刺参多糖清除活性氧保护线粒体的研究

本文采用酶解法(胃蛋白酶与胰蛋白酶)提取刺参多糖(Stichopus japonicus polysaccharides,SJP),以硫酸苯酚法测定多糖含量并研究其清除活性氧保护线粒体的作用机制。以Fe~(2+)-Vit C系统诱发肝线粒体脂质过氧化,以丙二醛(MDA)为指标测定SJP对脂质过氧化的影响;测定SJP的还原力及其对Fe~(2+)的螯合作用;以H_2O_2-Fe~(2+)体系为羟自由基(·OH)生成系统,测定SJP清除·OH的能力;用滴定法测定SJP清除过氧化氢(H_2O_2)的能力;用氮蓝四唑(NBT)法测定SJP清除超氧阴离子(O_2·~-)的能力。研究表明:SJP可抑制MDA生成;SJP具有一定的还原力和较弱的Fe~(2+)螯合作用;另外,SJP能在一定浓度范围内明显清除·OH、H_2O_2和O_2·~-。SJP能通过抗氧化、清除活性氧(ROS)来保护线粒体,具有保护机体的功效,这是SJP保护线粒体的可能机制。     

滑菇多糖抗氧化活性研究

利用化学发光法检测滑菇多糖(Pholiota nameko polysaccharides,PNP)对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(OH·)、脂自由基(R·)、抗氧化;单线态氧(1O2)的清除能力,同时检测了滑菇多糖对小鼠肝匀浆以及肝线粒体丙二醛(MDA)氧化抑制作用.实验结果表明,滑菇多糖四种活性氧自由基均具有较好的清除作用,同时对肝匀浆以及肝线粒体中丙二醛(MDA)氧化具有很强的抑制作用.滑菇多糖具有很好的抗氧化作用.     

连翘叶水提物保护线粒体及抗衰老研究

研究连翘叶水提物(FLA)对自由基所致的线粒体损伤的保护作用,并研究其抗氧化能力、活性氧的清除活性及抗衰老机制.采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法测定丙二醛(MDA)含量、分光光度法测线粒体的肿胀度,并以还原型辅酶Ⅰ-氮蓝四唑-吩嗪硫酸甲酯(NADH-NBT-PMS)为超氧阴离子生成系统测定对超氧阴离子的清除能力.利用钼酸胺比色法、黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝基苯甲酸比色法、Fenton反应显色法分别测定FLA对小鼠肝匀浆过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及抗羟自由基活力的影响.FLA可明显抑制线粒体的损伤及线粒体肿胀,并呈剂量依赖关系,清除超氧阴离子的能力显著,且能明显增强CAT、SOD、GSH-Px及抗羟自由基活力.FLA能通过清除活性氧自由基及提高抗氧化酶活力来保护线粒体,具有一定的抗氧化及抗衰老药用价值.     

柿子皮提取物的抗氧化活性

为评价柿子皮提取物(persimmon peel extracts,PPE)的抗氧化活性,采用不同的抗氧化评价方法以及Fe2+-H2O2或Fe2+-VC诱导的离体鼠肝线粒体损伤模型。结果显示：PPE具有良好的总抗氧化活性、还原力、脂质过氧化抑制力以及自由基清除能力;清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O2·)、羟自由基(·OH)的IC50值分别为57、137、425μg/mL;另外,PPE能显著地抑制线粒体脂质过氧化、肿胀、蛋白氧化和ATPase活性降低。说明PPE有明显的体外抗氧化活性,有可能作为一种天然抗氧化剂的新原料。     

沙棘多糖清除自由基及抗脂质过氧化作用研究

目的:探讨沙棘多糖体外清除自由基及抗脂质过氧化作用。方法:采用体外抗氧化活性法测定沙棘多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力及沙棘多糖总还原能力;制备5%小鼠肝脏匀浆,通过模拟建立体外小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化模型、CCl₄体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、H₂O₂体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、Fe²⁺-V_C 体外诱导小鼠肝脏脂质过氧化模型,利用TBA显色法,观察沙棘多糖对脂质过氧化的抑制作用。结果:沙棘多糖对DPPH自由基、OH自由基和超氧阴离子自由基都具有一定的清除能力,其IC₅₀值分别为1.55、1.23、8.31 mg/mL,其浓度为2 mg/mL时,还原能力稍高于同浓度V_C。沙棘多糖对小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化及CCl₄、H₂O₂、Fe²⁺-V_C所诱导的肝脏脂质过氧化均具有抑制作用,其IC₅₀值分别为1.10、1.59、9.13、1.39 mg/mL。结论:沙棘多糖具有一定的抗氧化活性及抗脂质过氧化作用。     

桑叶酸性蛋白多糖(APFM)抗氧化作用的实验研究

目的:研究桑叶酸性蛋白多糖(APFM)的抗氧化作用。方法:在化学模拟实验中,测定APFM对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)的清除作用,并测定APFM对·OH诱导的小鼠脏器中MDA形成和积累的影响,以及对小鼠肝线粒体肿胀的抑制作用。在小鼠模型实验中,观察和分析APFM对四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠脏器中MDA含量和SOD活性等生理指标的影响。结果表明APFM可以有效清除化学模拟体系中形成的·OH和O2·,抑制小鼠脏器在该体系和糖尿病模型中MDA的形成和积累,明显减轻·OH诱导的小鼠肝线粒体的肿胀和模型小鼠脏器中SOD活性的降低,并都存在明显的量效关系。结论:可以认为APFM具有良好的体外和体内的抗氧化作用,是一种有效的自由基淬灭剂。     

西瓜籽油的体外抗氧化作用研究

探讨了西瓜籽油体外抗氧化活性。采用三氯乙酸法测定西瓜籽油的还原能力,Fenton反应体系测定西瓜籽油的羟自由基(·OH)清除率,NBT光化还原法测定西瓜籽油的超氧阴离子自由基(O-2·)清除率,硫代巴比妥酸法测定肝匀浆丙二醛(MDA)相对含量以反映西瓜籽油对脂质过氧化的影响,并与BHT的抗氧化活性进行比较。结果表明:西瓜籽油有一定的还原能力,具有显著的清除·OH和O-2·能力;能抑制小鼠肝组织自发性脂质过氧化,当西瓜籽油的质量浓度为10mg/mL时作用达最强。     

香水莲花醇提物抗氧化活性的研究

研究了香水莲花醇提物对超氧阴离子自由基、羟自由基的清除作用和对脂质过氧化反应(LPO)的抑制作用,测定了其还原能力及总抗氧化能力。结果表明:香水莲花醇提物对超氧阴离子自由基及羟自由基有清除作用;对脂质过氧化反应有较好的抑制作用;具有较大的还原能力和总抗氧化能力。     

不同纯化方法对花生多糖抗氧化活性的影响

以冷榨花生饼为原料,经提取得到花生多糖粗液,分别采用双酶水解和DEAE-52纤维素柱层析的方法进行纯化得到花生多糖PPS-a、PPS-2组分,并研究二者的抗氧化能力。研究表明:两个组分具有一定的清除羟基自由基、超氧阴离子、DPPH、还原力和抗脂质过氧化能力,且其清除效果随着浓度增加而增加,其中PPS-a的抗氧化活性较PPS-2强。与VC相比,PPS-a和PPS-2的浓度大于5 mg/mL时,两种多糖对羟基自由基清除能力均高于VC;从清除超氧阴离子和DPPH自由基及抗脂质过氧化方面来看,其抗氧化能力均低于VC;两种多糖的还原力最差,仅达到VC的16%左右。     

灰树花多糖PGF-1体外对羟基自由基的抑制作用

研究灰树花多糖PGF-1对脱氧核糖-铁体系产生的羟基自由基(•OH)的抑制作用;通过检测小鼠肝匀浆丙二醛(MDA)含量、肝线粒体MDA含量、肝线粒体肿胀度、肝线粒体膜流动性及大鼠红细胞氧化溶血,研究PGF-1体外对•OH引起的氧化损伤的保护作用。结果显示PGF-1具有明显抑制•OH的作用,可降低•OH所致MDA的产生、抑制小鼠肝线粒体的肿胀、对小鼠肝线粒体膜流动性具有保护作用,并对由•OH所致大鼠红细胞氧化溶血具有抑制作用。表明PGF-1体外对•OH有较强的抑制作用。     

藤茶多糖的抗氧化作用研究

目的: 探讨藤茶多糖的体内外抗氧化作用。 方法: (1)测定藤茶多糖(Ampelopsis Grossedentata polysaccharide,AGP)的还原能力;(2)测定AGP在化学模拟体系、体外血清的抗活性氧能力;(3)测定AGP对小鼠肝匀浆、小鼠肝线粒体MDA生成的影响;(4)用分光光度法测定H2O2诱导小鼠红细胞溶血和Fe2+-VC诱导的肝线粒体肿胀程度来研究AGP的抗氧化效果;(5)小鼠随机分成对照与AGP组,腹腔注射AGP 150mg/kg•bw•d 12d后,测定小鼠血清抗活性氧能力及肝组织MDA含量。 结果: AGP具有一定的还原能力,一定浓度范围内具有显著的体外抗活性氧能力并能抑制小鼠肝组织及肝线粒体MDA的生成,可减少红细胞诱导溶血和肝线粒体肿胀程度,对小鼠体内肝组织MDA生成的抑制作用显著。 结论: AGP一定浓度范围内具有抗氧化作用。     

大豆皂甙体外抗氧化活性研究

研究大豆皂甙的抗氧化作用,用分光光度法测定大豆皂甙的总抗氧化能力和抗活性氧能力、肝匀浆丙二醛(MDA)生成量和肝线粒体膨胀程度。结果表明,大豆皂甙的体外总抗氧化能力和抗活性氧能力较强,可抑制肝组织脂质过氧化反应,减轻肝线粒体膨胀程度。提示,大豆皂甙具有体外抗氧化活性。     

水飞蓟寡肽对小鼠肝线粒体损伤的保护作用

研究水飞蓟寡肽对羟自由基(·OH)致小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的保护作用。采用·OH诱导小鼠肝细胞线粒体氧化损伤,通过测定线粒体肿胀度、丙二醛含量、琥珀酸脱氢酶及ATP酶活性、线粒体膜电位和膜流动性等指标,研究水飞蓟寡肽对·OH引起的体外氧化损伤的保护作用。结果表明水飞蓟寡肽可显著抑制小鼠肝细胞线粒体的肿胀,降低丙二醛的含量,可显著增强琥珀酸脱氢酶和ATP酶活性,维持线粒体膜电位和膜流动性,在试验剂量范围内,以高浓度组效果最好。研究证明水飞蓟寡肽可以抑制·OH所致的小鼠肝细胞线粒体氧化损伤,其机制可能与清除自由基、抑制脂质过氧化有关。     

小米多肽的制备及其抗氧化功能研究

采用碱性蛋白酶Alcalase水解小米蛋白,以二苯代苦味肼基(DPPH)自由基清除率为指标,通过单因素试验和正交试验确定小米多肽最佳制备条件,用硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验、脱氧核糖法检测其对超氧阴离子自由基(O2·)和羟自由基(·OH)的清除能力,分光光度法测定小鼠红细胞溶血和肝线粒体MDA生成量。结果表明：碱性蛋白酶Alcalase制备小米多肽的最佳酶解条件为pH8.5、[E]/[S]5%、温度40℃、时间3.5h、对DPPH自由基、O2·和·OH的清除率分别为68.93%、40.06%和48.63%,并具有明显抑制氧化溶血现象和·OH诱导线粒体氧化损伤的功能,表明小米多肽具有较强的抗氧化功能。     

刺参粗多糖保护线粒体及其作用机制

通过Fe²⁺/V_C系统诱发肝线粒体脂质过氧化,采用硫代巴比妥酸显色法测定刺参粗多糖(Stichopus japonicuscrude polysaccharide,SJCP)对丙二醛(MDA)含量的影响;并测定SJCP对Fe²⁺的螯合作用、三种主要活性氧(ROS)(超氧阴离子(O₂^-·)、羟自由基(·OH)、过氧化氢(H₂ O₂))的清除作用和对还原力的影响。结果表明SJCP对丙二醛含量的升高有极显著的抑制作用(p < 0.01);当SJCP浓度为0.333 mg/mL时,其螯合率才达到30.86%,远不如EDTA组;随着SJCP浓度的升高,其对线粒体O₂^-·、·OH、H₂ O₂三种主要ROS的清除率也逐渐增大,还原力也随剂量的增加而增强,但弱于BHT组。说明SJCP能在一定程度上抑制线粒体发生脂质过氧化;具有一定的Fe²⁺螯合能力;能通过温和的抗氧化作用及清除ROS作用来保护线粒体,从而维持机体的健康。     

苏木色素的稳定性及抗氧化活性研究

以苏木抗癌药物提取废液为研究对象,首先对废液中的苏木色素进行分离、纯化,并对其稳定性和抗氧化活性进行了评价。实验表明:纯化后的色素回收率为84.50%87.96%,色价较粗品提高了3倍以上;该色素在弱酸性、中性环境中稳定性良好;在温度低于60℃时,保存率较高;紫外灯照射、室内光照、室外光照均会使色素有一定程度的褪色,因此该色素更适宜避光保存;Cu2+、Al3+会使其颜色变深,具有增色作用,而Zn2+、Ca2+、Mg2+的加入则对其无影响;甜味剂、防腐剂的加入也不会改变色素的吸光度值。同时,通过体外抗氧化活性实验发现,相比于BHT,该色素具有更强的还原性,对脂质过氧化过程有抑制作用,且抗氧化效果与添加量之间有明显的量效关系,对羟自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2-.)也有较强的清除能力。     

不同检测方法分析紫甘薯红色素的抗氧化能力

采用比色法（分光光度法）、化学发光法、荧光法分析了紫甘薯红色素对体外活性氧（O2-·和·OH）的清除作用和对体外脂质体过氧化产物丙二醛（MDA）生成的抑制作用。结果表明:紫甘薯红色素对邻苯三酚自氧化体系产生的O2-·具有一定的清除作用,但低于对照抗坏血酸（VC）,采用化学发光法测定时,这种清除效果强于采用比色法;色素对Fenton反应产生的·OH具有清除作用,采用化学发光法测定时,这种清除效果最好（高于VC）,荧光法次之（稍高于VC）,比色法最差（高浓度时显著低于VC）;对Fe2+-H2O2诱导小鼠肝组织匀浆脂质过氧化产物丙二醛的生成具有抑制作用,采用TBA荧光光度法测定时,这种抑制作用（略低于VC）强于采用TBA比色法（高浓度时显著低于VC）。与比色法相比,化学发光法和荧光法用于分析花色苷类色素抗氧化能力的大小灵敏度高,选择性强,能减少由于花色苷类色素自身在可见光区的光谱吸收对测定结果的干扰。