解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质特性研究与初步分离纯化

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolique aciens)BW-13发酵滤液对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和植物病原真菌灰霉(Botrytis cinerea)均具有显著的抑制活性,并具有热稳定性好、对紫外线照射和蛋白酶处理不敏感、在pH 3～9范围内稳定,尤其在酸性条件下基本不丧失活性的特点.通过发酵液预处理,活性炭吸附,D293强碱性季铵型阴离子交换树脂柱层析,对解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质进行了初步分离纯化.高效液相色谱(HPLC)分析显示分离得到的抗真菌物质在220 nm处有单一的活性峰.     

蜡状芽孢杆菌S—1菌株抗真菌物质的分离纯化

蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus)S-1菌株具有强烈的广谱抗真功活性。本文作者报道该菌株产生的抗菌物质的分离纯化方法。该菌株的发酵液经酸化沉淀，有机溶剂萃取，Sephades G100和DEAE52纤维素层析等步骤后，所得样品经硅胶薄层层析显色为单点，表明抗菌物质得到纯化。     

蜡状芽孢杆菌S-1菌株抗真菌物质的分离纯化

蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus)S - 1菌株具有强烈的广谱抗真菌活性。本文作者报道该菌株产生的抗菌物质的分离纯化方法。该菌株的发酵液经酸化沉淀、有机溶剂萃取、SephadesG1 0 0和DEAE52纤维素层析等步骤后 ,所得样品经硅胶薄层层析显色为单点 ,表明抗菌物质得到纯化     

芽孢杆菌产细菌素的分离及性质研究

实验室筛选到的枯草芽孢杆菌C119对某些革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及真菌均有抑制作用.研究发现芽孢杆菌C119所产细菌素在硫酸铵质量分数为25%的条件下能较好的分离;对温度和pH的稳定性较高;对蛋白酶的抗性较弱;对有机溶剂的稳定性较低.     

枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的纯化和性质

本文以魔芋粉为碳源培养枯草芽孢杆菌S-88获得一种β-甘露聚糖酶粗酶液,粗酶液通过硫酸铵梯度盐析、超滤、HiprepTM 26/10脱盐柱脱盐、HiprepTM 16/10 DEAE FF阴离子树脂和G-75凝胶柱的纯化,该枯草芽孢杆菌S-88产的甘露聚糖酶的酶活力达到61697.52 IU/mL。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纯化后酶的分子量为30 kda,比其它细菌产的β-甘露聚糖酶分子量(50 kda)小。β-甘露聚糖酶在pH 6.0和50℃的酶活性最大。它在pH 4.4~6.8之间有很好的稳定性,37℃水浴2 h酶活保持在80%以上。55℃以下水浴2 h,酶活力保持在90%以上,该酶有较好的耐热性,煮沸80 min该酶活力才能基本上消失。     

苏云金芽孢杆菌毒素Cry7Aal三维结构模型

运用生物信息学软件和网络数据库资源,采取同源建模的方法以毒素蛋白Cry8Eal为模板预测了苏云金芽孢杆菌毒素Cry7Aal的三级结构并分析了相关的生物学功能．结果表明,Cry7Aal为3个结构域组成的近似球状蛋白,Cry7Aal在氨基酸序列上与Cry8Eal有40％的同源性,在三维结构上Cry7Aal与Cry8Eal有高度的相似性,它们结构域I几乎完全相同,在结构域Ⅱ之间和结构域Ⅲ之间存在较小差异．Cry7Aal与Cry8Eal的表面电势分布不同．2种毒素具有相似的毒杀机理．模型经Ramachandran图和Verify3D检验具有合理性．     

高产抗生素Zwittermicin A苏云金芽孢杆菌A164发酵条件的优化

从土壤样品中筛选出高产抗生素(Zwittermicin A)的苏云金芽孢杆菌菌株:A164,对此菌种的发酵条件进行了探讨。以A164合成高含量抗生素为目标对发酵培养的碳源、氮源、时间等条件进行了单因素优化;采用Plackett-Burman设计,确定发酵条件的重要影响因子,根据爬坡路径法,确定了各个因子的最适范围,采用响应面分析法对因子再次进行优化,得到了最佳发酵条件。最佳发酵条件为:蛋白胨含量17.56g.L-1,葡萄糖20.0g.L-1,MgSO40.18g.L-1,CaCl20.08g.L-1,ZnSO40.20g.L-1,K2HPO41.3g.L-1,培养温度28.31℃,发酵时间36h。     

一株同型乳酸发酵芽孢杆菌的分离和鉴定

从奶粉中分离一株同型乳酸发酵杆菌，编号ＴＱ３３，主要特点：生产芽孢，生长温度范围（２０～６３）℃最适生长温度（４５～５０）℃接触酶试验阳性，通气条件下生长良好，厌氧条件下发酵葡萄糖产不产气，主要产Ｌ（＋）乳酸，菌体（Ｇ＋Ｃ）为（３２．４５）％，生理生化性质特殊，据以上特点，将ＴＱ３３菌株鉴定为凝结芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｏａｇｕｌａｎｓ）ＬＤ５０试验表明，菌体和代谢产物属无毒物质。     

苏云金芽胞杆菌不同发酵阶段的补糖发酵

通过苏云金芽胞杆菌工程茵BMB005发酵不同阶段补加葡萄糖发酵试验，研究了补糖对苏云金芽胞杆菌发酵的影响．结果表明：对数生长期补加葡萄糖可以提高生物量，进而使发酵液中杀虫晶体蛋白的质量分数提高33．1％，而稳定期补加葡萄糖则是通过提高茵体合成晶体蛋白的能力而使发酵液中晶体蛋白的质量分数提高18．1％．30L发酵罐补糖实验结果表明：在起始碳源质量浓度为3．0g／dL的情况下，对数生长期补加1．0g／dL葡萄糖可以将发酵液中杀虫晶体蛋白的质量分数和生物效价分别提高37％和51％；稳定期补加1．0g／dL葡萄糖可以将发酵液中杀虫晶体蛋白的质量分数和生物效价分别提高33．7％和75．1％；而且稳定期补加比对数生长期补加葡萄糖更有利于增效因子的合成．     

新型抗真菌抗生素分离与纯化

对1株不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus ZJUIB001)产生的新型抗真菌抗生素进行分离纯化研究.通过发酵液经离心去沉淀后,采用氯仿和石油醚萃取.萃取后的水相调节至pH=2并采用Dowex 50 × 16阳离子交换树脂和XAD7HP大孔吸附树脂分离其中的抗真菌代谢物,对分离样品进行反相高效液相色谱分析.Dowex 50×16层析条件优化如下：pH=2的萃取浓缩液以2倍床层体积/h的流速上柱,在去离子水冲洗后,用0.6 mol/L氨水以1倍床层体积/h流速洗脱;Amberlite XAD7HP大孔吸附树脂层析条件为：体积分数为10%和70%的乙醇水溶液阶跃洗脱.将纯化得到的样品用高效液相色谱(HPLC)系统检测,色谱柱为YMC-C₁₈ (5 μm, Φ4.6 mm × 250 mm)氰基柱,流动相为0.01 mol/L的乙酸铵缓冲液(pH=4.3),流速为1 mL/min,检测波长为220 nm. HPLC检测结果显示,分离的抗生素纯度和效价分别达到93.0%和21 632 U/mg．     

蛹虫草胞外多糖的提取和纯化

对蛹虫草液体深层发酵液的胞外多糖提取进行研究,确定了提取的工艺条件,并对所提取的粗多糖进行分子筛分,对主要多糖组分的糖成分进行测定。其结果为：蛹虫草液体深层发液的胞外粗多糖的提取率为10.0g／L;其粗多糖主要由4种蛹虫草多糖组成;而第4个组分占总粗多糖的32.14%,由葡萄糖构成。     

侧柏籽核糖体失活蛋白的分离及作用机制研究

提出了从裸子植物侧柏中分离纯化核糖体失活蛋白的制备和检测方法.通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析、阳离子交换层析等步骤制备了该蛋白.该蛋白的检测方法是把这种蛋白作用于大鼠80S肝核糖体后, 不经过酸性苯胺处理,直接进行聚丙烯酰胺的尿素变性胶电泳.在电泳图上得到400bp左右的特征性核酸条带.分析结果表明,该蛋白为一种新的核糖酶型的核糖体失活蛋白,阐明了侧柏核糖体失活蛋白失活核糖体的分子机制.     

大枣多糖的提取分离及纯化研究

研究了大枣多糖的提取分离工艺,并用正交试验对溴化十六烷三甲基胺(CTAB)络合精制大枣多糖的工艺进行了优选,得出最佳纯化工艺条件为——以1∶1的体积比加入w=2%的CTAB,在35℃下保温静置4h,所得大枣多糖经紫外光谱扫描,不具有蛋白质和核酸的特征吸收峰;红外光谱分析表明,特征吸收峰为3425.62cm-1,2927.32cm-1,1623.87cm-1,1419.14cm-1,1238.35cm-1,1025.56cm-1.     

从枇杷叶中分离提取熊果酸的研究进展

枇杷叶作为一种传统中药植物资源,其中富含有三萜酸等生物活性物质,具有广泛的应用价值.对枇杷叶中熊果酸的含量、提取及纯化方法和生理活性进行了综合性分析.     

产胞外耐高温纤维素酶细菌的获得和酶的纯化及性质研究

对从高温堆肥中分离得到的一株产胞外耐高温纤维素酶的细菌进行了生理生化鉴定,结果显示其属于嗜热脂肪芽孢杆菌。对其所产纤维素酶进行了分离纯化,该酶反应的最适温度约为66℃,最适pH值为7.0,至少有8个亚基。     

组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(Reteplase)的克隆表达和分离纯化

从人脑cDNA文库中经PCR扩增得到组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(reteplase,简称r PA,中文名称:瑞替普酶)的cDNA,经测序确证,克隆于表达载体pET22b,转化大肠肝菌BL21进行重组表达.表达的r PA占菌体总蛋白的40%,以包涵体形式存在.经过亲和层析和离子交换层析等纯化步骤后,得到纯度高于99%,比活性高于5×105IU/mg的r PA.对纯化的r PA进行了westernblot,N端氨基酸序列、氨基酸组成、质谱分析等测定.动物血栓模型实验表明:r PA具有较好的溶血栓作用.     

牡蛎糖原的提取、纯化及补体活性研究

采用酶解结合醇沉法从新鲜牡蛎中提取制备牡蛎糖原(oyster glycogen,OG),经阴离子交换柱DEAE-52、葡聚糖凝胶柱SephadexG-100分离纯化,得到纯度较高的牡蛎糖原组分OG11.其蛋白质量分数为0.33％,糖质量分数为97.77％.用气相色谱法对OG11进行单糖组成鉴定,结果表明其中只含有葡萄糖...     

南方红豆杉叶中活性多糖的分离与纯化

采用水提醇沉方法从南方红豆杉枝叶中得到红豆杉总多糖，经DEAE-Sepharose FF阴离子交换色谱分离得到3种酸性多糖，分别命名为红豆杉多糖-1(PTM-1)、红豆杉多糖-2(PTM-3)和红豆杉多糖-3（PTM-3），条件为：色谱柱先用pH值为8.5的HCl-Tris缓冲液平衡，然后用0.1、 0.3、 0.5、0.7 和 0.9 mol/L的NaCl溶液阶跃洗脱.PTM-3进一步采用凝胶过滤色谱纯化、脱盐和冻干后，用高压凝胶渗透色谱、紫外、红外和薄层色谱分析其结构, 发现PTM-3不含蛋白和核酸，重均相对分子质量Mw为12.3 kD，单糖组成含有L-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-葡萄糖醛酸和L-鼠李糖，以β-(1,3)糖苷键连接.     

牡蛎糖原的提取、纯化及补体活性研究

采用酶解结合醇沉法从新鲜牡蛎中提取制备牡蛎糖原(oyster glycogen,OG),经阴离子交换柱DEAE-52、葡聚糖凝胶柱Sephadex G-100分离纯化,得到纯度较高的牡蛎糖原组分OG11。其蛋白质量分数为0.33%,糖质量分数为97.77%。用气相色谱法对OG11进行单糖组成鉴定,结果表明其中只含有葡萄糖。补体实验表明,OG11对补体具有较强的抑制活性,在5.0mg/mL时补体抑制率可达到77.38%。