸组成变化。对不同采样期的鱼肉,采用石墨炉原子吸收光谱法测定肌肉矿物质含量,气相色谱-质谱联用技术测定肌肉脂肪酸组成。结果显示,普通草鱼肌肉的胶原蛋白含量为1.02 g/100 g,显著低于脆肉鲩。与普通草鱼相比,脆化后肌肉的钙、镁的含量分别增加了269.43%、46.05%,但铁、铜元素的含量分别下降了85.59%和23.08%,肌肉的锌、铬和镉含量差异不显著（P＞0.05）。不同脆化周期的肌肉中共检出17 种脂肪酸,多不饱和脂肪酸总量与饱和脂肪酸总量的比值为0.74～1.46,其中以普通草鱼最高。随着脆化时间的延长,肌肉的多不饱和脂肪酸总量、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸总量均有所下降。研究表明在草鱼脆化过程中肌肉胶原蛋白和钙、镁含量显著增加,铁、铜含量和多不饱和脂肪酸总量有所下降。     

响应面优化草鱼鱼鳔酶溶胶原蛋白的提取工艺

为提高草鱼下脚料鱼鳔中胶原蛋白的提取率,采用响应面法优化胃蛋白酶提取草鱼鱼鳔胶原蛋白。探讨加酶量、提取时间和液料比3个因素对提取率的影响;在单因素试验的基础上进行响应面优化试验。结果表明：胃蛋白酶提取草鱼鱼鳔胶原蛋白的最佳工艺条件为加酶量40mg/g、提取时间48h、液料比80:1(mL/g),在此工艺条件下胶原蛋白实际提取率为17.82%,与模型预测值(18.04%)接近。方差分析显示,模型可靠,3个因素均对草鱼鱼鳔胶原蛋白的提取率影响显著。     

草鱼鱼鳞中活性胶原蛋白提取工艺及参数优化

以草鱼鱼鳞为原料,在低于蛋白变性温度的条件下提取酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对鱼鳞原料的前处理方法、胶原蛋白提取工艺进行优化。结果表明,在鱼鳞原料的前处理工艺中,以0.1mol/L 的Na2CO3 溶液为试剂脱除原料中杂蛋白的最佳工艺条件为室温、料液比1:40(g/mL),300r/min 搅拌处理3 次,每次6h;以0.3mol/L 的EDTA 为试剂脱除原料中矿物质杂质的最佳工艺条件为室温、料液比1:60,搅拌处理3 次,每次12h;ASC 的最佳提取工艺条件为：提取温度不高于25℃,料液比1:60,醋酸浓度0.8mol/L,提取3 次,每次24h;PSC 的最佳提取工艺条件为：胃蛋白酶用量为鱼鳞原料质量的3.0%、醋酸浓度0.8mol/L、料液比1:30、提取温度4 ℃、提取2 次,每次24h。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白-壳聚糖共混膜的制备及其性能研究(续)

以草鱼鱼鳞胶原蛋白和壳聚糖为原料制备共混膜,测定了共混膜的力学性能、水溶液稳定性、水蒸气透过系数、透光率,并用红外光谱、X射线衍射、显微镜等方法表征了共混膜的结构。结果表明:共混膜的最佳组成是1.5%壳聚糖溶液与0.3%胶原蛋白溶液的体积比为1:3。在此条件下形成的共混膜的力学性能、水溶液稳定性、水蒸气透过系数,较单一成分的膜有明显改善,壳聚糖与胶原蛋白之间有强烈的相互作用和良好的相容性,为共混膜在医学材料领域的应用提供试验数据。     

两种鲤鱼鱼鳞胶原蛋白性质异同分析

本研究以鲤鱼鱼鳞为原料,研究了乙酸提取法和胃蛋白酶提取法得到的两类鱼鳞胶原蛋白ASC(acid solublecollagen)和PSC(pepsin soluble collagen)的异同。经过SDS-凝胶电泳可以看到,两种蛋白之间在分子α-链组成、分子量大小等方面的差异不明显,两种蛋白经蛋白酶K有限酶解以后的肽段图谱也很相似。但从差热分析(DSC)图谱和CD图谱看,二者之间在热稳定性方面存在一定的差异,对于热稳定性存在差异的原因与蛋白质制备过程中胃蛋白酶的作用有关。     

鲤鱼鱼皮和鱼骨酶溶性胶原蛋白的性质比较

以鲤鱼鱼皮和鱼骨为原料提取得到酶溶性胶原蛋白(PSC),对鱼皮PSC和鱼骨PSC的性质进行比较。电泳结果表明,鱼皮PSC和鱼骨PSC都属于Ⅰ型胶原;2种胶原蛋白中,脯氨酸和羟脯氨酸含量均低于牛皮酸溶性胶原蛋白;粘度测定的结果显示,鱼皮PSC的变性温度为28.1℃,鱼骨PSC的变性温度为30.0℃;差热分析的结果说明,鱼骨PSC的热稳定性高于鱼皮PSC,这与氨基酸分析和粘度分析的结果相一致;傅立叶红外光谱分析结果显示,鱼皮PSC和鱼骨PSC结构具有很大的相似性。     

Acid‐soluble and pepsin‐soluble collagens from grass carp (Ctenopharyngodon idella) skin: a comparative study on physicochemical properties

In this study, acid‐soluble (ASC) and pepsin‐soluble (PSC) collagens with triple helical structures were successfully extracted from the skin of grass carp (Ctenopharyngodon idella) by two different extraction approaches. SDS‐PAGE pattern revealed that ASC and PSC are type I collagens with typical α1, α2 and β‐chains. In addition, the intensity of χ‐chain (trimer) in ASC was higher than that of PSC, representing the presence of the high proportion of intra‐ and intermolecular cross‐links of extracted collagens with large molecular weight using the acid method. Differential scanning calorimetry (DSC) results demonstrate that T_d (69.04 °C) of ASC was higher than T_d (62.20 °C) of PSC. Both ASC and PSC had the highest solubility at acidic pHs or at a low concentration of NaCl (<2%, w/v). The results of FTIR suggested the ASC and PSC maintained in the helical secondary structure at high degree.     

水杨酸-金属与皮胶原蛋白热稳定性

通过研究水杨酸与3种金属离子(Cr(Ⅲ)、Al(Ⅲ)和Cu(Ⅱ))形成的Tanning Matrices(配合物-鞣性模块)与皮胶原蛋白作用,采用DSC测得的作用后皮胶原蛋白热变性温度Td,考察Tanning Matrices与皮胶原蛋白的耐热稳定性关系.结果证明两种物质形成Tanning Matrices与胶原蛋白作用的Td高于两者分别作用,同时发现,构成Tanning Matrices的配合物稳定常数越大,Td越高,即皮胶原蛋白耐热稳定性越高.