放线菌对发酵过程产酱香功能菌的生物学特性研究

从酱香型白酒酒醅中分离到的30株放线菌中复筛出2株具有生物活性的菌株A2、A22,对2株放线菌代谢产物的生物学活性进行了比较研究,考察了放线菌发酵时间对其代谢生物学活性产物的影响,并且对其生物学活性物质进行了初步提取与生物活性检测。结果表明,放线菌A22、A2均能代谢产生生物学活性物质,A22代谢产物相对A2抑菌活性更强,在30℃、120 r/min摇床培养30~36 h时,代谢产物抑菌效果最强,初步结果表明此代谢产物极可能为一种非蛋白类和非肽类抗生素。     

传统浆水中乳酸菌的筛选及抑菌性能分析

以甘肃传统发酵浆水为材料,采用平板划线法分离纯化其中的乳酸菌,并对纯化后的菌株进行形态学观察及生物学特性分析,筛选出其中具有抑菌活性的菌株,分别研究它们的抑菌能力以及抑菌物质的成分。结果表明:6株乳酸杆菌中,菌株SJ-1、SJ-2的发酵代谢产物对指示菌具有较高的抑菌活性。排除酸抑制作用和过氧化氢抑制作用后代谢产物仍具抑菌活性,且显示出良好的热稳定性。使用不同的蛋白酶对代谢产物进行处理后,其抑菌能力产生了程度不等的降低,表明抑菌物质具蛋白酶敏感性,因此判断抑菌物质中含有蛋白类抑菌成分。经鉴定发现菌株SJ-1为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),SJ-2为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。     

具有抑菌作用乳酸菌的筛选及其抑菌物质特性的研究

从内蒙古地区传统谷物发酵食品——酸粥中分离并鉴定的13株乳酸杆菌中筛选具有抑菌活性的菌株,并对其抑菌能力及抑菌物质的特性进行研究。结果表明,菌株NSZL-2(鼠李糖乳杆菌L.rhamnose)和NSZL-12(植物乳杆菌L.plantarum)对指示菌具有较高的抑菌活性,且抑菌能力主要来自菌体的发酵代谢产物。排除酸和过氧化氢的干扰后代谢产物仍具有抑菌活性,且抑菌物质对热具有很高的稳定性。代谢产物经蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、过氧化氢酶、溶菌酶处理后,抑菌能力均有不同程度的降低,说明抑菌物质对蛋白酶敏感,故判定抑菌物质中有蛋白质类细菌素。     

乳酸菌FY-1筛选鉴定及其抗菌物质分析

从韩国泡菜辣白菜中分离到一株乳酸菌,命名为FY-1,对该菌株菌落特征、生理生化特征进行分析,并结合16S r DNA序列分析,最终鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。通过牛津杯法研究该菌株代谢产物的抑菌活性,结果显示该菌株产生的代谢产物抑菌谱较广,对多种细菌如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌、李斯特菌等食品腐败菌都有很好的抑制作用,对梨黑斑病菌、桃软腐病菌等植物致病菌也有很好的抑菌活性。通过稳定性实验分析,确定菌株产生的抑菌活性物质有很好的温度和有机溶剂稳定性。在p H为酸性时活性较好,p H为碱性时活性几乎丧失,经蛋白酶K处理后,样品活性消失。     

番石榴叶多酚提取液稳定性的研究

番石榴叶提取物具有抗氧化性、抑菌活性、解痉、减肥、降血糖等功效,而产生这些功效的成分正是芳香类二级代谢产物多酚物质。因此本文对番石榴叶多酚提取液的稳定性进行了研究。番石榴叶多酚提取液在弱酸、低温、避光条件下保存稳定性较好;蔗糖对稳定性影响不大;高浓度的葡萄糖导致稳定性有所降低;食盐对稳定性影响较为明显;柠檬酸对番石榴叶多酚物质有增色效果;苯甲酸钠浓度较高时稳定性变差,而山梨酸钾会导致多酚提取液不稳定;提取液对Mg~(2+)稳定、对Zn~(2+)、Fe~(2+)和Fe~(3+)均不稳定,对低浓度的K~+和Ca~(2+)较稳定,高浓度时不稳定。     

植物乳杆菌NCU116抑菌性能的研究

以9种常见病原菌和非病原菌作为指示菌,采用牛津杯法对植物乳杆菌NCU116发酵液、菌体及代谢产物进行体外抑菌试验。结果显示,NCU116对其中3株乳酸菌无抑制作用,对大肠埃希氏菌ATCC 25922的抑制作用最强。进一步研究了不同浓度样品、不同有机酸、排除有机酸及过氧化氢干扰以及经pH调节、热处理、酶处理后对大肠埃希氏菌ATCC 25922的抑菌活性变化。结果表明,样品浓度对抑菌效果无明显影响;产生的抑菌物质中除有机酸外还有其他活性物质,如小分子多肽类细菌素、H2O2等;低pH是产生抑菌效果的一个必要条件。综合表明,植物乳杆菌NCU116主要起抑菌作用的是菌体及其代谢产物中的各种有机酸和小分子多肽类细菌素等。     

益生菌代谢产物对病原菌的抑菌作用研究进展

益生菌能产生多种具有抑菌活性的代谢产物,且均具有广谱的抑菌效果,能够满足人们对抗菌药物绿色、健康的要求,有望成为一种环境友好型的微生物源抑菌剂。益生菌所产代谢产物种类繁多,主要有有机酸、细菌素、过氧化氢等,其抑菌机理多样,不仅能够破坏病原菌细胞壁膜结构,影响膜电位;还能在胞内破坏生物大分子,干扰菌体代谢,或影响DNA、RNA生物活性;也可以竞争病原菌中生长相关物质结合位点,阻止细胞生长分裂。该文有望对益生菌代谢产物作为新型抑菌活性物质的广泛应用提供理论依据。     

晒红烟陈化过程中中性致香物质含量的变化

按照新植二烯、胡萝卜素降解产物、芳香族氨基酸代谢产物、美拉德反应产物、西柏烷类降解产物5类对陈化过程中凤凰晒红烟中性致香物质含量变化进行了分析,结果表明,在陈化过程中三个等级晒红烟中性致香物质总量呈显著增加的趋势.上中三级和下一级5类中性香气物质均呈增加的趋势.上中二级芳香族氨基酸代谢产物有减少的趋势,其他4类香气物质均是增加的趋势.     

海洋真菌抗老年痴呆相关活性成分的筛选与追踪研究

本文作者对44株海洋真菌的抗老年痴呆相关活性成分进行了筛选与追踪。采用DTNB法和DPPH自由基清除法分别评价其提取物抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)和抗氧化活性,采用生物自显影和专一性显色剂分析活性物质多样性及结构类型,采用高分辨液质联用分析代表性菌株的活性代谢产物。发现共计32株菌在不同培养基中的发酵产物,显示了显著的双重活性,它们来自不同真菌类群。生物自显影显示它们可产生多样化活性成分,化学显色显示其活性成分可能为生物碱等含氮化合物、酚类及其他结构类型的天然产物。通过液质联用分析,发现一株真菌中分子式为C_(16)H_(13)NO_2的代谢产物具有较强抑制AChE活性。本研究表明海洋真菌是多样化抗老年痴呆活性物质的重要来源,为活性物质的后续分离鉴定奠定了基础。     

耐盐芽孢杆菌B11抗菌活性物质的分离纯化及其特征分析

对耐盐芽孢杆菌B11产生的抗菌活性物质进行了分离纯化及特性研究。从盐碱土壤中分离得到一株对金黄色葡萄球菌具有强拮抗活性的耐盐芽孢杆菌B11,其发酵液中抗菌活性物质具有良好的热稳定性、p H稳定性和紫外光照稳定性,100℃加热1 h,抑菌活性仅下降11.0%,且在p H为3和11环境下,抑菌活性也仅下降11.4%和10.9%,对酸碱环境具有耐受性。发酵液经预处理、离心、阳离子阴离子交换层析,经正丁醇抽提和半制备高效液相色谱得到活性物质A1和A2,其中A1分子量为1423.8 u且带有多电荷,氨基酸分析仪鉴定A1为非核糖体多肽(NRPS),对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为8.0μg/m L;A2活性很弱且含量较低,初步鉴定为小分子抗菌物质,分子量为373 u。耐盐芽孢杆菌B11的抗菌代谢产物应用于食品防腐具有很大的潜力。     

四君子汤复方总多糖的体外抗肿瘤和免疫活性研究

目的探讨四君子汤总多糖的体外抗肿瘤作用和免疫活性。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测四君子汤总多糖对人肝癌细胞株HepG2和小鼠脾淋巴细胞增生的影响。结果四君子汤总多糖在体外对HepG2细胞无明显影响,但显著促进脾淋巴细胞增生。结论四君子汤总多糖没有直接抑制肿瘤的作用,但具有较强的免疫促进活性。     

海湾扇贝多肽混合物对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

采用CCK-8（Cell Counting Kit-8）法检测海湾扇贝多肽混合物对体外培养的人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,利用倒置显微镜及流式细胞仪观察、分析其对HepG2细胞的形态和细胞凋亡的影响。结果表明：不同质量浓度海湾扇贝多肽混合物（4、6、8、10、12 mg/mL）能够抑制人肝癌HepG2细胞的生长,且抑制率随海湾扇贝多肽混合物质量浓度的增加而升高。经12 mg/mL海湾扇贝多肽混合物处理后,HepG2细胞的形态发生了明显改变,表现为细胞皱缩、透明度降低、细胞核固缩等,并出现了凋亡小体。海湾扇贝多肽混合物可诱导HepG2细胞凋亡。     

四君子汤复方总多糖的体外抗肿瘤和免疫活性研究

目的探讨四君子汤总多糖的体外抗肿瘤作用和免疫活性。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测四君子汤总多糖对人肝癌细胞株HepG2和小鼠脾淋巴细胞增生的影响。结果四君子汤总多糖在体外对HepG2细胞无明显影响,但显著促进脾淋巴细胞增生。结论四君子汤总多糖没有直接抑制肿瘤的作用,但具有较强的免疫促进活性。     

响应面优化超声波提取冬凌草甲素工艺及其抗肿瘤活性研究

目的:应用单因素实验和响应面法优化超声波提取冬凌草甲素工艺并探索冬凌草甲素的体外抗肿瘤活性.方法:通过单因素实验确定料液比、超声时间和超声功率的参数范围,经响应面法优化提取工艺;体外培养肿瘤细胞HepG2,经过对HepG2细胞存活率和凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9表达的研究,探讨冬凌草甲素的抗肿瘤活性....     

碱蓬多糖SSP1-1的分离纯化及其抗肿瘤活性

目的:本实验对水溶性碱蓬(Suaeda salsa)多糖SSP1-1进行分离纯化并对其抗肿瘤活性进行初步研究。方法:采用水提醇沉法提取碱蓬粗多糖,通过DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱分离纯化碱蓬粗多糖,得到单一碱蓬多糖SSP1-1,利用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)对其纯度及分子量进行分析,利用MTT、Hoechst 33342染色,Western blot方法对碱蓬多糖SSP1-1的抗肿瘤活性进行研究。结果:SSP1-1分子量为60.32 kDa;SSP1-1具有时间-剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖作用,当SSP1-1浓度为500 μg/mL时,HepG2细胞在24和48 h的细胞活力分别为52.8%和50.2%,Hoechst 33342染色实验观察到SSP1-1可引起HepG2细胞核出现典型的细胞凋亡特征;Western blot证明SSP1-1可以降低Bcl-2的蛋白表达,提高Bax和Caspase-3的蛋白表达,各组蛋白含量与对照组相比均具有显著性(P<0.05)。结论:SSP1-1为均一组分多糖,并对肿瘤细胞具有显著的抑制作用,为进一步开发利用碱蓬多糖奠定了基础。     

The influence of metabolism on the genotoxicity of catechol estrogens in three cultured cell lines

The 2- and 4-hydroxy metabolites of 17beta-estradiol (E2) and estrone (E1) are important for E2-mediated carcinogenesis due to the formation of genotoxic ortho-quinone metabolites. To assess the importance of metabolic conjugation for their genotoxicity, the DNA strand-breaking activity of the four catechol estrogens was determined in three cell lines with different activities of catechol-O-methyltransferase (COMT) and UDP-glucuronosyltransferase (UGT). Most DNA strand breaks were observed in V79 cells, which lack these metabolic activities. 2- and 4-hydroxy-E2 were 2.5 times more genotoxic than 2- and 4-hydroxy-E1. MCF-7 cells exhibit COMT activity, and the incidence of DNA strand breaks decreased with increasing methylation; only the 4-hydroxy metabolites of E1 and E2, which were poor substrates of COMT, exhibited low genotoxicity. HepG2 cells converted the catechol and methoxy metabolites of E2 to the respective E1 metabolites by 17beta-hydroxysteroid dehydrogenase (HSD). Moreover, methylation and glucuronidation took place. Only 4-hydroxy-E1 elicited a weak genotoxic response in these cells. The extensive metabolism in HepG2 cells is proposed to account for the failure of catechol estrogens to induce DNA strand breaks. Thus, metabolism by COMT and UGT and, to a minor extent, by HSD is a major determinant for the genotoxicity of catechol estrogens in target cells.     

青鱼肉活性肽的制备及其抗肿瘤活性研究

以青鱼肉为原料,经二步酶解、凝胶色谱分离纯化制备抗氧化和抗肿瘤活性肽。首先以抗氧化活性和水解度为评价指标,采用单因素和正交试验优化青鱼肉活性肽的制备工艺;然后采用凝胶色谱进行分离纯化,得到不同分子质量多肽组分并分析其氨基酸组成、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力和抗肿瘤活性。结果表明,二步酶解青鱼肉的最优酶解组合为碱性蛋白酶-复合蛋白酶,最佳制备工艺为:pH 8.00、酶解温度50℃、料液比2∶10(g∶mL)、酶添加量6000 U/g、酶解时间3 h,在此条件的二步酶解物清除DPPH自由基的半抑制浓度(half inhibiting concentration,IC 50)为9.52 mg/mL;经Sephadex G-15分离得到5个肽组分,其分子质量范围为130~1397 Da;抗氧化实验表明,组分IV具有最强的DPPH自由基清除能力,其IC ₅₀为3.17 mg/mL,为二步水解物的3倍。细胞增殖抑制实验发现,10 mg/mL组分IV对HepG 2细胞抑制率为92.54%,表明青鱼肉活性肽同时具有抗氧化和抗肿癌活性。     

胶红酵母CICC 33013胞外多糖抑制肝癌细胞活性研究

采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法对胶红酵母胞外多糖组分(Rhodotorula mucilaginosa exo-polysaccharide2-A,REPS2-A)抑制10种常见癌细胞(血癌细胞K562、胃癌细胞BGC823、胃癌细胞SGC7901、胃癌细胞MKN28、肝癌细胞HepG2、BEL7402、Hep3B、胰腺癌细胞HS66T、乳腺癌细胞SKBR3、宫颈癌细胞HeLa)能力进行了筛选,结果证明胞外多糖组分REPS2-A对肝癌细胞HepG2有较好的抑制效果。通过胞外多糖组分REPS2-A对HepG2细胞抑制作用最佳浓度及时效性的研究,探讨胞外多糖组分REPS2-A对肝癌HepG2细胞的生长抑制及其作用机制。结果表明:当胞外多糖组分REPS2-A的浓度为1mg/mL时,肝癌细胞HepG2的抑制率高于IC50时的抑制率,抑制效果明显优于其他浓度。肝癌细胞HepG2的自发凋亡率为0.40%,当胞外多糖组分REPS2-A浓度为1mg/mL,分别处理24,48,72h,肝癌细胞HepG2的凋亡率依次为77.70%,88.18%,97.08%。胞外多糖组分REPS2-A能有效抑制肝癌细胞的增殖,使肝癌细胞HepG2阻滞发生在G1/S期,并诱导肝癌细胞HepG2凋亡,且存在剂量效应。     

生姜与醋泡姜抗氧化、抑菌和抗肿瘤活性比较研究

本文研究了生姜和醋泡姜的姜油和姜乙醇提取物的抗氧化、抑菌和抗肿瘤作用的活性差异。以抗坏血酸为对照,评价两类姜提取物的抗氧化活性(DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基(·OH)清除能力和总还原能力);以96孔板微量稀释法比较了两类姜提取物对几种常见致病菌的抑菌活性;同时研究了两类姜提取物对HCT116(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、Skov3(卵巢癌细胞)等肿瘤细胞的抗癌效果。结果表明:醋泡姜的抗氧化活性总体上好于生姜,其中醋姜油对羟自由基(·OH)的清除能力(IC₅₀为0.28 mg/mL)明显强于生姜油(IC₅₀为0.42 mg/mL);生姜和醋泡生姜提取物都有一定的抑菌作用,醋姜油的抑菌效果稍好于生姜油,其中最好的是醋姜油对金黄色葡萄球菌的抑制作用(156.25 μg/mL);抗肿瘤活性基本相当。本研究结果表明,醋泡姜在抗氧化、抑菌功能上一定程度优于生姜。     

荔枝核提取物及其阳离子树脂分离物体外降血糖作用

研究荔枝核乙醇提取物(LSE)和其阳离子树脂分离物(FCE)体外降血糖作用。采用高糖和高胰岛素所致的两种HepG2细胞模型,在模型培养中添加不同浓度的LSE与FCE,以葡萄糖试剂盒测定,MTT法等进行对HepG2细胞葡萄糖消耗作用的研究。结果表明:在高糖环境下,LSE和FCE均能促进HepG2细胞的葡萄糖消耗,而FCE的促进作用显著高于相近浓度的LSE,提示离子交换树脂分离物贡献了荔枝核提取物的降糖作用;此外,FCE还可与低剂量胰岛素协同增加细胞的葡萄糖消耗。在胰岛素抵抗模型中,FCE能显著降低胰岛素抵抗,增加细胞的葡萄糖消耗。荔枝核提取物和其阳离子树脂分离物具有体外降血糖作用。