研究磨损微观机制的新方法——“铁谱”透射电镜法

“铁谱”透射电镜法是新开创的一种研究机械磨损微观机制的方法。采用透射电镜观察金属磨粒的形貌、计算微小磨粒尺寸、分析相结构以及分析各种磨粒状态等方面都有极高的准确性。如果采用类似H-800型综合分析电镜,观察分析“铁谱”透射电镜样品。可以获取微小磨粒同位置的形貌、衍射花样及能谱化学成份的综合分析结果。同时消除了扫描电镜分析“铁谱”片时,由玻璃载玻片带来的影响,大大提高了实验精度。“铁谱”透射电镜法,经三年的完善,成功率达90％以上,并获取了各种类型的微粒子形貌,图中是     

扫描电镜生物标本制备的超快微波处理技术

由于生物标本含有较多的水分,而扫描电镜内部是高真空的,它要求放入的标本必须干燥,但在样品空气干燥时由于液体表面张力的作用样品发生皱缩、龟裂,样品表面发生塌陷,使细胞外形发生明显改变、与生活形态的形状相差太多。为此,须对扫描电镜观察的生物样品进行固定、脱水,最后用临界点干燥器进行干燥,临界点干燥是传统的常规干燥方法。国外曾有人使用连续的微波照射固定扫描电镜样品,我们根据自己的实验经验,改进了微波固定样品的方法,使用微波照射干燥扫描电镜洋品取得很好的效果。胃和小肠,经缓冲液洗后,放入磷酸缓冲的2.5％戊二醛(pH7.3)中。实验共分三组:第1组为对照组;第2     

银染活性核仁形成区的透射电镜观察

有活性的rDNA是间期细胞核核仁形成的组织者(Nucleolar Orgnizer Region),也称之为活性核仁形成区(aNOR)。应用常规超薄切片技术一般只能显示核仁的大小和数目,而很难观察到核仁内部的结构。我们改进了前人的方法,建立了悬浮培养细胞银染活性核仁形成区的透射电镜技术,对核仁的超微结构进行了观察。收集悬浮培养于RPMI—1640培养基中的人急性白血病细胞(HL—60),经2.5％戊二醛预固定后,再用Carnoy＇s固定液行后固定,固定后的细胞经离心形成细胞团块,以50％AgNO_3:2％蛋白胶(用1％     

扫描电镜观察不同抗凝剂对血细胞形态的影响

电子显微镜观察血液细胞的形态及超微结构的报导很多,但采血时所用的抗凝剂及制样固定时的温度对血细胞形态的影响却报导至少。本实验主要以扫描电镜观察肝素、枸橼酸钠、草酸钾三种常用抗凝剂对血细胞形态的影响。实验方法;取健康狗静脉血,分别注入三种抗凝及生理盐水管摇匀待用。红细胞制备:分别取上述四种血样用二甲胂酸钠缓冲液(pH7.4)洗涤后,滴到有Formvar膜的盖玻片上,静置数分钟,吸去上清液,戊二醛及锇酸双固定,以下按常规脱水、置换、临界点干燥,喷镀、镜检。生理盐水作为对照。     

人早幼粒白血病细胞(HL—60)的表面超微结构及其在诱导分化过程中的变化

为了解HL—60细胞的表面形态特征以及它们在诱导分化过程中的变化,我们应用扫描电镜技术,结合超薄切片和组织化学方法,对HL—60细胞的表面形态进行了观察分析。 HL—60细胞常规培养,部分细胞以终浓度为10~(-6)M的维生素A酸处理。在指定时间内,收集对照组与给药组的HL—60细胞,2.5％戊二醛固定。经锇酸—单宁酸—锇酸处理后,梯度乙醇脱水,CO_2临界点干燥,真空喷金。在日立S—450扫描电镜下观察。透射电镜标本制备和糖原的组织化学反应(PAS)按常规进行。扫描电镜下,HL—60细胞最明显的表面形态特征是绝大多数细胞(约占90％)具有丝状伪足。这种丝状伪足     

豚鼠耳蜗毛细胞静纤毛变异的扫描电镜观察

为进一步了解豚鼠耳蜗毛细胞静纤毛变异的形态特征和原因，采用本实验室20多年各种实验动物耳蜗的扫描电镜观察标本，回顾分析耳蜗毛细胞静纤毛的形态特征和变异。收集正常对照豚鼠37只，受噪声刺激者187只，给予耳毒性药物（奈替米星）实验者20只，WM88拈抗庆大霉素耳毒性实验观察24只，丹参滴耳液实验6只，激光辐射镫骨底板实验7只，给予负压和超压者6只，接受次声者23只。共观察豚鼠310只，620只耳蜗。样品制备按照常规或本实验室改良的技术方法进行，所有动物均快速断头处死，取出双侧颞骨，挑破圆窗膜，取出镫骨，打开卵圆窗，用针在耳蜗尖挑一小孔，用21．5％戊二醛做蜗管内灌注固定，随后置冰箱连续固定8h。0．1mol／L磷酸缓冲液漂洗后，1％四氧化锇固定2h。然后在0．1mol／L磷酸缓冲液中去除耳蜗骨壳，去除螺旋韧带、前庭膜，充分暴露Corti器。单宁酸导电染色，梯度酒精脱水，HCP-2型临界点干燥仪干燥，E-102型离子溅射仪镀金。Philip SEM 505型或Hitachi S-800型扫描电镜观察。     

脾气虚证骨骼肌线粒体超微结构图像分析研究

脾气虚证大白鼠骨骼肌的超微结构变化已作了观察研究,发现线粒体数显著减少,其结构改变表现为肿胀、嵴断裂、空泡化等。本文对线粒体的超微结构作进一步图像分析。实验动物Wistar大白鼠,取正常组、脾气虚证组、四君子汤复健组和自然恢复组的骨骼肌用4％戊二醛固定液作前固定,1％四氧化锇固定液后固定,Epon 812包埋。LKB V型超薄切片机切半薄和超薄切片,半薄切片作光学显微镜观察和修块定位,超薄切片用醋酸铀、柠檬酸铅双重染色,日立H-500透射电镜观察照相,Joyce-Loebl μMAGISCAN图像分析仪对四个组线粒体的面积、周长、长度、宽度(见图1)以及长度与宽度之比进行测定、统计分析,对四个组的上述参数分别作t测验。     

乙醇对小鼠小肠绒毛和微绒毛影响的SEM观察

目前低度酒和含有酒精的饮料已被越来越多的人接受,但过量饮酒或饮用高度酒均会影响健康,并可引起多种疾病。目前有关酒精对小肠粘膜表面形态结构影响的报道尚少,为此我们用21日龄昆明种雄性小白鼠作试验,随机分成对照组、5％酒精组、10％酒精组和15％酒精组四个试验组,连续饮用酒精水溶液60天后,经整体灌注3％戊二醛固定,取十二指肠和空肠,常规扫描电镜样品制备后,S—570扫描电镜观察,结果如下:1.十二指肠绒毛的形态结陶变化:对照组绒毛整齐均一,呈扁锥体形,绒毛顶端直径平均为70.95±5.35μm;而5％酒精组的绒毛顶端出现了肿胀现象,而这种肿胀现象随酒精浓度的增大(10％、15％酒精组)而     

胚胎及成人心脏心肌细胞的立体构筑与心电传导相关的研究

具有泵样作用的心脏是人体血循环的中枢器官 ,心脏血液动力学及心肌细胞立体构筑的变化均与心肌细胞的电传导和代谢相关 ,本研究应用扫描电镜及透射电镜对人胚胎及成人心脏的心肌一般作业、心肌细胞及心传导系心肌细胞的立体构筑及相关的心电传导功能进行了比较性研究。材料和方法　本研究选用医院水囊引产正常胎儿及非心脏病死亡成人心脏各 6例 ,主动脉生理盐水灌流后 1 2Ｋａｒｎｏｖｓｋｙ’ｓ固定液灌流 ,取左心室游离壁 ,ＮａＯＨ 超声波消化法处理后 ,一般扫描电镜方法脱水、干燥、镀膜、扫描电镜观察。结果　正常人心脏的心肌细胞呈…     

用常规透射电镜观察半薄切片——铀—铅—铜浸染技术的应用

在常规透射电镜中,超薄切片的厚度一般不超过0.1微米,否则就看不清样品的细节。但是,使用特殊的标本本浸染方法,选择性地对某些细胞结构染色,就可以在一般透射电镜下观察半薄切片。本实验采用铀—铅—铜浸染技术,选择性地染色一部分细胞器,在75—100KV透射电镜下观察0.25—0.5微米的半薄切片。结果表明,这一技术在超微结构研究中有一定实用意义。实验方法:用2％戊二醛灌注大鼠,取肝、肾、十二指肠和睾丸等组织,切成1立方毫米小块。组织块经缓冲液漂洗后,在42℃下先放入5％醋酸铀水溶液(PH3.5)浸染1小时,再在硝酸铅—硫酸铜—枸椽酸钠溶液中浸染1小时,然后在4℃下用1％饿酸后固定12小时、常规环氧树脂包埋,最后将组织块切成0.25—0.5微米半薄切片,在透射电镜下观察。     

十二指肠上皮细胞的亚显微结构

本文以健康家兔十二指肠为实验材料,在超薄切片透射电镜观察的基础上,采用冷冻蚀刻技术对十二指肠上皮细胞的亚显微结构及其膜表面特化结构,进行观察分析。实验方法取新鲜材料,经4％戊二醛和1％锇酸双固定后,为了提高样品的反差和较好地显示细胞的膜结构,将样品放入1％单宁酸浸泡60分钟,尔后再用丙酮逐级脱水,EPON812包埋,超薄切片后送H—500电镜观察。冷冻蚀刻样品,系用HFZ—1型冷冻蚀刻装置,按常规操作步骤制备复型膜。     

猪尾猴疟原虫卵囊发育和子孢子逸出方式的扫描电镜研究

本文首次描述了猪尾猴疟原虫大劣按蚊体内卵囊发育和子孢子逸出方式的扫描电镜观察结果。感染猪尾猴疟原虫的大劣按蚊分别在感染后的第6、8、12天,在生理盐水下解剖,取出蚊胃,以2.5％戌二醛和1％锇酸作双固定。漂洗后以2％鞣酸浸泡三十分钟。经漂洗后,再分别以上述浓度的锇酸和鞣酸反复处理一次。然后经系列乙醇脱水,临界点干燥,金喷涂后在日立扫描电镜下观察与拍片。感染八天的卵囊表面结构有三种类型:光滑的,具皱纹的和蜂窝状的卵囊。感染十二天的卵囊表面结构只有光滑的和具皱纹的二种类型。根据光滑的和具皱纹的卵囊内都能逸出成熟的子孢子,我们认为这两种类型的卵囊     

大鼠板层骨的扫描电镜观察

骨组织经常处于活跃的形成、吸收和改造,这主要发生于骨表面,故很适于用扫描电镜观察。下面介绍我们用扫描电镜对大鼠板层骨进行研究的初步的结果。材料和方法:(1)为观察骨表面细胞,经主动脉向下肢灌流2％戊二醛固定后取股骨中段,用牙科薄砂轮纵行锯开,经注射器用盐水轻轻冲掉骨髓,戊二醛浸泡,1％锇酸后固定,临界点干燥、离子溅射仪喷金,JSM35—CF扫描电镜观察骨内膜表面细胞。同时取胫骨上端、矢状锯开,观察新生骨梁;(2)为观察去掉表面细胞后类骨组织的表面,取胫骨中段如前法,用力冲洗,足可去掉绝大部分表面细胞,必要时使用超声震荡;(3)为观察骨组     

激光光敏剂血卟啉衍生物杨州光卟啉作用于癌细胞疗效原理的超微结构研究

以国产血卟啉衍生物—扬州光卟啉为光敏剂,研究它对离体培养的人宫颈鳞状上皮癌细胞克隆(CC—801)的激光光敏的早期效应。实验组分别以8μg/ml及16μg/ml两种不同剂量的扬州光卟啉作用于培养细胞,经不同的光照时间及持续不同的作用时间后立即固定取材,进行透射电镜与扫描电镜的观察,发现给药16μg/ml后光照两分钟细胞内线粒体基质即出现灶性空化,扫描电镜下发现,细胞体积肿大。光照5分钟后,细胞核基质开始有轻度凝聚现象,细胞质膜绒毛突起肿胀,随着作用时间的延长,上述损伤愈加严重,绒毛肿胀呈泡状,继而脱落,细胞裂解8μg/ml     

肺巨噬细胞在某些实验病理情况下超微结构变化的电镜观察

本文以健康家兔为实验对象,分别采用夹闭肠系膜上动脉所造成的动脉闭塞性(SMAO)休克、自耳静脉注入油酸所复制的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)为实验模型,应用“洗肺”技术采取肺巨噬细胞,进行超薄切片和冷冻蚀刻电镜观察;分析比较了肺巨噬细胞在上述实验性疾病时的超微结构变化,探讨了肺巨噬细胞与某些病理过程的关系。一、材料与方法:将健康成年家兔,分为正常对照组,SMAO休克组和ARDS组。各组动物均以适量温生理盐水缓冲液(约50毫升),经气管插管反复灌洗肺组织(六次),再将洗出液三次离心沉淀(500克,8分钟/次),制得5×10~6/毫升肺巨噬细胞混悬液。此后,样品分别经2.5～4.0％戊二醛固定,以618树脂包埋制备超薄切片;经30％甘油生理盐水防冻处理,用日立FHZ—1型冷冻蚀刻装置制得冷冻复型膜。样品送H—500电镜观察,加速电压75KV。     

急性砷中毒大鼠心肌的电镜细胞化学观察

本实验是把显示葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的电镜细胞化学技术应用于研究急性砷中毒大鼠心肌G-6-Pase活性的变化,目的在于从亚显微水平上进一步探讨砷对心肌结构和功能的影响。选用健康wistar大鼠20只,随机分成实验组和对照组,每组10只。实验组大鼠每天自由饮用含As_2O_350PPm的蒸馏水,对照组饮用蒸馏水。35天后急性处死取其心尖部组织,置于4％多聚甲醛+1％戊二醛内前固定,入孵育液,37℃下孵育60min,1％锇酸后固定,常规脱水包埋,超薄切片,不经电子染色进行电镜观察。     

对干燥断裂方法的初步体会——家兔视网膜的扫描电镜观察

干燥断裂方法是制备扫描电镜样品用以观察各层细胞结构的一种手段。在设备不足的条件下,我们试验了一种简易的干燥断裂方法,制备了家兔视网膜的标本,在扫描电镜下观察:结构清晰,层次分明,效果好。实验方法:正常家兔,在乙醚麻醉下摘出眼球,用生理盐水冲洗之后,不断向眼球滴2.5％戊二醛固定液(0.1M二甲砷酸钠缓冲液配制)的同时,断开巩膜,取出连着脉络膜的视网膜,在不损伤表面结构的情况下,用清洁的单面刀片将组织断成大约6×3mm的长条。放入2.5％     

兔病毒性出血症病毒血凝作用的扫描电镜观察

兔病毒性出血症病毒对人的A、O、B、AB型红细胞有明显的凝集作用,并可被相应的兔免疫血清所抑制[1]。本文应用扫描电镜技术对兔病毒性出血症病毒的血凝过程进行了较系统的观察。材料与方法:取0.1毫升病毒材料(病兔肝脏经研磨、冻融离心后的上清液)与等量的1％的人O型红细胞悬液混匀后,分别在4℃,室温(20℃)、37℃条件下,反应1秒、30秒、1分、10分、30分等不同时间。之后,加入2.5％戊二醛2毫升固定3小时。固定好的样品经乙醇逐级脱水后滴加到盖玻片上,进行离子溅射,扫描电镜观察。     

复方苦槿霜的毒理学实验研究

目的：观察动物外用复方苦槿霜的急性毒性和长期毒性,评价其安全性．方法：急性毒性试验：24小时内将40％、80％复方苫槿霜分别涂于家兔完整皮肤和破损皮肤2次;18小时内将80％复方苦槿霜1．0g涂于大鼠背部脱毛区2次。长期毒性试验：连续28天将40％、80％、200％的复方苦槿霜10g分别均匀涂于大鼠背部脱毛区。观察大鼠给药后第28天的生长发育、血液学、血液生化学、主要脏器系数、组织病理学变化及停药后14天上述指标的变化。结果：24小时内40％、80％复方苦槿霜外用在家兔完整皮肤或破损皮肤2次未引起急性毒性反应。18小时内将80％复方苦槿霜1．0g涂于大鼠背部脱毛区2次,7日内无一大鼠死亡。长期毒性试验中：复方苦槿霜高、中、低二个剂量组大鼠连续给药第28天及停药恢复第14天,与对照组比较上述各项观测指标均未见明显差异。结论：复方苫槿霜临床日用量是安全的。     

氦氖激光照射对鼓室成形术后干耳的疗效观察

目的：观察氦氖激光照射对鼓室成形术后干耳的疗效。方法：对60例患有慢性中耳炎行鼓室成形术的病人,随机分为两组,一组为激光照射组,即实验组,另一组为对照组。实验组于术后抽出纱条后第2日开始每日换药时行一次氦氖激光术腔照射15分钟,对照组则不给予氦氖激光照射,其他治疗方法相同,观察两组术后干耳时间。结果：氦氖激光照射组患者术后干耳时间为17±3天,对照组患者术后干耳时间为21±3天,两组间经统计学检验,p〈0.05,差异有显著性。结论：氦氖激光照射对鼓室成形术后干耳有明显的促进作用。