含铬革屑碱酶结合法提取水解胶原蛋白

为提高含铬革屑的脱铬率与胶原提取率,采用碱酶结合法进行处理,筛选了较优的碱性材料与蛋白酶,并探讨了最佳实验条件。研究发现,CaO的处理效果优于MgO、NaOH、NaHCO_3,其最佳作用条件为CaO用量8%,反应温度70℃,反应时间5 h;中性蛋白酶水解碱处理铬渣的效果要好于碱性蛋白酶,其最佳作用条件为中性蛋白酶用量4%,反应温度37℃,反应pH7.5。采用CaO-中性蛋白酶结合的方法水解含铬革屑,胶原提取率为77.45%,脱铬率为99.71%。     

含铬革屑碱酶结合水解提取胶原蛋白

为提高含铬革屑的脱铬率与胶原提取率,采用碱酶结合法进行处理,筛选了较优的碱性材料与蛋白酶,并探讨了最佳实验条件。研究发现,CaO的处理效果优于MgO、NaOH、NaHCO_3,其最佳作用条件为CaO用量8%,反应温度70℃,反应时间5h;中性蛋白酶水解碱处理铬渣的效果要好于碱性蛋白酶,其最佳作用条件为中性蛋白酶用量4%,反应温度37℃,反应pH7.5。采用CaO-中性蛋白酶结合的方法水解含铬革屑,胶原提取率为77.45%,脱铬率为99.71%。     

利用含铬革屑制备液体冲施肥前驱体

本文采用氢氧化钾与碱性蛋白酶的新型反应体系,水解含铬革屑制备多肽水解液。以黏度、游离氨基量、氨基酸含量为实验指标,探索了酶与含铬革屑的百分比以及反应的时间、pH值等因素对反应体系革屑水解程度的影响。经一步碱水解,固液比1∶12.5,氢氧化钾用量32%,反应温度100℃,水解时间6 h。二步酶水解最佳条件为:酶用量5%,反应体系pH=10,反应4 h。     

铬革屑酶解因素研究

选用1398蛋白酶对铬鞣革屑进行水解,从酶促反应动力学角度出发,研究了酶浓度、底物浓度、温度因素对酶解反应的影响,并通过正交试验,考察了各酶解条件的综合影响。结果表明:酶浓度和底物浓度超过一定范围时,表现为混合级反应,酶促反应受到抑制;反应温度在蛋白酶最适温度范围内时,酶活是影响反应速率的主要因素,反应温度超出最适范围很高时,温度成为影响反应速率的主要因素;1398蛋白酶最佳酶解条件为:底物浓度2%,反应温度60℃,酶浓度2%,氮收率达到60%左右。     

中性蛋白酶水解铬革屑的研究

研究了用1398中性蛋白酶水解铬革屑提取水解蛋白质的各种影响因素,如酶的用量、反应温度和pH值等对水解蛋白质收获率的影响.测定了水解蛋白质的灰分含量、铬含量等.综合各种影响参数,确定了制取水解蛋白质的最佳条件,在现有条件下制定了用碱和1398蛋白酶两步法处理铬革屑的最佳方案.研究结果表明采用此方案Cr2O3在水解蛋白质中的含量仅为10-6级;水解蛋白质的回收率为45%左右,蛋白质总回收率达到85%左右.     

铬革屑酶解工艺条件的研究

通过对蛋白酶产生菌进行紫外诱变,得到产生更高活性蛋白酶的菌种,然后利用此菌种产生的蛋白酶对铬革革屑进行降解实验,通过控制变量法研究了影响水解程度的体系pH值、温度、酶用量和反应时间等因素,获得高活性蛋白酶降解铬革革屑的最佳条件为：酶用量为70%,温度50℃,pH值4.0,时间2.5 h。     

牡蛎肉双酶复合水解工艺

以牡蛎为原料,利用多种蛋白酶对牡蛎蛋白质进行水解,挑选中性蛋白酶1398和Flavourzyme蛋白酶进行复合酶解,得出酶解的最佳工艺参数为:时间16h,中性蛋白酶1398与Flavourzyme作用的时间比为16∶15,中性蛋白酶1398酶与底物比为300U/g,Flavourzyme酶与底物比为1200U/g.水解后,氨基态氮质量分数为0.469%,总氮回收率为91%.     

锆-铝-钛鞣革屑制备制革用填料及其应用

为合理利用锆-铝-钛无铬鞣革屑,采用草酸法水解、THPS改性,制备蛋白填料,并回用于制革填充工序。锆-铝-钛鞣革屑的最佳水解条件为草酸用量15%,水用量750%,温度90℃,时间8 h,水解率可达到89%以上。蛋白水解物的最佳改性条件为THPS用量为40%,温度70℃,pH=7,时间6 h,改性产物溶解度高,填充效果好。将其应用于锆-铝-钛鞣白湿革及蓝湿革的复鞣填充工序,增厚率分别为14.56%、11.18%,填充效果好、防霉性好,成革性能符合鞋面革标准要求。     

铬革屑的酶解研究及其产物氨基酸成分分析

根据水解率确定了中性蛋白酶水解铬革屑的最佳条件,系统考察了水解温度、水解时间、酶用量、浴液pH对水解率的影响,通过正交试验优化了中性酶水解铬革屑的条件,得到最佳水解条件为:温度55℃,水解时间4 h,酶用量2%,浴液pH=7.0;在此条件下水解率为94.25%,氮收率达78.84﹪,水解液中铬含量仅为0.31×10-4g/L。并通过高效液相色谱(HPLC)分析了最佳实验条件下水解产物中的游离氨基酸成分。     

壳聚糖微球固定化蛋白酶的制备及其在羊毛织物抗起毛起球整理中的应用

以壳聚糖微球为载体、戊二醛为交联剂,制备纺织用固定化蛋白酶.考察固定化蛋白酶的最佳制备条件及其稳定性,并将其应用于毛织物抗起毛起球整理中.结果表明:戊二醛用量为1.0%,交联时间为5 h,反应温度30℃,每g载体固定20 mL酶(稀释后),制备的固定化蛋白酶的固载率为84.4%,酶活回收率可达57.2%.与游离蛋白酶相比,固定化蛋白酶的耐酸碱稳定性、耐热稳定性与储存稳定性均有所提高,且可循环使用.将制备的固定化蛋白酶用于羊毛织物的抗起毛起球整理中,其抗起毛起球等级提高1.5级.     

蛋白酶固定化条件优化及在酱醪发酵中的应用

本文以海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、酶液与载体溶液体积比及固定时间为因素,优化中性蛋白酶固定化工艺,并将固定化中性蛋白酶凝胶颗粒应用于传统高盐稀态酱醪发酵,以缓解高渗透压环境对酶的胁迫作用,提高蛋白质利用率,缩短酿造周期。结果显示:当采用0.007 M海藻酸钠、0.27 M氯化钙,酶液与载体溶液体积比为12:30,固定2 h,固定化凝胶颗粒最稳定,相对酶活力最高;另外,酱醪发酵数据显示,酱醪总重17.5 kg,添加总酶量5.80 g(1000 U/g酶粉)时,外源游离蛋白酶和固定化蛋白酶试验组均能显著改善发酵过程各指标含量,平均缩短发酵时间20 d左右;与外源游离组相比,固定化试验组效果更加显著,蛋白质转化率较空白对照组与游离组分别提高达6.08%和1.88%。因此,在酱醪发酵过程添加固定化外源蛋白酶能有效提高高盐稀态酱油发酵蛋白质转化率,同时缩短发酵周期。     

氨基硅烷修饰的磁性纳米粒子固定化碱性蛋白酶

用3-氨丙基三乙氧基硅烷对四氧化三铁磁性纳米粒子表面进行修饰,以戊二醛作为交联剂固定化碱性蛋白酶。结果表明：在经过表面修饰的磁性纳米粒子具有较好的磁分离能力,碱性蛋白酶能有效地结合在修饰后的粒子表面。固定化酶的最佳条件：酶添加量为7000U/g、反应温度为40℃、时间为1.5h;固定后酶活力可达3352U/g,回收率为48%,在反复使用5次以后,依然能保持34.2%的酶活力。     

Immobilized alcalase alkaline protease on the magnetic chitosan nanoparticles used for soy protein isolate hydrolysis

An efficient immobilization of Alcalase 2.4L alkaline protease has been developed by using chitosan-coated magnetic nanoparticles as support via glutaraldehyde cross-linking reaction. The Fe₃O₄ nanoparticles, Fe₃O₄-chitosan, and immobilized Alcalase 2.4L alkaline protease were characterized by X-ray diffraction, transmission electron microscope, Fourier transform infrared spectroscopy, electron spin resonance, and vibrating sample magnetometry. Results showed that the binding of chitosan and Alcalase 2.4L alkaline protease on Fe₃O₄ through cross-linking was successful. In addition, the Alcalase 2.4L alkaline protease immobilized with chitosan-coated magnetic nanoparticles enhanced the activity, the optimum reaction temperature and pH value for the immobilized enzyme were 55 °C and 10, respectively, compared with the free enzyme, and the optimal temperature and pH profile range were considerably broadened. Similarly, the thermal stability was enhanced by immobilization, and the kinetic parameters of free and immobilized Alcalase 2.4L alkaline protease were determined. Then, from our hydrolysis experiments, we found that immobilized Alcalase 2.4L alkaline protease uses Fe₃O₄-chitosan had a greatest hydrolytic activity, and the DH of soy protein isolate (SPI) can reach to 18.38 %, against 17.50 % with the free enzyme after 140 min. Furthermore, the immobilized Alcalase 2.4L alkaline protease could maintain about 86 % of its original activity after ten consecutive operations. Thus, Fe₃O₄-chitosan immobilized Alcalase 2.4L alkaline protease a good candidate for the continuous hydrolysis of SPI.     

转谷氨酰胺酶在尼龙网上的固定化及其酶学性质的研究

以硫酸二甲酯活化后的尼龙网为载体,戊二醛为交联剂固定转谷氨酰胺酶,并对固定化条件及固定化酶的酶学性质进行研究。结果表明固定化的最适条件为：1cm2 处理后的尼龙网与20ml 7% 的戊二醛交联5h 后,在4℃条件下固定10ml 1.5mg/ml 的转谷氨酰胺酶溶液6h,此条件下酶活回收率达到46%。固定化转谷氨酰胺酶相对于游离酶具有更好的热稳定性,并具有良好的储存性及操作稳定性。     

壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,采用交联-吸附法对瑞士乳杆菌蛋白酶的固定化条件进行研究。在单因素试验基础上,以固定化酶活力为主要指标,研究凝结液、壳聚糖质量浓度、酶用量、交联时间、戊二醛质量浓度对瑞士乳杆菌蛋白酶固定化的影响。运用响应面对固定化条件进行优化,确定瑞士乳杆菌蛋白酶的最优固定条件：凝结液为4g/100mL NaOH-甲醇(体积比3:1)、壳聚糖质量浓度2.89g/100mL、酶用量2.95mg、交联时间1h、戊二醛质量浓度0.40g/100mL,此时固定化酶活力为28.67U。     

交联β-葡萄糖苷酶聚集体的制备及应用

交联酶聚集体(CLEAs)是一种新型的无载体固定化方法.本研究利用该法对来源于西梅籽的β-葡萄糖苷酶进行了固定化研究.优化了制备交联β-葡萄糖苷酶聚集体的条件,并探讨其在丙基β-D-葡萄糖苷合成中的应用.研究发现,最适的沉降剂及其比例、最适交联剂(戊二醛)浓度以及交联时间分别为正丙醇、2/1(V/V)、10 mmol/...     

醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜固定化脂肪酶的研究

以醋酸纤维素(CA)和聚四氟乙烯(PTFE)为材料制备醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜,采用吸附-交联相结合的固定化方法,用该复合膜固定化脂肪酶。研究温度、吸附时间、酶液质量浓度、交联时间和交联剂体积分数对脂肪酶固定化效率和催化效果的影响,并对固定化酶膜的酶学性质进行研究。得到最佳的固定化条件为：温度25℃、吸附时间2h、酶液质量浓度0.02g/mL、交联时间3h、交联剂(戊二醛)体积分数0.2%,固定化酶最大酶活力为17.2U/cm2。固定化酶膜的酶学性质为：最适温度35℃,比游离酶降低了5℃;最适pH8.5,与游离酶相比pH值向碱性偏移1.0;经10次(10h /次)重复使用后,固定化酶相对酶活力为55.5%。SEM结果显示CA-PTFE复合膜能较好的固定化脂肪酶。     

玉米ACE抑制肽水解酶的筛选及酶解条件的优化

酶解玉米蛋白粉(蛋白含量为70%)制备血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,通过酶的筛选实验确定了AS.1398中性蛋白酶作为最佳水解酶,在此基础上,进行pH、温度、底物浓度、加酶量[E]∶[S]的单因素实验,并且确定4种因素的参数值进行L9(34)正交实验,采用体外检测ACE抑制率和肽得率为指标来确定最佳工艺条件。研究结果表明,选用AS.1398中性蛋白酶作为水解酶,水解时间在2h时,pH7.0,温度50℃,底物浓度5%,加酶量[E]∶[S]为1.5∶100,得到的最大ACE抑制率为85.65%,肽得率为58.64%。     

磁性壳聚糖微球固定化糖化酶的研究

以磁性壳聚糖微球为载体,采用吸附一交联法固定化糖化酶。对给酶量、戊二醛添加量、交联温度、交联时间等因素进行了考察;并对固定化酶的酶学性质进行了研究。结果表明,固定化的最佳条件为：浓度为0．5mg／mL酶液8mL、1％戊二醛溶液4mL、交联温度45℃、交联时间4h;固定化酶的热稳定性和pH稳定性都优于游离酶;固定化酶连续使用5次,酶活仍保持了58％。     

固定化酸性蛋白酶载体的选择及其性质

选用海藻酸钠（sodium alginate,SA）分别与3 种天然高分子材料制作复合凝胶载体,以酶活回收率为评价指标,采用单因素试验和正交试验确定最佳载体材料及最佳固定化条件。结果表明,SA-黄原胶复合凝胶为最佳载体,其最佳工艺条件为：SA与黄原胶质量比例为6∶1,CaCl2质量浓度为5.0 g/100 mL,固定化时间为2.5 h,在此条件下固定化酶活回收率为74.12%。对固定化酸性蛋白酶酶学性质进行研究,结果表明,其最适pH值为3.0、最适反应温度为45 ℃,均与游离酶相同,热稳定性优于游离酶,动力学参数Km值高于游离酶,操作半衰期为17.28 d。